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松江鲈白介素15(TfIL-15)的结构特征与重组表达 被引量:1
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作者 刘莹莹 于珊珊 +2 位作者 柴迎梅 林啸鹏 祝茜 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2019年第4期95-103,共9页
为研究白介素15(Interleukin-15, IL-15)在松江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel)先天免疫中的功能,本研究利用RACE技术克隆得到松江鲈IL-15基因(命名为TfIL-15)的全长cDNA序列,其长度为1140bp,包括5'-非编码区(5'-UTR) 165bp... 为研究白介素15(Interleukin-15, IL-15)在松江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel)先天免疫中的功能,本研究利用RACE技术克隆得到松江鲈IL-15基因(命名为TfIL-15)的全长cDNA序列,其长度为1140bp,包括5'-非编码区(5'-UTR) 165bp、开放阅读框(ORF) 522bp和3'UTR 453bp。在5'UTR区域,存在4个读码框外的AUG翻译起始位点。基因ORF编码173个氨基酸(aa),其中,前59aa为信号肽序列。成熟肽全长为114aa,预测分子量为12.975kDa,理论等电点为5.15。同源比对发现,鱼类IL-15变异程度较高,TfIL-15与其他鱼类IL-15同源性在23%~61%之间。多序列比对和三维结构构建结果显示,TfIL-15具有典型4个α螺旋二级结构,形成二硫键的4个半胱氨酸高度保守。qRT-PCR分析表明,TfIL-15广泛表达于松江鲈各组织中。腹腔注射脂多糖(Lipopolysaccharides, LPS)后,TfIL-15 mRNA在血液、皮肤、肝脏和脾脏中均上调表达。在皮肤和血液中,刺激后2h表达量迅速上调至最高峰,分别为对照组的74倍和41倍。脾脏和肝脏在刺激后12h分别达到对照组的3倍和18倍。肝脏中,刺激后96h,表达量再次上调至对照组的86倍。上述结果表明,TfIL-15可能参与了松江鲈抵抗外界刺激的先天免疫过程。另外,通过构建TfIL-15成熟肽的原核表达载体,成功获得重组蛋白,为进一步研究TfIL-15蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 松江鲈 白介素15(IL-15) 克隆 基因表达 重组蛋白表达
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Potassium channel in peripheral blood lymphocytes of turbot (Scophthalmus maximus)
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作者 chai yingmei HUANG Xiaohang +2 位作者 CONG Bailin LIU Chenlin LIU Shenghao 《Acta Oceanologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2010年第1期116-119,共4页
In order to provide pertinent evidence of ion channel with immune response in the fish, whole cell patch-clamp technique was employed for potassium ion channel study in turbot (Scophthalmus maximus). Lymphocytes wer... In order to provide pertinent evidence of ion channel with immune response in the fish, whole cell patch-clamp technique was employed for potassium ion channel study in turbot (Scophthalmus maximus). Lymphocytes were isolated by Percoll density gradient centrifugation from peripheral blood samples, and electrophysiological characters of the channel were analyzed. In the recorded cells, activated voltage of the channels was -42.5±3.7 mV and the average peak current was 313.12±28.2 pA. The channel was identified as voltage dependent, the current was outward and it could be inhibited by 10 mmol/dma TEA or 5 mmol/dm^3 4-AP, a specific potassium channel inhibitor, identifying the existence of potassium channel in peripheral lymphocytes of the turbot. 展开更多
关键词 patch-clamp technique potassium channel turbot peripheral blood lymphocyte
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