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斑马鱼3号染色体血红蛋白基因敲除对心血管发育的影响 被引量:1
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作者 黄梓熙 孟琳 +1 位作者 陈良标 陈忠 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第7期900-908,共9页
目的:研究斑马鱼3号染色体血红蛋白基因敲除后心血管发育的差异及可能的机制。方法:利用CRISPR/Cas9敲除斑马鱼3号染色体血红蛋白基因hbba2到hbae3片段,获得杂合突变体斑马鱼(Hb^(+/-))。检测Hb^(+/-)与野生型斑马鱼(WT)受精卵的血红蛋... 目的:研究斑马鱼3号染色体血红蛋白基因敲除后心血管发育的差异及可能的机制。方法:利用CRISPR/Cas9敲除斑马鱼3号染色体血红蛋白基因hbba2到hbae3片段,获得杂合突变体斑马鱼(Hb^(+/-))。检测Hb^(+/-)与野生型斑马鱼(WT)受精卵的血红蛋白含量及分布,观察血管的发育,统计两者5月龄红细胞数量,并采用成年斑马鱼心脏转录组测序分析,qRT⁃PCR进行验证。结果:Hb^(+/-)胚胎血红蛋白含量明显减少,且在受精后50 h的胚胎中异位分布。Hb^(+/-)腹部主血管与共同基静脉相对WT发育迟缓,肠下静脉发育更快,尾部节间血管增生;而Hb^(+/-)和WT成鱼红细胞数量的差异无统计学意义(P>0.05)。对成年斑马鱼心脏转录组分析发现,血红蛋白水平降低导致nos2b、cybb上调,hif3a下调,并激活了线粒体的代偿保护机制。结论:血红蛋白基因敲除影响了胚胎时期斑马鱼的血红蛋白水平和血管发育,通过调控基因表达和线粒体的补偿机制可维持成鱼的正常生理活动。 展开更多
关键词 血红蛋白 心血管发育 CRISPR/Cas9 hbba2 hif3a
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42Sp50/eEF1a在正常和gsdf缺失型青鳉性腺中的表达差异
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作者 武小雯 张新亭 +3 位作者 常宇阳 汪丝雨 陈良标 关桂君 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期49-53,81,共6页
青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子gsdf敲除可导致XY雌性化,但Gsdf的生物学作用和靶基因仍不清楚。用Label Free蛋白组学结合MS质谱分析,定量比对正常的XX卵巢、XY精巢及gsdf缺失XY卵巢中的蛋白质表达谱,发现真核翻译延伸因子1(e... 青鳉(Oryzias latipes)性腺体细胞衍生因子gsdf敲除可导致XY雌性化,但Gsdf的生物学作用和靶基因仍不清楚。用Label Free蛋白组学结合MS质谱分析,定量比对正常的XX卵巢、XY精巢及gsdf缺失XY卵巢中的蛋白质表达谱,发现真核翻译延伸因子1(eEF1)的卵巢异构型42Sp50的表达量,在gsdf缺失卵巢中显著升高。通过实时定量PCR扩增,定量分析了42Sp50在正常XX gsdf^(+/+)卵巢、XX和XY型gsdf^(-/-)卵巢中的表达。用抗人EEF1A抗体的免疫荧光技术,鉴定了青鳉eEF1a和/或42Sp50在生殖细胞性分化及性成熟期,gsdf缺失卵巢同正常卵巢对照组的细胞内表达变化,验证了蛋白组学发现的在gsdf^(-/-)卵巢中有大量卵细胞高表达42Sp50。青鳉eEF1a和42Sp50氨基酸序列高度同源,但在氨基酰基结合囊和核糖体结合部位有显著差异,为此推测Gsdf信号可能直接或间接地影响XY生殖细胞表达42Sp50和雌性分化。同时建立了双色细胞荧光免疫技术用于鉴别青鳉XX型和gsdf缺失的XY型卵细胞,为研究脊椎动物配子发生的分子机制提供了新线索。 展开更多
关键词 性腺体细胞衍生因子 真核翻译延伸因子1 42Sp50基因 卵巢发育 青鳉
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构建农业农村优先发展体制机制和政策体系 被引量:35
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作者 张红宇 陈良彪 胡振通 《中国农村经济》 CSSCI 北大核心 2019年第12期16-28,共13页
实施乡村振兴战略,当务之急、重中之重就是要加快构建农业农村优先发展的体制机制和政策体系,本文从基本原则、深刻内涵、矛盾关系、目标任务、制度创新、政策设计等方面进行分析和论述。农业农村优先发展,要深化对发展理念优先、制度... 实施乡村振兴战略,当务之急、重中之重就是要加快构建农业农村优先发展的体制机制和政策体系,本文从基本原则、深刻内涵、矛盾关系、目标任务、制度创新、政策设计等方面进行分析和论述。农业农村优先发展,要深化对发展理念优先、制度创新优先、政策安排优先、保障措施优先的理解,处理好城乡融合和乡村优先、长期目标和阶段任务、总体要求和重点突破、市场机制和政府行为、制度创新和政策体系等各类复杂关系,突出抓好农业、农民、农村发展面临的重点任务。促进农业农村优先发展,要重点考虑以下十大方面:促使土地资源优先向农业农村配置;创新农业经营制度带动小农现代化;加快构建和完善农村现代产权制度;促进人才队伍优先向农业农村配备;保证财政税收政策向农业农村倾斜;引导信贷资金更多投向农业农村;充分发挥农业保险的保障作用;全面加强农业农村基础设施建设;持续改善和强化农村公共服务;不断提升农民群众的获得感幸福感。 展开更多
关键词 乡村振兴 农业农村优先发展 体制机制 政策体系
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青鳉gsdf调控cyp19b介导的脑垂体性腺轴性别分化 被引量:1
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作者 亢逸 徐疏梅 +2 位作者 张颖庆 陈良标 关桂君 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期4491-4499,共9页
芳香化酶是雄激素转化为雌激素重要的限速酶,在硬骨鱼中有卵巢型(Cyp19a)和脑型芳香化酶(Cyp19b)两种。cyp19a敲除的XX性腺能产生初级卵母细胞,证明生殖细胞早期雌性分化不受cyp19a影响,而cyp19b在性腺分化及发育成熟过程中的生理作用... 芳香化酶是雄激素转化为雌激素重要的限速酶,在硬骨鱼中有卵巢型(Cyp19a)和脑型芳香化酶(Cyp19b)两种。cyp19a敲除的XX性腺能产生初级卵母细胞,证明生殖细胞早期雌性分化不受cyp19a影响,而cyp19b在性腺分化及发育成熟过程中的生理作用尚不清楚。利用免疫组化和实时荧光定量的方法,发现cyp19b在垂体和性腺中都有表达,且伴随着发育,其表达量的差异主要集中在垂体上。雌性垂体的Cyp19b蛋白质水平明显高于雄性垂体,而性腺中的mRNA表达无明显性差。垂体促黄体生成素Lh分泌细胞数量也在性成熟期的雌性中高于雄性。然而gsdf缺失突变体雌性垂体中Cyp19b和Lh表达量均下降,表明gsdf信号可能影响了Cyp19b和Lh的表达,该结果为TGF-β调节垂体性腺轴的发育提供了新的见解。定量PCR结果显示,成熟期正常精巢的lhr(Luteinizing hormone receptor)表达量高于正常XX卵巢和gsdf敲除的XY卵巢。gsdf过表达的XX精巢中cyp9b和lhr的转录水平均明显上升。以上结果揭示gsdf信号可能直接或间接调控cyp19b和lhr在性腺-垂体轴中的表达,进而影响雄激素转化雌激素的合成。gsdf敲除型青鳉,为深入探索性腺-垂体轴cyp19b和lh调控卵细胞的发生发育分子机制,提供了好的研究平台。 展开更多
关键词 cyp19b gsdf 性激素 垂体- 性腺轴 LH
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鲤CISH基因克隆鉴定与组织特异性表达分析
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作者 杨慧 周杰 +4 位作者 高谦 刘明丽 翟万营 陈良标 谢海侠 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期491-499,共9页
克隆得到长度为1685 bp的鲤(Cyprinus carpio)CISH基因(Cytokine inducible SH-2 containing protein,CISH)的cDNA全长序列,开放阅读框(ORF)长666 bp,编码221个氨基酸,预测蛋白质分子量为24.91 ku。鲤CISH基因具有典型的SOCS家族结构特... 克隆得到长度为1685 bp的鲤(Cyprinus carpio)CISH基因(Cytokine inducible SH-2 containing protein,CISH)的cDNA全长序列,开放阅读框(ORF)长666 bp,编码221个氨基酸,预测蛋白质分子量为24.91 ku。鲤CISH基因具有典型的SOCS家族结构特征,含有N区、中央SH2结构域和C端SOCS box结构域。系统进化分析表明,鲤CISH与同属鲤科的草鱼(Ctenopharyngodon idella)和斑马鱼(Danio rerio)的亲缘关系最近。鲤CISH基因的mRNA表达水平在血液中最高,肝脏中最低。嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)刺激后,鲤CISH基因在血液中表达量在12~24 h出现显著上升,在第48小时恢复正常水平,暗示鲤CISH基因在抵抗细菌感染过程中起作用。 展开更多
关键词 细胞因子信号转导抑制因子 CISH CDNA全长 组织表达
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Stability in Inverse Problem of Determining Two Parameters for the Moore-Gibson-Thompson Equation with Memory Terms
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作者 FU Songren chen liangbiao ZHANG Ji-Feng 《Journal of Systems Science & Complexity》 SCIE EI 2024年第6期2368-2389,共22页
In this paper,the authors consider the inverse problem for the Moore-Gibson-Thompson equation with a memory term and variable diffusivity,which introduce a sort of delay in the dynamics,producing nonlocal effects in t... In this paper,the authors consider the inverse problem for the Moore-Gibson-Thompson equation with a memory term and variable diffusivity,which introduce a sort of delay in the dynamics,producing nonlocal effects in time.The H¨older stability of simultaneously determining the spatially varying viscosity coefficient and the source term is obtained by means of the key pointwise Carleman estimate for the Moore-Gibson-Thompson equation.For the sake of generality in mathematical tools,the analysis of this paper is discussed within the framework of Riemannian geometry. 展开更多
关键词 Carleman estimate memory term Moore-Gibson-Thompson equation stability Riemannian geometry
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