基于女性主义视角下民国月份牌中西洋服饰研究

针对民国时期女性西洋服饰的种类、特征及配伍问题,文章基于女性视角,应用图像学、历史文献研究方法对民国月份牌广告中的西洋服饰进行分析,得到西洋服饰促进女装现代化及妇女思想解放的结论。研究表明:在西方思潮与女性主义的影响下,民国女性服装逐渐引入西洋服饰品类并出现在月份牌广告之中,女性服饰呈现出多样化、个性化与现代化的发展趋势。伴随着女性思想的进一步解放,月份牌中的洋装女郎通过西洋服饰及生活方式展现出她们追求男女平等、渴望独立自主的心理特征,完成了对近代女性主义的表达与强化。近代女性主义使得月份牌中新女性形象愈加清晰真实,同样月份牌广告也进一步促进了女性主义在中国的发展与传播。

政府对工程质量监管体制实践比较与建议

近年来,党中央、国务院高度重视建设工程质量问题,由住建部牵头,各地政府采取相关措施强化政府对工程质量监管的力度。目前总体上工程质量管理状况较好,但仍存在相关法律法规执行力度不够、各方监管责任界定不清、监管组织体系不健全等问题。本文首先界定了政府对工程质量监管体制的概念及范围,然后分别从工程质量管理相关法律法规体系、责任体系、组织体系三个方面出发,分析现有问题,介绍住建部的政策导向及各地政府的特色做法,并提出实用性的建议,进一步解决和完善政府对工程质量监管体制范围内的问题。

茶叶中含Fe量检测的实验教学改革探索

以茶叶中微量元素含Fe量的定量检测为实例,进行实验教学改革,采用“单个必做”和“组队选做”相结合模式,结合已知和未知的实验因素分析,以提高学生的创新和实践能力.分析学生在不同模式的实验完成情况,统计比较改革前后学生的实验成绩,并进行实验满意度调查.结果表明:所有学生完成了单个必做实验,98.0%的学生完成了组队选做实验,60.0%的学生完成了其他因素分析实验;与改革前相比,改革后学生的总成绩提高了22分,学生的及格率和满意度分别达97.5%和95.0%,增幅分别达25.0%和20.6%.通过实验教学的革新,让冗长较难的实验变得通俗且易操作,调动了学生的兴趣爱好,培养了团队协作能力,实验效果好.这些创新可以更好地让学生掌握现代分析技术的原理和方法,夯实基础实验技能,提高综合实验设计和动手能力,提升学生满意度.

靶向CD123抗原的双特异性抗体的构建及其抗急性髓系白血病的作用研究

目的构建一种新的靶向CD123抗原的双特异性抗体(CD123 DuAb),研究CD123DuAb在急性髓系白血病(AML)治疗中的作用。方法以自主研发的CD123单克隆抗体可变区为基础,利用分子克隆技术,构建CD123 DuAb表达质粒,转染ExpiCHO-S细胞,表达该双功能抗体。通过功能实验,验证CD123 DuAb在T细胞活化及增殖中的作用,及其促进T细胞对AML细胞的杀伤作用。结果①构建了CD123 DuAb表达质粒,并通过Expi-CHO真核系统表达。②CD123 DuAb可以分别与T细胞上的CD3位点及CD123阳性肿瘤细胞上的CD123位点结合。③将1 nmol/L CD123 DuAb加入T细胞与MV4-11细胞共培养体系中,T细胞中CD69阳性表达率为68.0%,CD25阳性表达率为44.3%,均显著高于对照组(P值均<0.05)。④在CD123 DuAb浓度为1 nmol/L的条件下培养T细胞,可促进T细胞增殖,其绝对计数第1天为5×10^(5)/ml,第9天扩增至3.2×10^(6)/ml,且CFSE荧光强度显著降低。⑤CD123 DuAb能够显著激活T细胞,且激活强度与其浓度呈正相关,浓度为1 nmol/L时,T细胞CD107a表达率可达16.05%,较对照组显著升高(P<0.05)。⑥随培养体系中CD123 DuAb浓度的升高,T细胞耗竭和凋亡也随之增加,浓度为1 nmol/L时,T细胞CD8+PD-1+LAG-3+比例为10.90%,PI-AnnexinⅤ+比例为18.27%,PI+AnnexinⅤ+比例为11.43%,均较对照组显著升高(P<0.05)。⑦CD123 DuAb能够促进T细胞分泌细胞因子,浓度为1 nmol/L时,共培养体系上清中的IFN-γ和TNF-α的浓度可分别达到193.8 pg/ml和169.8 pg/ml,较对照组显著升高(P<0.05)。⑧将CD123 DuAb以1 nmol/L的浓度加入T细胞与CD123阳性肿瘤细胞共培养体系中,能显著增强T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用,共培养3 d,CD123+MV4-11细胞、CD123+Molm13细胞和CD123+THP-1细胞的残留率分别为7.4%、6.7%和14.6%,较对照组显著降低(P<0.05)。结论本研究构建及表达了一种靶向CD123的双特异性抗体,并通过体外实验验证其可以同时结合CD123阳性肿瘤细胞和T细胞,促进T细胞的活化和增殖,增强其抗白血病作用,为进一步临床研究提供了基础。

一种新的靶向CD19抗原的三特异性T细胞衔接器的制备及其抗白血病作用研究

目的制备一种新的靶向CD19的三特异性T细胞衔接器融合蛋白(19TriTE),研究其对CD19阳性血液肿瘤的免疫治疗作用。方法通过分子克隆技术构建19TriTE表达质粒,并通过真核蛋白表达系统成功表达该融合蛋白。体外实验验证19TriTE对T细胞的活化与增殖作用及介导T细胞发挥对CD19阳性肿瘤细胞的特异性细胞毒作用。结果①成功构建19TriTE融合蛋白表达质粒,并通过真核蛋白表达系统成功表达。②19TriTE可以特异性结合T细胞和Nalm6细胞,与T细胞的平衡解离常数为19.21 nmol/L,与Nalm6细胞的平衡解离常数为11.67 nmol/L。③2 nmol/L浓度的19TriTE与T细胞及Nalm6细胞共培养时,T细胞中CD69阳性表达率为35.4%,CD25阳性表达率为49.8%,较对照组显著升高。④19TriTE在浓度为1 nmol/L时即可显著促进T细胞增殖,第12天时,T细胞绝对计数由初始1×10^(6)扩增至7.4×10^(7),增殖74倍。⑤19TriTE融合蛋白能明显介导T细胞杀伤CD19阳性靶细胞且与剂量呈正相关,浓度为10 nmol/L时,靶细胞裂解率达50%。⑥脱颗粒实验验证,CD19阳性靶细胞存在时,19TriTE可以显著激活T细胞且与剂量呈正相关。⑦将19TriTE融合蛋白分别与过表达RFP及Luciferase基因的靶细胞及T细胞共培养,19TriTE能够介导T细胞杀伤CD19阳性的靶细胞。结论本研究成功构建及表达19TriTE融合蛋白,体外实验验证其可以有效活化T细胞,并促进T细胞增殖。同时,能够结合CD19阳性靶细胞和T细胞,促进T细胞发挥体外抗白血病作用,为进一步临床研究奠定基础。

靶向CD33抗原三特异性T细胞衔接器的制备及对白血病细胞的作用研究

目的研究靶向CD33抗原双特异性及三特异性T细胞衔接器对T细胞增殖及其抗白血病作用。方法构建抗CD33scFv-抗CD3scFv的双特异性T细胞衔接器(CD33-BiTE)及在BiTE基础上加入CD80胞外段的三特异性T细胞衔接器(CD33-TriTE)表达载体, 使用真核细胞表达系统表达蛋白并进行亲和层析纯化。检测CD33-BiTE及CD33-TriTE对T细胞活化增殖功能及对白血病细胞杀伤功能活性的影响。结果①成功构建了CD33-BiTE及CD33-TriTE表达载体, 在真核细胞中表达, 纯化得到的融合蛋白能与相同靶抗原流式抗体竞争结合于靶细胞表面。②CD33-BiTE及CD33-TriTE分别与人T细胞共培养12 d后, T细胞数扩增至基线值的(33.89±19.46)倍和(81.54±23.62)倍, CD33-TriTE促T细胞增殖能力明显优于CD33-BiTE(P<0.05)。③体外实验证实CD33-BiTE和CD33-TriTE均可增强T细胞对表达CD33白血病细胞的特异性杀伤作用, 且在一定浓度范围内, 浓度越高, 抗体的杀伤作用越强。④与CD33-TriTE相比, CD33-BiTE杀伤白血病细胞的同时增加其PD-L1表达, 而TriTE对过表达PD-L1的Molm13细胞具有更强的杀伤作用。结论该研究构建了CD33-BiTE及CD33-TriTE表达载体, 并在真核细胞表达了融合蛋白, 体外实验证实其促T细胞增殖活化的特性, 并具有促T细胞抗白血病作用。其中CD33-TriTE较CD33-BiTE促增殖效果更强, 且对PD-L1高表达的白血病细胞杀伤效果更强。

Preparation of a novel tri-specific T cell engager targeting CD19 antigen and its anti-leukemia effect exploration

Objective To prepare a novel tri-specific T cell engager(19TriTE)targeting CD19 antigen,and to investigate its immunotherapeutic effect on CD19-positive hematological malignancies.Methods 19TriTE was construeted by molecular cloning technology and successfully expressed through the eukaryotic expressing system.