北方强冬性甘蓝型冬油菜生长锥与抗寒性的关系研究

为探究北方强冬性甘蓝型冬油菜(Brassica napus L.)生长锥低温响应特性及其与抗寒性的关系,以冬性不同的甘蓝型冬油菜为试验材料,通过体式显微镜解剖、石蜡切片、扫描电镜等方法观察生长锥形态,通过测定半致死温度(LT_(50))鉴定不同品种的抗寒性,并对STM等生长锥调控关键基因进行克隆和表达分析。结果表明,冬前低温处理后,强冬性抗寒品种VHTSG10与VHTS309-4苗期的生长锥表面光滑,相对高度较低,弱冬性材料VH天油2288和VH新油23号苗期的生长锥表面有小突起组织,相对高度较高;不同品种间LT_(50)与生长锥相对高度极显著正相关;调控苗期生长锥分化的关键基因BnSTM,其相对表达量与生长锥相对高度显著正相关,而BnCUC2基因相对表达量与生长锥相对高度极显著负相关;BnSTM基因存在1149 bp的完整开放阅读框,编码382个氨基酸,包含KNOX1、KNOX2、ELK和Homeobox_KN 4个保守结构域,与白菜型油菜(Brassica rapa L.)的亲缘关系较近,蛋白序列相似性为98.69%,亚细胞定位分析表明BnSTM蛋白在细胞核表达,参与茎尖分生组织的生长发育,与预测结果一致。因此,冬性越强的甘蓝型冬油菜,苗期生长锥相对高度越低,抗寒性越强,而冬性弱的品种苗期生长锥相对高度越高,抗寒性越差。

白菜型冬油菜RuBisCo蛋白亚基基因rbcL和rbcS的克隆及其在干旱胁迫下的表达

应用双向电泳结合液相色谱-质谱联用(LC-MS)分析,筛选得到干旱胁迫下白菜型冬油菜与光合作用相关差异蛋白质RuBisCo小亚基。根据已发表白菜型油菜(Brassicarapa)RuBisCo亚基rbcL和rbcS保守序列设计引物,采用RT-PCR扩增陇油7号的cDNA,获得rbcL和rbcS基因开放阅读框,长度分别为1095 bp和549 bp,编码364和181个氨基酸的蛋白质。生物信息学分析结果显示, rbcL与大白菜(Brassica rapa subsp. chinensis)的蛋白质同源性达到99%以上,其保守序列属于RuBisCoLarge超家族,该蛋白质理论相对分子量及等电点分别为40.29kDa和6.70,不稳定指数(instabilityindex,II>40为不稳定蛋白质)为41.67,属于不稳定蛋白;脂融指数(aliphaticindex)为83.63,平均亲水性值(grand average of hydropathicity)为-0.232,属于亲水性蛋白质;二级结构包括38.74%α-螺旋(alpha helix)、10.99%延伸链(extendedstrand)及50.27%自由卷曲(randomcoil);三级结构具有5个不同的活性口袋。rbcS与甘蓝(Brassicaoleracea)蛋白质同源性达到99%,其保守序列具有rbcS超家族和RuBisCo Small Like超家族,理论相对分子量为20.32 kDa,理论等电点为8.23,不稳定指数为33.66,属于稳定蛋白质;脂融指数为74.86,平均亲水性值为-0.142,属于亲水性蛋白质;二级结构包括16.02%α-螺旋、28.73%的延伸链及55.25%自由卷曲;三级结构具有4个不同的活性口袋。实时荧光定量和半定量分析显示,干旱胁迫下,白菜型冬油菜叶片rbcL和rbcS基因表达量下调是光合作用下降的原因。并且,冬油菜叶片Pn下降与RuBPCase表达抑制和活性降低有关,非气孔限制是Pn下降的主要因素。

生物安全性发光碳点纳米材料的制备及其在Hg^2+检测中的应用

环境及食品污染物种类广、含量低,因此相应的分析监测方法须具备灵敏、准确、快速、无二次污染等特点。发光碳点纳米材料是一种新型发光纳米材料,以碳为基本骨架,毒性较低、生物相容性好,能解决传统发光纳米材料的缺陷,并具有更高的发光性能及光稳定性。以盐酸多巴胺为碳源,邻苯二胺为修饰剂,通过简单水热法制备了一批低成本环保发光碳点纳米材料,发射波长在596 nm(λex=532 nm)。经紫外可见光谱、荧光光谱、红外光谱及透射电镜等表征的结果表明,该发光碳点纳米材料具有很好的发光性能,尺寸均一(~3 nm),分散性好。对该材料应用于重金属污染物检测进行了探索。水中汞元素主要以Hg^2+的形式存在,含Hg^2+的水体可以通过土壤渗透污染地下水环境,而Hg^2+在生物体内富集,会使水体中的生物群受到危害,甚至可以通过生活用水及水产品进一步间接地危害到人类的健康。Hg^2+对人体神经细胞产生不可逆转、不可修复的伤害。Hg^2+检测是重金属检测的重中之重。通过金属选择性检测实验进行筛选,结果表明,在一定条件下,发光碳点纳米材料可对Hg^2+实现专一高灵敏快速检测,检出限为0.0006μg·mL^-1(S/N=3,n=6),满足生活用水(<0.001 mg·L^-1)及工业废水(<0.005 mg·L-1)中Hg^2+检测国家标准的要求。在0.001~10μg·mL^-1浓度范围内符合Stern-Volmer方程,且在范围为0~0.04μg·mL^-1(y=190x+0.498,R 2=0.9924),以及0.6~10μg·mL^-1(y=3.2x+18.7,R 2=0.9932),均有良好的线性响应,实际水样中Hg^2+检测的加标回收率在91%~106%(RSD=0.5~1.5)之间。进一步考察了发光碳点纳米材料的生物安全性,细胞毒性MTT分析实验,结果表明随着发光碳点纳米材料浓度的升高,细胞活性并没有出现明显的下降,说明该近红外发光碳点材纳米料毒性较小且具有良好的生物相容性,可在环保监测、示踪传感、生物医学等领域广泛应用。

手足口病病毒EV71衣壳蛋白VP1基因特征分析

目的分析幼童手足口病病毒EV71衣壳蛋白VP1基因特征,为手足口病临床预防和控制提供指导。方法随机收集604例手足口病幼童患者标本,培养病毒株并分离鉴定。采用RT-PCR扩增EV71及其VP1区基因,经基因产物测序分析毒株的核苷酸和氨基酸序列同源性。结果604例手足口病幼童患者标本中,男性患者369例(61.09%)和女性235例(38.91%);(34.60%).1~岁179例(29.64%),2~岁216例(35.76%)和3~岁209例(34.60%)。共分离出病毒129株,分离率21.36%,其中EV71 61株(占47.29%),CoxA16 28株(占21.71%),其他肠道病毒40株(占31.01%)。61株EV71的VP1区基因序列间核苷酸同源性95.7%~100.0%,氨基酸同源性97.3%~100.0%。与C4a亚型代表株的核苷酸同源性96.4%~98.9%,氨基酸同源性99.0%~100.0%。与CoxA16原始株G-10、A、B基因型代表株VP1区以及C4b、C5亚型代表株的核苷酸同源性分别为66.0%~68.9%、78.6%~82.8%、83.2%~85.5%、95.2%~97.4%和84.5%~87.6%,氨基酸同源性分别为71.4%~75.7%、90.5%~93.6%、95.1%~96.0%、99.0%~99.8%和97.6%~99.4%。结论手足口病发病以3~4岁男性幼童为主,且以EV71为主。所分离的EV71流行株属于C4亚型。

1起人偏肺病毒引起的急性呼吸道感染暴发疫情调查

目的调查分析深圳市龙华区1起由人偏肺病毒(hMPV)引起的急性呼吸道感染暴发疫情的流行特点和发生原因,为防控相关疫情提供参考。方法对病例报告学校开展流行病学调查;采集患者咽拭子样本,针对A型流感病毒、B型流感病毒、腺病毒、人鼻病毒、呼吸道疱疹病毒、人偏肺病毒,进行荧光定量PCR检测。结果 2019年2月11日至3月31日共搜索到病例32例,所有病例均在五年级(3)班,罹患率为59.26%(32/54),病例中男生16人,女生16人。首例病例于2019年2月20日发病,末例病例3月18日发病,疫情持续时间为27 d。患者临床症状以咳嗽(96.88%)、流鼻涕(84.38%)和咽痛(71.88%)为主,体温多为正常或低热(78.13%),≥38℃的中高热少见(21.88%)。临床辅助检查无特异性。实验室检测17份咽拭子标本,4份为人偏肺病毒核酸阳性(23.53%),其他病毒核酸均未检出。结论这是1起因患病学生未痊愈返校导致的人偏肺病毒引起急性呼吸道感染暴发疫情,学校应加强病例的发现及全程隔离。

深圳市龙华区托幼儿童流感样病例发病情况及影响因素分析

目的调查深圳市龙华区托幼儿童流感样病例发病情况及分析其影响因素,为制定流感防控策略提供理论依据。方法采用多阶段抽样方法抽取研究对象,在辖区的6个街道随机抽取11所幼儿园,再随机抽取大中小各一个班级进行问卷调查,调查2019年1—6月曾发生流感样症状的病例,并与未发生流感样症状的非病例开展病例对照研究,采用单因素及多因素分析的方法分析其影响因素。结果纳入统计的1193名托幼儿童在2019年1月1日—6月30日发生过流感样病例症状的病例有591例(49.54%,591/1193),其中就诊人数536例(90.69%,536/591),住院人数20例(3.38%,20/591)。开展流感咽拭子胶体金检测114例(19.29%,114/591),阳性检出率(25.44%,29/114)。本年度接种流感疫苗191人,疫苗接种率16.01%(191/1193),既往曾接种流感疫苗662人,疫苗接种率55.49%(662/1193)。多因素分析结果显示:年级(大班)(OR=0.398,95%CI:0.292~0.541)和儿童打喷嚏会捂住口鼻(OR=0.620,95%CI:0.474~0.810)是儿童是否患流感样症状的保护因素。结论龙华区托幼儿童流感病原检测率及疫苗接种率较低,提高流感病原检测,提倡疫苗接种及强调儿童打喷嚏礼仪的健康宣教,有利于保护儿童健康。

深圳市龙华区校园传染病防控能力评价指标体系构建及应用

目的建立深圳市龙华区中小学校及幼儿园传染病防控能力评价指标体系,并对学校及幼儿园传染病防控能力进行初步评价。方法通过查阅文献、参考相关的工作规范和专家咨询的方法,拟定龙华区校园传染病防控能力评价的基础指标,采用2轮专家评分法对基础指标进行筛选、增、减得到最终评价指标体系及其权重,最后利用问卷调查法对校园传染病的防控能力进行评价。结果邀请13名具有医学背景、熟悉传染病防控业务且具有丰富实践经验的专家进行咨询,建立的校园传染病防控能力评价指标体系由4个一级指标、15个二级指标、33个三级指标组成。应用该评价体系对龙华区245所中小学校和幼儿园进行初步评分,10.61%(26/245)评价对象的传染病防控能力"很强"(90.00~100.00分),50.61%(124/245)为"强"(80.00~89.99分),23.27%(57/245)为"一般"(70.00~79.99分),13.06%(32/245)为"差"(60.00~69.99分),2.45%(6/245)为"很差"(0~59.99分)。结论通过校园传染病防控能力评价指标体系,对学校及幼儿园进行综合评价,找出传染病防控的薄弱环节,为进一步提高传染病防控能力提供科学依据。

深圳市龙华区校外午托机构传染病防控风险评估和从业人员知信行调查

目的 了解深圳市龙华区校外午托机构工作人员传染病防控知信行现状,为卫生机构及相关部门完善相关卫生管理制度和校外午托机构从业人员传染病防控健康教育提供依据。方法 2020年1-12月在龙华区6个街镇中通过随机抽样抽取40家校外午托机构共209名从业人员,采用自行设计的问卷进行现场调查。问卷内容包含基本情况、传染病防控知识、态度、需求和行为5部分。结果 校外午托从业人员传染病防控知识的总体知晓率为52.44%,法定传染病种类数量的正答率为34.45%。从业人员的年龄、学历、工作性质、工作岗位均对知晓率影响差异有统计学意义(P<0.05);全职是从业人员知晓率高于60%的有利因素(OR=2.83,95%CI=1.01~7.91,P<0.05)。在态度方面,72.25%从业人员对机构暴发传染病持担心及非常担心态度;在行为方面,仅3.35%从业人员对新冠病毒防控有效行为有正确认知,22.49%从业人员能采取正确的工器具消毒方法,21.05%从业人员在学生出现呕吐时能避免采取错误做法。40家午托机构经风险评估,7家午托机构风险值处于较大风险,33家处于中等风险。结论 深圳市龙华区校外午托从业人员传染病防控知识掌握不足,大部分人员持积极的防控态度,其担心态度可能受疫情影响。