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太子参参须多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究 被引量:4
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作者 曾丽 陈赛红 +5 位作者 赵佳梅 陈颖清 黄一帆 张炎达 李健 马玉芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期79-87,共9页
为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制,本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况,筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL~400μg/mL。将25μg/mL~400μg/mL RPFRP... 为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制,本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况,筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL~400μg/mL。将25μg/mL~400μg/mL RPFRP作用于RAW264.7细胞并于不同时间后收获细胞培养物或上清液进行后续试验。采用中性红法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的吞噬活性,结果显示:RPFRP可极显著提高RAW264.7细胞吞噬活性(P<0.01),且该吞噬活性在PRFRP浓度为25μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高;Griess法检测RAW264.7细胞的NO产生量,结果显示:RAW264.7细胞上清液中NO含量显著升高(P<0.05),且呈RPFRP剂量依赖式升高;ELISA法检测RAW264.7细胞的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,结果显示:与空白对照组相比,RPFRP处理的RAW264.7细胞上清液中IL-6、IL-1β、TNF-α和IL-10的含量极显著或显著上升(P<0.01、P<0.05),且在RPFRP浓度为25μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高;qRT-PCR检测RAW264.7细胞的诱导型-氧化氮合酶(iNOS)、细胞因子、核转录因子-κB(NF-κB)、髓样分化因子88(MyD88)和Toll样受体4(TLR4)mRNA转录水平,结果显示:RPFRP处理的RAW264.7细胞中iNOS、IL-6、IL-10、TNF-α的mRNA转录水平均呈剂量依赖式增加(P<0.01),IL-1β、MyD88和NF-κB的mRNA转录水平在RPFRP浓度为25μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高(P<0.01),仅在RPFRP浓度为400μg/mL时有所降低,而TLR4 mRNA的转录水平则呈剂量依赖式降低(P<0.01);western blot检测RAW264.7细胞中TLR2、TLR4、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、MyD88、NF-κB抑制蛋白α(IκB-α)、NF-κB蛋白中表达水平,结果显示:RPFRP处理的RAW264.7细胞中TLR2、MyD88、TRIF与胞核NF-κB蛋白的表达水平提高且在RPFRP浓度为50μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式升高,而该细胞中TLR4、IκB-α和胞浆NF-κB蛋白的表达水平则在RPFRP浓度为50μg/mL~200μg/mL时呈剂量依赖式下降。综上可知,RPFRP可通过提高RAW264.7细胞的增殖能力、吞噬活性、分泌NO和细胞因子的能力等增强RAW264.7细胞的免疫功能,且RPFRP对RAW264.7细胞的免疫调控机制可能是通过TLR2/4-MyD88/TRIF-NF-κB信号通路活化RAW264.7细胞来完成。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 RAW264.7细胞 免疫调节
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太子参参须提取物对免疫抑制小鼠的免疫调节作用 被引量:2
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作者 陈赛红 衣伟萌 +5 位作者 闵思明 陈俊宇 甘思言 潘慧青 张炎达 马玉芳 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期138-143,共6页
本试验旨在探讨太子参参须提取物(RPFRE)对环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制小鼠的免疫调节作用。腹腔注射CTX建立免疫抑制模型小鼠,以黄芪多糖(APS)为阳性对照,用不同剂量的RPFRE灌胃免疫抑制小鼠2周,检测免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能、... 本试验旨在探讨太子参参须提取物(RPFRE)对环磷酰胺(CTX)所致免疫抑制小鼠的免疫调节作用。腹腔注射CTX建立免疫抑制模型小鼠,以黄芪多糖(APS)为阳性对照,用不同剂量的RPFRE灌胃免疫抑制小鼠2周,检测免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能、脾淋巴细胞增殖、细胞因子含量等免疫学指标。结果显示,给予高剂量RPFRE[400 mg/(kg·bw)]的免疫抑制小鼠脾脏指数极显著降低(P<0.01),肝脏指数极显著升高(P<0.01),胸腺指数有所升高,但差异不显著(P>0.05);碳粒廓清指数K、吞噬指数α、脾T、B淋巴细胞刺激指数(SI)、血清细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6含量均显著升高(P<0.05或P<0.01),效果与APS相当;给予低[100 mg/(kg·bw)]、中[200 mg/(kg·bw)]剂量RPFRE的免疫抑制小鼠上述指标变化趋势与高剂量组相同。结果表明,RPFRE能增强免疫抑制小鼠的免疫功能。 展开更多
关键词 太子参参须提取物 免疫抑制小鼠 免疫器官指数 脾淋巴细胞增殖 吞噬指数 细胞因子
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太子参参须多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究 被引量:19
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作者 闵思明 赵晓瑶 +5 位作者 陈赛红 甘思言 陈俊宇 朱晶 黄一帆 马玉芳 《动物医学进展》 北大核心 2020年第8期23-28,共6页
为研究太子参参须多糖(RPFRP)对免疫抑制小鼠功能的影响,腹腔注射环磷酰胺(CY)建立免疫抑制模型小鼠,灌胃RPFRP,称量计算器官指数(脾指数和胸腺指数),碳粒廓清法测定巨噬细胞功能,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测细胞因子... 为研究太子参参须多糖(RPFRP)对免疫抑制小鼠功能的影响,腹腔注射环磷酰胺(CY)建立免疫抑制模型小鼠,灌胃RPFRP,称量计算器官指数(脾指数和胸腺指数),碳粒廓清法测定巨噬细胞功能,MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖指数,ELISA法检测细胞因子含量。结果显示,RPFRP能下调免疫功能低下小鼠的脾脏指数,上调胸腺指数、碳粒廓清指数K和细胞因子IL-2、IFN-γ含量。说明RPFRP能通过改善免疫器官指数、巨噬细胞吞噬功能、特异性细胞免疫和体液免疫功能,增强免疫功能低下小鼠的免疫功能。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 环磷酰胺 免疫调节 免疫抑制小鼠
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太子参参须提取物对免疫抑制小鼠免疫保护作用的研究 被引量:20
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作者 衣伟萌 陈赛红 +5 位作者 闵思明 陈俊宇 甘思言 黄一帆 张炎达 马玉芳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期837-844,共8页
本试验旨在研究太子参参须提取物(RPFRE)对免疫抑制小鼠的免疫保护作用。选取3~4周龄,体重20±2 g的KM雄性小鼠,随机分为对照(CK)组、环磷酰胺(CY)模型组、黄芪多糖(APS)组、RPFRE低、中、高剂量组,每组20只。第1~14天,CK组、CY组... 本试验旨在研究太子参参须提取物(RPFRE)对免疫抑制小鼠的免疫保护作用。选取3~4周龄,体重20±2 g的KM雄性小鼠,随机分为对照(CK)组、环磷酰胺(CY)模型组、黄芪多糖(APS)组、RPFRE低、中、高剂量组,每组20只。第1~14天,CK组、CY组小鼠灌服双蒸水;APS组小鼠灌服200 mg/kg黄芪多糖;RPFRE低、中、高剂量组小鼠分别灌胃100、200、400 mg/kg太子参参须提取物;第15~17天,CK组小鼠腹腔注射生理盐水、其他五组小鼠腹腔注射80 mg/kg环磷酰胺。第18天采样,碳粒廓清法检测小鼠巨噬细胞吞噬功能;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖能力;ELISA法检测细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ)的含量;免疫比浊法检测血清免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)及补体(C3和C4)含量。结果显示,与模型组相比,RPFRE高剂量能显著升高小鼠脾脏指数和肝指数(P<0.01),增强小鼠巨噬细胞吞噬能力(P<0.05),促进脾淋巴细胞增殖(P<0.01),促进细胞因子IL-2、IL-4和IFN-γ分泌(P<0.01,P<0.05),升高免疫球蛋白细胞IgA、IgM、IgG和补体C3和C4(P<0.01)含量。上述结果表明,RPFRE能拮抗CY所致的脾脏、胸腺和肝脏的萎缩,提高免疫器官指数;高浓度RPFRE能干预CY损伤,维持巨噬细胞的吞噬能力,促进T淋巴细胞增殖,拮抗CY造成的免疫球蛋白和补体分泌水平降低,从而对免疫抑制小鼠发挥免疫保护作用。 展开更多
关键词 太子参参须提取物 免疫抑制小鼠 脾淋巴细胞增殖 细胞因子 免疫球蛋白 补体
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太子参参须多糖对免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用研究 被引量:12
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作者 乔石 闵思明 +5 位作者 甘思言 陈赛红 陈俊宇 张炎达 黄一帆 马玉芳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期991-997,共7页
为探究太子参参须多糖(RPFRP)对环磷酰胺(CY)造成的免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用,本研究将96只雄性KM小鼠,随机分成CK组(空白对照组),CY组(模型组),100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg RPFRP组(即低、中、高剂量RPFRP组)和200 mg/kg AP... 为探究太子参参须多糖(RPFRP)对环磷酰胺(CY)造成的免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用,本研究将96只雄性KM小鼠,随机分成CK组(空白对照组),CY组(模型组),100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg RPFRP组(即低、中、高剂量RPFRP组)和200 mg/kg APS组(黄芪多糖组,阳性对照组)。实验开始后第1 d~第3 d,CK组每天腹腔注射(ip)适量生理盐水,其余各组分别ip 80 mg/kg的CY,对小鼠造成免疫抑制后于第4 d~第17 d,CK组和CY组小鼠每天灌胃(ig)双蒸水,RPFRP组和APS组分别ig相应剂量的RPFRP和APS。第18 d迫杀小鼠,无菌取脾制备脾细胞悬液,采用MTT法检测小鼠NK细胞对淋巴瘤细胞(YAC-1)的杀伤活性;利用流式细胞术检测T细胞亚群数量、脾淋巴细胞的凋亡;通过qRT-PCR检测小鼠脾细胞因子及转录因子mRNA的转录水平。结果显示,与CY组相比,中剂量的RPFRP能够显著增强免疫抑制小鼠NK细胞对YAC-1细胞的杀伤活性(p<0.05);RPFRP可显著提高免疫损伤小鼠脾脏中CD^(3+)、CD^(4+)、CD^(8+)T淋巴细胞含量以及CD^(4+)/CD^(8+)比值(p<0.05),显著降低因CY所致的小鼠脾淋巴细胞的凋亡(p<0.05);较CY组,各剂量RPFRP组小鼠IL-2 mRNA转录水平均显著升高(p<0.05),IL-4、IL-6 mRNA转录水平均显著下降(p<0.05),RPFRP低、中剂量组小鼠脾淋巴细胞IFN-γmRNA转录水平均显著升高(p<0.05),各剂量RPFRP组和APS组小鼠T盒子转录因子(T-bet)的转录水平也显著升高(p<0.05),GATA结合蛋白3(GATA-3)的转录水平则显著降低(p<0.05),且T-bet/GATA-3的比值更接近于CK组。上述结果表明,RPFRP能够改善因CY所致小鼠脾脏T淋巴细胞亚群数量的降低,调节小鼠脾细胞因子及转录因子mRNA的转录水平,降低脾淋巴细胞的凋亡,且中剂量的RPFRP能显著提高小鼠脾NK细胞的杀伤活性,从而发挥其对免疫抑制小鼠脾脏损伤的修复作用。本研究为RPFRP的临床应用和对机体免疫作用的研究提供参考依据。 展开更多
关键词 太子参参须多糖 免疫抑制小鼠 脾脏损伤 免疫修复
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太子参参须皂苷对RAW 264.7细胞体外免疫调节作用研究 被引量:1
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作者 曾丽 陈赛红 +4 位作者 甘思言 杜蓥蓥 张炎达 黄一帆 马玉芳 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2022年第10期1657-1665,共9页
本实验旨在研究太子参参须皂苷(Radix Pseudostellariae fibrous roots saponins,RPFRS)对小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7细胞)的免疫调节作用及可能的作用机制。采用脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7细胞,检测RAW 264.7细胞的增殖、吞噬活性、NO... 本实验旨在研究太子参参须皂苷(Radix Pseudostellariae fibrous roots saponins,RPFRS)对小鼠单核巨噬细胞(RAW 264.7细胞)的免疫调节作用及可能的作用机制。采用脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7细胞,检测RAW 264.7细胞的增殖、吞噬活性、NO产生量、相关细胞因子含量、相关免疫分子及免疫蛋白相对表达量。结果表明:与空白对照组相比,RPFRS组中的RAW 264.7细胞的吞噬活性OD值呈剂量依赖式上升(P<0.01),NO、IL-6的含量、IL-6和TNF-α的mRNA相对表达量呈剂量依赖式上升(P<0.05);RPFRS的浓度为12.5~100μg/mL时,IL-10、IL-1β、TNF-α的含量及IL-10、IL-1β、iNOS、MyD88和NF-κB的mRNA表达量在呈剂量依赖式上升(P<0.05),但TLR4的mRNA相对表达量呈剂量依赖式降低(P<0.05);WB结果显示RPFRS能够上调TLR2、MyD88、TRIF与胞核NF-κB蛋白,下调TLR4、IκB-α和胞浆NF-κB蛋白的相对表达量,上述结果表明,RPFRS可以通过提高RAW 264.7细胞的增殖能力、吞噬活性、分泌NO和细胞因子能力从而增强RAW 264.7细胞的免疫功能,提示RPFRS可能通过TLR2/4-MyD88/TRIF-NF-κB信号通路活化RAW 264.7细胞。 展开更多
关键词 太子参参须皂苷 RAW 264.7细胞 免疫调节
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Effects of Different Concentrations of Radix pseudostellariae Fibrous Root Extracts on Serum Cytokines in Mice and Their Correlation Analysis 被引量:1
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作者 PAN Hui-qing ZHANG Yan-da +4 位作者 YI Wei-meng chen sai-hong JIA Zhi-ping ZHAO Qi MA Yu-fang 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2022年第3期46-51,共6页
To investigate the effects of Radix pseudostellariae fibrous root extracts(RPFRE) on serum cytokines in normal and immunosuppressed mice and the correlation between indexes, KM male mice were randomly divided into fou... To investigate the effects of Radix pseudostellariae fibrous root extracts(RPFRE) on serum cytokines in normal and immunosuppressed mice and the correlation between indexes, KM male mice were randomly divided into four groups, which were given 0(control), 0.1, 0.2, 0.4 g/kg RPFRE by gavage. The levels of IL-2, IL-4, IL-6, and IFN-γ in the serum of mice were measured 14 d after gavage. On the 15day, the remaining mice in the experimental group were intraperitoneally injected with cyclophosphamide(CY), and samples were collected on the 18day to measure serum cytokines levels. The results showed that RPFRE improved the serum cytokine level in normal mice. 0.1 g/kg RPFRE significantly increased the content of IL-2and IFN-γ(P<0.05), while 0.4 g/kg RPFRE significantly increased the content of IL-4 and IL-6(P<0.05). Correlation analysis showed that serum cytokines IL-4 and IL-6 in normal mice had an extremely significant positive correlation with RPFRE concentration(P<0.01), IL-2 had a significant or extremely significant positive correlation with IL-4, IL-6, and IFN-γ(P<0.01or P<0.05), and IL-4 had an extremely significant positive correlation with IL-6(P<0.01). After CY injection, serum cytokine levels in mice decreased and immune function was inhibited. Compared with the control group, the experimental group recovered the level of cytokines to some extent. 0.1 g/kg RPFRE significantly increased the content of IL-2 in immunosuppressed mice(P<0.05), and 0.4 g/kg RPFRE significantly increased the content of IL-4, IL-6, and IFN-γ in immunosuppressed mice(P<0.05). Correlation analysis showed that the serum cytokines in immunosuppressed mice were significantly positively correlated with RPFRE concentration(P<0.01), and there was a certain dose dependence. Moreover, the correlation coefficient between IL-2 and IL-4, IL-6, and IFN-γ, IL-4 and IL-6, and IL-6 and IFN-γ reached an extremely significant level(P<0.01). To sum up, RPFRE could improve the serum cytokines level of mice, promote the secretion of cytokines, and have a certain immune protective effect. There was a significant positive correlation between the RPFRE concentration and the serum cytokines in mice, which provided basic data support for the further study of RPFRE immune function. 展开更多
关键词 Radix pseudostellariae fibrous root Extraction MICE CYTOKINES CORRELATION
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