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水稻热激转录因子家族基因对纹枯病病菌和植物激素的响应特征
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作者 高鹏 王广达 +8 位作者 魏兆根 叶元妹 冯志明 赵剑华 居冉 谢文亚 陈宗祥 胡珂鸣 左示敏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期609-621,共13页
解析水稻热激转录因子(Heat shock factors,Hsf)家族基因响应纹枯病病菌侵染和4种植物激素处理的表达特征,可为进一步解析Hsf调控水稻纹枯病抗性与对相关逆境的响应提供重要依据。利用生物信息学方法搜索并鉴定到25个水稻Hsf基因,对其... 解析水稻热激转录因子(Heat shock factors,Hsf)家族基因响应纹枯病病菌侵染和4种植物激素处理的表达特征,可为进一步解析Hsf调控水稻纹枯病抗性与对相关逆境的响应提供重要依据。利用生物信息学方法搜索并鉴定到25个水稻Hsf基因,对其系统进化树、相关分子特征、蛋白质结构域、基因结构及顺式作用元件进行预测和分析,用荧光定量PCR法分析它们对纹枯病病菌侵染的响应特征及4种激素[茉莉酸(Jasmonic acid,JA)、水杨酸(Salicylic acid,SA)、乙烯(Ethylene,ETH)和激动素(Kinetin,KT)]处理后的表达模式,同时分析它们在水稻组织中的表达情况。结果显示,水稻Hsf蛋白总体上可划分为5组,3个OsHsf亚家族基因在进化关系上的距离较远。25个Hsf蛋白的相对分子质量大小不一,且多数蛋白质的稳定性不高,但其基因结构较为保守。这些基因可能与激素响应及光信号通路相关。有5个基因呈组成型表达,另有7个基因呈组织特异性表达。水稻Hsf基因总体上受纹枯病病菌诱导的强度较低,其中11个上调表达的基因主要集中在OsHsfA、OsHsfB亚家族,4个下调表达的基因主要集中在OsHsfC亚家族,提示Hsf基因可能在调控水稻对纹枯病抗性的功能上存在分化。4个基因(OsHsfA2a、OsHsfA3、OsHsfB2a、OsHsfB2c)强烈响应纹枯病病菌的侵染,并且在叶鞘、叶片组织中的相对表达量较高,表明这些基因可能参与调控水稻对纹枯病的抗性。多数Hsf基因能够响应4种植物激素处理,总体来说,大部分OsHsf基因在JA、SA和ETH处理下呈下调表达,仅有少数基因呈上调表达;JA处理与SA处理相比,有1个Hsf基因受诱导表达的特征相反,SA处理和ETH处理相比,有3个Hsf基因受诱导表达的特征相反,JA处理和ETH处理相比,有3个Hsf基因受诱导表达的特征相反,JA处理与SA处理相比,SA处理与ETH处理相比,JA处理与ETH处理相比,表达特征相似的基因分别有18个、16个和13个。OsHsfA2a、OsHsfA3、OsHsfB2a、OsHsfB2c等4个水稻的Hsf基因可能参与调控水稻对纹枯病的抗性,研究结果明确了水稻中Hsf基因对不同激素处理的响应特征,为进一步研究Hsf在水稻逆境响应中的功能提供了参考依据。 展开更多
关键词 水稻 OsHsf基因 纹枯病 防御相关激素
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Ⅱ型登革病毒NS1蛋白的表达及其免疫血清的制备
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作者 张勇侠 高雅丽 +7 位作者 康庄 丛聪 罗心梅 代云见 陈宗香 李立 李桂华 刘兰军 《微生物学免疫学进展》 2018年第5期7-13,共7页
目的原核表达、纯化II型登革病毒NS1A蛋白(NS1蛋白1~180氨基酸即DENV2 NS1A),将其免疫动物制备免疫血清并鉴定。方法构建重组融合质粒p ET22b-p64K-L-DENV2 NS1A,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG低温诱导表达。表达的融合蛋白经Hitrap ... 目的原核表达、纯化II型登革病毒NS1A蛋白(NS1蛋白1~180氨基酸即DENV2 NS1A),将其免疫动物制备免疫血清并鉴定。方法构建重组融合质粒p ET22b-p64K-L-DENV2 NS1A,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG低温诱导表达。表达的融合蛋白经Hitrap Talon crude柱亲和层析纯化后,免疫雌性日本长耳兔获得抗DENV2 NS1A兔抗血清,用Western blot和免疫荧光检测免疫血清对重组麻疹病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6Xhis的识别和结合特性。结果重组融合质粒p ET22b-p64K-L-DENV2 NS1A经双酶切和测序证明构建正确。表达的重组融合蛋白相对分子质量为100 000,纯化后蛋白纯度在85%以上,免疫获得的抗DENV2 NS1A兔抗血清可识别重组病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6XHis表达的DENV2 NS1蛋白。结论原核表达并纯化了DENV2 NS1A蛋白,建立了基于NS1蛋白的重组病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6XHis的Western blot和免疫荧光检测方法,为登革热疫苗研制中重组病毒MV_(S191)-DENV2 NS1 6XHis的质检奠定了基础。 展开更多
关键词 登革病毒 NS1蛋白 原核表达 免疫荧光
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导师制对提高毕业论文质量和创新能力的探究——以农学专业本科生为例 被引量:4
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作者 冯志明 张亚芳 +1 位作者 陈宗祥 左示敏 《教育教学论坛》 2020年第28期344-345,共2页
本科生导师制是新形势下高校人才培养的新机制,对于提高本科生的实践创新能力和科研素质具有重要作用。该文对本科生毕业论文质量存在的问题及其产生原因进行了分析,结合农学院农学专业实施导师制的实际情况,总结并探讨了导师制带来的益... 本科生导师制是新形势下高校人才培养的新机制,对于提高本科生的实践创新能力和科研素质具有重要作用。该文对本科生毕业论文质量存在的问题及其产生原因进行了分析,结合农学院农学专业实施导师制的实际情况,总结并探讨了导师制带来的益处,为进一步提高毕业论文质量和培养具有实践创新能力的人才提供了借鉴。 展开更多
关键词 本科生导师制 毕业论文质量 实践创新能力
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基于改进EMD和双谱分析的电机轴承故障诊断实现 被引量:32
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作者 陈宗祥 陈明星 +1 位作者 焦民胜 葛芦生 《电机与控制学报》 EI CSCD 北大核心 2018年第5期78-83,共6页
轴承是电机设备极重要的部件。轴承故障检测是非常必要的。通过将改进的经验模态分解和双谱分析相结合的故障检测方法来有效诊断电机轴承的早期故障。首先,针对EMD分解无法得到严格单分量IMF的问题,利用小波包分解将轴承振动信号分解为... 轴承是电机设备极重要的部件。轴承故障检测是非常必要的。通过将改进的经验模态分解和双谱分析相结合的故障检测方法来有效诊断电机轴承的早期故障。首先,针对EMD分解无法得到严格单分量IMF的问题,利用小波包分解将轴承振动信号分解为窄带信号并选取能量最集中的频带进行重构,从而降低故障信号的复杂性,抑制模态混叠问题;然后利用经验模态分解方法根据信号的固有波动模式将其分解为一系列IMF分量;再通过方差贡献率检验去除其中的虚假分量;最后,利用双谱分析信号的调制关系进行解耦,得到故障特征频率。验证结果表明,所提出的分析方法能有效诊断轴承故障。 展开更多
关键词 电机轴承 故障检测 改进经验模态分解 双谱
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基于可变电感的变频LLC谐振变换器交错并联技术 被引量:6
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作者 陈宗祥 陈克难 +1 位作者 熊宣 何瑞阳 《电机与控制学报》 EI CSCD 北大核心 2020年第12期97-105,共9页
LLC谐振变换器具有软开关、高效率、高功率密度等优点。LLC交错并联技术被应用于大功率输出,以期降低功率器件的开关损耗和输出电流纹波。然而,多路LLC变换器参数之间存在差异,最终致使变换器各并联模块均流效果不佳。可变电感技术是利... LLC谐振变换器具有软开关、高效率、高功率密度等优点。LLC交错并联技术被应用于大功率输出,以期降低功率器件的开关损耗和输出电流纹波。然而,多路LLC变换器参数之间存在差异,最终致使变换器各并联模块均流效果不佳。可变电感技术是利用恒流功率源控制磁芯饱和程度,实现等效电感变化。本文提出将可变电感应用于交错并联LLC变换器中,在线调整谐振电感,使LLC各模块实现输出电流的交错与均流。本文提出了一种新的谐振网络直流增益表达式并进行了三维可视化分析,推导出基于常数分离的可变电感感量表达式,从而为可变电感在交错并联LLC中的应用提供了理论指导,使得分析与设计得以简化。本文设计并制作了一台480 W的实验样机,验证了这种控制策略的有效性。 展开更多
关键词 LLC谐振变换器 交错并联 变频控制 均流 可变电感 软开关
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LLC谐振变换器自抗扰控制研究 被引量:3
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作者 陈宗祥 张武林 +2 位作者 陈克难 刘康 李松 《电机与控制学报》 EI CSCD 北大核心 2022年第8期130-138,共9页
LLC谐振变换器采用PI控制器对环路补偿时存在带宽设计受限、动态性能不佳、抗扰能力较差问题。本文将自抗扰控制(ADRC)等效为二自由度系统,提出利用PID与ADRC之间的等效关系,通过频域法对ADRC参数进行预设计,并采用粒子群算法(PSO)对ADR... LLC谐振变换器采用PI控制器对环路补偿时存在带宽设计受限、动态性能不佳、抗扰能力较差问题。本文将自抗扰控制(ADRC)等效为二自由度系统,提出利用PID与ADRC之间的等效关系,通过频域法对ADRC参数进行预设计,并采用粒子群算法(PSO)对ADRC参数进行优化,通过多次迭代得到ADRC参数最优解。最后设计并制作一台额定功率为300 W的样机,仿真和实验证明,ADRC控制策略有效解决了传统PID控制器在负载扰动较大情况下系统的调节时间较长问题,加载过程调节时间缩短了3.4 ms,减载过程调节时间缩短了2.5 ms,所设计控制器有效提高了LLC变换器的动态性能。 展开更多
关键词 LLC谐振变换器 二自由度 自抗扰控制 粒子群算法 PID控制 动态性能
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iTRAQ-based quantitative proteomics analysis of defense responses triggered by the pathogen Rhizoctonia solani infection in rice 被引量:2
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作者 FENG Zhi-ming GAO Peng +11 位作者 ZHAO Jian-hua WANG Guang-da ZHANG Hui-min CAO Wen-lei XUE Xiang ZHANG Ya-fang MA Yu-yin HUA Rong chen zong-xiang chen Xi-jun HU Ke-ming ZUO Shi-min 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2022年第1期139-152,共14页
The soil-borne necrotrophic fungus Rhizoctonia solani is one of destructive fungi causing severe yield losses in various important crops. However, the host defense mechanisms against the invasion of this pathogen are ... The soil-borne necrotrophic fungus Rhizoctonia solani is one of destructive fungi causing severe yield losses in various important crops. However, the host defense mechanisms against the invasion of this pathogen are poorly understood. In this study, we employed an i TRAQ-based quantitative proteomic approach to investigate host proteins responsive to R. solani using the resistant rice cultivar YSBR1. As a whole, we identified 319 differentially accumulated proteins(DAPs) after inoculation of rice plants with R. solani. Functional categorization analysis indicates that these DAPs cover a broad range of functions. Notably, a substantial portion of the DAPs are involved in cell redox homeostasis, carbohydrate metabolism, and phenylpropanoid biosynthesis, or belong to pathogenesis-related proteins, indicating that these processes/proteins play important roles in host defense against R. solani. Interestingly, all of the DAPs involved in photosynthesis and chlorophyll biosynthetic processes, and part of the DAPs involved in phenylpropanoid biosynthesis, show reduced accumulation after R. solani infection, suggesting that R. solani probably inhibits host photosynthetic system and phenylpropanoid biosynthesis to facilitate infection and colonization. In conclusion, our results provide both valuable resources and new insights into the molecular mechanisms underlying rice and R. solani interaction. 展开更多
关键词 rice sheath blight Rhizoctonia solani PROTEOMIC defense response
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水稻类病斑突变体基因克隆及发生机制研究进展 被引量:2
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作者 沈旺鑫 史小品 +5 位作者 杜海波 冯志明 陈宗祥 胡珂鸣 范江波 左示敏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第3期837-848,共12页
类病斑突变体(Lmms)是研究植物细胞死亡和防御反应机制的重要材料。本文对水稻类病斑突变体的最新研究进展进行了综述。在此基础上,对进一步加强类病斑突变体及其抑制突变体基因的鉴定与克隆、解析病健组织间细胞命运的精细调控机制,以... 类病斑突变体(Lmms)是研究植物细胞死亡和防御反应机制的重要材料。本文对水稻类病斑突变体的最新研究进展进行了综述。在此基础上,对进一步加强类病斑突变体及其抑制突变体基因的鉴定与克隆、解析病健组织间细胞命运的精细调控机制,以及如何利用类病斑突变体开展抗逆分子设计育种进行了讨论。 展开更多
关键词 水稻 类病斑突变体 表型 基因克隆 分子机制
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Effect of Rolled Leaf Gene Rl_(t) on Grain Quality in Hybrid Rice 被引量:1
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作者 SHAO Yuan-jian chen zong-xiang +2 位作者 chen Hong-qi ZHANG Ya-fang PAN Xue-biao 《Rice science》 SCIE 2005年第3期168-172,共5页
Effects of rolled leaf gene Rl(t) on grain quality characters of hybrid rice were analyzed by using three pairs of rolled leaf near-isogenic lines under two fertilizer treatments. Under normal fertilizer level (e.g... Effects of rolled leaf gene Rl(t) on grain quality characters of hybrid rice were analyzed by using three pairs of rolled leaf near-isogenic lines under two fertilizer treatments. Under normal fertilizer level (e.g. 450 kg urea per ha), head rice rates and milled rice recovery of rolled leaf hybrids were significantly higher than those of corresponding non-rolled crosses, while the chalky rice rate and chalkiness were all lower. Of the RVA profiles, the peak viscosity, the hot paste viscosity and the breakdown viscosity of the rolled were all higher than those of the corresponding non-rolled ones to various degrees. Increasing fertilizer application for promoting panicle development increased the brown, milled and head rice rates except for Shanyou 63, furthermore, significant difference of head rice rates existed between the rolled leaf Shanyou 559 and Shanyou 559; while the peak viscosity, the hot paste viscosity and the breakdown viscosity all decreased to different levels; changes of values of other characters had no apparent regularity. It suggested that Rl(t) could improve rice quality under certain conditions. 展开更多
关键词 hybrid rice rice quality rolled leaf gene effect starch viscosity rapid visco analyzer
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Improvement of Rice Resistance to Sheath Blight by Pyramiding QTLs Conditioning Disease Resistance and Tiller Angle 被引量:1
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作者 ZUO Shi-min ZHANG Ya-fang +3 位作者 chen zong-xiang JIANG Wei FENG Ming-hui PAN Xue-biao 《Rice science》 SCIE 2014年第6期318-326,共9页
Rice resistance to sheath blight (SB) is controlled by polygenes or quantitative trait loci (QTLs) and affected by plant morphological traits, qSB-9^TQ and TAG1^TQ, which control SB resistance and tiller angle (T... Rice resistance to sheath blight (SB) is controlled by polygenes or quantitative trait loci (QTLs) and affected by plant morphological traits, qSB-9^TQ and TAG1^TQ, which control SB resistance and tiller angle (TA), respectively, were employed to test whether the combination of the two genes will further improve rice SB resistance and reduce yield loss rather than only one of them or neither. Using two pairs of near isogenic lines (NILs), TAC1^TQ was confirmed to contribute to SB resistance. However, its effect was less considerable than that of qSB-9^TQ. Subsequently, the two genes were introduced into two commercial rice varieties to develop a series of NILs. The NILs carrying both TAG1^TQ and qSB-9^TQ showed more resistance than the NILs containing only one of them. Comparing the grain yield per plant (GYP) under the three different SB disease conditions, namely slight, moderate and severe conditions, NILs carrying both genes apparently lost lower GYP than the NILs without the two genes and the NILs carrying only TAC1^TQ. Under slight disease condition, no significant differences were found on morphology, development and GYP associated traits except for TA between the NILs carrying both genes and either of them, indicating that the two genes have no inferior effect on rice agronomic traits. Results indicated that mAC1^TQ and qSB-9^TQ have high breeding potential, and pyramiding SB resistance QTL and morphological trait QTL is a potential approach in improving rice SB resistance. 展开更多
关键词 breeding potential QTL pyramiding RICE sheath blight yield
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基于对称控制的不对称半桥变换器建模与设计 被引量:1
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作者 陈宗祥 何瑞阳 +1 位作者 夏冰 葛芦生 《电力电子技术》 CSCD 北大核心 2018年第12期91-92,132,共3页
传统不对称半桥(AHB)存在变压器激磁电流的直流偏磁、开关管电压应力不同等现象;而对称控制有助于改善这些问题。在此介绍了对称控制的AHB电路原理,提出了利用状态空间平均法建立基于对称控制的AHB变换器小信号模型,分析了静态工作点并... 传统不对称半桥(AHB)存在变压器激磁电流的直流偏磁、开关管电压应力不同等现象;而对称控制有助于改善这些问题。在此介绍了对称控制的AHB电路原理,提出了利用状态空间平均法建立基于对称控制的AHB变换器小信号模型,分析了静态工作点并设计了补偿网络。最后制作了600 W实验样机,实验结果验证了理论分析。 展开更多
关键词 变换器 对称控制 不对称半桥 小信号模型
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大功率高频微波发生器的PWM整流器研究与应用 被引量:1
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作者 赵庆亮 袁正勇 +1 位作者 陈宗祥 方勇 《真空电子技术》 2021年第3期71-75,共5页
大功率高频微波发生器为解决传统的不控整流带来的进线电流谐波大和功率因数低的问题而采用脉宽调制(PWM)整流方式,在分析PWM整流器基本原理和数学模型的基础上,归纳出可行的电流直接控制方式,通过仿真和实验测试,验证了采用该方案的大... 大功率高频微波发生器为解决传统的不控整流带来的进线电流谐波大和功率因数低的问题而采用脉宽调制(PWM)整流方式,在分析PWM整流器基本原理和数学模型的基础上,归纳出可行的电流直接控制方式,通过仿真和实验测试,验证了采用该方案的大功率高频微波发生器具有总谐波失真小于5%、功率因数大于0.99、微波频率频宽小于2 MHz、微波功率稳定度小于100 W等优异性能。 展开更多
关键词 高频微波发生器 PWM整流器 总谐波失真
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Genome-Wide Association Studies Reveal New Genetic Targets for Five Panicle Traits of International Rice Varieties
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作者 ZHANG Ya-fang MA Yu-yin +5 位作者 chen zong-xiang ZOU Jie chen Tian-xiao LI Qian-qian PAN Xue-biao ZUO Shi-min 《Rice science》 SCIE CSCD 2015年第5期217-226,共10页
Narrow genetic background is a key limiting factor in breeding stable high-yielding rice. The introduction and utilization of international rice core germplasm is an important way to increase the genetic diversity of ... Narrow genetic background is a key limiting factor in breeding stable high-yielding rice. The introduction and utilization of international rice core germplasm is an important way to increase the genetic diversity of domestic rice varieties. We conducted a genome-wide association study on 5 panicle traits of 315 rice accessions introduced from the international rice micro-core germplasm bank. Based on the tests from Yangzhou of China and Arkansas of American, environment exhibited a significant impacts on panicle length and primary branch number, while grain length, grain width and grain length/width ratio were insensitive to environment changes. We discovered a total of 7, 5, 10, 8 and 6 chromosomal regions or single nucleotide polymorphism marker loci that were significantly associated with primary branch number, panicle length, grain length, grain width and grain length/width ratio, respectively. Among them, eleven regions were associated with grain shape and one region associated with primary branch number, showing the good consistence in two different environments. Significant linear correlation was discovered between the average trait value and the number of favorable alleles carried by the varieties in all associated loci. Among the associated loci, varieties in aromatic and tropical japonica sub-groups possessed most favorable alleles, while those in temperate japonica sub-group contained the least. The domestic varieties mainly harbored unfavorable alleles in six of the associated loci being detected. On the contrary, 15 varieties from 11 different countries harbored more favorable alleles (as many as 30 or more) than the others. Remarkably, all these 15 varieties belonged to the tropical japonica sub-group. In conclusion, our study demonstrates that varieties in the tropical japonica sub-group had high potentials for breeding stable high-yielding rice. Based on this discovery, we proposed a new approach for improving the panicle traits of domestic rice by using tropical japonica varieties. 展开更多
关键词 international rice core germplasm panicle trait genome-wide association study favorableallele breeding utilization
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Fine mapping of a novel wax crystal-sparse leaf3 gene in rice
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作者 GONG Hong-bing ZENG Sheng-yuan +10 位作者 XUE Xiang ZHANG Ya-fang chen zong-xiang ZUO Shi-min LI Chuang LIN Tian-zi JING De-dao YU Bo QIAN Hua-fei PAN Xue-biao SHENG Sheng-lan 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2017年第2期497-502,共6页
Cuticular wax plays an important role in protecting plants against water loss and pathogen infection and in the adaptations to environmental stresses. The genetic mechanism of the biosynthesis and accumulation of epic... Cuticular wax plays an important role in protecting plants against water loss and pathogen infection and in the adaptations to environmental stresses. The genetic mechanism of the biosynthesis and accumulation of epicuticular wax in rice remains largely unknown. Here, we show a spontaneous mutant displaying wax crystal-sparse leaves and decreased content of epicuticular wax that was derived from the cytoplasmic male sterility (CMS) restorer line Zhenhui 714. Compared with the wild type Zhenhui 714, the mutant exhibited hydrophilic features on leaf surface and more sensitivity to drought stress. The mutation also caused lower grain number per panicle and thousand grain weight, leading to the decline of yield. Genetic analysis indicates that the mutation is controlled by a single recessive gene, named wax crystal-sparse leaf3 (wsl3). Using segregation populations derived from crosses of mutant/Zhendao 88 and mutant/Wuyujing 3, respectively, the wsl3 gene was fine-mapped to a 110-kb region between markers c3-16 and c3-22 on chromosome 3. According to the rice reference genome and gene analysis, we conclude that a novel gene/mechanism involved in regulation of rice cuticular wax formation. 展开更多
关键词 RICE cuticular wax wax crystal-sparse fine mapping
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基于AMMI模型和GGE双标图对2018年江苏省水稻杂交中粳品种区域试验结果的评价分析 被引量:12
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作者 李雪 丁逸帆 +7 位作者 左示敏 陈宗祥 许明 赵愈 李鹏程 徐扬 徐辰武 杨泽峰 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2021年第3期96-102,共7页
为合理评价水稻区试中参试品种的高产稳产性、区域适应性以及各试点的区分力和代表性,采用AMMI模型和GGE双标图对2018年江苏省水稻杂交中粳区域试验的14个品种在11个试验点的产量数据进行综合分析。结果表明,基因型效应、环境效应以及... 为合理评价水稻区试中参试品种的高产稳产性、区域适应性以及各试点的区分力和代表性,采用AMMI模型和GGE双标图对2018年江苏省水稻杂交中粳区域试验的14个品种在11个试验点的产量数据进行综合分析。结果表明,基因型效应、环境效应以及基因型与环境的互作效应均对参试品种产量产生极显著影响。在品种的高产稳产方面,高产性较好的品种有嘉优中科1号、嘉优中科1602和春优T36;稳定性较好的品种为隆嘉优77和甬优6718;在品种的适应性方面,嘉优中科1号适宜种植的试点较多,具有一定的广适性,是水稻生产上具备推广潜力的理想品种;在试验环境的功能形态方面,江苏东海县作物栽培指导站和江苏省农业科学院粮食作物研究所2个试点不仅具有较强的区分力和代表性,也是综合性最好的2个试点。综合运用AMMI模型和GGE双标图可以更加全面有效地评估品种和试点,为新品种的精准推广提供理论依据,同时为目标品种的选育提供参考。 展开更多
关键词 水稻 区试 AMMI模型 GGE双标图 高产 稳产 适应性
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乙烯信号参与调控水稻纹枯病抗性的研究 被引量:5
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作者 薛芗 冯志明 +6 位作者 曹文磊 王雨 陈宗祥 马玉银 张亚芳 潘学彪 左示敏 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期462-470,共9页
乙烯(ET)信号在植物抵抗各种逆境反应中具有重要作用,但目前关于乙烯信号在调控水稻纹枯病抗性中的作用仍缺乏系统研究。本研究以感纹枯病水稻品种Lemont和抗纹枯病水稻品种YSBR1为材料,分析了纹枯病菌接种后乙烯合成关键基因及信号传... 乙烯(ET)信号在植物抵抗各种逆境反应中具有重要作用,但目前关于乙烯信号在调控水稻纹枯病抗性中的作用仍缺乏系统研究。本研究以感纹枯病水稻品种Lemont和抗纹枯病水稻品种YSBR1为材料,分析了纹枯病菌接种后乙烯合成关键基因及信号传导途径中标志基因的表达水平,结果显示,纹枯病菌侵染可显著诱导相关基因的表达、激活乙烯信号。进一步采用乙烯合成抑制剂和信号激活剂处理水稻并进行接种鉴定,结果显示,两种化学剂分别可抑制或激活乙烯信号;无论是Lemont还是YSBR1,激活其乙烯信号均可显著增强抗病性,而抑制该信号均显著降低抗病性。对3个乙烯受体突变体(ethylene response2,etr2;ethylene response3,etr3;ethylene response sensor2,ers2)进行温室接种鉴定,发现突变体的病斑长度均极显著高于野生型对照。以上研究表明乙烯信号在水稻对纹枯病菌的防卫反应或基础抗性中具有十分重要的作用,结果将为进一步解析"水稻—纹枯病菌"间的互作机制、制定合适的病害综合防控策略提供理论基础。 展开更多
关键词 水稻 纹枯病 抗性 乙烯信号
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麻疹疫苗株Schwarz反向遗传系统的建立 被引量:1
17
作者 陈宗香 张勇侠 +5 位作者 高雅丽 康庄 罗心梅 丛聪 李立 刘兰军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期637-642,共6页
目的建立麻疹疫苗株Schwarz(MVSW)反向遗传系统。方法将MVSW全长cDNA分为F1~F7共7个片段,在F1片段的5′端插入T7启动子及锤头核酸酶序列(hammerhead ribozyme,HamRz),F7片段的3′端插入T7终止子及丁型肝炎病毒核酶序列(hepatitis D viru... 目的建立麻疹疫苗株Schwarz(MVSW)反向遗传系统。方法将MVSW全长cDNA分为F1~F7共7个片段,在F1片段的5′端插入T7启动子及锤头核酸酶序列(hammerhead ribozyme,HamRz),F7片段的3′端插入T7终止子及丁型肝炎病毒核酶序列(hepatitis D virus ribozyme,HdvRz),分别将F1~F7片段克隆至pT7-MCS2载体上,7个重组质粒经酶切按顺序拼接MVSW全长cDNA,获得全长质粒pT7MVSW。同时构建表达MVSW核蛋白(N)、磷蛋白(P)、大蛋白(L)的3个辅助质粒。将全长质粒与3个辅助质粒及表达T7RNA聚合酶的质粒(pT7-T7RNAP及pCDIBP-T7RNAP)共同电转染Vero细胞,拯救获得病毒rMV_(SW)。收获的rMV_(SW)在Vero及CEC细胞中进行传代培养,观察细胞病变、检测病毒滴度并进行病毒测序,同时免疫小鼠检测抗r MVSW中和抗体。结果经酶切鉴定,全长质粒及辅助质粒均构建正确。拯救病毒rMV_(SW)在Vero及CEC细胞培养的病变典型特征类似;P2代病毒rMV_(SW)扩增片段与疫苗株MVSW理论序列一致;rMV_(SW)经Vero细胞连续培养P2~P10代病毒滴度稳定在5.5~6.5 lgCCID_(50)/mL之间;rMV_(SW)及疫苗株MVS191诱导的抗rMV_(SW)抗体滴度接近。结论成功建立了麻疹疫苗株MVSW的反向遗传系统,获得的具有良好遗传稳定性及免疫原性的拯救病毒rMV_(SW)有作为疫苗生产用毒种的潜力。 展开更多
关键词 麻疹病毒 疫苗株Schwarz 病毒拯救 反向遗传系统
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腮腺炎疫苗株Jeryl Lynn 1反向遗传系统的建立
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作者 高雅丽 张勇侠 +5 位作者 陈宗香 康庄 罗心梅 丛聪 李立 刘兰军 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第10期1059-1063,1069,共6页
目的建立腮腺炎疫苗株Jeryl Lynn 1(JL1)反向遗传系统,获得单一成分的拯救病毒JL1R。方法将JL1全长cDNA基因序列分为7个片段(F1~F7),在F7片段的3′端引入丁型肝炎病毒核酶序列(hepatitis D virus ribozyme,HdvRZ),分段合成后分别插入载... 目的建立腮腺炎疫苗株Jeryl Lynn 1(JL1)反向遗传系统,获得单一成分的拯救病毒JL1R。方法将JL1全长cDNA基因序列分为7个片段(F1~F7),在F7片段的3′端引入丁型肝炎病毒核酶序列(hepatitis D virus ribozyme,HdvRZ),分段合成后分别插入载体pT7-MCS3中,根据每段重叠区域的酶切位点拼接,构建全长表达质粒pT7-MCS3-MUVJL1(HdvRz);同时构建表达腮腺炎病毒(mumps virus,MuV)核蛋白(NP)、磷蛋白(P)、聚合酶蛋白(L)的3个辅助质粒;将全长表达质粒与3个辅助质粒及表达T7RNA聚合酶的质粒pCDIBP-T7RNAP共同电转染Vero细胞。对获得的病毒JL1R进行测序、病毒滴度及中和抗体测定。结果拯救病毒JL1R基因组SH及HN片段与疫苗株JL1对应片段的理论序列一致;JL1R经Vero细胞连续传代培养2~10代病毒滴度均在6 lgCCID50/mL以上;JL1R与疫苗株S79诱发抗MuV抗体滴度接近。结论成功构建了MuV疫苗株JL1的反向遗传操作系统,获得的单一成分拯救病毒JL1R可作为腮腺炎疫苗株的备选株,解决了S79疫苗生产中毒种及疫苗株的成分、纯度和批间一致性等问题,进一步提高了国内腮腺炎疫苗的免疫效果。 展开更多
关键词 腮腺炎病毒 疫苗株 JL1 反向遗传系统
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