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基于Fosmid文库筛选山羊瘤胃微生物源蛋白酶基因及其表达验证
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作者 杨凯尧 刘功炜 +3 位作者 李林芳 王智伟 崔雯元 杨雨鑫 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2024年第4期28-38,共11页
【目的】利用Fosmid文库功能筛选法,获得山羊瘤胃微生物源蛋白酶基因并进行原核表达。【方法】利用功能底物筛选法从山羊瘤胃微生物源Fosmid文库中筛选具有蛋白酶活性的克隆子,对其进行Illumina二代测序,对预测到的基因进行功能注释,根... 【目的】利用Fosmid文库功能筛选法,获得山羊瘤胃微生物源蛋白酶基因并进行原核表达。【方法】利用功能底物筛选法从山羊瘤胃微生物源Fosmid文库中筛选具有蛋白酶活性的克隆子,对其进行Illumina二代测序,对预测到的基因进行功能注释,根据基因丰度结果确定后续研究的功能基因。利用大肠杆菌BL21(DE3)对功能基因进行诱导表达,对表达产物进行酶活性测定。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术,将密码子优化后的功能基因分别敲入枯草芽孢杆菌C6基因组ctc位点并进行表达验证。【结果】从Fosmid文库1700个克隆子中筛选到1个具有蛋白酶活性的阳性克隆Pro4-C5。通过二代测序技术,鉴定出3个潜在的蛋白酶基因gene0833(内肽酶,EC编号:EC3.4.21.53)、gene0196(金属内肽酶,EC编号:EC3.4.24)和gene0585(羧肽酶,EC编号:EC3.4.17.14)以及1个L-天冬酰胺酶基因(gene0683,EC编号:EC3.5.1.1)。以pET-28a(+)为表达载体,通过大肠杆菌BL21(DE3)原核诱导表达发现,gene0585和gene0196未表达;gene0833表达的蛋白分子质量为87 ku,蛋白酶活性为10.45 U/mL;gene0683表达的蛋白分子质量为37 ku,L-天冬酰胺酶活性为88.52 U/mL,同时发现该蛋白也具有蛋白酶活性,酶活性为5.25 U/mL。将密码子优化后的gene0683和gene0833定点敲入枯草芽孢杆菌C6基因组中表达发现,gene0833未表达,gene0683表达的蛋白酶活性为109.72 U/mL,相比原始菌株(100.97 U/mL)显著提高了8.67%(P<0.01);L-天冬酰胺酶活性为31.63 U/mL,相比原始菌株(22.79 U/mL)显著提高了30.06%(P<0.01)。【结论】从山羊瘤胃微生物源Fosmid文库中筛选和鉴定出了2个具有蛋白酶活性的功能基因(gene0833和gene0683),均来源于微小杆菌属(Exiguobacterium),其中gene0683在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的表达产物具有较高的蛋白酶和L-天冬酰胺酶酶活性。 展开更多
关键词 FOSMID文库 蛋白酶 L-天冬酰胺酶 原核表达 基因筛选 菌株生产
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剩余采食量对绵羊屠宰性能以及肉品质的影响 被引量:1
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作者 唐红玉 李俊达 +6 位作者 何喜梦 杨博华 梁旭辉 崔雯元 周广琛 陈玉林 杨雨鑫 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期2394-2405,共12页
本研究旨在比较不同剩余采食量(RFI)绵羊的屠宰性能和肉品质,以探究RFI对绵羊胴体特征和肉品质的影响。选用202只萨福克羊(♂)×湖羊(♀)的杂交F1代青年绵羊作为试验候选群体,进行单栏饲喂试验75 d,其中,预试期15 d,正试期60 d。筛... 本研究旨在比较不同剩余采食量(RFI)绵羊的屠宰性能和肉品质,以探究RFI对绵羊胴体特征和肉品质的影响。选用202只萨福克羊(♂)×湖羊(♀)的杂交F1代青年绵羊作为试验候选群体,进行单栏饲喂试验75 d,其中,预试期15 d,正试期60 d。筛选出RFI最小(RFI=-0.39±0.04)、平均体重为31.35 kg的8只试验羊作为低剩余采食量组(L-RFI组),RFI值最高(RFI=0.30±0.03)、平均体重为31.15 kg的8只试验羊作为高剩余采食量组(H-RFI组)。测定2组屠宰性能,并且采集背最长肌、牡蛎肌、霖肉、米龙肌、腹腩肌,测定营养成分含量、肉色指标和持水能力等指标。结果表明:1)L-RFI组的GR值显著低于H-RFI组(P<0.05),2组之间宰前活重、胴体重、屠宰率、净肉率、眼肌面积没有显著差异(P>0.05)。2)L-RFI组的背最长肌脂肪含量,牡蛎肌脂肪、灰分含量以及霖肉蛋白质含量显著低于H-RFI组(P<0.05),2组之间米龙肌、腹腩肌水分、脂肪、蛋白质、灰分含量没有显著差异(P>0.05)。3)L-RFI组的背最长肌、牡蛎肌、霖肉、米龙肌、腹腩肌pH_(0)显著高于H-RFI组(P<0.05),2组之间背最长肌、牡蛎肌、霖肉、米龙肌、腹腩肌pH 24、肉色、滴水损失、蒸煮损失、系水力和失水率没有显著差异(P>0.05)。综上所述,在相同饲养管理条件下,L-RFI组绵羊沉积更少的胴体脂肪和肌肉脂肪,屠宰后肌肉的pH 0显著提高,但不同RFI对肌肉的肉色、滴水损失、蒸煮损失、系水力、失水率没有显著影响。 展开更多
关键词 剩余采食量 屠宰性能 肉品质 绵羊
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凝望宇宙、见微知著——司天工程介绍 被引量:1
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作者 范舟 沈志侠 +13 位作者 李正阳 陈志远 胡义 葛亮 邹虎 黄样 陈天禄 胡绍明 崔文元 吴宏 商朝晖 吴雪峰 毛永娜 刘继峰 《青海科技》 2023年第2期18-28,共11页
当今天文学已经从刻画静态宇宙发展到认识动态宇宙。对宇宙空间中任何时间变化加以研究的时域天文学,将揭示各类天体的变化,发现和探索新天体、新现象并开拓新的理论空间,已成为天文和天体物理界最活跃和最具突破性的前沿领域之一。高... 当今天文学已经从刻画静态宇宙发展到认识动态宇宙。对宇宙空间中任何时间变化加以研究的时域天文学,将揭示各类天体的变化,发现和探索新天体、新现象并开拓新的理论空间,已成为天文和天体物理界最活跃和最具突破性的前沿领域之一。高效搜寻和监测天体动态事件需要大视场、多波段和高频次的时域巡天,高性能观测设备与能充分发挥设备观测能力的优质天文台址缺一不可。司天工程是我国天文学家面向时域天文学所提出的“十五五”天文重大基础设施,一期计划在国内多个优选观测台址布置54台(18组)口径1米级的大视场望远镜,组成多波段同时监测网络,每30分钟完成1万平方度天区的高精度三色“凝视”巡天。司天的采样频率比全球其他巡天项目高近两个量级,将突破目前探测时标的限制,在新的空域和时域下发现大批新天体、新现象,在宇宙极端高能爆发源、引力波电磁对应体、系外行星和太阳系天体等理论和观测研究中形成新的突破,在“两暗一黑三起源”等重大科学问题研究以及地球文明灾难预警等国家空间安全问题方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 时域天文学 巡天观测 光学天文 多色测光
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用光影讲好中国税收故事的实践探索
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作者 崔文苑 《电影评介》 北大核心 2023年第22期94-96,共3页
近年来,税务部门顺应融媒体发展趋势,以大学生电影节“中国税收”特别单元等赛事为契机,不断探索短视频创作新路径,创作了丰富的税收短视频作品。本文结合当下税收短视频创作的现状和难点,探索如何进一步抓好税收短视频创作,用光影讲好... 近年来,税务部门顺应融媒体发展趋势,以大学生电影节“中国税收”特别单元等赛事为契机,不断探索短视频创作新路径,创作了丰富的税收短视频作品。本文结合当下税收短视频创作的现状和难点,探索如何进一步抓好税收短视频创作,用光影讲好中国税收故事,持续扩大税收文化的覆盖面和影响力。 展开更多
关键词 税收文化 视频创作 税务部门 短视频 实践探索 光影 现状和难点 覆盖面
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卓资—阳高一带区域变质岩中共生矿物氧同位素的研究
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作者 崔文元 王时麒 +1 位作者 强德美 郑淑蕙 《岩矿测试》 CAS 1982年第3期9-14,I0001,共7页
本文对卓资—阳高一带区域变质岩中某些共生矿物的氧同位素进行了研究,讨论了变质作用温度、与磁铁矿、石英平衡的水的δO值和一些矿物的δO值变化规律等问题。
关键词 区域变质岩 共生矿物 氧同位素 变质作用 变化规律 磁铁矿 卓资 石英
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税收与大学生电影节的奇妙“化学反应”——大影节“中国税收”特别单元背后的故事
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作者 崔文苑 张中艺 《电影评介》 北大核心 2022年第22期89-92,共4页
今年是“中国税收”特别单元第二次亮相大学生电影节,经过了上一届的沉淀,今年的“中国税收”特别单元有什么亮眼之处?如何用镜头语言讲好税收故事?大学生、影视与税收碰撞,能产生什么样的化学反应?本文将探访大影节“中国税收”特别单... 今年是“中国税收”特别单元第二次亮相大学生电影节,经过了上一届的沉淀,今年的“中国税收”特别单元有什么亮眼之处?如何用镜头语言讲好税收故事?大学生、影视与税收碰撞,能产生什么样的化学反应?本文将探访大影节“中国税收”特别单元背后的故事。 展开更多
关键词 镜头语言 化学反应 税收 大学生 故事 单元 背后
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面向中国式现代化的税制改革研究与探索 被引量:3
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作者 崔文苑 《税务研究》 北大核心 2023年第9期101-107,共7页
进入新时代以来,中国税制改革取得了系列伟大成就。面向实现中国式现代化的宏伟目标,必须深入贯彻落实党的二十大关于税制改革的决策部署,立足新发展阶段,贯彻新发展理念,围绕构建新发展格局、实现高质量发展,按照《中华人民共和国国民... 进入新时代以来,中国税制改革取得了系列伟大成就。面向实现中国式现代化的宏伟目标,必须深入贯彻落实党的二十大关于税制改革的决策部署,立足新发展阶段,贯彻新发展理念,围绕构建新发展格局、实现高质量发展,按照《中华人民共和国国民经济和社会发展第十四个五年规划和2035年远景目标纲要》要求,坚持税收法定原则、公平与效率相统一原则、宏观税负稳定原则,从优化税制结构、提高税制科学性,逐步降低名义税率、提高税制竞争力,健全地方税体系、保障地方财政收入三个方面入手,深入推进税制改革,进一步发挥税收在国家治理中的基础性、支柱性、保障性作用。 展开更多
关键词 税制改革 中国式现代化 税制结构 名义税率 地方税体系
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The fluid inclusions in jadeitite from Pharkant area, Myanmar 被引量:9
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作者 SHI Guanghai cui wenyuan +1 位作者 WANG Changqiu ZHANG Wenhuai 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2000年第20期1896-1901,1923,共7页
A lot of liquid-gas and liquid-gas-solid inclusions were found in Pharkant jadeitites, northwestern Myanmar and their characteristics, geological setting and porphyroclastic jadeites with inclusions in them were descr... A lot of liquid-gas and liquid-gas-solid inclusions were found in Pharkant jadeitites, northwestern Myanmar and their characteristics, geological setting and porphyroclastic jadeites with inclusions in them were described in detail. The results analyzed by Raman spectrometer showed that the component of liquid-gas phase and solid phase (daughter minerals) in fluid inclusions is H2O + CH4 and jadeite separately. The results indicated that Pharkant jadeitites were crystallized from H2O + CH4 bearing jadeitic melt which may originate from mantle. The P-T conditions in which the jadeitites were crystallized were speculated to be T】650℃, P】1.5 GPa. 展开更多
关键词 Pharkant Myanmar JADEITITE JADEITE fluid inclusion H2O + CH4 jadeitic MELT mantle.
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Investigating the abundance enrichment pattern of heavy elements in the only observed CEMP-r/s star J004441.04-732136.4 of the SMC
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作者 cui wenyuan ZHANG Bo ZHAO Gang 《Science China(Physics,Mechanics & Astronomy)》 SCIE EI CAS 2014年第6期1201-1205,共5页
The post-AGB star J004441 is the first and the only one CEMP-r/s star found in SMC. Herein, we investigate the observed abun- dance pattern of the heavy elements using our parametric model. A consistent fitting result... The post-AGB star J004441 is the first and the only one CEMP-r/s star found in SMC. Herein, we investigate the observed abun- dance pattern of the heavy elements using our parametric model. A consistent fitting results was obtained for the sample star. Based on the low r = 0.08, the s-process nucleosynthesis occurred in the interior is supposed to belong to the single neutron-exposure v9 ,1/2 mbarn-1 supports a higher efficiency of the s-process nucleosynthesis relative to event. The median value of τ0 =0.44(T9/0.348)mbarn-1 supports a higher efficiency of the s-process nucleosynthesis relative to J004441 than that of the solar system, however, the value is not sufficiently high to favor the formation of a lead star. Thus, J004441 does not belong to lead star group. The large Cs value of J004441 supports the intrinsic characteristic of the s-enrichment. The Cr value is similar with that found in halo CEMP-r/s stars, which indicates that the r-process contributions is critical during heavy element enrichment. This star has a metallicity of [Fe/H] = -1.34, which is larger than that of Galaxy halo CEMP-r/s stars. The reason may be because of the different history of metallicity enrichment between the SMC and the Galaxy halo. 展开更多
关键词 stellar nucleosynthesis ABUNDANCES chemically peculiar stars
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