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黄芩苷对热应激小鼠卵巢氧化损伤的保护作用 被引量:5
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作者 周颖璐 高琛 +5 位作者 姜忠玲 王新 丛霞 曹荣峰 李华涛 田文儒 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第1期21-24,I0002,共5页
研究旨在探讨黄芩苷对热应激小鼠卵巢抗氧化和细胞凋亡的作用机制。将小鼠分为常温对照组(生理盐水)(C组)、黄芩苷(50 mg/kg体重)组(C+B组)、41℃热应激组(H组)和热应激加黄芩苷(50 mg/kg体重)组(H+B组),连续注射7 d,第8天41℃热应激2 h... 研究旨在探讨黄芩苷对热应激小鼠卵巢抗氧化和细胞凋亡的作用机制。将小鼠分为常温对照组(生理盐水)(C组)、黄芩苷(50 mg/kg体重)组(C+B组)、41℃热应激组(H组)和热应激加黄芩苷(50 mg/kg体重)组(H+B组),连续注射7 d,第8天41℃热应激2 h,立即处死,取卵巢组织进行切片观察并检测丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活力。Western Blot检测Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达。免疫组化法检测Bcl-2、Bax、Caspase 3蛋白表达。结果显示,热应激引起小鼠卵巢组织氧化损伤。黄芩苷能显著降低组MDA和NO含量,显著或极显著增加SOD、CAT和GSH-Px活力。此外,热应激可显著增加Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1蛋白表达,黄芩苷干预后Nrf2等蛋白的表达降低。黄芩苷干预后Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2、Caspase 3蛋白表达显著升高。上述表明,黄芩苷能缓解热应激下小鼠卵巢组织的氧化损伤及细胞凋亡,其机制可能与提高抗氧化能力及Nrf2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 黄芩苷 热应激 小鼠卵巢 氧化损伤 细胞凋亡
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犬血型系统研究进展 被引量:3
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作者 王雪 姜忠玲 +3 位作者 丛霞 曹荣峰 田文儒 李华涛 《动物医学进展》 北大核心 2018年第1期85-89,共5页
输血疗法在兽医临床的使用范围和数量不断扩大,已经发展成为一种抢救重症犬和治疗病犬的重要手段。输血疗法可以迅速补充患病犬的循环血量和体液量,维持血压,起到补血、止血、解毒、提高机体耐受力的作用。犬输血疗法在提供生命保障的同... 输血疗法在兽医临床的使用范围和数量不断扩大,已经发展成为一种抢救重症犬和治疗病犬的重要手段。输血疗法可以迅速补充患病犬的循环血量和体液量,维持血压,起到补血、止血、解毒、提高机体耐受力的作用。犬输血疗法在提供生命保障的同时,也会带来危险与伤害,异体输血时,血型不符可能产生输血反应,严重时可以致死患犬。论文主要对犬血型的发现历程和命名、不同血型之间的差异和生化特性以及各种犬血型输血时可能出现的反应进行综述,探讨临床上如何对犬进行安全、有效输血以及当前存在问题,最后对DEA1.1血型频率研究现状以及犬血型检测方法进行介绍。 展开更多
关键词 血型系统 输血疗法 DEA1.1血型
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应用RNA-Seq技术筛选低钙环境下牛肾细胞差异表达基因
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作者 朱雨凝 姜忠玲 +4 位作者 丛霞 曹荣峰 李华涛 田文儒 丰艳妮 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期17-23,共7页
本研究旨在寻找更为灵敏、准确的围产期奶牛低钙血症生物标志物,探索低钙环境下牛肾细胞的差异表达基因。先将低钙环境中培养至第3天的牛肾细胞(MDBK)进行RNA-seq测序,并对测序结果进行差异表达基因和GO、KEGG富集分析。随后挑选14个差... 本研究旨在寻找更为灵敏、准确的围产期奶牛低钙血症生物标志物,探索低钙环境下牛肾细胞的差异表达基因。先将低钙环境中培养至第3天的牛肾细胞(MDBK)进行RNA-seq测序,并对测序结果进行差异表达基因和GO、KEGG富集分析。随后挑选14个差异基因进行荧光定量PCR(RT-qPCR)验证。结果显示,对照组和试验组分别得到79 207 867条和96 688 237条Reads,共筛选出差异表达基因114个,其中上调的基因22个,下调的基因92个。并且,富集在PI3K信号通路中的基因(PIK3CA、G-CSF、TSC2、CDC37、ERBB3、MDM2)、参与调控甲状腺激素信号通路的基因(PLCD3、PIK3CA、TSC2、MDM2),以及参与膜运输的基因(MDM2、AP180、MICAL、PRAM1、PIK3CA、WIPF、PLCD、UNC13D、TBC1D10等)表达水平在低钙条件下差异明显。RT-qPCR验证测序筛选的14个与钙调节相关的差异表达基因显示,其结果与RNA-seq结果大体一致。因此,低钙环境对牛肾细胞的增殖具有抑制作用,并影响其基因表达,差异表达的基因主要富集在膜运输、PI3K信号通路以及甲状腺信号通路中。 展开更多
关键词 RNA-SEQ 牛肾细胞 基因表达 低钙环境
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基于RNA-seq技术筛选低钙培养奶牛乳腺上皮细胞差异表达基因
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作者 王娟 姜忠玲 +4 位作者 丛霞 曹荣峰 田文儒 丰艳妮 李华涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期27-31,I0006,I0007,共7页
本研究拟利用转录组测序(RNA-seq)技术筛选低钙培养奶牛乳腺上皮细胞(CMEC)差异表达基因,为临床寻找更为准确、灵敏的奶牛低钙血症生物标志物提供方法与思路。利用RNA-seq技术对低钙组CMEC转录组测序,筛选8个差异表达基因进行定量反转... 本研究拟利用转录组测序(RNA-seq)技术筛选低钙培养奶牛乳腺上皮细胞(CMEC)差异表达基因,为临床寻找更为准确、灵敏的奶牛低钙血症生物标志物提供方法与思路。利用RNA-seq技术对低钙组CMEC转录组测序,筛选8个差异表达基因进行定量反转录聚合酶连锁反应(qRT-PCR)验证测序结果准确性,对测序数据进行基因功能注释及通路富集分析。结果显示,2组分别得到63910842条和66979098条滤过读段,共计筛选116个差异表达显著性基因,其中上调基因52个,下调基因64个,并找到调节甲状腺素信号通路的KAT2A基因和参与甲状腺素合成的DUOXA2基因。利用qRT-PCR对测序结果中筛选的8个差异表达基因进行验证,其结果与RNA-seq结果大体一致。结果表明低钙环境影响CMEC基因表达,KAT2A和DUOXA2基因可能参与细胞钙调节。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 低钙 转录组测序 差异表达基因
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犬DEA1.1血型抗原保存的研究
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作者 朱雨凝 丛霞 +4 位作者 姜忠玲 丰艳妮 曹荣峰 田文儒 李华涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期70-74,I0003,共6页
本试验采用甘油化冻存红细胞及醛化固定红细胞的方法探索适合犬DEA1.1血型抗原保存方法,用3%、6%、10%、20%、30%和40%(w/v)浓度的甘油溶液保存犬DEA1.1血型红细胞,分快速冻存、程序降温两组处理,并对甘油化红细胞进行溶血情况、回收率... 本试验采用甘油化冻存红细胞及醛化固定红细胞的方法探索适合犬DEA1.1血型抗原保存方法,用3%、6%、10%、20%、30%和40%(w/v)浓度的甘油溶液保存犬DEA1.1血型红细胞,分快速冻存、程序降温两组处理,并对甘油化红细胞进行溶血情况、回收率、物理性状、保存期及抗原效价的测定;用0.25%、0.5%戊二醛,1.5%、3%甲醛和0.5%、1%多聚甲醛分别固定犬DEA1.1血型红细胞,检测犬红细胞醛化稳定性,以及醛化红细胞与新鲜红细胞DEA1.1血型抗原效价符合率。结果显示,30%浓度甘油程序降温组去甘油化后红细胞溶血率、细胞破损率最低,回收率最高且物理性状新鲜红细胞相似,抗原性与新鲜红细胞符合率可达93%,保存期可达12个月;用戊二醛醛化固定120 d的红细胞稳定性及犬DEA1.1抗原的敏感性不变,抗原滴度与新鲜红细胞的符合率可达到100%。表明30%浓度甘油的程序降温冻存与0.25%~0.5%戊二醛醛化固定都能较好保存犬DEA1.1抗原性。 展开更多
关键词 犬DEA1.1血型 甘油冻存 红细胞醛化
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犬DEA1.1血型抗体间接ELISA检测方法的建立
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作者 隋君霞 隋京京 +4 位作者 李晓 姜忠玲 曹荣峰 丰艳妮 李华涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第6期72-76,共5页
为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法。试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优... 为探求减少宠物临床中犬因血型错配发生的输血反应,本试验以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原建立能检测DEA1.1抗体的间接ELISA方法。试验以犬DEA1.1血型为主要研究对象,提取犬红细胞膜,以DEA1.1阳性红细胞膜作为抗原,用醛化技术包被抗原,优化间接ELISA反应条件。结果显示,最佳固定剂为浓度0.0625%和0.125%的戊二醛,最佳抗原包被量为4~8μg/孔,最佳封闭液为5%的脱脂奶粉,最佳温度为37℃,最适反应时间为90 min。与间接抗球蛋白试验相比,优化后的间接ELISA法有更高的灵敏性,本试验建立的间接ELISA方法可以对犬DEA1.1血型抗体进行高通量检测。 展开更多
关键词 犬DEA1.1 红细胞膜 间接ELISA 间接抗球蛋白试验
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Expression of HSP72 in Mouse Preimplantation Embryos with Heat Shock
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作者 Suo Jia-jia cao rong-feng +4 位作者 Cui Xiao-ni Jiang Zhong-ling Cong Xia Cui Kai Tian Wen-ru 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2014年第2期38-45,共8页
The objective of the paper was to detect HSP72 expression and HSP72 gene sequence in heat shocked mouse preimplantation embryos and the effects of different thermo conditions on hatching rates of embryos. The mouse bl... The objective of the paper was to detect HSP72 expression and HSP72 gene sequence in heat shocked mouse preimplantation embryos and the effects of different thermo conditions on hatching rates of embryos. The mouse blastocysts cultured in vitro were heat treated at 40℃ and 38℃ for 1 h, 2 h and 3 h and then recovered at 370C for 3 h, 2 h and 1 h, respectively, to detect their HSP72 gene expression by using RT-PCR after the total R.NA extraction. The hatching rate of the blastocysts for different treated groups was recorded and the expression of liSP72 in the blastocysts was determined by Western blot. The results showed that all the groups of blastocysts, including the control, had the expression of HSP72 gene. The expression of HSP72 protein had the highest level in the embryos stressed at 38℃ for 2 h, and it was significantly higher than that in the control group. The expression of HSP72 in the groups of blastocysts treated at 40℃ was not significantly different from that in the control group. The embryos with induction of mild heat shock at 38℃ for 2 h, then subjected to heat shock at 40℃ for 2 h, had a significant higher (P〈0.05) hatching rate of 54.74% compared to 47.85% in the embryos treated directly at 40℃ for 2 h. The above results indicated that the mouse blastocysts were sensitive to heat shock and a mild heat shock induced HSP72 gene expression. Induction of HSP72 expression with mild heat shock helped embryos to tolerate more severe heat shocks. 展开更多
关键词 MOUSE heat shock protein 72 heat shock BLASTOCYST
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犬DEA1.1血型抗体间接Dot-ELISA检测方法建立
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作者 王娟 姜忠玲 +4 位作者 丰艳妮 丛霞 曹荣峰 田文儒 李华涛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期85-89,I0005,共6页
为了建立一个更为简单和敏感的方法,以作为不使用试剂红细胞检测犬DEA1.1血型抗体的替代方法,从犬DEA1.1阳性红细胞中分离出细胞膜。将携带DEA1.1阳性抗原的膜置于硝酸纤维素膜上,加入初级抗体和辣根过氧化物酶标记的二级抗体,采用TMB... 为了建立一个更为简单和敏感的方法,以作为不使用试剂红细胞检测犬DEA1.1血型抗体的替代方法,从犬DEA1.1阳性红细胞中分离出细胞膜。将携带DEA1.1阳性抗原的膜置于硝酸纤维素膜上,加入初级抗体和辣根过氧化物酶标记的二级抗体,采用TMB显色试剂盒检测。对照试验采用凝聚胺抗球蛋白试验检测DEA1.1抗体。用DEA1.1阳性和阴性血型抗原检测Dot-ELISA的灵敏度、稳定性和特异性。用158只犬的血清样本检测Dot-ELISA的准确性。结果显示,Dot-ELISA方法比凝聚胺抗球蛋白试验灵敏8倍以上。即使细胞膜反复冻融20次,其抗原稳定性也不受影响,并且可在-20℃时长期稳定保存。在对158只犬血清检测的过程中,该方法展现了与凝聚胺抗球蛋白试验较高的相关性。表明本研究成功建立了犬DEA1.1血型抗体Dot-ELISA检测方法,并且方法稳定、灵敏、无需试剂红细胞,可以作为输血前传统抗体检测的一种有效替代方法。 展开更多
关键词 犬DEA1.1 红细胞膜 DOT-ELISA 凝聚胺抗球蛋白试验
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