慢病毒介导的TPX2基因沉默对人宫颈癌HeLa细胞系增殖、迁移和细胞周期的影响及机制

目的:研究慢病毒介导的TPX2基因沉默对人宫颈癌He La细胞系增殖、迁移和细胞周期的影响及其机制。方法:构建4种靶向TPX2基因的慢病毒表达载体(LV-TPX2-sh RNA-1/2/3/4),同时构建阴性对照质粒,将5种质粒分别转染到293T细胞中制备慢病毒。慢病毒感染宫颈癌He La细胞后,实时荧光定量PCR和Western blot分别检测TPX2 m RNA和蛋白的沉默效果。选择沉默效果最佳的重组慢病毒进行后续功能实验。分别采用CCK-8法、Transwell迁移实验及流式细胞术检测各组细胞的增殖、迁移及细胞周期分布情况。Western blot检测TPX2-sh RNA转染前后Ki-67、cyclin B2、Aurora-A及P53的表达。结果:与对照组比较,构建的靶向TPX2基因的RNA干扰慢病毒载体均可持续稳定的抑制He La细胞TPX2基因的表达,尤其以LV-TPX2-sh RNA-1最为明显(P<0.01),故选择LV-TPX2-sh RNA-1进行后续实验。与对照组比较,沉默TPX2基因的表达能降低He La细胞增殖及迁移能力(P<0.05),使G2及S期细胞比例明显增加(P<0.05),且上调P53蛋白的表达水平,下调Ki-67、cyclin B2及Aurora-A蛋白的表达水平(P均<0.05)。结论:沉默TPX2基因蛋白表达能抑制宫颈癌细胞的增殖及迁移能力,可能与其改变细胞周期分布及下调Ki-67、cyclin B2、AuroraA蛋白表达水平,上调P53蛋白表达水平有关。

基于NSGA-Ⅱ的冷链物流配送路径多目标优化

为优化冷链物流配送路径,提高配送效率,实现低碳绿色出行,综合考虑顾客对农产品新鲜度的要求、冷链企业对物流成本的控制以及社会环境对碳排放的约束等方面,以生鲜农产品新鲜度和准时到达率量化客户满意度,以固定成本、运输成本、制冷成本和惩罚成本构成物流成本,以运输燃料消耗及制冷产生的CO_(2)计算碳排放量,提出带混合时间窗的生鲜农产品冷链物流配送路径多目标优化模型。基于带精英策略的非支配排序遗传算法(NSGA-Ⅱ)求解模型,得到Pareto解集,并结合层次分析法,选出最优满意解。以华北某地区情况为例,将NSGA-Ⅱ与NSGA对比,发现NSGA-Ⅱ的收敛速度较快且结果质量较高,各目标值较为理想,表明模型和算法的有效性与实用价值。

锻件内部孔洞缺陷行为的数值模拟及闭合解析

根据压力容器整体顶盖的终成形工艺,设置不同位置、不同尺寸的孔洞缺陷,采用SuperForm模拟软件分析拉胀成形过程中孔洞的变形行为,确定了顶盖终成形前毛坯内部孔洞体积、尺寸变化最大的位置及终成形前毛坯内部孔洞所允许的最大体积和尺寸。同时对原始205 t钢锭中的孔洞闭合进行了解析计算,制定了合理的预锻工艺。

IMPINGEMENT HEAT TRANSFER FROM RIB ROUGHENED SURFACE WITHIN ARRAYS OF CIRCULAR JET Part I:The Effect of the Initial Crossflow

Impingement heat transfer from the rib roughened surface within 2 dimensional arrays of circular jet has been experimentally investigated.This investigation is intended here to include the flow and the heat transfer characteristics of the jet impinging on the rib roughened surface with initial crossflow for simulating the impingement cooling midchord region of the gas turbine aerofoils in case where an initial crossflow is presented.The study covered the ranges of crossflow G_(c)/G_(j)=0~0.55 under the conditions of Re_(j)=8000~11000 and Z/d=1.5~3.0 for smooth and rib roughened surfaces.The test results show that the impingement heat transfer from the rib roughened surface is considerably affected by the initial crossflow rate.The existence of the initial crossflow will improve the efficiency of the impingement heat transfer from the rib roughened surface within arrays of circular jet compared with that from the smooth surface.

A356铝合金的高温流变行为及本构模型研究

A356铝合金的高温流变特性和本构模型对其应力状态起着重要的作用,为铝合金流变成形过程的有限元模拟奠定了重要的基础。从A356铝合金轮毂铸造坯料上制取拉伸试样,利用Instron 3369型实验机进行等温拉伸实验,实验温度为300~375℃,应变速率为0.001~0.1 s^(-1)。由此得到的真应力-真应变曲线表明,温度和应变速率等热力学条件对材料的流变应力的影响显著。基于真应力-真应变曲线,建立了基于位错密度理论的物理模型来表征不同热力学条件下的流变应力。将模型预测值与实验值进行对比,并进行误差分析。结果表明,所建立的物理模型能够较准确地预测A356铝合金的高温拉伸流变行为。