应用改进的多克隆抗体Western blot技术研究柑桔速衰病毒蛋白(英文)

本文利用多克隆抗体发展了一种无背景的 Western blot技术并用于研究柑桔速衰病毒( CTV)的蛋白。结果表明 ,利用 CTV兔多克隆抗体 12 12和 10 52发展的 Western blot技术可以检测到感染 CTV的墨西哥酸橙或 Citrusexcelsa植株内 CTV的 4种蛋白 P1、P2、P3和 P4。在健株或病株内杂交反应均无非特异性背景。从不同寄主上分离到的 CTV不同分离物的蛋白条带是不同的。利用12 12和 10 52抗体均可以检测到感染 6个 CTV分离物的墨西哥酸橙幼苗内的 P1、P2和 P3。利用10 52抗体能检测到感染严重型分离物 T36、T3和 Mm2的墨西哥酸橙幼苗内微弱的 P4 ,但感染轻型分离物 T30、T2 6和 T4的幼苗内则检测不到。利用 12 12抗体检测不到 P4。在 C.excelsa内 ,12 12和10 52抗体均能检测到感染所有分离物的病株内的 P1。在感染 T3、T2 6、T4或 Mm2的病株内能检测到 P2 ,但在感染 T30和 36分离物的病株内则检测不到。在感染 T36、T3、T2 6、T4和 Mm2的病株内可检测到 P3,但在感染 T30的病株内则检测不到。在大多数植物内 ,P1、P2、P3和 P4的分子量分别约为 2 5k Da,2 4 k Da,2 1k Da和 18k Da。在感染 T36分离物的 C. excelsa植株体内 ,P1和 P3的分子量分别约为 2 7k Da和 2 2 k Da,比感染其它分离物的 C.excelsa和墨西哥酸?