白藜芦醇通过Ca^(2+)/Caspase-3途径减轻内质网应激诱导的神经细胞凋亡

目的:研究白藜芦醇对内质网应激诱导神经细胞凋亡的影响及机制。方法:采用内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)处理PC12细胞,构建内质网应激模型。免疫印迹法检测GRP78蛋白表达,激光共聚焦和Fluo-3/AM检测胞浆钙离子浓度,比色法测定Caspase-3活性,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:白藜芦醇减轻内质网应激诱导剂TG引起的GRP78高表达,阻止内质网应激诱导的钙超载。白藜芦醇和钙离子螯合剂BAPTA均抑制内质网应激诱导的Caspase-3活化和神经细胞凋亡。结论:白藜芦醇可能通过Ca^(2+)/Caspase-3途径抑制内质网应激诱导的神经细胞凋亡。

转录因子CREB调节小鼠CD4+淋巴细胞中miR-30a的表达

目的研究CD4^(+)淋巴细胞系中转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)对miR-30a的表达调节作用。方法利用UCSC和Ensembl网站确定miR-30a基因启动子区;EMBOSS Cpgplot网站分析启动子区DNA序列的甲基化情况;ECR Browser网站分析启动子区转录因子结合区域及其保守性;JASPAR数据库筛选启动子区结合的转录因子;染色质免疫沉淀检测小鼠CD4^(+)淋巴细胞中miR-30a基因启动子区CREB的结合量;依据培养基中是否添加CREB抑制剂KG-501将小鼠CD4^(+)淋巴细胞分为对照组、溶剂对照组和KG-501处理组,RT-qPCR检测KG-501对细胞中miR-30a表达的影响。结果miR-30a基因启动子区未发现可被甲基化的CpG岛;启动子区含有高保守性的转录因子结合序列,其中包含多个CREB的结合位点;转录因子CREB直接结合于miR-30a基因启动子区的上游区段;添加KG-501可明显下调细胞中miR-30a的表达(P<0.05)。结论转录因子CREB直接结合于小鼠CD4^(+)淋巴细胞中miR-30a基因启动子区的特定位点,调节miR-30a的表达。

加减温经汤对妇科寒凝血瘀证大鼠Rho/ROCK信号通路相关因子表达的影响

目的观察加减温经汤对妇科寒凝血瘀证大鼠Rho/ROCK信号通路相关因子表达的影响,探讨其调节微血管的作用机制。方法实验大鼠随机分为空白组、模型组、BQ123组和温经汤组,冰水浴法建立妇科寒凝血瘀证大鼠模型,检测大鼠全血血液流变学相关指标,ELISA检测血清和卵巢组织内皮素(ET)-1和一氧化氮(NO)含量,RT-qPCR和Western blot分别检测卵巢组织Rho/ROCK信号通路关键因子RhoA、ROCK1、MLCK mRNA和蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠全血血液流变学相关指标均明显升高(P<0.01,P<0.05),血清和卵巢组织ET-1含量明显升高,NO含量明显降低(P<0.01),卵巢组织RhoA、ROCK1、MLCK mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,BQ123组和温经汤组大鼠血清和卵巢组织ET-1含量明显降低,NO含量明显升高(P<0.01,P<0.05),卵巢组织RhoA、ROCK1、MLCK mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论加减温经汤通过抑制Rho/ROCK信号通路相关因子的过度激活,改善卵巢子宫组织微血管调节的失衡,从而治疗妇科寒凝血瘀证。

金匮温经汤对妇科虚寒证模型大鼠子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达的影响

目的:观察金匮温经汤对妇科虚寒证模型大鼠子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达的影响。方法:120只3月龄SD雌性清洁级大鼠,随机数字表法分为4组,对照组、模型组、温经汤高、低剂量组(各30只)。模型组、温经汤高、低剂量组采用延长冰箱冷冻加冰水浸泡时间的方法造模,同时温经汤高、低剂量组给予金匮温经汤灌胃,对照组、模型组给予同体积蒸馏水灌胃,连续30 d。处死大鼠,取子宫、卵巢,采用免疫组织化学染色和Western blot检测GRP78、Nrf-2的表达。结果:模型组子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达低于对照组(P<0.05),高、低剂量组子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达高于模型组(P<0.05),其中高剂量组升高更为显著,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:金匮温经汤通过上调子宫、卵巢GRP78、Nrf-2表达,拮抗内质网应激,缓解氧化损伤,恢复改善靶器官功能,治疗妇科虚寒证。

金南油田地层原油相态及注CO2膨胀实验研究

金南油田是复杂小断块油藏,低孔低渗,非均质性强,层间差异大。开发现状表明其天然能量不足、储层动用程度低、开发效果差。为解决这一问题,通过高压物性分析和注CO2膨胀实验得到金南储层油藏一系列高压物性参数,评价注CO2技术的可行性。通过实验得出结论,金南油田原油属于低气油比中质中黏度原油,是典型的黑油油藏;CO2对于金南油藏有很强的膨胀能力,使原油体积系数从1.0712逐步上升至1.6636;CO2对原油有很好的减黏效果,降黏幅度达到81.7%。以上成果认识为拟定开发方案打下了基础。

生物化学课程思政微课案例研究--以“酶的竞争性抑制”为例

以“酶的竞争性抑制”微课设计为例,通过挖掘其蕴含的思政元素,将思想政治教育与医学专业基础课程教学相结合,潜移默化地提高学生思想道德素养。

归因方式在挫折情境与青少年内隐、外显攻击性之间的调节作用

目的探讨一般攻击模型框架下挫折情境、归因方式对青少年内隐、外显攻击性的影响机制。方法使用多维-多向归因量表筛选出具有内、外归因倾向的青少年各30名作为研究对象。采用2(有挫折、无挫折)×2(内归因、外归因)混合试验设计,并使用挫折情境任务、Buss-Perry攻击性量表、单类内隐联想测验进行研究。使用E-prime 1.0编写SC-IAT的试验程序,使用SPSS 17.0进行描述性统计、双因素方差分析、简单效应分析以及事后检验。结果挫折情境对个体的外显、内隐攻击性的影响均差异有统计学意义(F(1,58)=6.78,P<0.05,偏η^(2)=0.11和F(1,58)=17.59,P<0.01,偏η^(2)=0.23)。挫折的情境中被试的外显攻击性[(83.43±15.05)分]和内隐攻击性[(-0.06±0.35)分]高于无挫折的情境中的外显攻击性[(80.54±12.40)分]和内隐攻击性[(-0.33±0.49)分]。挫折情境对不同归因方式被试的外显、内隐攻击性的影响均差异有统计学意义(F(1,58)=4.90,P<0.05,偏η^(2)=0.08;F(1,58)=8.68,P<0.01,偏η^(2)=0.13)。挫折情境对内归因被试(D<0)的外显攻击性有较大影响[有挫折:(82.90±12.98)分;无挫折:(77.56±10.16)分],而对外归因被试(D>0)的内隐攻击性有较大影响[有挫折:(0.07±0.35)分;无挫折:(-0.40±0.45)分]。结论挫折情境对青少年的外显、内隐性攻击的影响受到归因方式的调节,一般攻击模型适用于解释外显攻击性和内隐攻击性。

寒凝血瘀证动物模型研究现状

寒凝血瘀证是临床常见中医证型,寒凝血瘀证动物模型是探索中医寒凝血瘀证候实质的基础,是后续开展中医临床研究的前提。该文对近年寒凝血瘀证动物模型的建立方法、理论支撑及评价方法进行归纳总结,并对不同模型的优缺点进行分析。目前,寒凝血瘀证动物模型制备思路主要有病因造模、病因病理复合造模和病证结合造模3种。病因模型的制备主要采用冷暴露方法,根据寒冷的施加方法不同分为全身冷冻法、冰水浴法和局部冻伤法等;病因病理复合模型以寒冷刺激结合肾上腺素注射为主;常见的寒凝血瘀证病证结合模型有寒凝血瘀证冠状动脉粥样硬化性心脏病模型、寒凝血瘀证原发性痛经模型、寒凝血瘀证子宫内膜异位症模型、寒凝血瘀证动脉硬化闭塞症模型等。三大模型各具优势又各有不足,其中病证结合模型与临床实际的吻合度更高,可靠性和实用性更强,但此类模型的疾病种类较集中且病证结合方式存在争议。寒凝血瘀证模型的评价指标主要包括寒凝血瘀证表征评价,以及与血流状态有关的理化指标,如血液流变学、凝血功能、微循环等指标,也有学者从血管舒缩功能、内分泌、能量代谢等方面进行探索,现阶段的模型评价方法客观性和特异性均有待完善。寒凝血瘀证动物模型的研究应以临床实际为基础,以临床需求为导向,只有建立与临床病证特点高度吻合的动物模型才能更好地揭示寒凝血瘀证本质,推动中医药的现代化发展。

Effects of modified Wenjing decoction on microcirculation in reproductive organs in rats with symptom patterns of cold coagulation and blood stasis

OBJECTIVE: To investigate the relationship between symptom patterns of cold coagulation and blood stasis(CCBS) and microcirculation disturbance. In addition, we determined the efficacy of modified Wenjing decoction(WJD) for the treatment of CCBS.METHODS: CCBS was induced in rats with an icewater bath treatment. The ovarian function, microvascular and circulatory status of reproductive organs, and function of local microvascular endothelial cells(VECs) and vascular smooth muscle cells(VSMCs) were evaluated.RESULTS: Ovarian dysfunction was observed in the rats with CCBS. It was characterized by the presence of an estrous cycle disorder and a decrease in reproductive hormone levels. Microvascular circulation disorders were associated with an imbalance in vasoconstriction, relaxation substances, nitric oxide, abnormal blood flow in whole blood, and decreased blood flow in the auricle and uterus. VECs were damaged, and VSMCs contracted and proliferated in ovarian and uterine tissues.CONCLUSION: Our findings suggest that the dysfunctional reproductive organs observed in gynecological CCBS may be closely related to the microcirculation disturbance of local tissues, microvascular contraction, and vascular remodeling. Modified WJD can be used to treat CCBS by improving microcirculation in reproductive organs.