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三维生物打印抗菌型水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面的作用 被引量:2
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作者 金荣华 张珍珍 +6 位作者 徐鹏钦 夏斯展 翁婷婷 朱志康 王新刚 有传刚 韩春茂 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期165-174,共10页
目的探讨三维生物打印负载纳米银的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面的作用。方法采用实验研究方法。采用扫描电子显微镜观察不同质量浓度的纳米银溶液中的纳米银颗粒的形态、粒径、分布和含不同终质量分数GelMA... 目的探讨三维生物打印负载纳米银的甲基丙烯酸酐化明胶(GelMA)水凝胶对大鼠全层皮肤缺损创面的作用。方法采用实验研究方法。采用扫描电子显微镜观察不同质量浓度的纳米银溶液中的纳米银颗粒的形态、粒径、分布和含不同终质量分数GelMA的含银GelMA水凝胶的孔隙结构,并计算孔径大小。处理1、3、7、14 d,采用质谱仪检测含终质量分数15%GelMA和终质量浓度10 mg/L纳米银的水凝胶的纳米银释放浓度。培养24 h,检测含终质量浓度0(无纳米银)、25、50、100 mg/L纳米银的GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌圈直径。取浙江大学医学院附属第二医院泌尿外科2020年7月收治的1名健康5岁男童包皮环切术后废弃包皮和该院整形外科2020年7月收治的1名健康23岁女性抽脂手术后废弃脂肪,采用酶解法分别提取成纤维细胞(Fb)和脂肪干细胞(ASC)。将Fb分为仅有培养基的空白对照组和另加入含相应终质量浓度纳米银溶液的2 mg/L纳米银组、5 mg/L纳米银组、10 mg/L纳米银组、25 mg/L纳米银组、50 mg/L纳米银组,培养48 h,采用细胞计数试剂盒8检测Fb增殖活性。将Fb分为进行相应处理的0 mg/L含银GelMA水凝胶组、10 mg/L含银GelMA水凝胶组、50 mg/L含银GelMA水凝胶组、100 mg/L含银GelMA水凝胶组,于培养1、3、7 d,同前检测Fb增殖活性。将ASC与GelMA水凝胶混合种植,分为三维生物打印组和非打印组,于培养1、3、7 d,同前检测ASC增殖活性并行活/死细胞荧光染色观察ASC生长情况。以上实验中样本数均为3。于18只雄性4~6周龄SD大鼠背部各制作4个全层皮肤缺损创面,分别设为单纯水凝胶组、水凝胶/纳米银组、水凝胶支架/纳米银组、水凝胶支架/纳米银/ASC组并移植相应支架。分别于伤后4、7、14、21 d,行大体观察并计算创面愈合率(样本数为6);于伤后7、14 d,对创面行苏木精-伊红染色观察组织病理学改变(样本数为6);于伤后21 d,对创面行Masson染色观察胶原排列情况(样本数为3)。对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、Bonferroni校正、独立样本t检验。结果不同质量浓度的纳米银溶液中的纳米银颗粒均呈圆形,散在分布,粒径均匀。含不同终质量分数GelMA的含银GelMA水凝胶都呈现大小不一且相互连通的孔隙结构。含终质量分数10%GelMA的含银GelMA水凝胶的孔径明显大于含终质量分数15%和20%GelMA的含银GelMA水凝胶(P值均<0.05)。处理1、3、7 d,含银GelMA水凝胶的体外纳米银释放浓度的变化趋势相对平缓;处理14 d,其体外纳米银释放浓度迅速增加。培养24 h,含0、25、50、100 mg/L纳米银的GelMA水凝胶对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌的抑菌圈直径分别为0、0、0.7、2.1 mm和0、1.4、3.2、3.3 mm。培养48 h,2 mg/L纳米银组、5 mg/L纳米银组Fb的增殖活性均明显高于空白对照组(P<0.05),10 mg/L纳米银组、25 mg/L纳米银组、50 mg/L纳米银组Fb的增殖活性均明显低于空白对照组(P<0.05)。与0 mg/L含银GelMA水凝胶组相比,培养1 d,50 mg/L含银GelMA水凝胶组、100 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性均明显降低(P<0.05);培养3 d,50 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性明显升高(P<0.05),100 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性明显降低(P<0.05);培养7 d,100 mg/L含银GelMA水凝胶组Fb的增殖活性明显降低(P<0.05)。培养1 d,三维生物打印组的ASC增殖活性与非打印组比较,差异无统计学意义(P>0.05);培养3、7 d,三维生物打印组的ASC增殖活性均明显高于非打印组(t值分别为21.50、12.95,P<0.05)。培养1 d,三维生物打印组死亡ASC数略多于非打印组。培养3、5 d,三维生物打印组和非打印组中的绝大多数ASC为活细胞。伤后4 d,单纯水凝胶组和水凝胶/纳米银组大鼠创面渗液较多,水凝胶支架/纳米银组和水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面干燥且未见明显感染迹象。伤后7 d,单纯水凝胶组和水凝胶/纳米银组大鼠创面仍有少量渗液,水凝胶支架/纳米银组和水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面干燥结痂。伤后14 d,4组大鼠创面上的水凝胶均脱落。伤后21 d,仅单纯水凝胶组仍有少量创面未愈合。伤后4、7 d,水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面愈合率均明显高于其他3组(P<0.05)。伤后14 d,水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面愈合率明显高于水凝胶/纳米银组和单纯水凝胶组(P值均<0.05)。伤后21 d,单纯水凝胶组大鼠创面愈合率明显低于水凝胶支架/纳米银/ASC组(P<0.05)。伤后7 d,4组大鼠创面上的水凝胶均保持在位;伤后14 d,单纯水凝胶组大鼠的水凝胶已与创面脱离,而其余3组仍有部分水凝胶存在于创面新生组织中。伤后21 d,单纯水凝胶组大鼠创面胶原排列无序,而水凝胶/纳米银组、水凝胶支架/纳米银组、水凝胶支架/纳米银/ASC组大鼠创面胶原排列相对有序。结论含银GelMA水凝胶具有良好的生物相容性及抗菌性能,其三维生物打印的双层结构能更好地与大鼠全层皮肤缺损创面新生组织相融合并促进创面愈合。 展开更多
关键词 生物打印 组织工程 水凝胶类 纳米银 创面修复
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Nanosilver alleviates foreign body reaction and facilitates wound repair by regulating macrophage polarization 被引量:1
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作者 chuangang you Zhikang ZHU +3 位作者 Shuangshuang WANG Xingang WANG Chunmao HAN Huawei SHAO 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2023年第6期510-523,共14页
Foreign body reactions induced by macrophages often cause delay or failure of wound healing in the application of tissue engineering scaffolds.This study explores the application of nanosilver(NAg)to reduce foreign bo... Foreign body reactions induced by macrophages often cause delay or failure of wound healing in the application of tissue engineering scaffolds.This study explores the application of nanosilver(NAg)to reduce foreign body reactions during scaffold transplantation.An NAg hybrid collagen-chitosan scaffold(NAg-CCS)was prepared using the freeze-drying method.The NAg-CCS was implanted on the back of rats to evaluate the effects on foreign body reactions.Skin tissue samples were collected for histological and immunological evaluation at variable intervals.Miniature pigs were used to assess the effects of NAg on skin wound healing.The wounds were photographed,and tissue samples were collected for molecular biological analysis at different time points post-transplantation.NAg-CCS has a porous structure and the results showed that it could release NAg constantly for two weeks.The NAg-CCS group rarely developed a foreign body reaction,while the blank-CCS group showed granulomas or necrosis in the subcutaneous grafting experiment.Both matrix metalloproteinase-1(MMP-1)and tissue inhibitor of metalloproteinase-1(TIMP-1)were reduced significantly in the NAg-CCS group.The NAg-CCS group had higher interleukin(IL)-10 and lower IL-6 than the blank CCS group.In the wound healing study,M1 macrophage activation and inflammatory-related proteins inducible nitric oxide synthase(iNOS),IL-6,and interferon-(IFN-)were inhibited by NAg.In contrast,M2 macrophage activation and proinflammatory proteins(arginase-1),major histocompatibility complex-II(MHC-II),and found in inflammatory zone-1(FIZZ-1)were promoted,and this was responsible for suppressing the foreign body responses and accelerating wound healing.In conclusion,dermal scaffolds containing NAg suppressed the foreign body reaction by regulating macrophages and the expression of inflammatory cytokines,thereby promoting wound healing. 展开更多
关键词 NANOSILVER MACROPHAGES IMPLANTS Foreign body reaction Wound repair
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异物残留致1例患者腹部慢性难愈合创面
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作者 王新刚 余朝恒 +3 位作者 殷骏 有传刚 张惟 韩春茂 《中华烧伤与创面修复杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期555-557,共3页
2018年12月17日,浙江大学医学院附属第二医院收治1例因异物残留导致局部窦道形成的59岁男性患者。经检查,残留异物为患者27年前行阑尾切除手术时植入的“毡布”成分,23年前因右下腹阑尾炎手术致切口处增生性瘢痕形成,瘢痕切除术后继发... 2018年12月17日,浙江大学医学院附属第二医院收治1例因异物残留导致局部窦道形成的59岁男性患者。经检查,残留异物为患者27年前行阑尾切除手术时植入的“毡布”成分,23年前因右下腹阑尾炎手术致切口处增生性瘢痕形成,瘢痕切除术后继发感染导致创面不愈合。该次收入院后经手术治疗后创面完全愈合,术后病理检查提示局部肉芽肿性炎。该病例提示在植入物附近的手术操作一旦继发感染,容易形成慢性难愈合创面,积极手术治疗是有效手段。 展开更多
关键词 伤口愈合 腹部 异物残留 慢性难愈合创面 医源性创面 窦道
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Nanomaterials for the delivery of bioactive factors to enhance angiogenesis of dermal substitutes during wound healing 被引量:1
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作者 Tingting Weng Jialiang Wang +5 位作者 Min Yang Wei Zhang Pan Wu chuangang you Chunmao Han Xingang Wang 《Burns & Trauma》 SCIE 2022年第1期639-656,共18页
Dermal substitutes provide a template for dermal regeneration and reconstruction.They constitutes an ideal clinical treatment for deep skin defects.However,rapid vascularization remains as a major hurdle to the develo... Dermal substitutes provide a template for dermal regeneration and reconstruction.They constitutes an ideal clinical treatment for deep skin defects.However,rapid vascularization remains as a major hurdle to the development and application of dermal substitutes.Several bioactive factors play an important regulatory role in the process of angiogenesis and an understanding of the mechanism of achieving their effective delivery and sustained function is vital.Nanomaterials have great potential for tissue engineering.Effective delivery of bioactive factors(including growth factors,peptides and nucleic acids)by nanomaterials is of increasing research interest.This paper discusses the process of dermal substitute angiogenesis and the roles of related bioactive factors in this process.The application of nanomaterials for the delivery of bioactive factors to enhance angiogenesis and accelerate wound healing is also reviewed.We focus on new systems and approaches for delivering bioactive factors for enhancing angiogenesis in dermal substitutes. 展开更多
关键词 NANOMATERIALS Bioactive factors Dermal substitute ANGIOGENESIS Wound healing REGENERATION Tissue engineering VASCULARIZATION
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