PCR－SSCP联合序列分析法在RB1基因突变检测中的应用

用聚合酶链反应－单链构象多态（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）联合序列分析，对视网膜母细胞瘤肿瘤组织ＲＢ１基因存在状态进行检测。对ＲＢ１基因全部２７个外显子分别进行ＰＣＲ扩增后，选用适当的限制性核酸内切酶将扩增产物切割成２００ｂｐ左右的片段，加热至双链解离后，６％聚丙烯酰胺凝胶电泳。电泳后对有异常电泳迁移率条带所属标本的同一外显子行ＰＣＲ扩增、序列分析，进一步证实突变的位置和类型。本研究发现包括点突变、缺失、插入等ＲＢｌ基因改变，显示Ｐａｉｔ－ＳＳＣＰ联合序列分析在已知序列基因突变检测中的敏感性和可靠性。