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江浙部分地区牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查及BVDV-2型毒株分离鉴定 被引量:14
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作者 姚志兰 傅宏庆 +1 位作者 崔平福 宗佳丽 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2019年第1期40-46,102,共8页
为了解江浙地区牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的流行情况,于2016~2017年在江浙部分地区采集了145份临床腹泻犊奶牛血清样品,并对其进行RT-PCR检测,对阳性样品的5′-UTR和N^(pro)基因进行序列与遗传进化树分析。145份血清样品中共有19份样品为... 为了解江浙地区牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的流行情况,于2016~2017年在江浙部分地区采集了145份临床腹泻犊奶牛血清样品,并对其进行RT-PCR检测,对阳性样品的5′-UTR和N^(pro)基因进行序列与遗传进化树分析。145份血清样品中共有19份样品为BVDV阳性,阳性率为13.1%,其中江苏和浙江地区的阳性率分别为14.1%和11.9%。根据阳性样品的5′-UTR和N^(pro)基因序列进行遗传进化树分析,18份样品为BVDV-1型,包括1a(n=2)、1b(n=6)、1c(n=2)、1m (n=7)和1q(n=1)亚型;1份样品为BVDV-2型,其5′-UTR和N^(pro)基因序列分析均显示与我国吉林分离株BVDV-2SD1301同源性最高,分别为99.0%与97.0%。同时,对BVDV-2型阳性样品进行病毒分离、RTPCR检测和IFA鉴定,证实成功分离到1株非致细胞病变型(ncp)BVDV-2病毒,命名为BVDV-2JZ21。结果表明:江浙部分地区存在较高比例的BVDV感染,且基因型多样,其中BVDV-1b与1m亚型为该地区感染的主要亚型,分别占33.3%和38.9%。此外,该地区已存在BVDV-2感染。这一研究丰富了BVDV的分子流行病学数据,也为BVDV疫苗研制提供了一定的理论基础。 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 分子流行病学 分型
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血清Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备与初步应用
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作者 陈长春 王永娟 +1 位作者 崔平福 朱善元 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第3期152-157,共6页
为研制血清Ⅰ型鸭肝炎病毒主要的结构蛋白之一VP3蛋白的单克隆抗体,将鸭肝炎病毒免疫BALB/c小鼠,利用原核表达的Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3重组蛋白作为抗原进行筛选以及3次亚克隆后,获得了一株(2G3)能够稳定分泌抗VP3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细... 为研制血清Ⅰ型鸭肝炎病毒主要的结构蛋白之一VP3蛋白的单克隆抗体,将鸭肝炎病毒免疫BALB/c小鼠,利用原核表达的Ⅰ型鸭肝炎病毒VP3重组蛋白作为抗原进行筛选以及3次亚克隆后,获得了一株(2G3)能够稳定分泌抗VP3蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,单克隆抗体亚类鉴定为IgG1,ELISA检测腹水效价为1∶12800。鉴定结果表明制备的单克隆抗体效价高,反应原性强,为后续建研制血清Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒的快检试剂盒及建立病原及抗体检测方法奠定基础。 展开更多
关键词 Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒 VP3基因 单克隆抗体
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Development of RT PCR Assay for Detection of Duck Hepatitis Virus Type 1
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作者 Wang Yongjuan cui pingfu +1 位作者 Liu Bo Meng Ting 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2017年第5期308-310,共3页
In this study,a RT-PCR assay for rapid detection of duck hepatitis virus type 1( DHV-1) was established in the presence of a pair of primers designed based on vp1 gene sequence,using the genomic RNA of DHV-1 or other ... In this study,a RT-PCR assay for rapid detection of duck hepatitis virus type 1( DHV-1) was established in the presence of a pair of primers designed based on vp1 gene sequence,using the genomic RNA of DHV-1 or other common viruses as the template. The template was serially diluted 10-fold to determine the reaction sensitivity. Finally,seven liver samples of ducks with suspected DHV-1 infection,which were collected from different regions of Jiangsu Province,were detected with this method. The results showed that a DNA fragment of about 360 bp was specifically amplified with the RT-PCR system,and the detection limit was1 fg/μL. The detection rate of clinical samples with this method was 100%. The results revealed that the RT-PCR system which had high specificity and high sensitivity in the detection of DHV-1 was successfully established. 展开更多
关键词 DUCK HEPATITIS VIRUS TYPE 1 RT PCR DETECTION
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奶牛泌乳启动调控激素的研究进展 被引量:9
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作者 姚志兰 崔平福 +3 位作者 宗佳丽 巫晓峰 沈留红 傅宏庆 《畜牧与兽医》 北大核心 2018年第8期129-132,共4页
哺乳动物泌乳启动都是在一系列激素的调控作用下完成的。奶牛的泌乳启动受到多种激素的共同调控,处于非妊娠期的奶牛乳腺在经过特定激素的刺激后,都会在一定程度上出现泌乳现象。本文对奶牛催乳素PRL、雌激素E、胰岛素INS、生长激素GH... 哺乳动物泌乳启动都是在一系列激素的调控作用下完成的。奶牛的泌乳启动受到多种激素的共同调控,处于非妊娠期的奶牛乳腺在经过特定激素的刺激后,都会在一定程度上出现泌乳现象。本文对奶牛催乳素PRL、雌激素E、胰岛素INS、生长激素GH和孕酮P4与泌乳启动的关系进行了综述,为研究泌乳启动和奶牛产奶量等提供重要理论基础。 展开更多
关键词 激素 泌乳启动 奶牛
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重组鸡α-干扰素的表达与抗病毒活性分析 被引量:1
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作者 刘莉 王永娟 +4 位作者 武彩红 崔平福 谭菊 张成兰 郑天 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第22期80-83,共4页
为了表达具有抗病毒活性的重组鸡α-干扰素(IFN-α),试验根据大肠杆菌密码子的偏好性,对鸡IFN-α的成熟肽基因序列进行优化,合成后连接至原核表达载体pET30a-ELP,经体外诱导后表达重组蛋白ELP-ChIFN-α,借助重复可逆相变循环(ITC)法进... 为了表达具有抗病毒活性的重组鸡α-干扰素(IFN-α),试验根据大肠杆菌密码子的偏好性,对鸡IFN-α的成熟肽基因序列进行优化,合成后连接至原核表达载体pET30a-ELP,经体外诱导后表达重组蛋白ELP-ChIFN-α,借助重复可逆相变循环(ITC)法进行纯化;纯化蛋白经过变性、复性处理后进行安全性评价,采用微量细胞病变抑制法在犬肾细胞(MDCK)/水疱性口炎病毒(VSV)系统中进行蛋白抗病毒活性的检测。结果表明:合成的重组鸡IFN-α成熟肽基因能在原核表达系统中成功表达;不同浓度的重组蛋白ELP-ChIFN-α对细胞的生长抑制率为0;重组蛋白ELP-ChIFN-α在MDCK/VSV系统中具有抗病毒活性,活性为1.2×10^(6)IU/mg。说明原核表达的重组鸡IFN-α有较好的抗病毒活性,可作为鸡的抗病毒生物药物进一步开发研究。 展开更多
关键词 Α-干扰素 原核表达 类弹性蛋白 抗病毒活性
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