油橄榄压条不定根发生的转录组分析

探明油橄榄生根过程中基因表达调控的变化规律,可为控制不定根发生的关键基因的筛选奠定基础。以油橄榄品种‘田园1号’为研究对象,采用生根粉1号(1500 mg/kg)处理油橄榄压条,并在压条后的第0、10、20、30和40 d取样(记为YT0、YT10、YT20、YT30、YT40)进行转录组测序,分析油橄榄生根过程不同阶段的差异基因的表达变化,挖掘出参与油橄榄生根过程的重要代谢通路及生根相关差异表达基因。结果显示:(1)压条生根过程中差异表达基因在YT0与YT10间共1218个,包括829个上调和389个下调;在YT10与YT20间共有1157个,包括567个上调和590个下调;在YT20与YT30间共1163个,包括499个上调和664个下调;在YT30与YT40间共1458个,包括952个上调和506个下调。(2)通过差异基因GO功能注释分析发现显著富集的类名包括细胞膜、催化活性、氧化还原酶活性、辅因子结合、转运活性、跨膜转运蛋白活性、碳水化合物代谢过程等。(3)通过差异基因KEGG富集分析,发现参与生根过程的主要通路包括植物激素信号转导、苯丙烷生物合成、淀粉和蔗糖代谢、戊糖和葡萄糖醛酸相互转化、氨基糖和核苷酸糖、核糖体、半胱氨酸和蛋氨酸代谢等。结果表明:在压条生根过程中,与植物激素信号转导有关的基因包括ARF、GH 3、AUX1、SAUR、JAZ、CYCD3、MYC 2等;与苯丙烷生物合成途径相关的基因包括β-葡萄糖苷酶、反-肉桂酸4-单加氧酶、苯丙氨酸解氨酶等;参与生根过程的转录因子包括bHLH、MYB、ERF、NAC、C2H2和WRKY等家族。

富含玉米黄质色素橄榄油对高血脂小鼠的影响

旨在为开发富含玉米黄质色素橄榄油(ZT)保健产品提供参考,用脂肪乳剂灌胃构建高血脂小鼠模型,同时设生理盐水对照(CK)组,将建模成功的小鼠随机分为高血脂模型组(Model),ZT高、中、低剂量处理组和菲勒贝特药物对照(PL)组,连续灌胃给药28 d,研究ZT(玉米黄质色素含量400 mg/100 g)对高血脂小鼠空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbAlc)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆红素(TBIL)、总胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬酸氨基转移酶(AST)、γ-氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)等指标的影响,并对ZT小鼠开展急、慢性毒理研究。结果表明:ZT能有效降低高血脂小鼠的FBG、HbAlc、TC、TG、LDL、TBIL、TBA含量,升高HDL含量,对ALT、AST、GGT和ALP活性具有很好的抑制作用,能够显著改善血糖、血脂代谢紊乱,降低小鼠体质量,对正常小鼠无急、慢性毒理作用,可提高小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性。综上,富含玉米黄质色素橄榄油属无毒性物质,能提高小鼠的抗氧化能力,降低其体质量,是具有较好辅助降血糖、降血脂作用的橄榄油保健食品。

驼血营养成分分析与评价

目的:分析评价驼血营养成分,为其合理、高效利用提供数据支持和理论依据。方法:采用国家标准及参考相关文献测定了驼血、鹿血、猪血、鸭血和鸡血5种食物源性动物血液中灰分、粗蛋白、粗脂肪、白蛋白、钙、铁、钾、镁、锌以及钠的含量,并运用方差分析和主成分分析方法对驼血和其他4种食源性动物血液的营养成分进行比较分析。结果:驼血与其他4种食源性动物血液相比,白蛋白占粗蛋白的比例最高,为82.17%,锌、钙含量和钠钾含量比均高于其他4种食物源性动物血液,分别为(7.7±1.05)mg/100 g、(108.4±9.97)mg/100 g和1.6(P <0.05)。主成分分析法提取出2个主成分,第一主成分在钾元素上有较大的载荷系数,贡献率为84%,第二主成分主要与钠有关,贡献率为15%,累计贡献率为99%。结论:驼血为白蛋白含量高,富含锌、钙,钠钾比高的食源性动物血液;钠元素和钾元素含量是引起5种动物血液差异的主要因素。

橄榄苦苷对LPS诱导小鼠视网膜损伤的保护作用

为研究橄榄苦苷(oleuropein, OP)对LPS诱导小鼠视网膜损伤的保护作用,将SPFKM小鼠随机分成5组,分别为LPS模型组(LPS)、对照组(Control)、OP高、中、低质量浓度(800、400、200 mg/kg)处理组,连续灌胃21 d,从第14天开始,各组小鼠灌胃30 min后,在异氟烷气体辅助麻醉下,小鼠腹腔注射2.0 mg/kg LPS,对照组小鼠腹腔注射2.0 mg/kg生理盐水,连续7 d,建模完成后,检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)活性及白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)含量,采用免疫组化SP法检测甘油三脂脂肪酶(PNPLA2)在小鼠视网膜各层结构上的分布特点并观察视网膜组织形态学变化。结果显示,OP使小鼠血清中SOD、CAT和GHS-Px活性显著升高(P<0.01),IL-1β和TNF-α含量下降(P<0.05),视网膜中PNPLA2表达量升高(P<0.05,P<0.01);OP各剂量组均能提高SOD、CAT和GHS-Px活性,降低IL-1β和TNF-α含量,改善LPS对小鼠视网膜的病理损伤,提高视网膜中PNPLA2表达量,具有保护LPS诱导视网膜损伤的作用。

Effect of Occupational Manganese Exposure on Uric Acid Levels in Human Urine

Objective To investigate the effect of long-term and low-level occupational Mn exposure on the level of uric acid （UA） in human urine. Methods In this study, 65 volunteers were recruited, who were working on welding and foundry work in an plant in Gansu province, China. Additionally, 29 control samples were collected from individuals who did not have any history of excessive Mn exposure. An improved high performance liquid chromatography system equipped with a diode-array detector （HPLC-DAD） method was developed to determine the UA level in human urine. A Spectra AA 220 Atomic Absorption Spectrophotometer （AAS） was used to measure the Mn level in the urine. Results The analytical method was validated acceptable accuracy, precision, and recovery significantly lower than that of control samples for concentrations ranging from 3.82-45.84 pg/mL with Overall, the UA levels of Mn exposure samples were （P〈O.O5）. Conclusion The practical method developed here is suitable for both routine monitoring of UA level in human urine and metabolism research. Long-term and low-level occupational Mn exposure may lead to a lower UA level in urine, and UA might be an indicator of the early stage of manganism.

12C^(6+)辐照对不同品种油橄榄种子萌发及幼苗生长的影响

【目的】为油橄榄辐照诱变育种提供理论参考。【方法】以‘皮削利’‘切姆拉尔’‘豆果’‘奇迹’‘阿尔波萨纳’5个品种的种子为试验材料,以5种剂量(0、50、100、150和250 Gy)的12C^(6+)辐照油橄榄种子,播种后统计不同处理下的发芽率、存活率、鲜质量、株高、总叶数量、根长和侧根数量等7项指标,运用隶属函数法综合评价不同辐照剂量对不同品种油橄榄种子萌发及幼苗生长的影响,并计算半致死辐照剂量。【结果】12C^(6+)辐照对不同品种油橄榄种子发芽率的影响存在差异。随着辐照剂量增加,‘皮削利’和‘切姆拉尔’种子发芽率先升高后降低,‘豆果’‘奇迹’‘阿尔波萨纳’种子发芽率逐渐降低,250 Gy辐照处理下发芽率分别降至11.46%、8.33%、14.58%、7.29%和11.46%。12C^(6+)辐照对各品种油橄榄幼苗的生长有抑制作用。随着辐照剂量增加,鲜质量、株高、总叶数量、根长和侧根数量均逐渐下降,250 Gy辐照处理下均降至最低。12C^(6+)辐照对油橄榄幼苗具有一定的致死效应,且与辐照剂量紧密相关。与种子发芽后40 d时相比,发芽后90 d时各辐照处理下不同品种油橄榄幼苗的存活率均有不同程度的下降。隶属函数分析结果表明,各辐照剂量按照5个品种的总得分由高到低排序,依次均为0、50、100、150、250 Gy,表明不同剂量辐照处理(50~250 Gy)均不同程度地影响了不同品种油橄榄幼苗的长势。5个油橄榄品种按照种子半致死剂量由高到低排序,依次分别为‘豆果’(153.7 Gy)、‘皮削利’(143.5 Gy)、‘切姆拉尔’(129.9 Gy)、‘奇迹’(115.3 Gy)、‘阿尔波萨纳’(108.1 Gy)。【结论】12C^(6+)辐照对不同品种油橄榄种子萌发及幼苗生长整体上有抑制作用,且辐照剂量越大,抑制作用越强。综合考虑发芽率、存活率、幼苗生长等情况,油橄榄种子的适宜辐照剂量为100~150 Gy。

花椒50%乙醇提取物对中枢神经系统作用机理研究

目的:探索花椒50%乙醇提取物对中枢神经系统的作用机制及物质基础,为其开发应用奠定坚实的基础。方法:利用具有致小鼠惊厥作用的模型药物戊四氮和异烟肼,联合工具药安定,找到花椒50%乙醇提取物与γ-氨基丁酸(GABA)系统的作用机制;在体外分别测定花椒50%提取物四个组分对乙酰胆碱酯酶(AchE)以及单胺氧化酶(MAO)活性的影响,选用其中活性较强的组分与具有拮抗M受体的哌仑西平、拮抗N受体的阿曲库铵合用,揭示其对胆碱能神经系统的作用机制。结果:花椒50%乙醇提取物可显著延长戊四氮和异烟肼小鼠的惊厥潜伏期。安定对花椒50%乙醇提取物具有增效作用。花椒50%乙醇提取物四个部分中毒性最大的两个部分对小鼠的半数致死量(LD_(50))分别为ZBMⅡ-1:609 mg/kg,ZBMⅡ-2:948 mg/kg。体外实验中四个部分对AchE的半数抑制浓度(IC_(50))分别为ZBMⅡ-1:1575μg/mL,ZBMⅡ-2:1450μg/mL,ZBMⅡ-3:2503μg/mL,ZBMⅡ-4:511μg/mL;对MAO-A的IC_(50)值分别为ZBMⅡ-1:65μg/mL,ZBMⅡ-2:169μg/mL,ZBMⅡ-3:174μg/mL,ZBMⅡ-4:332μg/mL;对单胺氧化酶B的IC_(50)值分别为ZBMⅡ-1:1601μg/mL,ZBMⅡ-2:75691μg/mL,ZBMⅡ-3:855μg/mL,ZBMⅡ-4:25505μg/mL。花椒50%乙醇提取物的组分ZBMⅡ-1与哌仑西平对小鼠的胃部泌酸量有较好的对抗作用。结论:花椒50%乙醇提取物具有较强的药理活性,其兴奋胆碱能神经系统可能与其激动M受体和N受体有关;其激动γ-氨基丁酸系统可能与其能够抑制MAOs活性有关。

牡蛎肉营养成分分析及安全性评价

通过测定牡蛎肉的主要营养成分、微量元素及重金属含量,评价了牡蛎肉的营养价值及食用安全性,为牡蛎肉的后期开发提供理论依据。营养成分测定结果显示,牡蛎肉中蛋白质含量为11.5 g/100 g,脂肪含量为3.4 g/100g,碳水化合物和钠的含量分别为8.5 g/100 g和219 mg/100 g,每百克牡蛎肉可提供466 kJ能量。此外,牡蛎肉中含有多种人体所需的微量元素,锌的含量是124 mg/kg,硒的含量是638μg/kg,铁的含量是7.77 mg/100 g。牡蛎肉安全性评价结果显示,重金属铅的含量为0.098 mg/kg,低于允许限量标准。因此,牡蛎肉营养丰富、食用安全,可作为高质量食品、保健食品、药品等开发利用。

花椒“心智爽悟”功效的科学内涵研究

目的:运用现代研究手段,逐步揭示花椒"心智爽悟"功效的科学内涵,为临床科学、合理应用提供理论依据。方法:分别测定小鼠口服各花椒提取物的LD50,在此基础上,进一步测定其对单胺氧化酶的影响,并运用酚妥拉明、普萘洛尔、阿托品,以及三因素两水平正交分析其主要作用及交互作用。结果:分别测得花椒50%乙醇提取物、95%乙醇提取物、水提物以及挥发油的LD50分别为:0.39原生药g/kg、0.52原生药g/kg、3.10原生药g/kg以及4.62原生药g/kg;MAO-A的IC50为:0.15原生药mg/mL、0.14原生药mg/mL、0.21原生药mg/mL、挥发油对MAO-A的IC50未测出;MAO-B的IC50分别为:0.46原生药mg/mL、0.29原生药mg/mL、0.73原生药mg/mL、6.41原生药mg/mL。酚妥拉明、普萘洛尔以及阿托品均可显著减少花椒95%乙醇提取物所致小鼠的死亡数,死亡率分别达到了57.14%、14.29%、0,其中以阿托品的作用最强,但三者合用仅有少许相加作用,并无明显的系统增效作用。结论:花椒的急性毒性作用是其药理效应的放大,其机制与抑制MAO-A以及MAO-B活性相关,也与其拟胆碱活性明显相关,这些作用是花椒"心智爽悟"功效的内在因素。

基于新型溶剂系统筛选的高速逆流色谱分离油橄榄叶中的多酚类化合物

目的采用HEMW(正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水)系统组成基于9×9表新型溶剂系统筛选的方法应用于高速逆流色谱(HSCCC)分离油橄榄叶中的多酚类化合物橄榄苦苷、木犀草素-4’-O-β-D-葡萄糖苷和羟基酪醇。方法通过测定目标物在4种溶剂体系中的分配系数K值并在LogK值和溶剂系统数之间构建相关的线性关系,筛选出最佳溶剂系统HEMW(1.2∶8.8∶1.7∶8.3,V/V)进行HSCCC分离油橄榄叶提取物并优化了流速、转速及进样量等参数。结果计算所得HEMW(1.2∶8.8∶1.7∶8.3,V/V)为溶剂系统,流速为1.5 mL/min、转速为950 r/min、进样浓度为20 g/L从500 mg油橄榄叶提取物中分离得到45.8 mg橄榄苦苷、17.7 mg木犀草素-4’-O-β-D-葡萄糖苷及6.8 mg羟基酪醇,且3种化合物纯度均大于90%。结论本研究表明9×9表溶剂系统筛选应用于HSCCC分离天然产物领域中具有可行性和高效性,并为HSCCC溶剂系统快速筛选及提高其从复杂体系中分离制备目标化合物的效率提供了技术支持。

高速剪切辅助疏水低共熔溶剂萃取技术在HPLC检测枸杞红素类成分的应用研究

研究合成了一系列疏水性低共熔溶剂(Deep eutectic solvents,DES),以其为萃取剂建立了高速剪切(High-speed shear dispersing emulsifier,HSDE)辅助疏水低共熔溶剂萃取,结合高效液相色谱法测定枸杞中的枸杞红素类成分的新方法。通过优化料液比、萃取次数、高速剪切转速等影响萃取效率的因素,确定最佳条件为:以薄荷醇和正辛醇(比例为1:2)合成的DES-4为萃取剂,料液比为1:20,高速剪切转速为10000 r/min,室温萃取5 min,离心后定容经高效液相色谱检测,外标法定量。结果显示:3种主要的枸杞红素类成分(玉米黄质、玉米黄质单棕榈酸酯和玉米黄质双棕榈酸酯)在各自质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数R;均大于0.995,日间精密度、日内精密度和重复性均良好,加标回收率分别为83.7%~102.8%、89.1%~114.3%和85.4%~99.3%。该方法操作简单、高效便捷,适用于枸杞中枸杞红素类成分的检测需求,为以枸杞红素类成分为指标成分的标准构建和枸杞品质保障质控体系构建提供了新的途径。

清热解毒软胶囊防治急性肺损伤作用机理研究

目的:清热解毒软胶囊由川芎和当归挥发油组成,本文探讨清热解毒软胶囊防治流感病毒、脂多糖(LPS)所引起的急性肺损伤相关机制,为后期开发奠定坚实的基础。方法:采用静脉注射LPS和气管局部滴注流感病毒建立急性肺损伤小鼠模型,考察灌胃清热解毒软胶囊对急性肺损伤小鼠的保护作用,同时利用皮下注射角叉菜胶诱导小鼠尾部血栓模型,考察清热解毒软胶囊改善微循环的作用。结果:与模型对照组比较,清热解毒软胶囊2、4、8 g/kg可明显延长静脉注射LPS 20 mg/kg小鼠或H1N1流感病毒感染小鼠的生存时间,降低其死亡率(P<0.05或P<0.01);与正常对照组比较,模型对照组肺指数及肺组织病理评分显著升高,肺组织中还原型谷胱甘肽(GSH)的含量降低,丙二醛的含量显著升高(P<0.01);防治性给药7次后,清热解毒软胶囊可显著改善上述指标,尤其是清热解毒软胶囊8 g/kg组(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组比较,模型对照组皮下注射角叉菜胶致小鼠尾部血栓形成长度显著增加(P<0.01),凝血酶时间缩短和纤维蛋白原含量升高(P<0.05或P<0.01);预防性给药5次后,清热解毒软胶囊1、2、4 g/kg组可明显改善上述指标(P<0.05或P<0.01)。结论:清热解毒软胶囊能有效延长流感病毒感染小鼠、大剂量静脉注射LPS小鼠的生存时间,减少其死亡率;其对急性肺损伤的保护作用可能与减轻肺部氧化应激、减少血栓形成、减轻肺水肿有关。

大孔吸附树脂对鱼籽多肽脱色工艺

为探究鱼籽多肽最优脱色工艺,以鱼籽多肽脱色率和得率为评价指标,筛出优选树脂。利用单因素试验和响应面试验进一步优化,确定最佳脱色工艺条件。结果表明,优选的大孔吸附树脂为LSA-50,最优脱色工艺为树脂用量4.94 g/g、脱色时间2 h、脱色温度55℃、pH 4。此条件下的脱色率为80.20%,得率为77.05%。该工艺所得鱼籽多肽性质稳定,有助于鱼籽多肽进一步开发利用。