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苹果生长素响应因子(MdARF)基因克隆与表达分析 被引量:4
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作者 李慧峰 张文芹 +2 位作者 董庆龙 王小非 冉昆 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1170-1181,共12页
【目的】克隆苹果(Malus domestica‘Zihong Fuji’)MdARF基因,研究其在生长素和逆境处理下的表达特性。【方法】以‘紫弘富士’叶片c DNA为模板,采用RT-PCR技术克隆得到10个MdARF基因;运用Array技术检测MdARF在不同组织中的表达特性;运... 【目的】克隆苹果(Malus domestica‘Zihong Fuji’)MdARF基因,研究其在生长素和逆境处理下的表达特性。【方法】以‘紫弘富士’叶片c DNA为模板,采用RT-PCR技术克隆得到10个MdARF基因;运用Array技术检测MdARF在不同组织中的表达特性;运用qRT-PCR技术检测MdARF在生长素、盐和甘露醇处理条件下的表达特性。【结果】克隆得到10个MdARF基因(MdARF4-13,GenBank登录号为MG021615~MG021624),其开放阅读框分别为2 136、3 345、2 052、2 400、2 532、2 691、1 782、2 532、3 342和2 034 bp。进化分析表明,MdARF3/7属于AtARF3/4-like,MdARF4/10属于AtARF10/16/17-like,MdARF1/6/11/13属于AtARF1/2-like,MdARF5/9/12属于AtARF5/7/19-like,MdARF2/8属于AtARF6/8-like。亚细胞定位预测分析表明,10个MdARF蛋白均定位于细胞核。MR结构域氨基酸组成预测分析表明,MdARF2/5/8/9/12可能为转录激活子,MdARF1/3/4/6/7/10/11/13可能为转录抑制子。Array结果显示,MdARF在被检测的组织中均有表达。在IAA处理条件下,MdARF1/7/9/10转录水平受到诱导,MdARF2/3/4/6/8/11/12转录水平降低;在盐处理条件下,MdARF9转录水平受到诱导,而MdARF1/5/7/10/12/13转录水平下调;在甘露醇处理条件下,MdARF6/9转录水平受到诱导。【结论】克隆得到10个MdARF基因,其表达水平受IAA、盐或甘露醇诱导或者下调,可能参与调控生长素信号转导以及逆境响应等过程。 展开更多
关键词 苹果 生长素响应因子 序列分析 表达分析
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14个苹果AP2/ERF转录因子基因的克隆与表达分析 被引量:6
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作者 李慧峰 董庆龙 +1 位作者 赵强 冉昆 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期921-931,共11页
为探究AP2/ERF转录因子在苹果(Malus pumila Mill.)生长发育以及生物或非生物胁迫应答下的功能,本研究利用同源比对和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,克隆苹果MdAP2/ERF全长cDNA序列并进行生物信息学分析。采用Array技术检测MdAP2/ER... 为探究AP2/ERF转录因子在苹果(Malus pumila Mill.)生长发育以及生物或非生物胁迫应答下的功能,本研究利用同源比对和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,克隆苹果MdAP2/ERF全长cDNA序列并进行生物信息学分析。采用Array技术检测MdAP2/ERF在苹果16种不同组织中的表达情况,RNA-seq技术检测MdAP2/ERF在苹果斑点落叶病菌(Alternaria alternata apple pathotype, AAAP)侵染下的表达特性,RT-qPCR技术检测MdAP2/ERF在NaCl和甘露醇胁迫下的表达模式。结果表明,共获得了MdERF9-10、MdERF12-15、MdERF20-21、MdERF30、MdERF37和MdAP2D66-69共计14个MdAP2/ERF基因,其GenBank登录号依次为MG099818-19、MG099821-24、MG099829-30、MG099839、MG099846和MG099855-58,开放阅读框(ORF)分别为966、540、1 260、843、1 056、1 011、1 347、1 047、669、615、1 956、1 455、1 365和1 101 bp。进化分析表明,MdERF12、MdERF37、MdERF20分别属于DREB亚家族A-2、A-4和A-6组;MdERF30、MdERF15、MdERF14/MdERF21和MdERF9/MdERF10/MdERF13分别属于ERF亚家族B-1、B-3、B-5和B-6组;MdAP2D66-69属于AP2亚家族。亚细胞定位预测结果显示,MdERF9-10、MdERF12-15、MdERF20、MdERF30、MdERF37和MdAP2D66-69可能位于细胞核;MdERF21可能位于线粒体。Array分析结果显示,14个MdAP2/ERF在16个检测组织中均有不同的相对表达水平。RNA-seq结果显示,MdERF12、MdERF14、MdERF15、MdERF20和MdAP2D66/67/69响应斑点落叶病菌侵染;在150 mmol·L-1 NaCl处理下,MdERF10、MdERF12、MdERF13、MdERF15、MdERF20、MdERF30和MdERF37转录水平上调,而MdERF14和MdAP2D68转录水平下调;在300 mmol·L-1甘露醇处理下,MdERF10、MdERF30、MdERF37和MdAP2D66-69转录水平上调,MdERF14转录水平下调。综上表明,MdAP2/ERF基因呈组成型表达,并受斑点落叶病菌、NaCl或甘露醇胁迫诱导或下调,可能参与调控苹果生物胁迫和非生物胁迫应答的过程。该研究结果为进一步揭示AP2/ERF转录因子调控苹果生长发育及逆境胁迫的机理奠定了理论基础。 展开更多
关键词 苹果 AP2/ERF转录因子 序列分析 表达分析
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水性聚氨酯/丙烯酸树脂合成及改性技术的研究进展 被引量:6
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作者 曾国屏 董清龙 +2 位作者 刘德旺 王刚 王玲玲 《化工新型材料》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期12-15,26,共5页
水性聚氨酯/丙烯酸树脂(WPUA)的挥发性有机化合物(VOCs)含量低,耐水性、耐溶剂性、机械性能优秀,已经成为水性涂料的研究热点。对WPUA的主要组成及合成技术等进行了综述,同时阐述了不同合成方式的优缺点,以及未来的研究发展趋势。
关键词 水性聚氨酯/丙烯酸树脂 改性 核/壳聚合 互穿网络接枝共聚
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单肺移植术后手术室内气管拔管方案的探索性研究 被引量:1
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作者 周延然 董庆龙 +9 位作者 杨汉宇 刘辉 陈磊 李颖芬 吴蕾 徐鑫 杨超 彭桂林 刘梦杨 梁丽霞 《器官移植》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期246-252,共7页
目的探讨终末期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者单肺移植术后手术室内气管拔管方案的可行性及安全性。方法回顾性分析57例因终末期COPD行单肺移植的受者的临床资料,根据本院制定的手术室内气管拔管评估指标进行评估,符合条件、在手术室完成... 目的探讨终末期慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者单肺移植术后手术室内气管拔管方案的可行性及安全性。方法回顾性分析57例因终末期COPD行单肺移植的受者的临床资料,根据本院制定的手术室内气管拔管评估指标进行评估,符合条件、在手术室完成气管拔管的为手术室拔管组(OR拔管组,17例),在重症监护室(ICU)完成气管拔管的为ICU拔管组(40例)。比较两组术中气管拔管评估结果和术后康复情况。结果与ICU拔管组比较,OR拔管组受者的氧合指数较高,动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、血乳酸水平较低,血压波动幅度较小,术中使用体外膜肺氧合(ECMO)的例数较少(均为P<0.05)。OR拔管组2例受者分别于返回ICU 6、8 h再次气管插管,术后6、9 d拔除气管导管。OR拔管组受者术后机械通气时间、术后ICU入住时间、术后住院时间均较ICU拔管组受者短(均为P<0.05)。两组受者术后原发性移植物功能障碍(PGD)3级、房性快速性心律失常、连续肾脏替代治疗例数和1年生存率比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论本院制定的COPD患者单肺移植术后手术室内气管拔管方案安全可行,可减少受者术后机械通气时间,缩短术后ICU入住时间及住院时间,不增加并发症发生率。 展开更多
关键词 肺移植 慢性阻塞性肺疾病 麻醉管理 加速康复外科 气管拔管 机械通气 手术室 重症监护室 氧合指数 体外膜肺氧合
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巨大芽孢杆菌菌剂对苹果产量、品质及土壤微生物的影响
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作者 潘纪源 董庆龙 +5 位作者 温海彬 刘亚南 王晓洁 张雪梅 刘文菊 陆秀君 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2453-2465,共13页
以树龄16年‘红富士’苹果(Malus×domestica)为试材,研究巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)菌剂处理对新梢生长、果实产量和品质以及土壤微生物数量、微生物群落结构和土壤养分的影响。结果表明,与对照相比,2021、2022连续两年苹... 以树龄16年‘红富士’苹果(Malus×domestica)为试材,研究巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)菌剂处理对新梢生长、果实产量和品质以及土壤微生物数量、微生物群落结构和土壤养分的影响。结果表明,与对照相比,2021、2022连续两年苹果树春季施用巨大芽孢杆菌菌剂,30 d内新梢增长率分别提高了3.45%和17.01%,60 d内新梢增长率分别提高了2.58%和6.71%;产量分别增长了7.17%和7.01%;而对果形指数、硬度、可溶性糖含量、可溶性固形物和维生素C含量等指标均无显著影响。2021年处理组单株果实数量增加4.95%。2022年处理组的果实着色相关指标红绿色度a*低于对照,色度角h高于对照,而2021年无显著差异。施用菌剂后0~20 cm、20~40 cm土层真菌数量减少,细菌增加,但随着时间延长,菌剂效果逐渐减弱;真菌和细菌群落的α多样性无显著变化;土壤真菌中短梗蠕孢属(Trichocladium)、产油菌属(Solicoccozyma)、担子菌酵母属(Naganishia)和土赤壳属(Ilyonectria)相对丰度分别是对照的1.87倍、1.92倍、2.91和3.38倍;陶氏菌属(Tausonia)和头束菌属(Cephalotrichum)相对丰度分别是对照的76.44%和67.96%;土壤细菌中链霉菌属(Streptomyces)和芽单胞菌属(Gemmatimonas)相对丰度分别是对照的2.65倍和1.33倍;而朱氏杆菌属(Chujaibacter)的相对丰度是对照的48.88%;处理苹果根际土壤中细菌和真菌OTU数量与对照相比发生显著变化;苹果根系土壤的速效磷、速效钾含量分别比对照高21.87%和20.81%、5.14%和5.31%。综上,春季施用巨大芽孢杆菌菌剂能够抑制土壤有害真菌,改善土壤微生物群落结构和数量,活化土壤磷、钾,促进苹果生长,提高苹果产量。 展开更多
关键词 苹果 巨大芽孢杆菌 产量 品质 土壤微生物 土壤养分
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苹果MdVQs基因响应SA、JA及斑点落叶病的表达分析
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作者 郑文倩 董庆龙 +2 位作者 段定越 马锋旺 李翠英 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第16期5221-5228,共8页
VQ家族是一类植物转录调控辅助因子,参与调节植物生长发育以及防御反应。本研究根据水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)以及已报道的苹果斑点落叶病菌(Alternaria alternata apple pathotype)处理下苹果不同组织的转录组数据,采用Array、RT-qPCR和R... VQ家族是一类植物转录调控辅助因子,参与调节植物生长发育以及防御反应。本研究根据水杨酸(SA)、茉莉酸(JA)以及已报道的苹果斑点落叶病菌(Alternaria alternata apple pathotype)处理下苹果不同组织的转录组数据,采用Array、RT-qPCR和RNA-Seq检测和分析苹果品种‘Gala’的20个MdVQs基因的表达模式。Array结果表明,MdVQs基因在苹果各组织部位中都有高表达;RT-qPCR结果表明,多数MdVQs基因在早期响应激素信号,其中14个MdVQs基因受两种激素共同响应,MdVQ19只响应SA诱导表达,MdVQ5、MdVQ12、MdVQ16、MdVQ35、MdVQ47只响应JA且Md VQ47表达显著受抑制;RNA-Seq结果表明,MdVQs基因除在后期个别时间段下调表达外,其余时间段均上调表达,其中MdVQ21、MdVQ27、MdVQ42上调表达显著。MdVQs基因家族可能在响应SA、JA信号途径以及生物胁迫中存在潜在重要作用。该研究结果为深入解析MdVQs基因在苹果防卫生物胁迫中的功能提供参考。 展开更多
关键词 MdVQs基因 防御相关激素 苹果斑点落叶病菌 表达分析
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Influence of buccal acupuncture on analgesic effect,immune indicators,and expression of Survivin and Livin proteins in patients with advanced-stage primary liver cancer 被引量:3
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作者 LIN Zhiguang SU Shengxian +3 位作者 XIE Xiaoli YANG Yuanfeng dong qinglong KONG Xiehe 《Journal of Acupuncture and Tuina Science》 CSCD 2022年第5期383-391,共9页
Objective To investigate the effects of buccal acupuncture on analgesia,immune indicators,and expression levels of Survivin and Livin proteins in patients with advanced-stage primary liver cancer.Methods Eighty patien... Objective To investigate the effects of buccal acupuncture on analgesia,immune indicators,and expression levels of Survivin and Livin proteins in patients with advanced-stage primary liver cancer.Methods Eighty patients with advanced-stage primary liver cancer were selected and divided into control and treatment groups according to the difference in treatment modalities,with 40 patients in each group.The control group received transcatheter arterial chemoembolization(TACE),and the treatment group received buccal acupuncture in addition to TACE.The recent efficacy,analgesic effect,liver function,serum tumor markers,Survivin and Livin protein expression levels in liver cancer tissue,and immune indexes were analyzed and compared between the two groups.Results The objective response rate(ORR)and disease control rate(DCR)of the treatment group were 37.5%and 77.5%,respectively,which were significantly higher than those of the control group(22.5%and 52.5%),and the recent efficacy of the treatment group was significantly better than that of the control group(P<0.05).The onset of analgesia in the treatment group was significantly faster than that in the control group(P<0.05),the duration of analgesia was significantly longer than that in the control group(P<0.05),and the numeric rating scale(NRS)score of pain after treatment was significantly lower than that in the control group(P<0.05).In the treatment group,the aspartate aminotransferase(AST),alanine aminotransferase(ALT),and albumin/globulin(A/G)were significantly lower than those in the control group(P<0.05),and the serum levels of alpha-fetoprotein(AFP),alpha-L-fucosidase(AFU),and carcinoembryonic antigen(CEA)were significantly lower than those in the control group(P<0.05),and the expression levels of Survivin and Livin in liver cancer tissue were significantly lower than those in the control group(P<0.05);CD4^(+)and CD4^(+)/CD8+in the treatment group were significantly higher than those in the control group,and CD8+was significantly lower than that in the control group after treatment(P<0.05).Conclusion Buccal acupuncture can reduce the degree of pain and liver function damage in patients with advanced-stage primary liver cancer and lower the serum tumor marker levels,and its mechanism of action may be related to the down-regulation of Survivin and Livin protein expression levels in the liver cancer tissue and the regulation of the immune function. 展开更多
关键词 Acupuncture Therapy Buccal Acupuncture Liver Neoplasms Acupuncture Analgesia Immune Function Liver Function Tests Biomarkers Tumor SURVIVIN
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不同麻醉方式对吻合器痔上黏膜环切术日间手术快速康复的影响
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作者 何翠翠 董庆龙 +1 位作者 梁丽霞 陈劲松 《中华普通外科学文献(电子版)》 CAS 2021年第3期193-197,共5页
目的探讨适合吻合器痔上黏膜环切术(PPH)最优麻醉方式,从而促进患者术后快速康复。方法选取2019年7月至2020年1月广州医科大学附属第一医院择期行PPH的患者60例,随机分成腰硬联合麻醉组(A组)、肌肉松弛药喉罩通气全身麻醉+肛周阻滞组(B... 目的探讨适合吻合器痔上黏膜环切术(PPH)最优麻醉方式,从而促进患者术后快速康复。方法选取2019年7月至2020年1月广州医科大学附属第一医院择期行PPH的患者60例,随机分成腰硬联合麻醉组(A组)、肌肉松弛药喉罩通气全身麻醉+肛周阻滞组(B组)、无肌肉松弛药喉罩通气全身麻醉+肛周阻滞组(C组),每组20例。比较三组患者围术期麻醉效果:每组术前、术中、手术结束的血压、心率变化,手术时间,拔除喉罩时间;患者术后2、6、12、24 h疼痛评分和镇痛药使用率;患者术后尿潴留发生率、住院时间和术后睡眠情况。结果B组的麻醉效果明显优于A组和C组(P<0.05);术后镇痛评分和镇痛药使用率均低于A组和C组(P<0.05);尿潴留发生率、住院时间明显低于A组和C组;术后睡眠质量优于A组和C组(P<0.05)。结论肌肉松弛药喉罩通气全身麻醉+肛周阻滞更适合PPH日间手术,麻醉效果优,有效降低患者术后疼痛程度,尿潴留发生率明显下降,患者术后康复快,值得推广。 展开更多
关键词 麻醉 快速康复 日间手术 PPH
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