期刊导航
期刊开放获取
河南省图书馆
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式:
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
一个巨大的多烯抗生素基因簇中聚酮合酶(PKS)基因单元在大肠杆菌中的双重诱导超量表达
被引量:
1
1
作者
陶美凤
胡志浩
+4 位作者
周秀芬
周启
邓子新
Tobi
a
s KIESER
david a hopwood
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1999年第6期721-730,共10页
根据序列分析信息,将链霉菌FR-008中与多烯大环内酯抗生素生物合成直接有关的PKS基因簇内长2671bp的一个PKS单元以正确框架克隆于表达载体pET-15b中P(T7)启动子下游的BamHI位点上,经IPTG诱导只得到微量PKS表达。同样地克隆于pBV22...
根据序列分析信息,将链霉菌FR-008中与多烯大环内酯抗生素生物合成直接有关的PKS基因簇内长2671bp的一个PKS单元以正确框架克隆于表达载体pET-15b中P(T7)启动子下游的BamHI位点上,经IPTG诱导只得到微量PKS表达。同样地克隆于pBV220中PRPL启动子下游的PKS基因在42℃诱导后也不能超量表达出PKS蛋白。然而克隆于串联启动子PRP(T7)或PRPLP(T7)下游的PKS基因却得到了超量表达。在PRPLP(T7)下游PKS基因的超量表达依赖于IPTG及42℃两个条件的双重诱导,而42℃及IPTG单独诱导只得到常量表达。而在PRP(T7)启动子下游时PKS基因在42℃、IPTG单独诱导或42℃+IPTG双重诱导时均可获得超量表达。据此构建了启动子PR、P(T7)串联排列的表达载体pH2330。外源基因克隆于该载体起始密码子下游的多克隆位点时,表达的外源蛋白可用Ni(++)"柱亲和纯化。此外,用在大肠杆菌中表达的PKS蛋白作为抗原免疫大白兔制备了特异性的抗体,Westernblotting实验证明该抗体是PKS特异性的,可用于PKS基因簇及PKS异源表达的深入研究。
展开更多
关键词
PKS
串联启动子
抗PKS抗体
大肠杆菌
双重诱导
下载PDF
职称材料
一个可介导链霉菌PKS基因向植物转化的杂合质粒的构建
被引量:
1
2
作者
陶美凤
胡志浩
+3 位作者
周秀芬
邓子新
david a hopwood
Tobi
a
s Kieser
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第4期492-494,共3页
抗生素FR-008是由链霉菌FR-008所产生的一种七烯大环内酯类抗真菌抗生素。胡志浩等已克隆了长达约105kb的FR-008聚酮合酶(PKS)基因簇,对该基因簇中相邻于pabAB基因下游的3.8kbDNA进行序列分析,找到一个多功能聚酮合酶基因的起点,与数据...
抗生素FR-008是由链霉菌FR-008所产生的一种七烯大环内酯类抗真菌抗生素。胡志浩等已克隆了长达约105kb的FR-008聚酮合酶(PKS)基因簇,对该基因簇中相邻于pabAB基因下游的3.8kbDNA进行序列分析,找到一个多功能聚酮合酶基因的起点,与数据库中蛋白质序列的比较分析揭示出一个尚未结束的大型开读框架的存在,它与抗细菌大环内酯类抗生素-红霉素生物合成所需的Ⅰ型聚酮合酶(PKS)基因中的乙酰转移酶(AT)和β-酮酰合酶(KS)的功能结构域显示出了高度的同源性,从分子水平上证实了FR-008抗生素由Ⅰ型PKS所合成。本实验将3.8kb中的编码聚酮合酶的部分开读框架通过基因工程的方法插入植物表达载体WRG2410上,从而成功构建了表达性质粒pHZ321。
展开更多
关键词
农业生物工程
链霉菌
植物转化
PKS基因
质粒
下载PDF
职称材料
题名
一个巨大的多烯抗生素基因簇中聚酮合酶(PKS)基因单元在大肠杆菌中的双重诱导超量表达
被引量:
1
1
作者
陶美凤
胡志浩
周秀芬
周启
邓子新
Tobi
a
s KIESER
david a hopwood
机构
华中农业大学生命科技学院
John Innes Centre
出处
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1999年第6期721-730,共10页
基金
国家自然科学基金
国家教委资助
文摘
根据序列分析信息,将链霉菌FR-008中与多烯大环内酯抗生素生物合成直接有关的PKS基因簇内长2671bp的一个PKS单元以正确框架克隆于表达载体pET-15b中P(T7)启动子下游的BamHI位点上,经IPTG诱导只得到微量PKS表达。同样地克隆于pBV220中PRPL启动子下游的PKS基因在42℃诱导后也不能超量表达出PKS蛋白。然而克隆于串联启动子PRP(T7)或PRPLP(T7)下游的PKS基因却得到了超量表达。在PRPLP(T7)下游PKS基因的超量表达依赖于IPTG及42℃两个条件的双重诱导,而42℃及IPTG单独诱导只得到常量表达。而在PRP(T7)启动子下游时PKS基因在42℃、IPTG单独诱导或42℃+IPTG双重诱导时均可获得超量表达。据此构建了启动子PR、P(T7)串联排列的表达载体pH2330。外源基因克隆于该载体起始密码子下游的多克隆位点时,表达的外源蛋白可用Ni(++)"柱亲和纯化。此外,用在大肠杆菌中表达的PKS蛋白作为抗原免疫大白兔制备了特异性的抗体,Westernblotting实验证明该抗体是PKS特异性的,可用于PKS基因簇及PKS异源表达的深入研究。
关键词
PKS
串联启动子
抗PKS抗体
大肠杆菌
双重诱导
Keywords
PKS
Gene expression
PKS antibodies
分类号
TQ927 [轻工技术与工程—发酵工程]
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
一个可介导链霉菌PKS基因向植物转化的杂合质粒的构建
被引量:
1
2
作者
陶美凤
胡志浩
周秀芬
邓子新
david a hopwood
Tobi
a
s Kieser
机构
华中农业大学生命科技学院
John Innes Center
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996年第4期492-494,共3页
基金
国家科委863青年科学基金
国家自然科学基金
+2 种基金
国家教委基金
美国洛克菲勒基金
英国皇家学会资助
文摘
抗生素FR-008是由链霉菌FR-008所产生的一种七烯大环内酯类抗真菌抗生素。胡志浩等已克隆了长达约105kb的FR-008聚酮合酶(PKS)基因簇,对该基因簇中相邻于pabAB基因下游的3.8kbDNA进行序列分析,找到一个多功能聚酮合酶基因的起点,与数据库中蛋白质序列的比较分析揭示出一个尚未结束的大型开读框架的存在,它与抗细菌大环内酯类抗生素-红霉素生物合成所需的Ⅰ型聚酮合酶(PKS)基因中的乙酰转移酶(AT)和β-酮酰合酶(KS)的功能结构域显示出了高度的同源性,从分子水平上证实了FR-008抗生素由Ⅰ型PKS所合成。本实验将3.8kb中的编码聚酮合酶的部分开读框架通过基因工程的方法插入植物表达载体WRG2410上,从而成功构建了表达性质粒pHZ321。
关键词
农业生物工程
链霉菌
植物转化
PKS基因
质粒
Keywords
PKS, Streptomyces
分类号
S188 [农业科学—农业基础科学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一个巨大的多烯抗生素基因簇中聚酮合酶(PKS)基因单元在大肠杆菌中的双重诱导超量表达
陶美凤
胡志浩
周秀芬
周启
邓子新
Tobi
a
s KIESER
david a hopwood
《Acta Genetica Sinica》
SCIE
CAS
CSCD
1999
1
下载PDF
职称材料
2
一个可介导链霉菌PKS基因向植物转化的杂合质粒的构建
陶美凤
胡志浩
周秀芬
邓子新
david a hopwood
Tobi
a
s Kieser
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
1996
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部