CPSF蛋白相互作用的体外研究

目的 :研究在前体mRNA的切割与多聚腺嘌呤化中 4种CPSF蛋白间的相互作用及CPSF 73k、10 0k、16 0k与PAP的相互作用。方法 :将GST -CPSF 30k和GST -PAP结合于谷胱甘肽Sepharose基质上 ,与经网织红细胞体外翻译的CPSF 73k、10 0k、16 0k蛋白进行GST -pulldown试验。结果与讨论 :蛋白质电泳结果表明 ,4种CPSF蛋白可相互作用 ,以四聚体的形式与参与前体mR NA 3’端加工。此外 ,CPSF 73k、10 0k、16 0k也可分别与PAP相互作用 ,共同完成前体mRNA的切割与多聚腺嘌呤化。