用MTT和resazurin对一线抗结核药物进行药物敏感性检测的多中心研究

目的:多中心评价两种快速价廉方法,MTT(3-[4.5-二甲基噻唑-2-一价烃基]-2.5-溴化二苯基四唑)和resazurin(刃天青)试验用于一线抗结核药物利福平(RMP)、异烟肼(INH)、乙胺丁醇(EMB)和链霉素(SM)的药敏检测。方法:30株编过号的结核分枝杆菌被送往拉丁美洲6个国家的7个试验室。每个试验室使用盲法,应用MTT和刃天青显色法进行一线药物利福平、异烟肼,乙胺丁醇和链霉素的药敏检测。获得的最低抑菌浓度的结果与传统的罗氏培养基比例法的结果进行对比。结果:确定临界浓度后,RMP,INH和EMB的结果非常好,特异性和敏感性介于96%-99%之间。结论:MTT和刃天青试验是非常有希望的一种方法,为中等资源以及资源贫乏国家进行一线结核药物的快速、价廉药敏试验方法提供了选择。

快速培养法对结核病诊断的评价:拉丁美洲的一个多中心研究

地点:拉丁美洲的结核病(TB)诊断实验室。目的:薄层琼脂(thin-layer agar,TLA)和罗氏培养(Lowenstein-Jensen,LJ)对结核病诊断的对比评价。设计:6个实验室Ⅱ期前瞻性研究。临床诊断的TB病人样本包括痰标本和肺外结核的标本。呼吸道标本用NaOH／NALC去污;根据推荐的操作程序对所有标本进行离心,萋尼氏法进行抗酸菌(AFB)染色,用LJ和TLA法培养检查。计算两种培养基的敏感度和似然比、生长检测时间和污染率。结果:总共研究了1118份临床标本。所有AFB阳性标本培养后均检出结核分枝杆菌,AFB阴性标本中,LJ检出率为3．2％,TLA为4．4％。TLA和LJ的敏感性分别为92．6％(95％CI:87．9-95．9)和84．7％(95％CI:78．8-89．0)。阳性和阴性LR相似。TLA和LJ的污染率分别为5．1％和3．0％。TLA和LJ对培养阳性的检出平均时间分别为11．5天(95％CI: 9．3-15．0)和30．5天(95％CI:26．9-39．0)(P<0．0001)。结论:参加研究实验室的不同特点、疾病流行情况和标本处理的不同并不影响TLA和LJ的总体效果,建议不同实验室使用这种方法,因它具有可靠性和可行性。

波兰肺结核患者耐药结核分枝杆菌分子流行病学研究

目的:描述波兰耐药结核分枝杆菌分离株的特征,估计人群中近期传播的数量。设计:应用间隔区寡核苷酸分型及 IS6110DNA 指纹图谱法对2000年波兰251名耐药肺结核患者分离株进行分析。对部分菌株进行 rpoB、katG 和/或 inhA基因调节区测序分析。结果:应用间隔区寡核苷酸分型/IS6110-RFLP 相结合的成簇定义,29%的菌株成簇,提示存在近期传播。成簇菌株中某些病例的传播联系得到了流行病学资料证实,多数分离株的突变与利福平和异烟肼耐药相关。年龄、性别、移民身份、用药史和成簇没有关系,耐多药病例更容易成簇。在波兰,也发现了北京基因型分离株,但频率较邻国偏低。结论:证实了耐药结核菌的传播及其对波兰发生耐药结核病的作用。

卢旺达复发结核病的分子学研究

背景:入选病例为来自卢旺达4个省市的肺结核(TB)病人。目的:确定复发TB的原因。方法:分离2002年1月—2005年9月复发TB的一系列结核分枝杆菌菌株,进行spoligotyping(间隔区寡核苷酸分型法)和MIRU-VNTR(数目可变的串联重复序列和结核分枝杆菌散在分布重复单位)基因型分析。通过表型药敏检测和rpoB、katG、inhA、embB基因的测序来确定耐药状态。结果:纳入研究的710例痰培养阳性的TB病人中,638例获得初次发病的药敏结果,其中69例为耐多药结核(MDR-TB),569例为非MDR- TB。在MDR-TB病人中,22例得到多株分离株,其中12例为治愈后复发,10例为迁延不愈。12例治愈后复发的病人中,4例病人前后分离株的DNA指纹型不同,说明为再感染,其余8例及10例慢性病人的前后分离株DNA指纹型相同,复发原因分别为复燃和治疗失败导致。非MDR-TB病人中,1例复发,复发原因为初发时混合克隆感染的单克隆复燃。结论:上述结果说明MDR-TB的治疗失败率/复燃率均很高,依此推测2年以内的再感染并不是本地区复发TB的普遍原因。

贝宁-科托努地区初治和复治肺结核患者抗结核药物耐药研究

目的:评估贝宁最大的结核病中心科托努地区目前抗结核药物的耐药形势。方法:共计分析从肺结核患者分离出的470株结核分枝杆菌复合群:其中244株来自新病人, 226株来自复治病人。使用比例法对分离菌株进行一线药物的敏感性试验。结果:原发耐多药情况与患者的来源有关:若分析所有的患者,则新病人中耐多药相对较高(1.6%);若仅考虑贝宁常住人口,该比例则较低(0.5%),并与1994年国家的耐药监测结果比较。复治患者的耐多药率(11.1%),也与贝宁1994年的耐药监测结果持平。没有发现合并感染人类免疫缺陷病毒与抗结核药物的耐药性相关。结论:本研究表明在流行病学调查中正确的区分患者的重要性,研究人口不同,结果就可能不相同。