离体培养的成年小鼠嗅上皮干细胞的增殖和自我更新

用离体培养法观察bFGF对成年小鼠嗅上皮中的具有多种潜能的未分化细胞的作用。实验显示 :bFGF能导致这些细胞在数量上不断增加 ,形成能自我更新的未分化细胞群 ;离开未分化细胞群的一些细胞则分化成神经元和胶质细胞。免疫组化反应显示这些未分化细胞表达nestin———存在于神经上皮干细胞的一种中丝蛋白 (一种神经元标记物 )。由此证明 ,具有多种潜能并有干细胞特征的未分化细胞存在于成年小鼠嗅上皮中。用免疫印迹技术 ,硫酸锌原位创伤能使嗅上皮中神经元特有微管蛋白 (neuron specifictubulin ,NST)和神经元特异醇化酶 (neuron specificenolase ,NSE)表达增加 ,硫酸锌创伤又是离体培养嗅上皮得以成功的主要因素。结果表明 ,许多因素导致了成年小鼠嗅上皮中干细胞离体培养时增殖和自我更新。

bFGF与BDNF对损伤后成年小鼠离体培养嗅觉上皮细胞发育的影响

在成熟神经系统中 ,嗅觉上皮 (OE)很特殊 ,它能不断产生新的神经元。本文用细胞培养、组织化学和免疫细胞化学技术对成年小鼠的OE进行了研究。实验显示 :双极细胞NF、NSE、MAP2、OMP和tau蛋白免疫染色为阳性 ,但keratin免疫染色为阴性 ,说明双极细胞是神经元。用不同浓度血清的培养基 ,离体培养成年小鼠的OE ,观察碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和脑源神经营养因子 (BDNF)对OE细胞数量和突起发育的影响。结果显示 :将bFGF与BDNF的组合分别加到 10 %和 5 %血清的OE培养基 (OEM)中 ,增加了双极细胞的数量和比例 ,刺激了双极细胞突起的发育 ,减少了大细胞和梭形细胞。这种组合的效果比bFGF或BDNF单独作用好。在 10 %血清的OEM中 ,神经营养因子的效果比在 5 %血清的OEM中好。