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猫杯状病毒反向遗传系统的建立及弱毒株的构建
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作者 于雯 孙慧敏 +2 位作者 方晨捷 宋家升 鲍恩东 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第5期107-112,共6页
为了构建猫杯状病毒(FCV)弱毒疫苗候选株,从杭州流行的FCV毒株FCV-HZ-DF-19中提取基因组RNA,利用RT-PCR技术分3段扩增获得FCV全基因组,通过同源重组的方法将全长基因组克隆至已插入榔头状核酶(HamRz)和丁型肝炎核酶(HdvRz)的PCI载体,获... 为了构建猫杯状病毒(FCV)弱毒疫苗候选株,从杭州流行的FCV毒株FCV-HZ-DF-19中提取基因组RNA,利用RT-PCR技术分3段扩增获得FCV全基因组,通过同源重组的方法将全长基因组克隆至已插入榔头状核酶(HamRz)和丁型肝炎核酶(HdvRz)的PCI载体,获得中间质粒pPCI-FCV;以pPCI-FCV为模板扩增获得含HamRz、HdvRz和FCV全基因组的产物FCV-H,并将其连接到BAC载体中获得含有FCV全基因组的克隆pBAC-FCV。将pBAC-FCV转染猫肾细胞F81连续传代后收获病毒。针对FCV毒力相关的LC基因进行缺失,获得感染性克隆pBAC-FCV-ΔLC,通过转染表达FCV-VP1蛋白的猫肾细胞系进行病毒拯救。结果显示,拯救毒株rBAC-FCV和LC基因缺失毒株rBAC-FCV-ΔLC均可产生细胞病变;测序结果表明,拯救毒株的基因序列与亲本毒株FCV-HZ-DF-19一致,且生长曲线与亲本毒相似,而基因缺失毒株的生长则慢于亲本毒株,产生的噬斑大小也明显小于亲本毒株,表明缺失LC基因后病毒毒力下降。结论:本研究成功构建了FCV的反向遗传系统及基因缺失弱毒株,为后续弱毒疫苗研发和FCV生物学特性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 反向遗传学技术 同源重组 基因缺失
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免疫抑制剂他克莫司研究进展 被引量:7
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作者 金美英 方晨捷 +3 位作者 陈燏 张博 刘平 柳志强 《发酵科技通讯》 CAS 2020年第1期37-43,57,共8页
他克莫司是一种从筑波链霉菌(Streptomyces tsukubaenis)发酵产物中分离得到的23元大环内酯类抗生素,临床上主要作为治疗器官移植后排斥反应的免疫抑制剂。介绍了他克莫司的药物动力学和药效学、理化性质、免疫抑制机制及其生物合成的... 他克莫司是一种从筑波链霉菌(Streptomyces tsukubaenis)发酵产物中分离得到的23元大环内酯类抗生素,临床上主要作为治疗器官移植后排斥反应的免疫抑制剂。介绍了他克莫司的药物动力学和药效学、理化性质、免疫抑制机制及其生物合成的研究进展。随着他克莫司的合成基因簇的阐释及其代谢途径的解析,运用基因工程和代谢工程手段对其进行的研究逐渐增加。由于其在临床治疗中具有重要地位,使得他克莫司产业的发展具有显著的社会效益和经济价值。 展开更多
关键词 他克莫司 筑波链霉菌 免疫抑制 合成基因簇 代谢途径
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提高白藜芦醇含量方法的研究进展 被引量:2
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作者 李庆林 方辰杰 +3 位作者 张永辰 亓畅 夏杨荣畅 黄家权 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1717-1722,共6页
白藜芦醇以其抑制脂质过氧化、调节抗氧化相关酶活性以及抗菌抗炎的生物学功能和天然、无毒副作用的特点引起了人们的广泛关注。本综述在详细介绍白藜芦醇的理化性质、生物学活性及其在植物体内的生物合成和调控过程的基础上,总结并分... 白藜芦醇以其抑制脂质过氧化、调节抗氧化相关酶活性以及抗菌抗炎的生物学功能和天然、无毒副作用的特点引起了人们的广泛关注。本综述在详细介绍白藜芦醇的理化性质、生物学活性及其在植物体内的生物合成和调控过程的基础上,总结并分析了外源因子对白藜芦醇的影响,其中主要包括物理因子,化学因子等非生物胁迫的方法以及霉类生物的接种感染的生物学方法,且提出了白藜芦醇未来研究的方法和方向,以及白藜芦醇合成工艺中存在的不足,以期为将来白藜芦醇合成工艺的改进与创新及其商业化开发提供经验借鉴。 展开更多
关键词 白藜芦醇 生物学功能 合成调控 抗氧化 生物诱导
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Chemical approaches for mimicking logic functions within fluorescent MPT dyes
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作者 XU ChunHu SUN Wei +5 位作者 ZHANG Chao BAI YanChun fang chenjie LI WenTao HUANG YanYi YAN ChunHua 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2009年第6期700-714,共15页
The progress of the design, synthesis, fluorescence properties and application of a new family of fluorescent molecular switches towards information processing at the molecular level was reviewed. On the basis of the ... The progress of the design, synthesis, fluorescence properties and application of a new family of fluorescent molecular switches towards information processing at the molecular level was reviewed. On the basis of the high fluorescence quantum yields and surroundings-sensitive fluorescent properties of the 5-methoxy-2-(2-pyridyl)-thiazole (2-MPT, 1) and a series of its derivatives as prepared, multiple binary logic and arithmetic functionalities were realized through encoding the controllable fluorescence switching properties with binary digit. Combined with the microfluidic platform, the fabrication of the molecular logic devices was attempted. 展开更多
关键词 5-methoxy-2-(2-pyridyl)-thiazole (2-MPT) surroundings-sensitive fluorescence properties logic and arithmetic FUNCTIONALITIES
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