lncRNA RRAS2-AS1在LPS诱导奶牛乳腺上皮细胞炎症中的功能

【背景】奶牛乳腺炎是奶牛中危害最严重的疾病之一,严重影响乳品质,不仅造成经济损失,甚至危及人类健康。已有研究表明,lncRNAs广泛参与人和动物的炎症和免疫调节。lncRNA RRAS2-AS1是我们在前期研究中新发现的差异表达lncRNA,其表达模式和功能尚不清楚。【目的】通过探究lncRNA RRAS2-AS1在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)炎症反应中的作用机制,为奶牛乳腺炎的分子调控机制解析和抗乳腺炎分子选育提供理论依据。【方法】利用RT-PCR和RACE等技术进行了lncRNA RRAS2-AS1的克隆,并通过生物信息学方法进行lncRNA RRAS2-AS1的靶基因预测及功能富集分析;利用细胞免疫荧光技术鉴定bMECs,利用细胞核质分离及半定量PCR技术检测了lncRNA RRAS2-AS1的亚细胞定位情况;采用qRT-PCR检测了lncRNA RRAS2-AS1在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导bMECs炎症反应和乳腺炎奶牛乳腺组织中的表达模式;利用LPS诱导bMECs构建了炎症细胞模型,在此基础上,通过lncRNA超表达、qRT-PCR和ELISA等技术研究了lncRNA RRAS2-AS1对炎性bMECs内的促炎细胞因子基因、增殖相关基因和凋亡相关基因在mRNA和(或)蛋白质水平表达的影响,同时采用EdU、CCK-8和流式细胞术进一步验证了lncRNA RRAS2-AS1对bMECs增殖、活力和凋亡的影响。【结果】lncRNA RRAS2-AS1基因的长度为363 bp,主要定位于细胞质中。表达量检测结果表明,与对照组相比,lncRNA RRAS2-AS1在LPS诱导炎症的bMECs和乳腺炎组织中的表达量显著下调(P<0.05);lncRNA RRAS2-AS1超表达试验结果表明,与对照组相比,lncRNA RRAS2-AS1超表达组的炎症信号通路关键基因(TLR4和NF-κB1)、促炎细胞因子基因(IL-1β、IL-6和IL-8)、促凋亡基因(BAD、CASP3和BAX等)的表达量显著下调(P<0.01),而增殖标志基因(CDK2、CDK4和PCNA)的表达量显著上调(P<0.05)。此外,lncRNA RRAS2-AS1超表达组的细胞活力显著增加(P<0.05),而bMECs的凋亡率极显著降低(P<0.01)。【结论】lncRNA RRAS2-AS1在LPS诱导bMECs的炎症反应和乳腺炎奶牛的乳腺组织中均显著下调;超表达lncRNA RRAS2-AS1可下调促炎细胞因子IL-6、IL-8和IL-1β在mRNA和蛋白质水平的表达,并促进细胞活力和增殖、抑制细胞凋亡,从而减轻LPS诱导的bMECs炎症反应,该结果可为解析奶牛乳腺炎的分子调控网络奠定了基础。

肌苷注射液联合胺碘酮治疗老年心力衰竭合并心房颤动的临床研究

目的:探讨肌苷注射液联合胺碘酮对老年心力衰竭合并心房颤动血清氨基末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)的影响。方法:选择2020年4月至2022年4月河南省安阳市第六人民医院收治的86例心力衰竭合并心房颤动患者,按随机对照原则分组。对照组(43例)给予胺碘酮治疗,研究组(43例)在对照组基础上联合肌苷注射液治疗。于治疗8周后评估两组疗效,对比两组治疗前后心功能指标[左室射血分数(LVEF)、心脏指数(CI)、左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVESd)水平]、心肌损伤指标[肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平]、血清指标[NT-proBNP、可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)水平]、统计不良反应。结果:治疗总有效率相比(95.35%vs 79.07%),研究组较高(P<0.05)。两组治疗后LVEF、CI水平升高,LVEDd、LVESd水平降低(P<0.05);研究组治疗后LVEF、CI水平比对照组高,LVEDd、LVESd水平比对照组低(P<0.05)。两组治疗后NT-proBNP水平降低,sST2水平升高(P<0.05);研究组治疗后NT-proBNP水平比对照低,sST2水平比对照组高(P<0.05)。两组治疗后cTnⅠ、CK-MB、LDH水平降低(P<0.05);研究组治疗后cTnⅠ、CK-MB、LDH水平比对照组低(P<0.05)。不良反应发生率相比(9.30%vs 13.95%),两组相当(P>0.05)。结论:肌苷注射液联合胺碘酮应用于老年心力衰竭合并心房颤动患者的治疗中效果显著,可改善心功能,减轻心肌损伤,改善血清NT-proBNP、sST2水平。

多学科协作团队指导对出院肺结核患者的干预效果研究

目的:分析多学科协作团队(MDT)指导对出院肺结核患者用药依从性、满意度和生活质量的干预效果。方法:选取2018年3月—2019年7月绵竹市人民医院收治的81例肺结核患者作为研究对象,采用随机数字表法分为试验组(n=40)与对照组(n=41)。对照组行结核门诊常规随访,试验组行MDT模式。比较两组用药依从性、患者满意度和生活质量评分。结果:干预后,两组患者依从性评分均升高,试验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后,两组患者满意度评分均升高,试验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后,两组患者生理机能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能和精神健康评分均升高,试验组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对出院肺结核患者行MDT指导可以改善患者生活质量、加强用药依从性,并提高患者对医护人员的满意度,值得临床推广。

黄精多糖对糖尿病肾病大鼠血糖及肾功能的影响

文章旨在探究黄精多糖对糖尿病肾病大鼠血糖及肾功能的影响。将大鼠随机分为空白组和模型组,后者采用高糖高脂饮食,并用链脲佐菌素腹腔注射,建立糖尿病肾病大鼠模型。将成模大鼠随机分为阳性组,黄精多糖低、中、高剂量组和二甲双胍组。空白组和阳性组每日用0.9%的氯化钠溶液灌胃,其他组用相应药物灌胃,共8周。用药期间,监测大鼠一般情况及空腹血糖,末次用药后检测24 h尿蛋白、血尿素氮、肌酐。研究发现,相较于阳性组,黄精多糖中、高剂量组大鼠体质量增加(P<0.05),空腹血糖、24 h尿蛋白量、血尿素氮、肌酐均降低(P<0.05),且高剂量组的作用显著强于低剂量组(P<0.05)。结果表明,黄精多糖能降低糖尿病肾病大鼠的空腹血糖,改善肾功能。

双指数模型DWI对宫颈癌分期及分级诊断的价值

目的:探讨双指数模型DWI在宫颈癌分期、分级诊断中的应用价值。方法:对经手术病理证实的65例宫颈癌患者的临床影像学资料进行回顾分析,就表观扩散系数(ADC)、慢速表观扩散系数(ADC_(slow))、快速表观扩散系数(ADC_(fast))、快速扩散成分所占比(F_(fast))等单指数模型及双指数模型DWI参数在宫颈癌分期、分级中的差异进行比较。结果:65例宫颈癌中,Ⅱa期以上出现宫旁浸润患者的ADC_(slow)及ADC均小于Ⅱa期及以下无宫旁浸润患者(包括Ⅱa期),差异具有统计学意义(P<0.05)。ADC_(fast)及F_(fast)均高于非浸润组,差异无统计学意义(P>0.05)。宫颈高分化鳞癌或腺癌的ADC_(slow)及ADC均高于中、低分化鳞癌或腺癌,差异均具有统计学意义(P<0.05)。而各种级别宫颈鳞癌或腺癌的ADC_(fast)、F_(fast)均无明显差异。ROC曲线分析显示ADC_(slow)在宫颈癌分期、分级诊断中效能最高。结论:ADC_(slow)有助于评估宫颈癌的分期与分级。

中药溃疡油对大鼠化疗外渗性损伤创面组织VEGF、EGF、bFGF表达的影响

目的:探究中药溃疡油促进大鼠化疗外渗性损伤创面的愈合机制。方法:将80只吡柔比星外渗性皮肤损伤模型大鼠随机分成实验组和对照组各40只。实验组采用中药溃疡油涂抹,对照组用0.9%氯化钠注射液涂抹,每日外敷给药2次,化疗外渗性皮肤损伤敷药后第2、6、10、18、24天各处死大鼠8只,分别以放射免疫法测量外渗性皮炎组织中血管内皮生长因子(VEGF)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的水平。结果:实验组大鼠的外渗性损伤创面组织中VEGF、EGF、bFGF水平在敷药后第2、6、10、18、24天均显著高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:中药溃疡油可显著减轻外渗性创面的损伤,减少微血管渗透性、减轻血管炎症反应和组织水肿的作用可能是通过增加创面组织VEGF、EGF、bFGF的表达来实现,推测可能是中药溃疡油治疗化疗外渗性损伤有效的重要机制之一。

基于扶阳抑阴理论运用吴氏长蛇灸治疗CFS患者轻度抑郁状态的临床研究

目的:客观评价吴氏长蛇灸对脾肾两虚型慢性疲劳综合症(CFS)患者抑郁状态的改善情况,为扶阳抑阴理论在抑郁症中的治疗提供临床证据。方法:采用中央随机,将符合纳入标准的CFS患者随机分为吴氏长蛇灸结合针刺组(n=51)和单纯针刺组(n=61)。治疗频率为3次/周,连续治疗8周。治疗前及结束时,将抑郁自评量表(self-rating depression scale,SDS)评分53分以上的CFS患者进行SDS量表积分、疗效自评及脾肾两虚中医证候积分评价。结果:吴氏长蛇灸结合针刺能有效改善CFS患者疲乏、抑郁(P=0.003)及中医证候症状(P=0.001),且相对于单纯使用针刺,吴氏长蛇灸结合针刺在改善轻度抑郁方面有优势(P=0.021)。结论:在相同治疗期待值下,吴氏长蛇灸能有效改善CFS伴轻度抑郁状态患者的疲劳及抑郁状态,说明扶阳抑阴思想应贯穿在抑郁症治疗始终。

中药熏洗联合奥司他韦治疗流行性感冒的临床观察

【目的】观察中药疏风退热散足浴熏洗联合口服奥司他韦胶囊对流行性感冒(简称流感)的治疗效果。【方法】将符合纳入标准的105例流感患者随机分为治疗组53例和对照组52例。对照组给予口服奥司他韦胶囊治疗,治疗组在对照组的基础上加用中药疏风退热散足浴熏洗治疗,疗程为5 d。观察2组患者治疗前后体温变化趋势和流感症状的缓解情况,评价2组患者的临床疗效。【结果】(1)疗效方面:治疗5 d后,治疗组的总有效率为96.2%,对照组为90.4%,治疗组的总体疗效明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)体温变化方面:72 h内,治疗组患者的体温下降幅度总体上优于对照组。(3)流感症状缓解方面:治疗后,治疗组患者的症状积分差值高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),表明治疗组对恶寒、发热、咳嗽、鼻塞、流涕等流感症状的缓解作用优于对照组。【结论】使用中药疏风退热散局部熏洗联合口服奥司他韦胶囊治疗流感,疗效确切,相比于单纯口服奥司他韦胶囊治疗,能更有效地降低患者体温,改善患者恶寒、发热、咳嗽、鼻塞等流感症状。

基于微信公众号的中医护理健康指导在原发性失眠患者中的应用

目的:探讨基于微信公众号的中医护理健康指导对原发性失眠患者的睡眠质量、焦虑及抑郁状况的改善效果。方法:选取2019年1月至2020年1月于成都市某三甲医院就诊的原发性失眠患者90例,随机分为两组,各45例。对照组实施常规线下中医护理干预,试验组进行基于微信公众号的线上中医护理干预,两组干预时间均为8周。结果:干预后,试验组匹兹堡睡眠质量指数、焦虑自评量表、抑郁自评量表得分均低于对照组(P<0.01)。结论:基于微信公众号的中医特色护理便捷可行,可提高原发性失眠患者的睡眠质量,缓解焦虑及抑郁状况。

中医体质与体检指标关联性研究

该文采用文献查阅法,通过查阅分析其他学者对中医体质与体检指标关联性的研究现状,总结出中医体质与部分体检指标存在一定的关联性,为下一步全面研究中医体质与体检指标关联性指明道路,为中医治未病事业添砖加瓦。

针刺疗法治疗脑卒中后认知功能障碍的临床研究及作用机制进展

脑卒中在我国发病率较高,可导致患者肢体运动、认知、语言等多个系统发生损害,其中认知功能障碍是其常见的临床后遗症。针刺疗法为临床治疗脑卒中后脑认知功能障碍的有效传统中医疗法之一,其临床疗效确切,亦有大量有关作用机制的研究。该文就近年采用针刺疗法治疗脑卒中后认知功能障碍的相关临床及机制研究进行简要综述,为今后临床治疗该病提供更多实用新疗法及参考依据。

冷端冷却方式对聚光光伏热电耦合系统的影响

聚光光伏热电耦合系统(CPV-TE)通过聚光增大光照强度,提升热电模块两侧的温差进而提高热电效率,但聚光同时也带来光伏电池温度过高等问题。提高冷端换热能力是降低光伏温度,提升热电冷热端温差的有效手段。研究了不同光强下,冷端冷却温度、冷却水流速以及不同冷却介质对CPV-TE的影响。研究发现降低冷却水温度和提高介质流速,不仅降低光伏电池温度、提高光电转化效率,而且增大热电模块两侧的温差提高热电效率。采用MWCNT-水纳米流体作为换热介质,可以进一步提升冷却效果进而提高系统整体输出。

绵羊NRCAM基因的生物信息学分析

利用生物基因组学数据库,对绵羊神经原相关的细胞粘附分子基因(neuro-related celladhesion molecule,NRCAM)进行生物信息学分析,以初步了解其结构并对其编码的蛋白质的功能进行预测。结果表明,绵羊NRCAM基因含有1个最大长度为3648 bp的开放阅读框,编码1215个氨基酸残基。NRCAM基因编码产物的分子质量为134367.13 KDa,理论等电点为5.49。亚细胞定位主要位于细胞质(26.1%),属于分泌蛋白,且存在信号肽序列。存在5段IGc2区、1段IG区,1段低复杂性区域以及4段FN3区,且有1段跨膜结构;二级结构以无规卷曲和β折叠为主,三级结构主要由无规卷曲和β折叠缠绕形成。

大肠杆菌型奶牛乳房炎对产奶性状相关基因表达的影响

旨为从基因水平上探究大肠杆菌(Escherichia coli)型乳房炎奶牛的产奶量和乳品质下降的原因。本实验利用脂多糖(LPS)诱导乳腺上皮细胞(bMECs)建立细胞炎症模型,并采用实时荧光定量PCR技术检测了奶牛产奶量与乳蛋白相关基因(CSN1S1、CSN2和LALBA)、乳脂调控相关基因(FABP3和LPL)以及炎症与产奶量相关基因MFGE8在奶牛乳腺组织和bMECs炎症反应中的表达量。结果表明,与对照组(0 h)相比,上述6个基因在E.coli型乳房炎奶牛的乳腺组织中表达量均极显著下调(P<0.01)。此外,上述6个基因在LPS诱导bMECs产生炎症反应的3、6、12和24 h的bMECs中表达量也均极显著下调(P<0.01)。在E.coli型奶牛乳房炎发生或bMECs产生炎症后,上述6个基因的表达水平均受到抑制,解释了E.coli型乳房炎导致产奶量减少、乳蛋白率和乳脂率下降的原因。

黄连素对2型糖尿病大鼠胸主动脉PI3K/Akt/eNOS信号通路的影响

目的观察黄连素对糖尿病大鼠糖、脂代谢及胸主动脉PI3K/Akt/eNOS信号通路的影响,探讨黄连素对糖尿病大血管保护作用的可能机制。方法将60只SD大鼠随机分为正常组(n=10)和实验组(n=50),实验组通过腹腔注射链脲佐菌素,结合高糖高脂饲料喂养的方式建立2型糖尿病大鼠模型。将糖尿病大鼠随机分为模型组(n=10)、二甲双胍组(n=10)和黄连素组(n=10)。二甲双胍组、黄连素组分别给予二甲双胍、黄连素灌胃,其余两组采用生理盐水灌胃。8周后取血检测空腹血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)及一氧化氮(NO)水平;HE染色观察大鼠胸主动脉形态;Western blotting检测胸主动脉p-PI3K-p85、p-Akt、p-eNOS等蛋白水平。结果模型组、黄连素组及二甲双胍组的FBG、TC、TG、LDL-c水平高于正常组,HDL-c、NO水平及胸主动脉p-PI3K-p85、p-Akt、p-eNOS的表达低于正常组,差异有统计学意义(P<0.01)。黄连素组及二甲双胍组的FBG、TC、TG、LDL-c水平低于模型组,HDL-c、NO水平及胸主动脉p-PI3K-p85、p-Akt、p-eNOS的表达高于模型组,差异有统计学意义(P<0.01)。黄连素组及二甲双胍组大血管内皮病变程度轻于模型组。结论黄连素对糖尿病大鼠大血管的保护作用可能与改善糖、脂代谢和激活PI3K/Akt/eNOS信号通路有关。

脯氨酰寡肽酶功能及抑制剂研究进展

脯氨酰寡肽酶(prolyl oligopeptidase,POP)又称为脯氨酰内肽酶,是一种脯氨酸后切割酶,主要存在于细胞质中,负责短神经肽和肽激素的成熟和降解,与神经相关性疾病密切相关。POP的活性位点位于三联体催化结构域和β-螺旋桨结构域的界面。POP抑制剂具有神经保护、抗遗忘和增强认知的特性,同时对肿瘤、高血压等也有一定的治疗作用。本文就POP的功能、作用机制及其抑制剂的研究作一综述。

牛CAMK4基因的编码区克隆、组织表达谱及其生物信息学分析

【目的】旨在进行牛钙调蛋白依赖性蛋白激酶4(Calmodulin-dependent protein kinase 4,CAMK4)基因编码区(Coding sequence,CDS)的克隆、CAMK4蛋白的功能预测分析及CAMK4基因在西门塔尔牛各组织中的组织表达谱分析。【方法】采用RT-PCR结合测序技术获得牛CAMK4基因的CDS区,利用PortParam、ProtScale、SOPMA和DNAMAN等生物信息学在线工具进行CAMK4基因及其所编码蛋白质的序列分析,并利用qRT-PCR检测CAMK4基因在西门塔尔牛的心、肝、脾、肺、肾、肌肉和睾丸组织中的表达量。【结果】牛CAMK4基因CDS区的长度为801 bp,编码1条266个氨基酸组成的不稳定且无跨膜结构域的亲水的酸性蛋白质。牛CAMK4蛋白存在丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)和酪氨酸(Tyr)残基的19个磷酸化位点,主要在细胞质中发挥作用。该蛋白质含有1个蛋白激酶C超家族(PKc_like superfamily)结构域和1个尿嘧啶DNA糖基化酶(PHA03201)结构域,同时,蛋白互作网络预测发现CAMK4蛋白可能与HDAC5、HDAC4、CAMKK1、CALM、CREB1、CALM2、PLCG2、CAMKK2、CALML3和CALML5蛋白有相互作用。CAMK4基因在西门塔尔牛睾丸组织中的表达量极显著高于心、肝、脾、肺、肾和肌肉组织。结合生物信息学分析结果,提示CAMK4基因可能参与调控细胞周期和免疫反应,并在精子发生及运动、精原干细胞自我更新等生物学过程发挥重要作用。【结论】本研究为进一步揭示牛CAMK4基因的功能和促进高繁殖力肉牛分子育种技术的研发提供基础资料。

黄连素与葛根素联合应用对糖尿病大鼠血糖和血脂的影响

目的探究黄连素(berberine)、葛根素(puerarin)联合应用对糖尿病大鼠血糖、血脂的影响。方法将大鼠随机分为正常对照组和造模组。造模组采用高脂高糖饲料喂养结合链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病大鼠模型。将造模成功的糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组、二甲双胍组、黄连素组、葛根素组、黄连素+葛根素组。正常对照组和糖尿病对照组给予生理盐水灌胃,其余各组以相应的药物灌胃,共8周。给药期间监测大鼠的一般情况,8周后取血检测大鼠的空腹血糖(FBG)、糖耐量及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平。结果与正常对照组比较,其余各组的FBG、糖耐量各时段的血糖值,TG,TC,LDL-C水平升高,HDL-C水平降低(P<0.01);与糖尿病对照组比较,二甲双胍组、黄连素组、葛根素组、黄连素+葛根素组的FBG、糖耐量各时段的血糖值,TG,TC,LDL-C水平降低,HDL-C水平升高(P<0.05);与黄连素组、葛根素组比较,黄连素+葛根素组的FBG、糖耐量各时段的血糖值,TG,TC,LDL-C水平降低,HDL-C水平升高(P<0.05)。结论黄连素与葛根素联合应用能降低糖尿病大鼠空腹血糖、改善糖耐量和血脂异常,其效果优于两药单独应用。

黄连素对2型糖尿病大鼠大血管病变PI3K/Akt信号通路的影响

目的探讨黄连素对糖尿病大鼠大血管保护作用的可能机制。方法以高脂高糖饲料喂养结合链脲佐菌素小剂量腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠模型,将大鼠随机分为正常组、模型组、黄连素组和二甲双胍组。黄连素组、二甲双胍组分别给予黄连素、二甲双胍灌胃,其余两组给予生理盐水灌胃。8周后观察大鼠胸主动脉形态,检测大鼠空腹血糖、血清C反应蛋白(CRP)水平,用免疫印迹法检测胸主动脉p-PI3Kp85、p-Akt的表达情况。结果黄连素能减轻糖尿病模型大鼠大血管内皮病变程度,降低糖尿病大鼠空腹血糖、血清CRP水平,提高大鼠胸主动脉p-PI3Kp85、p-Akt的表达量(P<0.01)。结论黄连素对糖尿病大鼠大血管病变的防治作用与PI3K/Akt信号通路有关。

针灸治疗轻度认知功能障碍的研究进展

轻度认知功能障碍(Mild cognitive impairment,MCI)是指一种处在正常的老化和轻度痴呆间的过渡状态,能够进一步进展为阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD),被认为是AD痴呆的前期。不少研究显示,针灸对改善MCI患者认知功能,尤其是提高记忆力,有明显的临床疗效,已经成为治疗MCI的重要疗法之一。