基于N和G蛋白的HeV抗体间接ELISA检测方法的建立

为了建立亨德拉病毒(HeV)抗体的间接ELISA检测方法,人工合成HeV的N和G基因,并将其分别连接到原核表达载体PET-30a,经IPTG诱导、变复性处理及纯化后获得表达蛋白,免疫健康马获得阳性血清,用矩阵法对蛋白包被浓度和一抗稀释倍数进行确定,优化包被时间、封闭剂以及孵育时间等技术参数,并对建立方法的灵敏性、特异性、重复性和准确性进行评估。经SDS-PAGE和Western blot验证,N和G两个蛋白均实现高效表达,间接ELISA方法中二者的最佳包被浓度分别为10μg/mL和8μg/mL,一抗血清的稀释倍数为1∶800,优化后的最佳反应条件为:N蛋白4℃包被过夜,5%脱脂奶粉37℃封闭2 h,一抗孵育时间30 min,二抗按1∶8000稀释后37℃作用60 min;G蛋白4℃包被过夜,2%BSA 37℃封闭2 h,一抗孵育时间80 min,二抗按1∶8000稀释后37℃作用80 min。结果表明,所建方法N蛋白的灵敏性大于1∶12800,G蛋白大于1∶6400,二者的临界值分别为0.235和0.267,特异性良好,批内、批间变异系数均小于10%,重复性良好,二者ROC曲线下面积分别为0.91和0.93,准确性高。试验结果可为海关、口岸以及出入境检验检疫等部门HeV临床血清学诊断提供技术支撑。

鼻咽癌再程放疗计划时腮腺体积和CT值的变化

目的研究鼻咽癌放射治疗20次后进行再程计划时腮腺体积及CT值的变化.方法选择昆明医科大学第一附属医院肿瘤放疗2016年11月至2017年6月期间治疗的14例鼻咽癌放射患者,每例患者均在治疗20次后再次进行定位CT扫描作再程计划.对比治疗前CT和再程计划CT中腮腺体积及腮腺CT值的变化.以脑干的体积和CT值变化作为参照,采用SPSS对结果作配对t检验统计分析,有统计学意义(P<0.05).结果 14例患者右侧腮腺治疗前和再程计划(治疗20次后)、CT值标准差的平均值为26.5和35.6(P=0.04)、体积的平均值分别为24.6 cm3和16.1 cm3(P=0.002).左侧腮腺治疗前和再程计划CT值平均值分别为4.4和-1.8(P=0.024)、CT值标准差的平均值为29.7和35.5(P=0.026)、体积的平均值分别为24.1 cm3和16.7 cm3(P=0.001).脑干治疗前和再程计划CT33.6和32.3(P=0.09)、CT值标准差的平均值为11.9和11.3(P=0.58)、脑干体积的平均值分别为28.7 cm3和28.9 cm3(P=0.887).结论左右腮腺体积照射20次后均明显缩小,腮腺CT值的平均值明显降低,标准差明显增大;脑干体积、CT值的平均值及标准差均无明显变化.CT值变化可作为目前鼻咽癌临床放疗再程计划和未来自适应计划的一个新的参考数据.

钱塘江下切河谷SE2孔全新世沉积物黏土矿物特征及其意义

通过X射线衍射系统分析了杭州湾地区SE2孔全新世沉积物的黏土矿物组成,结果显示研究层段黏土矿物主要由伊利石、绿泥石、高岭石和蒙脱石组成;伊利石结晶度较好,化学风化指数普遍大于0.5,表明以化学风化为主,且风化趋势自下而上呈递减趋势。通过对比中国东南部主要河流沉积物的黏土矿物组成,认为钱塘江下切河谷全新世沉积物的黏土矿物组成具有较好的物源指示意义:全新世Ⅰ段(即古河口湾和河漫滩)沉积物主要来自钱塘江上游,特征黏土矿物为高岭石,河口外物质贡献不大;Ⅱ段(即现代河口湾和近岸浅海)沉积物包含较多蒙脱石,表明不仅包括钱塘江上游物质,河口外长江物质也开始进入钱塘江河口。黏土矿物中,高岭石对气候有较好的指示作用:中全新世高岭石含量达到最高值,反映气候最为湿热,化学风化程度最高;晚全新世含量逐渐降低,反映气候逐渐回冷,化学风化强度降低。

高压GaN隔离栅驱动技术设计考虑

GaN晶体管相对于金属氧化物半导体场效应晶体管(MOSFET)器件有更小的导通电阻和栅电荷,在高速、高功率密度应用中独具优势。高速高能效电平转换器作为高侧栅极驱动的关键模块,主要决定高侧通道的传输延迟。但在高频应用中,电平转换器由于其传输延迟较大、功耗大及抗共模瞬态抑制(CMTI)能力弱等原因已不再适用。此处首先重点分析电平转换器存在的主要问题以及在高压应用下的不适用性,然后针对高压应用描述了几种替代电平转换器结构的隔离驱动结构并着重分析了数字隔离器的工作原理。数字隔离器由于其寄生电容小、传输延迟小以及抗共模噪声干扰能力强等优异的特性能够很好地满足高压的应用需求。

柠条叶中单宁的提取工艺的优化

柠条是治理水土流失和退化沙化草场的先锋植物,是良好的饲草饲料。试验采用Folin-Denis法测定浸提液中单宁含量,并计算得率。在时间、温度、料液比、提取液浓度的单因素试验基础上,通过正交试验进行优化。结果显示,在提取时间40 min、提取温度50℃、溶剂60%丙酮、料液比70 mL/g时,测得单宁的提取率最高达到44.63 mg/g。试验为柠条作为优质饲料资源的开发利用提供参考。

1种副孔正交型超声速5孔探针的设计与应用

针对超声速喷管出口流场Ma和方向角的测量,设计了直径为4 mm的副孔正交型超声速5孔探针。圆锥形测压头半角为20°,测压孔直径为0.4 mm,探针直段长140 mm。分别在亚声速风洞(196个校准点)和超声速风洞(294个校准点)中对5孔探针进行了校准,结果表明:5孔探针在不同Ma下的方向特性曲线具有几何相似性,有较高的角度灵敏度;总压特性系数和静压特性系数均具有良好的对称性。并通过数值计算研究了5孔探针的扰流特性。结合自动位移机构,完成了超声速喷管出口5个截面共315个坐标点的标定,获得了流场的Ma和方向角分布特性。

浅析测控雷达信号频谱特性分析

在各种航天器飞行过程中的测控,需要运用测控雷达的统一载波信道,来完成对航天器的遥控、遥测、跟踪测量、通信等活动。统一载波信道中的频带较宽,所以在该信道中能够进行多种遥控、遥测、跟踪测量、通信等信号的调制,从而实现对各种航天器飞行过程的测控。针对统一测控系统存在的测距值错误、遥控指令、信号干扰等情况,通过频谱分析仪对多个副载波信号进行分析,来提出信号调制故障的解决对策。

右美托咪定通过抑制脊髓小胶质细胞活化减轻吗啡戒断反应痛觉过敏

目的探讨右美托咪定(Dex)对吗啡戒断反应中痛觉过敏的影响及机制。方法 根据药物处理不同将健康雄性C57/BL小鼠随机分为空白对照组、吗啡戒断反应痛觉过敏模型组(M组)、M+Dex组、M+米诺环素(Min)组、M+Dex+Min组、M+MK8825组、M+Min+MK8825组,每组6只。空白对照组小鼠不予任何干预;其他6组小鼠每天上午8:00和下午6:00各腹腔注射吗啡溶液1次,连续注射6 d,随后注射纳洛酮构建吗啡戒断反应痛觉过敏模型。M组为单纯吗啡戒断反应痛觉过敏小鼠,M+Dex、M+Min、M+Dex+Min、M+MK8825、M+Min+MK8825组小鼠在纳洛酮给药前30 min通过鞘内导管分别单次给予人工脑脊液稀释的Dex、小胶质细胞激活抑制剂Min、Dex与Min混合液、降钙素基因相关肽(CGRP)抑制剂MK8825、Min与MK8825混合液。应用von Frey纤维丝测定各组小鼠机械性痛阈,免疫荧光和蛋白质印迹法检测脊髓背角小胶质细胞激活标志物钙离子结合调节因子1(IBA-1)的表达,蛋白质免疫印迹法和PCR检测脊髓背角组织中CGRP蛋白和mRNA表达变化,并用微透析技术测定脊髓背角炎症因子TNF-α、IL-1β水平,最后电生理技术观察Dex对脊髓背角自发性抑制性突触后电流(sIPSC)的影响。结果 成功构建吗啡戒断反应痛觉过敏模型,与空白对照组相比,M组机械性痛阈降低(P<0.05),脊髓背角IBA-1、CGRP表达及TNF-α、IL-1β水平均增加(P均<0.05)。与M组相比,M+Dex、M+Min、M+Dex+Min组机械性痛阈均升高(P均<0.05),脊髓背角IBA-1、CGRP表达及TNF-α、IL-1β水平均降低(P均<0.05)。与M组相比,M+MK8825组脊髓背角TNF-α、IL-1β水平均降低(P均<0.05),而M+MK8825组与M+Min+MK8825组之间TNF-α、IL-1β水平差异均无统计学意义(P均>0.05)。电生理结果显示,与人工脑脊液灌流相比,灌流Dex增强了脊髓背角神经元sIPSC的振幅和频率(P均<0.05)。结论 Dex通过抑制脊髓小胶质细胞激活、减少CGRP表达、减轻脊髓炎症反应及增强脊髓抑制性电活动缓解吗啡戒断反应中的痛觉过敏。

全英文药物设计的研究型教学改革

药物设计是药物研发的核心课程,一直存在教学和研究实际脱离的状况。为了满足一流学科建设和研究型人才培养的需求,将构效关系和构性关系作为课程两大主题,通过案例式教学穿插知识点,了解真实研发管线。同时,发挥学生主观能动性,挖掘科研选题,分析文献进展,通过期末报告评价、同行论文发表以及申请基金等方式进行全方位学习效果评价。充分发挥研究型大学"双一流"建设的优势,改善学生的学习效果并加强科研能力培养。

泵站深基坑变形影响因素及其规律的有限元研究

武汉市江南泵站深基坑工程因工期被压缩,需优化原支护结构以满足要求。为确定优化支护结构,以深基坑围护桩的桩径、插入比和内支撑截面尺寸为因素,选取围护桩水平位移和基坑外地表沉降为分析基坑变形的指标,利用有限元软件ABAQUS模拟了武汉江南泵站的开挖支护过程,分析了各因素对深基坑变形的影响机理及其规律。结果表明:围护结构水平位移和基坑外地表沉降的显著影响因素为桩径和插入比,增加桩径和插入比能有效降低围护桩水平位移和基坑外地表沉降,插入比超过限值后对变形的影响趋于稳定。

调强放疗联合替莫唑胺对高级别脑胶质瘤术后患者免疫功能和生活质量的影响

目的:观察调强放疗联合替莫唑胺对高级别脑胶质瘤术后患者免疫功能和生活质量的影响。方法:选择我院2015年7月~2017年9月收治的有完整临床资料的高级别脑胶质瘤患者107例,根据双色球随机分组法将患者分为对照组和观察组,分别为53例和54例,对照组给予调强放疗,观察组给予调强放疗联合替莫唑胺治疗,均治疗6周。对比两组疗效、免疫功能、生活质量、无进展生存时间、总生存时间和不良反应发生情况。结果:治疗6周后,观察组的客观缓解率55.56%、疾病控制率77.78%高于对照组的35.85%、56.60%(P<0.05)。观察组的无进展生存时间、总生存时间长于对照组(P<0.05)。治疗6周后,观察组的CD8^(+)水平低于对照组,CD3^(+)、CD4^(+)水平高于对照组(P<0.05)。治疗6周后,观察组的躯体功能、机体疼痛、健康状况、生命力、心理职能、躯体角色、情感角色、社会功能维度评分高于对照组(P<0.05)。两组不良反应总发生率对比无显著性差异(P>0.05)。结论:调强放疗联合替莫唑胺应用于高级别脑胶质瘤术后患者,可减轻调强放疗导致的免疫抑制,提高患者生活质量,延长其无进展生存时间、总生存时间。

植物源UDP-糖基转移酶及其分子改造

糖基化能够增加化合物的结构多样性,有效改善水溶性、药理活性和生物利用度,对植物天然产物的药物开发至关重要。UDP-糖基转移酶(UGTs)能够催化糖基从活化的核苷酸糖供体转移到受体形成糖苷键,植物中天然产物的糖基化修饰主要通过UGTs实现。但是大多数天然UGTs的催化活性、稳定性和底物特异性较低,难以满足工业用酶的要求,限制了它们的工业化应用。近年来,通过分子改造技术改进天然UGTs的催化特性取得了突破性的研究进展。为此,概述了植物源UGTs的挖掘与表征、三维结构和催化机制,归纳了UGTs分子改造的思路和方法,包括理性设计和定向进化,重点介绍了结构域替换、序列保守分析和结构分析与定点突变的结合,总结了定向进化中的高通量筛选方法,为植物天然产物酶法糖基化的工业应用提供了参考和借鉴。

Ionic Liquid-based Microwave-assisted Liquid-liquid Microextraction and High Performance Liquid Chromatography Determination of Sulfonamides from Animal Oils

The authors performed ionic liquid-based microwave-assisted liquid-liquid microextraction（IL-based MALLME） coupled with high performance liquid chromatographic separation for the determination of 6 sulfonamides （SAs） from animal oils. The target analytes were extracted from animal oil samples with sodium hydroxide solution containing 1-butyl-3-methylimidazolium tetrafluoroborateand as the extraction solvent under microwave irradiation. The experimental parameters of the IL-based MALLME, including types of ILs, volume of IL, amount of ion-pairing agent（NHaPF6）, pH value of sample solution, and extraction temperature and time were evaluated. The limits of detection and quantification obtained were in a range of 0.4--0.5μg/kg and a range of 1.2--1.8μg/kg, respectively. The accuracy of the method was evaluated by analyzing five spiked animal oil samples at two fortified levels（5 and 50μg/kg）, and the recoveries of SAs varied from 81.4% to 114.5% with relative standard deviations ranging from 0.8% to 9.0%.

哥伦比亚G电厂暖通设计

介绍了哥伦比亚G电厂的空调、通风与除尘系统的设计,项目对规范标准、出图深度等的审图要求,以及当地气象参数、电源等特殊性内容。