期刊文献+
共找到52篇文章
< 1 2 3 >
每页显示 20 50 100
尾丝蛋白在噬菌体吸附鸭疫里默氏菌中的作用
1
作者 刘娜 黄瑜 +8 位作者 陈红梅 江南松 刘荣昌 傅光华 傅秋玲 梁齐章 万春和 李昂 程龙飞 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期1-6,共6页
【目的】以鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer)噬菌体CRP2为对象,研究尾丝蛋白(Tail fiber protein,TFP)对噬菌体吸附功能的影响。【方法】克隆ORF70假定的TFP基因,构建重组表达载体pET28a(+)-TFP,在大肠杆菌E.Coli BL21(DE3)中诱... 【目的】以鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer)噬菌体CRP2为对象,研究尾丝蛋白(Tail fiber protein,TFP)对噬菌体吸附功能的影响。【方法】克隆ORF70假定的TFP基因,构建重组表达载体pET28a(+)-TFP,在大肠杆菌E.Coli BL21(DE3)中诱导表达,通过Ni-NTA亲和层析纯化。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定重组蛋白与CRP2噬菌体的宿主菌外膜蛋白(Outer membrane protein,OMP)的结合作用。竞争吸附试验测定重组蛋白对CRP2噬菌体吸附率的影响。【结果】构建了pET28a(+)-TFP重组表达质粒,在大肠杆菌中得到了可溶性表达。纯化的重组蛋白可以与宿主菌的OMP结合,也可以抑制CRP2对其宿主菌的吸附。【结论】ORF70编码的TFP是噬菌体CRP2的一种受体结合蛋白,其对应的受体是宿主菌的OMP。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏菌 噬菌体 尾丝蛋白 吸附
下载PDF
一株基因Ⅱ型鹅星状病毒的分离鉴定及培养特性
2
作者 兰琴 刘荣昌 +10 位作者 张佳雪 陈炜 焦文龙 梁齐章 江南松 万春和 程龙飞 陈红梅 傅秋玲 傅光华 黄瑜 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期378-386,共9页
【目的】明确鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)的致病性和体外培养特性。【方法】对广东某鹅场表现为内脏和关节痛风的发病鹅组织样品进行病原学检测、病毒分离鉴定、病毒基因序列测定与分析、病毒培养特性及致病性研究。【结果】从... 【目的】明确鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)的致病性和体外培养特性。【方法】对广东某鹅场表现为内脏和关节痛风的发病鹅组织样品进行病原学检测、病毒分离鉴定、病毒基因序列测定与分析、病毒培养特性及致病性研究。【结果】从中分离到1株鹅星状病毒,命名为GD2208株;ORF2基因核苷酸序列比对分析显示,该毒株与基因Ⅱ型鹅星状病毒(GAstV-Ⅱ)参考株同源性最高,为97.4%~99.1%;进化树分析显示该毒株与GAstV-Ⅱ参考株处于同一进化分支。动物回归试验显示,以该毒株感染3日龄雏鹅后致死率为20%,感染鹅临床症状、剖检病变及病理组织学变化与自然发病鹅相似。禽胚及细胞适应性研究结果显示,该毒株能在鹅胚中稳定增殖,但盲传4代后仍无法适应SPF鸡胚和番鸭胚;病毒在GEK和LMH细胞中均能稳定增殖且可见明显细胞病变,在DF-1上可稳定繁殖,但盲传至8代后仍未见细胞病变。【结论】本研究自表现痛风症状雏鹅中分离到1株GAstV-Ⅱ毒株,该毒株感染3日龄雏鹅可发生典型痛风症状,对鹅胚、GEK、LMH和DF-1细胞均有一定适应性,以上结果为进一步开展GAstV的致病机制、疫苗和药物研发奠定了基础。 展开更多
关键词 鹅星状病毒 分离 鉴定 培养特性
下载PDF
鸭3型甲肝病毒的分离鉴定与VP1基因序列分析
3
作者 焦文龙 傅秋玲 +10 位作者 林永强 刘友生 刘荣昌 梁齐章 江南松 万春和 程龙飞 陈红梅 林建生 傅光华 黄瑜 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期898-905,共8页
【目的】探明引起安徽某鸭场雏鸭肝脏出血和大量死亡的病原及其遗传进化特征。【方法】对安徽省某鸭场的病死雏鸭中采集的出血肝脏开展鸭已知病原核酸检测、病原分离鉴定和动物回归试验,在明确其病原为鸭3型甲肝病毒(Duck hepatitis A v... 【目的】探明引起安徽某鸭场雏鸭肝脏出血和大量死亡的病原及其遗传进化特征。【方法】对安徽省某鸭场的病死雏鸭中采集的出血肝脏开展鸭已知病原核酸检测、病原分离鉴定和动物回归试验,在明确其病原为鸭3型甲肝病毒(Duck hepatitis A virus type 3,DHAV-3)的基础上分析其VP1基因序列分子特征。【结果】细菌分离结果显示,未分离到细菌;经病毒核酸(RT-)PCR检测结果显示,鸭3型甲肝病毒(DHAV-3)核酸阳性,未检测出其他已知引起鸭肝出血的病毒核酸。将该阳性样品经鸭胚进行病毒分离与传代,发现接种后鸭胚发生死亡,胚体全身出血,对第5代尿囊液经RT-PCR检测为DHAV-3,将其命名为AH230225。经测定,该分离株的鸭胚半数致死量(Effective lethal dose 50,ELD_(50))为10^(−4.17)/0.1 mL。动物回归试验表明,该毒株对樱桃谷雏鸭的致死率为80%,且攻毒死亡鸭肝脏和肾脏的剖检病变与临床典型病变相近。对该分离毒的VP1基因核苷酸序列进行同源性分析,显示AH230225株的VP1基因核苷酸序列与AH07株DHAV-3(安徽分离株)的同源性最高,为98.8%,与GenBank登录的10株DHAV-3分离株VP1基因核苷酸序列同源性为90.4%~98.8%,而与DHAV-1和DHAV-2的VP1基因核苷酸序列同源性分别为62.1%~63.0%、64.6%~64.9%;基于VP1蛋白氨基酸序列的遗传进化显示,该分离株与AH07株DHAV-3处于同一小进化分支上,亲缘关系最近;而与SD01株、G株和韩国株(AP-04009、AP-03337)等亲缘关系较远,即远离DHAV-1和DHAV-2进化分支。【结论】引起安徽某鸭场雏鸭肝脏出血和大量死亡的病原为鸭3型甲肝病毒DHAV-3,同时明确了该毒株VP1基因的分子特征及遗传进化规律,为深入研究DHAV-3的致病机制和制定防控措施提供科学依据。 展开更多
关键词 鸭3型甲肝病毒 分离鉴定 VP1基因
下载PDF
引起种(蛋)鸭输卵管积液综合征的新发病毒——C型禽偏肺病毒 被引量:1
4
作者 傅秋玲 江南松 +12 位作者 梁齐章 刘荣昌 万春和 程龙飞 陈红梅 林琳 焦文龙 吴胜会 江斌 郑小兰 林建生 傅光华 黄瑜 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1387-1394,共8页
【目的】明确引起种(蛋)鸭特征性输卵管积液和产蛋下降的新发疫病[俗称种(蛋)鸭输卵管积液综合征]的病原。【方法】对自闽粤赣浙皖桂等地产蛋率较高的部分鸭群表现以输卵管内乳糜性积液、黏膜出血水肿增厚及不同程度产蛋下降为特征的病(... 【目的】明确引起种(蛋)鸭特征性输卵管积液和产蛋下降的新发疫病[俗称种(蛋)鸭输卵管积液综合征]的病原。【方法】对自闽粤赣浙皖桂等地产蛋率较高的部分鸭群表现以输卵管内乳糜性积液、黏膜出血水肿增厚及不同程度产蛋下降为特征的病(死)麻鸭、樱桃谷种鸭和种番鸭中采集的样品(输卵管积液、输卵管黏膜、卵巢和肝脾脏器),开展鸭已知病原核酸监测、病原分离鉴定和开产麻鸭人工感染试验。【结果】细菌分离显示,输卵管积液里未分离到细菌,排除细菌感染引起;经病毒核酸监测,只有C型禽偏肺病毒(Avain metapneumoviurs subgroup C,aMPV/C)阳性,未检测到其他引起禽产蛋异常的病毒;以aMPV/C单一阳性的样品经鸭胚进行病毒分离与传代,发现接种鸭胚未见死亡,但胚体表面稍水肿和出血、肝脏出血;对第5代鸭胚液进行RT-PCR检测,结果显示a MPV/C分离阳性率为72.2%;对获得的4株分离株(JX2126、FJ2228、FJ2375和GD2381株)的基因片段进行测序和序列分析发现,该片段与最早报道的番鸭a MPV/C法国分离株(Muscovy duck/1999/99178/France)同源性最高,为96.1%,而与A、B、D型禽偏肺病毒(Avain metapneumoviurs subgroup A,B,D,aMPV/A,B,D)分离株的同源性仅分别为67.8%~68.7%、66.1%~66.8%和71.4%,与人偏肺病毒(Human metapneumoviurs,hMPV)分离株的同源性为67.7%~68.3%;遗传进化分析表明,以上4株分离株与a MPV/C处于同一进化分支上,而与其他亚型aMPV和hMPV亲缘关系较远;经开产麻鸭人工感染试验,成功复制出与自然感染病例相同的临床病症,并能回收到病毒。【结论】明确引起种(蛋)鸭输卵管积液综合征的病原为C型禽偏肺病毒。本研究为该病的快速准确诊断和精准防控提供科学依据。 展开更多
关键词 种(蛋)鸭 输卵管积液综合征 产蛋下降 输卵管积液 C型禽偏肺病毒 分离与鉴定
下载PDF
基于认知架构的交互情感安抚策略在前列腺癌患者健康指导中的应用效果 被引量:2
5
作者 王树 傅光华 钱文燕 《广西医学》 CAS 2023年第13期1641-1644,共4页
目的分析基于认知架构的交互情感安抚策略在前列腺癌患者健康指导中的应用效果。方法将拟行手术治疗的88例前列腺癌患者随机分为观察组和对照组,各44例。对照组实施常规护理方案,观察组在此基础上实施基于认知架构的交互情感安抚策略。... 目的分析基于认知架构的交互情感安抚策略在前列腺癌患者健康指导中的应用效果。方法将拟行手术治疗的88例前列腺癌患者随机分为观察组和对照组,各44例。对照组实施常规护理方案,观察组在此基础上实施基于认知架构的交互情感安抚策略。比较患者术前1 d、术后3 d的焦虑自评量表(SAS)总分、抑郁自评量表(SDS)总分、心率和血压,以及住院期间的护理满意度评价结果。结果术后3 d,观察组患者的SAS总分、SDS总分、心率、收缩压、舒张压均低于术前及对照组(均P<0.05)。观察组患者的护理满意度高于对照组(P<0.05)。结论基于认知架构的交互情感安抚策略能有效改善前列腺癌患者的负性情绪,降低身心应激性水平,提高患者的护理满意度。 展开更多
关键词 前列腺癌 认知架构 交互情感 负性情绪 身心应激 满意度
下载PDF
情景模拟教学在产科临床教学中的应用效果 被引量:5
6
作者 吴迎 吴春蕾 +2 位作者 傅广华 姚小丽 茹海燕 《临床医学研究与实践》 2023年第31期195-198,共4页
目的探讨情景模拟教学在产科临床教学中的应用效果。方法选择2018级50名临床本科生作为研究对象,将其分为对照组(n=20)和试验组(n=30)。对照组开展常规教学,试验组在对照组基础上增加情景模拟教学。比较两组第一、二、三阶段的学习效果... 目的探讨情景模拟教学在产科临床教学中的应用效果。方法选择2018级50名临床本科生作为研究对象,将其分为对照组(n=20)和试验组(n=30)。对照组开展常规教学,试验组在对照组基础上增加情景模拟教学。比较两组第一、二、三阶段的学习效果。结果试验组的医患沟通能力、临床思维能力、团队协作能力评分均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。试验组的理论考核、病史采集、体格检查、产前检查、接生技巧、会阴裂伤缝合评分高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组的病例书写、新生儿处理评分无显著差异(P>0.05)。试验组的病例分析、胎监技术与判读、阴道检查、急危重情况处理评分高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);两组的腹部检查、外阴消毒评分无显著差异(P>0.05)。结论情景模拟教学方法能够较好地解决临床教学资源缺乏的系列困难,培养学生的学习兴趣,提高医患沟通、临床思维、临床操作技能、团队协作等综合能力,为妇产科学的教学工作提供了新思路。 展开更多
关键词 情景模拟教学 产科 临床教学
下载PDF
一株鸭源大肠杆菌噬菌体vB_EcoS214的分离鉴定
7
作者 刘娜 陈红梅 +3 位作者 江南松 黄瑜 傅光华 程龙飞 《福建畜牧兽医》 2023年第6期12-14,共3页
为分离能裂解鸭源大肠杆菌的噬菌体,采用富集法从鸭场污水中分离噬菌体,透射电镜观察其形态,结果显示,分离到1株噬菌体,电镜显示该噬菌体属长尾病毒科,命名为vB_EcoS214,头部直径约40 nm,尾部长约220 nm,宽约10 nm。该噬菌体有较宽的裂... 为分离能裂解鸭源大肠杆菌的噬菌体,采用富集法从鸭场污水中分离噬菌体,透射电镜观察其形态,结果显示,分离到1株噬菌体,电镜显示该噬菌体属长尾病毒科,命名为vB_EcoS214,头部直径约40 nm,尾部长约220 nm,宽约10 nm。该噬菌体有较宽的裂解谱,裂解力较强,可成为噬菌体鸡尾酒制剂的候选噬菌体。能裂解鸭源大肠杆菌噬菌体的成功分离,为鸭源大肠杆菌病的噬菌体疗法提供参考。 展开更多
关键词 大肠杆菌 噬菌体
下载PDF
新型鸭呼肠孤病毒、新型鹅细小病毒和鸭坦布苏病毒多重PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:9
8
作者 李海琴 傅光华 +6 位作者 康昭风 韦启鹏 谭美芳 黄江南 季华员 黄瑜 杨群 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期1-6,共6页
【目的】建立能同时检测新型鸭呼肠孤病毒(New-type duck reovirus,NDRV)、新型鹅细小病毒(Novel goose parvovirus,NGPV)和鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)的方法。【方法】根据NDRV、NGPV和DTMUV基因组的保守区域设计3对特异... 【目的】建立能同时检测新型鸭呼肠孤病毒(New-type duck reovirus,NDRV)、新型鹅细小病毒(Novel goose parvovirus,NGPV)和鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)的方法。【方法】根据NDRV、NGPV和DTMUV基因组的保守区域设计3对特异性引物,预期特异性扩增NDRV、NGPV和DTMUV的片段大小分别为594、467、328 bp,建立可同时检测NDRV、NGPV和DTMUV的多重PCR检测方法,对其进行特异性、敏感性及重复性检验,并在临床上进行初步应用。【结果】特异性检测结果表明,该多重PCR方法可同时扩增NDRV、NGPV、DTMUV的目的片段,且未扩增出其他鸭常见病原;敏感性结果显示NDRV、NGPV和DTMUV的检测下限分别为8.80×10^(4)、4.03×10^(4)、2.15×10^(4)copies·μL^(−1);重复性试验表明该方法具有良好的重复性。采用建立的多重PCR方法对167份临床样品进行检测结果显示,其检测结果与该3种病毒的常规单一PCR检测结果符合率为100%。【结论】建立的多重PCR检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,适用于临床样品中存在以上3种病原感染的检测和流行病学调查。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 新型鹅细小病毒 鸭坦布苏病毒 多重PCR
下载PDF
鸭腺病毒3型PCR检测方法的建立 被引量:11
9
作者 万春和 陈翠腾 +6 位作者 施少华 程龙飞 傅光华 刘荣昌 陈红梅 傅秋玲 黄瑜 《中国家禽》 北大核心 2019年第2期20-23,共4页
鸭3型腺病毒(Duck adenovirus type 3,DAdV-3)为近年来新发的以引起鸭肝脏肿大出血、肾脏大面积出血点为特征的鸭群新发疫病。为建立特异性的检测DAdV-3的PCR方法,研究通过分析鸭群中鸭腺病毒A型(DAdV-A)、鸭源禽腺病毒4型(FAdV-4)、鸭... 鸭3型腺病毒(Duck adenovirus type 3,DAdV-3)为近年来新发的以引起鸭肝脏肿大出血、肾脏大面积出血点为特征的鸭群新发疫病。为建立特异性的检测DAdV-3的PCR方法,研究通过分析鸭群中鸭腺病毒A型(DAdV-A)、鸭源禽腺病毒4型(FAdV-4)、鸭2型腺病毒(DAdV-2)和DAdV-3的Fiber 2基因特征,建立特异性检测DAdV-3的PCR方法。结果显示:优化后的PCR方法最佳退火温度为54℃,对DAdV-3扩增片段大小为548 bp;敏感性强,最低检测限为36.4 pg;特异性好,对DAdV-A、FAdV-4、鸭病毒性肠炎(DEV)、番鸭细小病毒(MDPV)、鹅细小病毒(GPV)、鸭圆环病毒(DuCV)和鹅多瘤病毒(GHPV)均无特异性扩增。表明该方法可有效用于开展新发DAdV-3的流行病学调查。 展开更多
关键词 鸭3型腺病毒 FIBER 2基因 PCR
下载PDF
番鸭源鸭疫里默氏杆菌的耐药性及rpoB基因突变分析 被引量:4
10
作者 林彬彬 谢碧林 +5 位作者 王秀祯 翁汉东 程龙飞 傅光华 刘荣昌 林志敏 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1337-1343,共7页
【目的】了解福建省莆田市番鸭源鸭疫里默氏杆菌的耐药性及rpoB基因突变情况。【方法】无菌采集病死番鸭的脑、心脏、肝脏进行细菌分离纯化,提取分离株基因组DNA,利用16S rDNA基因特异性引物进行PCR鉴定,纸片法进行药敏试验,扩增并分析r... 【目的】了解福建省莆田市番鸭源鸭疫里默氏杆菌的耐药性及rpoB基因突变情况。【方法】无菌采集病死番鸭的脑、心脏、肝脏进行细菌分离纯化,提取分离株基因组DNA,利用16S rDNA基因特异性引物进行PCR鉴定,纸片法进行药敏试验,扩增并分析rpoB基因利福平耐药决定区序列。【结果】共分离到49株鸭疫里默氏杆菌,这些菌株均表现广谱耐药性,耐药谱介于11~21种药物,分离株对氨基糖苷类、大环内酯类、复方新诺明、多黏菌素B和利福平等药物的耐药性高,对四环素类、β-内酰胺类和氟苯尼考等药物的敏感性高。44株利福平耐药菌的rpoB基因出现R494K(43/44)单点突变和R494K和V382I(1/44)的双点突变,R494K单点突变也在1株利福平敏感菌中发现。【结论】近期防治鸭传染性浆膜炎可首选四环素类、β-内酰胺类和氟苯尼考等药物,利福平耐药决定区氨基酸的R494K单点突变可能是鸭疫里默氏杆菌对利福平耐药的主要机制之一。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 分离 鉴定 耐药性 RPOB基因
下载PDF
鸭3型腺病毒的分离鉴定及其fiber基因分析 被引量:6
11
作者 程龙飞 刘荣昌 +6 位作者 傅光华 施少华 万春和 陈红梅 傅秋玲 陈翠腾 黄瑜 《中国家禽》 北大核心 2019年第11期47-50,共4页
为确诊引起福建某番鸭场以肝脏肿大出血为特征的病原,采用病毒分离、PCR检测、动物回归试验、电镜观察、组织病理学诊断、fiber基因序列测定与分析等方法进行研究。结果显示:所采样品盲传15代后获得病毒,PCR可以扩增出鸭3型腺病毒(DAdV... 为确诊引起福建某番鸭场以肝脏肿大出血为特征的病原,采用病毒分离、PCR检测、动物回归试验、电镜观察、组织病理学诊断、fiber基因序列测定与分析等方法进行研究。结果显示:所采样品盲传15代后获得病毒,PCR可以扩增出鸭3型腺病毒(DAdV-3)的特异性片段,分离病毒可引起3日龄番鸭发病死亡,死亡率为28.6%。人工感染死亡鸭的肝脏超薄切片呈现大量晶格状排列的典型禽腺病毒颗粒,肝脏的组织病理学以'包涵体肝炎'病变为特征。其fiber基因与已报道的DAdV-3毒株核苷酸同源性均为100%。以上结果证实分离的病原为DAdV-3。本试验为DAdV-3的诊断提供了科学依据。 展开更多
关键词 鸭3型腺病毒 分离 鉴定 fiber基因
下载PDF
环丙沙星对噬菌体RAP44裂解鸭疫里默氏杆菌的影响 被引量:4
12
作者 程龙飞 刘荣昌 +5 位作者 傅光华 万春和 陈红梅 施少华 傅秋玲 黄瑜 《中国家禽》 北大核心 2020年第8期35-39,共5页
为探明环丙沙星(CIP)对噬菌体裂解鸭疫里默氏杆菌的影响,采用微量稀释法测定CIP对鸭疫里默氏杆菌RAf71株的最小抑菌浓度(MIC),在亚MIC CIP下,测定不同浓度噬菌体RAP44对RAf71生长的影响、RAP44噬菌斑的形成、增殖效果、不同噬菌体株对RA... 为探明环丙沙星(CIP)对噬菌体裂解鸭疫里默氏杆菌的影响,采用微量稀释法测定CIP对鸭疫里默氏杆菌RAf71株的最小抑菌浓度(MIC),在亚MIC CIP下,测定不同浓度噬菌体RAP44对RAf71生长的影响、RAP44噬菌斑的形成、增殖效果、不同噬菌体株对RAf71的裂解效果。将RAf71人工感染番鸭,比较噬菌体(皮下注射噬菌体1×10^9pfu/只)、CIP(治疗剂量,浓度为250 mg/L CIP饮用)、噬菌体和治疗剂量CIP联合、噬菌体和减半治疗剂量CIP联合的治疗效果。结果显示:CIP对RAf71株的MIC为16μg/mL,亚MIC的CIP可以使噬菌体RAP44对RAf71的抑制作用提高2~8倍,不影响噬菌斑的形成,能促进RAP44的增殖,使部分噬菌体株获得对RAf71的裂解能力;RAP44可以降低RAf71株攻击引起的死亡,治疗剂量CIP与RAP44合用能起到协同作用,进一步降低死亡率。研究表明,治疗鸭疫里默氏杆菌感染,噬菌体和CIP具有协同作用。该研究为治疗鸭疫里默氏杆菌病提供了一种新的方法。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 噬菌体 环丙沙星 协同作用
下载PDF
鸭瘟病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立 被引量:3
13
作者 万春和 刘荣昌 +6 位作者 陈翠腾 程龙飞 施少华 傅光华 陈红梅 傅秋玲 黄瑜 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2018年第6期722-728,共7页
根据鸭瘟病毒(DEV) gE基因的特征,设计特异性引物和探针,经条件优化后,建立检测DEV的TaqMan实时荧光定量PCR方法.结果表明:当gE基因含量为1.0×10~1~1.0×10~6拷贝·μL^(-1)时,建立的实时荧光定量PCR检测方法有良好的线... 根据鸭瘟病毒(DEV) gE基因的特征,设计特异性引物和探针,经条件优化后,建立检测DEV的TaqMan实时荧光定量PCR方法.结果表明:当gE基因含量为1.0×10~1~1.0×10~6拷贝·μL^(-1)时,建立的实时荧光定量PCR检测方法有良好的线性扩增,其标准曲线方程为:y=-3.480x+37.955,扩增相关系数为0.999;敏感性强,最低检测限为10拷贝·μL^(-1);特异性好,仅对DEV强毒株和弱毒活疫苗株检测到阳性扩增信号,对鸭源其他传染病病原(番鸭细小病毒、鹅细小病毒、鸭腺病毒A型、鸭甲肝病毒1型、鸭甲肝病毒3型、番鸭呼肠孤病毒、新型鸭呼肠孤病毒、H9N2亚型禽流感病毒、禽1型副粘病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌、鸭源禽多杀性巴氏杆菌)检测均为阴性;重复性好,组内变异系数和组间变异系数分别为0.62%~1.14%和0.69%~2.40%.对临床送检疑似DEV感染的14份样品进行检测,并与常规PCR方法、病毒分离鉴定进行比较,阳性率分别为85.71%(12/14)、71.43%(10/14)和57.14%(8/14);且与常规PCR方法、病毒分离鉴定的阳性符合率均为100%.本试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法,可用于开发DEV快速诊断试剂盒,用于开展DEV流行病学调查. 展开更多
关键词 鸭瘟病毒 GE基因 TAQMAN探针 实时荧光定量PCR方法
下载PDF
鹦鹉幼雏病病毒福建株VP1基因的克隆及序列分析 被引量:3
14
作者 万春和 程龙飞 +6 位作者 傅光华 施少华 陈红梅 傅秋玲 刘荣昌 林建生 黄瑜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第6期1661-1667,共7页
为明确虎皮鹦鹉源鹦鹉幼雏病病毒(budgerigar fledgling disease polyomavirus,BFPyV)福建株(命名为FJ-2016株)结构蛋白VP1基因特征,本研究针对BFPyVVP1基因特点设计特异性引物,利用PCR方法扩增获得FJ-2016株VP1基因全长序列,目的片段... 为明确虎皮鹦鹉源鹦鹉幼雏病病毒(budgerigar fledgling disease polyomavirus,BFPyV)福建株(命名为FJ-2016株)结构蛋白VP1基因特征,本研究针对BFPyVVP1基因特点设计特异性引物,利用PCR方法扩增获得FJ-2016株VP1基因全长序列,目的片段经胶回收后进行克隆测序。结果显示,BFPyV FJ-2016株VP1基因全长为1 032bp,编码343个氨基酸。所编码VP1蛋白的理论等电点为5.77,不稳定指数为40.91,是不稳定蛋白;脂肪系数为74.72;总平均疏水性指数为-0.366。将获得的VP1基因序列提交至GenBank,登录号为:MG148345。核苷酸同源性分析表明,不同时间、地区和品种BFPyV的VP1基因十分保守,相互之间的核苷酸同源性均在99.1%以上。遗传进化分析发现,不同时间和地域BFPyV相互之间亲缘关系较近,但可细分为两个大的遗传进化分支(Clade 1和Clade 2)。从宿主品种来看,虎皮鹦鹉源BFPyV各分离株的遗传进化与分离时间及地域无明显关系,虎皮鹦鹉源BFPyV分离株在Clade 1和Clade 2分支均有分布。本研究首次证实福建地区虎皮鹦鹉中存在BFPyV感染,相关研究结果为丰富不同地区BFPyV分子流行病学数据提供参考。 展开更多
关键词 鹦鹉幼雏病病毒 虎皮鹦鹉 VP1基因 序列分析
下载PDF
鸭巴泰病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:2
15
作者 万春和 傅光华 +5 位作者 刘荣昌 程龙飞 施少华 陈红梅 傅秋玲 黄瑜 《中国家禽》 北大核心 2018年第12期21-25,共5页
为建立鸭巴泰病毒(Batai virus,BATV)SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,研究根据鸭BATV非结构蛋白(NSs)基因特征,设计引物,经条件优化后建立检测BATV感染的qRT-PCR方法。用建立的qRT-PCR方法对临床72份疑似BATV感染的病... 为建立鸭巴泰病毒(Batai virus,BATV)SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测方法,研究根据鸭BATV非结构蛋白(NSs)基因特征,设计引物,经条件优化后建立检测BATV感染的qRT-PCR方法。用建立的qRT-PCR方法对临床72份疑似BATV感染的病料进行检测,并对阳性样品进行病毒分离,评价两种方法的符合率。结果表明,当病毒NS基因含量为3.59×10~2~3.59×10~7拷贝/μL时有良好的线性扩增,其扩增相关系数为0.9994,扩增效率为98%。最低检测限为3.59×10~2拷贝/μL;扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,Tm值为(81.60±0.16)℃,对鸭源常见病毒(如鸭甲肝病毒、禽坦布苏病毒、禽Ⅰ型副黏病毒、H9N2亚型禽流感病毒、新型鸭呼肠孤病毒和番鸭呼肠孤病毒)检测均为阴性,组内变异系数和组间变异系数分别为0.49%~1.99%和0.58%~2.18%。临床送检的72份病料SYBRⅠ实时荧光定量PCR方法的阳性率为4.17%(3/72),并分离到2株鸭源BATV,2种方法的阳性符合率为66.67%(2/3)。建立的基于SYBRⅠ检测BATV的qRT-PCR方法、特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于BATV的分子流行病学研究。 展开更多
关键词 鸭巴泰病毒 NS基因 SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR
下载PDF
鸭腺病毒A型TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:2
16
作者 万春和 刘荣昌 +5 位作者 程龙飞 施少华 傅光华 陈红梅 傅秋玲 黄瑜 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第5期1341-1348,共8页
试验旨在建立鸭腺病毒A型(duck adenovirus A,DAdV-A)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。根据DAdV-A Hexon基因序列设计特异性引物和探针,建立了基于TaqMan探针检测DAdV-A的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,... 试验旨在建立鸭腺病毒A型(duck adenovirus A,DAdV-A)TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。根据DAdV-A Hexon基因序列设计特异性引物和探针,建立了基于TaqMan探针检测DAdV-A的实时荧光定量PCR检测方法,对其特异性、灵敏性、重复性进行检测,用建立的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法和常规PCR方法同时对福建地区临床收集的85份番鸭源病料进行DAdV-A感染的检测,比较其符合率。结果表明,试验成功建立了检测DAdV-A的实时荧光定量PCR检测方法,其扩增相关系数为0.996,扩增效率为99.9%;特异性强,对鸭常见病原(如鸭瘟病毒、鹅细小病毒、番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里默氏杆菌和鸭源禽多杀性巴氏杆菌)检测均为阴性;灵敏度高,最低检测限为8.37拷贝/μL;重复性好,组内变异系数和组间变异系数分别为0.54%~1.28%和0.61%~2.39%。对临床送检的85份病料,TaqMan实时荧光定量PCR方法的阳性率为7.06%(6/85),PCR方法的阳性率为5.88%(5/85),且PCR检测的阳性样品经TaqMan实时荧光定量PCR方法检测均为阳性,符合率为100%。本研究建立了基于TaqMan探针检测DAdV-A的实时荧光定量PCR检测方法,为鸭群中开展DAdV-A的分子流行病学研究提供了有效技术手段。 展开更多
关键词 鸭腺病毒A型 Hexon基因 TAQMAN探针 实时荧光定量PCR方法
下载PDF
癌症预康复在行腹腔镜前列腺癌根治术老年患者中的应用 被引量:6
17
作者 黄雨涵 傅光华 何勤忠 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第19期3369-3373,共5页
目的:探讨癌症预康复在行腹腔镜前列腺癌根治术老年患者中的应用价值。方法:选取2015年1月至2018年10月本院泌尿外科收治的60例行腹腔镜前列腺癌根治术的老年患者为研究对象,按随机数字表法分为观察组及对照组各30例。观察组从入院到手... 目的:探讨癌症预康复在行腹腔镜前列腺癌根治术老年患者中的应用价值。方法:选取2015年1月至2018年10月本院泌尿外科收治的60例行腹腔镜前列腺癌根治术的老年患者为研究对象,按随机数字表法分为观察组及对照组各30例。观察组从入院到手术前1天,约7~10天予以癌症预康复;对照组予以腹腔镜前列腺癌根治术的常规术前准备。于干预前、术前1天及术后30天分别记录六分钟步行距离(6MWT)、抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)和EORTC QLQ-PR55生命质量量表及术后首次下床活动时间,拔除尿管时间、拔除引流管时间,术后住院天数,住院费用及并发症发生率。结果:术前1天、术后30天,观察组6MWT、EORTC QLQ-PR55量表得分高于对照组,观察组SDS及SAS评分低于对照组(P <0.05);观察组术后首次下床活动时间、拔除尿管时间、拔除引流管时间、住院时间短于对照组(P <0.05);住院费用及并发症发生率低于对照组(P <0.05)。结论:癌症预康复应用于行腹腔镜前列腺癌根治术老年患者可改善其全身功能、心理状态及营养状况,促进康复。 展开更多
关键词 癌症预康复 前列腺癌根治术 腹腔镜 老年
下载PDF
商业生态系统的信息生态治理机制研究 被引量:4
18
作者 付广华 毕新华 张健 《科技管理研究》 CSSCI 北大核心 2018年第18期195-201,共7页
在综合商业生态系统、信息生态、组织治理理论的基础上,详细分析商业生态系统的信息生态的结构、治理内涵、治理构成和风险。针对信息活动中信息资源、信息技术基础设施和知识的治理及其风险,分析、论证核心组织决策机制、信息整合机制... 在综合商业生态系统、信息生态、组织治理理论的基础上,详细分析商业生态系统的信息生态的结构、治理内涵、治理构成和风险。针对信息活动中信息资源、信息技术基础设施和知识的治理及其风险,分析、论证核心组织决策机制、信息整合机制、知识获取机制;针对超组织生态发展中竞争范式转变的问题,分析、论证共生约束机制和共同演化机制。 展开更多
关键词 商业生态系统 信息生态治理 核心组织决策 信息整合 知识获取 共生约束 共同演化
下载PDF
中国鸭源H5N6 AIV血凝素和神经氨酸酶基因特征及遗传进化分析 被引量:1
19
作者 陈翠腾 万春和 +6 位作者 陈珍 朱春华 傅光华 施少华 蔡国漳 刘斌琼 黄瑜 《中国家禽》 北大核心 2020年第1期21-27,共7页
为明确中国鸭源H5N6 AIV的HA和NA基因特征及其遗传变异情况,研究选取了NCBI流感病毒资源库里的32株具有完整ORF编码区的中国鸭源H5N6 AIV的HA和NA基因序列,利用分子生物学软件分析其HA和NA基因特征及其遗传进化情况。结果显示,中国鸭源H... 为明确中国鸭源H5N6 AIV的HA和NA基因特征及其遗传变异情况,研究选取了NCBI流感病毒资源库里的32株具有完整ORF编码区的中国鸭源H5N6 AIV的HA和NA基因序列,利用分子生物学软件分析其HA和NA基因特征及其遗传进化情况。结果显示,中国鸭源H5N6 AIV的HA裂解位点有REKRRKR↓G、RERRRKR↓G和KEKRRKR↓G三种类型,HA有6个潜在的N-糖基化位点,其中第182、222、224位氨基酸依次为N、Q、G,具有与禽源唾液酸α-2,3受体结合的特性,然而HA发生了S123P/T、T156A、S223R氨基酸位点突变,部分毒株发生了I151T氨基酸位点突变;HA基因核苷酸遗传进化分析显示,中国鸭源H5N6 AIV遗传进化上均处于clade2.3.4.4分支,并进一步进化出Ⅰ和Ⅱ两个亚分支。部分中国鸭源H5N6 AIV NA第59~69位缺失11个氨基酸,中国鸭源H5N6 AIV NA基因遗传进化上分为两个大的分支,分别对应NA基因颈部缺失型和完整型两种类型;NA颈部完整型的NA有6个潜在的N-糖基化位点,NA颈部缺失型的NA由于第59~69位氨基酸的缺失,导致其第67位丢失了一个N-糖基化位点。研究为中国鸭源H5N6 AIV的生物学特性和遗传进化特征研究奠定基础。 展开更多
关键词 H5N6亚型禽流感病毒 血凝素 神经氨酸酶 基因特征 遗传进化
下载PDF
乳胶凝集试验检测鸭3型腺病毒方法的建立及应用 被引量:1
20
作者 程龙飞 刘荣昌 +6 位作者 陈翠腾 傅光华 施少华 万春和 陈红梅 傅秋玲 黄瑜 《中国家禽》 北大核心 2020年第6期48-51,共4页
为建立快速检测鸭3型腺病毒的方法,试验采用纯化的兔抗鸭3型腺病毒血清致敏聚苯乙烯乳胶,建立了乳胶凝集试验。结果显示,致敏乳胶不自凝,可于4℃保存半年。该方法特异性强,重复性好,与琼脂扩散试验的符合率为100%。对临床样品的检测,乳... 为建立快速检测鸭3型腺病毒的方法,试验采用纯化的兔抗鸭3型腺病毒血清致敏聚苯乙烯乳胶,建立了乳胶凝集试验。结果显示,致敏乳胶不自凝,可于4℃保存半年。该方法特异性强,重复性好,与琼脂扩散试验的符合率为100%。对临床样品的检测,乳胶凝集试验与PCR检测方法的符合率为85.4%。试验表明,乳胶凝集试验存在一定的漏检率,但由于其简单、快速、无需昂贵仪器等特点,可用于鸭3型腺病毒病的临床快速筛查。 展开更多
关键词 鸭3型腺病毒 乳胶凝集试验 检测
下载PDF
上一页 1 2 3 下一页 到第
使用帮助 返回顶部