重庆市基层全科医师儿童支气管哮喘防治服务评价研究

背景支气管哮喘(以下简称哮喘)是儿童期最为常见的慢性气道疾病,其因病程长、反复发作,从而严重影响儿童的生长发育和生活质量。全科医师作为基层医疗健康服务的主要提供者,在儿童哮喘早期筛查和分级管理过程中发挥着重要作用,了解全科医生对该病的防治服务水平,可为基层儿童哮喘防治服务质量提升提供建议。目的调查基层全科医师对儿童哮喘的防治服务水平及其影响因素。方法2022年4—7月,从重庆市38个区(县)中随机抽取22个区(县),并对样本区(县)的基层全科医师进行问卷调查。调查问卷由课题组查阅相关指南及文献自行设计,并经过两轮专家函询和预调查形成,包括知识、态度、行为和自评4个维度。调查基层全科医师对儿童哮喘防治的认知、态度、行为及自评情况并分析其影响因素。结果共有234名基层全科医师参与问卷调查。全科医师对儿童哮喘防治的知识得分为(6.03±2.04)分,合格率为44.9%;态度得分为(49.42±4.94)分,合格率为100.0%;行为得分为(30.55±6.66)分,合格率为87.2%;自评得分为(21.57±5.30)分,合格率为85.0%。在转诊指征的选择上,有98.7%(231/234)的全科医师认为中度以上急性哮喘发作,经过紧急处理后仍无明显缓解的患儿需要转诊,有94.0%(220/234)的全科医师认为规范化治疗哮喘后仍得不到有效控制的患儿需要转诊。在遇到症状控制不佳的患儿就诊时,33.8%(79/234)的全科医师会仔细分析控制不佳的原因,17.5%(41/234)的全科医师会告诫其谨遵医嘱、暂时观察并约好下次复查时间。33.8%(79/234)的全科医师对在基层进行儿童哮喘诊疗活动持有不确定或者反对的态度,影响因素主要为医护人员缺乏疾病相关知识储备和学习机会、家长不愿来基层就诊、儿科医患关系较成人紧张、该病种患儿较少、相关设施设备缺乏。多元线性回归分析显示:职称和儿童哮喘知识培训经历是知识得分的影响因素(P<0.05);学历和基层工作年限是态度得分的影响因素(P<0.05);儿科工作经验和儿童哮喘知识培训经历是行为和自评得分的影响因素(P<0.05)。结论重庆市基层全科医师对哮喘患儿的防治有一定信心,但防治理论知识水平欠佳;态度较积极,行为积极性也尚可,但两者之间存在一定差距。提示在做好基层儿科设施设备优化配置和提高居民信任度的同时,知识与实践培训仍是提升全科医师知识储备、防治自信和自身能力方面的重要因素,应加强全科医师的学历教育和继续教育培训,有效激励全科医师学习和自我提升的能力。

基于微信平台心理弹性干预在妇科恶性肿瘤患者护理中的应用

目的观察基于微信平台心理弹性干预在妇科恶性肿瘤患者护理中的应用效果。方法选取2021年3月至2022年9月丰城市人民医院收治的80例妇科恶性肿瘤患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组、观察组,各组均40例。对照组接受常规心理干预,观察组接受基于微信平台心理弹性干预。对比两组心理弹性[心理弹性量表(CD-RISC)]、焦虑与抑郁情绪[焦虑自评量表(SAS)、抑郁自评量表(SDS)]、癌因性疲乏程度[多维疲劳症状量表(MFSI-SF)]及满意度。结果干预后1个月,两组患者CD-RISC评分高于干预前,且观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后1个月,两组患者SAS、SDS、MFSI-SF评分低于干预前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组护理满意度评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论妇科恶性肿瘤患者接受基于微信平台心理弹性干预可提高心理弹性,缓解焦虑与抑郁情绪,减轻癌因性疲乏程度,提升满意度。

鸽脂肪前体细胞的分离培养及成脂诱导分化研究

旨在建立鸽脂肪前体细胞的体外分离、培养、鉴定和成脂诱导分化的方法。本研究采集3只健康的1日龄银王鸽皮下脂肪组织,利用I型胶原酶进行消化以分离脂肪前体细胞,在脂肪前体细胞常规分离法基础上进行分离方法改良,对获得的脂肪前体细胞进行原代和传代培养,并观察细胞形态,通过免疫荧光鉴定特异性标记DLK1,确认脂肪前体细胞。通过在培养基中添加胰岛素和油酸钠进行成脂诱导分化,使用BODIPY493/503染色观察细胞中的脂滴分布情况,通过甘油三酯测定试剂盒检测细胞中甘油三酯的含量,采用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测脂肪前体细胞成脂分化过程中分化相关基因的表达。研究结果表明,鸽脂肪前体细胞呈梭形,改良分离法比常规分离法能够获得更多的脂肪前体细胞;与37℃相比,在41℃培养温度下,获得的脂肪前体细胞数目显著增加(P<0.001)。免疫荧光结果表明,DLK1表达为阳性,说明获得的是脂肪前体细胞。BODIPY493/503染色结果显示,分化6 d的细胞中产生大量的脂滴。且随着分化时间的增加,细胞中甘油三酯的相对含量也显著增加(P<0.01)。qPCR结果显示,在添加诱导剂2 d时,PPARγ、SCD、DGAT2、PLIN2、FASN、AFABP、LPL基因的表达量显著上调(P<0.05),之后随分化时间的增加表达逐渐上调;SREBF 1基因在分化2 d时表达量显著上调(P<0.05),之后表达量不变;ACACA基因在分化2 d时,表达量显著增加(P<0.05),在分化4 d时表达量达到高峰。Western blot结果表明,在分化2 d时,PPARγ、LPL和PLIN2的表达量显著上调(P<0.05),之后随着分化时间的延长,表达量进一步升高。综上所述,本研究改良了脂肪前体细胞常规分离法,成功分离获得鸽脂肪前体细胞,且筛选出最适培养温度。获得的鸽脂肪前体细胞经胰岛素和油酸钠诱导后能高效地分化为成熟的脂肪细胞。本研究为鸽脂肪代谢分子调控机制的研究提供了良好的细胞模型,同时也为鸽生物培育肉的制备提供种子细胞和技术指导。

儿童重症肺炎支原体肺炎与重症肺炎链球菌肺炎的临床特征对比分析

目的 对比重症肺炎支原体肺炎(MPP)与重症肺炎链球菌肺炎(SPP)的临床特征。方法 回顾性分析2015年1月—2020年1月收治的77例重症MPP和40例重症SPP患儿,对比两组患儿的一般情况、临床表现、辅助检查等资料。结果 重症MPP患儿组男性48例(62.3%),年龄为44(24~78)月。重症SPP患儿组男性22例(55.0%),年龄为14(9~25)月。96.1%(74/77)的重症MPP患儿与80.0%(32/40)的重症SPP患儿在入院前使用抗生素(P=0.007)。与重症SPP患儿相比,重症MPP患儿出现发热、高热比例较高,出现喘息、神经系统症状比例较低(P均<0.05)。重症SPP患儿更易在肺部闻及湿啰音、哮鸣音,且双侧均出现体征患儿比例更高(P均<0.05)。与重症SPP患儿相比,重症MPP患儿WBC较低、LDH水平较高,胸部CT更易出现支气管充气征(均P<0.05)。两组患儿支气管镜镜下表现及肺泡灌洗液常规检查结果的差异无明显统计学意义(P均>0.05)。结论 重症MPP与重症SPP患儿临床特征常不典型,年龄、发热、高热、喘息、肺部体征、神经系统表现、外周血白细胞计数、外周血乳酸脱氢酶水平等对临床鉴别有提示作用。

循环流化床锅炉热效率估算及影响因素分析

锅炉热效率是锅炉运行状况经济性评价的关键指标,是指导锅炉高效运行的重要依据。针对锅炉热效率无法在线测量的问题,基于反平衡法提出了锅炉热效率的离线估算模型,利用某75 t/h循环流化床锅炉DCS运行数据和燃煤参数仪器化验值对锅炉热效率进行解算。通过对解算结果的分析表明,锅炉运行负荷和锅炉吹灰操作均会对锅炉热效率产生影响。最后,针对锅炉热效率的影响因素,提出了锅炉运行的优化策略。上述研究对提高锅炉运行效率具有潜在应用价值。

900例哮喘急性发作期住院患儿临床特征分析

目的 分析哮喘急性发作期住院患儿的临床特点,为哮喘诊治提供临床参考。方法 回顾性分析2011年1月至2021年6月重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心收治的支气管哮喘患儿的临床资料。结果 纳入支气管哮喘患儿900例,男615例、女285例,中位年龄2.3(1.3-3.9)岁。婴幼儿期559例、学龄前期246例、学龄期92例,不同年龄组男性比例、确诊时间分布差异均有统计学意义(P<0.05),婴幼儿组男性比例较高,首诊确诊比例较高。入院后首次诊断为哮喘的患儿比例为63.5%。因轻度哮喘急性发作入院患儿占76.6%,其中婴幼儿较多(475例,52.8%),其次为学龄前期患儿(180例,20.0%)。900例患儿中,501例(55.7%)痰培养检出致病菌,肺炎链球菌比例最高(26.9%),其次为卡他莫拉菌、流感嗜血杆菌。4种病毒(呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒、副流感病毒)检出阳性率为25.0%,其中呼吸道合胞病毒检出率最高(16.3%)。不同年龄组间哮喘合并过敏性鼻炎或鼻窦炎比例的差异有统计学意义(P<0.01)。共224例患儿行过敏原特异性IgE(sIgE)检测,119例次(53.1%)吸入性过敏原阳性,76例次(33.9%)食源性过敏原阳性;尘螨阳性比例最高(27.7%),其次为屋尘(8.9%)。不同年龄组间大部分吸入性过敏原(如尘螨、屋尘、猫狗毛、树组合、桑树等)阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 轻度哮喘急性发作是<6岁哮喘患儿最主要的住院原因,大部分患儿为首诊确诊哮喘。呼吸道感染是哮喘急性发作最主要诱发因素。应重视哮喘患儿过敏原筛查与过敏性鼻炎防治。

紫仙助孕汤联合枸橼酸氯米芬对多囊卵巢综合征不孕症患者的疗效研究

目的研究枸橼酸氯米芬联合紫仙助孕汤对多囊卵巢综合征不孕症患者的疗效。方法选择2020年9月-2021年9月山东省聊城市人民医院收治的84例多囊卵巢综合征不孕症患者,按照随机数表法分为对照组和观察组,每组42例。对照组单用枸橼酸氯米芬,观察组联用紫仙助孕汤。记录两组的1年妊娠率和优卵排出率,检测促黄体生成素(LH)、雌二醇(E_(2))、睾酮(T)和促卵泡激素(FSH)水平,评估两组的中医证候(烦躁易怒、月经不调、头晕耳鸣、情志抑郁、腰膝酸软和胸肋胀满)积分。结果观察组的1年妊娠率和优卵排出率明显高于对照组(P<0.05)。治疗前,两组的LH、E_(2)、T和FSH水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组的LH、T水平均降低,E_(2)、FSH水平均升高(P<0.05),且观察组变化更加明显(P<0.05)。治疗前,两组的烦躁易怒、月经不调、头晕耳鸣、情志抑郁、腰膝酸软和胸肋胀满积分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组的烦躁易怒、月经不调、头晕耳鸣、情志抑郁、腰膝酸软和胸肋胀满积分均明显降低(P<0.05),且观察组更加明显(P<0.05)。治疗前,两组的卵巢体积和子宫内膜厚度比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组的卵巢体积降低,子宫内膜厚度增加(P<0.05),且观察组变化更加明显(P<0.05)。结论枸橼酸氯米芬联合紫仙助孕汤对多囊卵巢综合征不孕症有显著疗效,能明显提高妊娠率,减轻症状,降低卵巢体积,增加子宫内膜厚度。

儿童支气管哮喘合并肺部真菌感染的临床特征及危险因素分析

目的探讨儿童支气管哮喘合并肺部真菌感染的临床特征,并分析支气管哮喘患儿继发肺部真菌感染的危险因素。方法回顾性分析2015年1月至2018年6月收治的发生肺部真菌感染(真菌感染组)和未伴肺部真菌感染(对照组)的支气管哮喘患儿各75例的临床资料。记录真菌感染组病原菌分布、临床症状及体征、治疗结局等情况,并采用多因素logistic回归分析肺部真菌感染的危险因素。结果 75例真菌感染组患儿中,共检出69株病原体,其中白色假丝酵母菌检出率最高(61%)。患儿临床症状以咳嗽(93%)、持续高热(56%)、喘息(49%)、呼吸困难(48%)为主;体征则以干湿啰音(43%)、湿啰音(29%)居多,部分患儿伴肝脾肿大。经抗真菌治疗后显效39例,好转26例,无效7例,恶化并死亡3例。多因素logistic回归分析显示,年龄<3岁、合并鼻窦炎和/或过敏性鼻炎、住院期间哮喘发作>3次、静脉应用糖皮质激素、不规范使用抗生素、机械通气及住院时间长均为哮喘患儿发生肺部真菌感染的独立危险因素(分别OR=4.865、3.241、2.255、3.725、3.568、1.549、3.808,P<0.05)。结论对于支气管哮喘患儿,若表现为咳嗽、持续高热,有明显干湿啰音,并合并有肝脾肿大,需高度警惕是否继发肺部真菌感染。年龄<3岁、有鼻窦炎和/或过敏性鼻炎、住院期间哮喘发作>3次、静脉应用糖皮质激素、不规范使用抗生素、机械通气或住院时间长的支气管哮喘患儿继发真菌感染的风险较高。[中国当代儿科杂志,2019,21(5):431-435]

肺炎支原体肺炎婴幼儿肺功能的变化

目的探讨肺炎支原体肺炎(MPP)婴幼儿肺功能的变化特点。方法选取2014年1月至2018年6月诊断为MPP的0~36月龄住院患儿196例为研究对象,同期非肺炎支原体感染引起的0~36月龄肺炎患儿208例为对照(非MPP组)。回顾性分析患儿临床资料,比较两组患儿入院次日和出院当日肺功能结果,并随访MPP患儿出院后2周和出院后4周的肺功能。结果与非MPP组相比,MPP组入院次日和出院当日肺功能检测显示,达峰时间比(TPTEF/TE)、达峰容积比(VPTEF/VE)、吸呼比及呼出75%潮气量时呼气流量显著下降(P<0.05);潮气峰流量与呼出75%潮气量时呼气流量比、呼吸频率、有效气道阻力和公斤功能残气量均显著升高(P<0.05)。与肺功能参数正常参考值比较,MPP和非MPP两组患儿入院次日VPTEF/VE和TPTEF/TE均有所下降;出院当日MPP组患儿VPTEF/VE和TPTEF/TE仍有所下降,而非MPP组患儿已达正常水平。与出院当日比较,MPP组患儿出院后2周及4周VPTEF/VE和TPTEF/TE均升高(P<0.05),但出院后4周时TPTEF/TE仍未达到正常水平。结论急性期MPP和非MPP婴幼儿均存在阻塞性通气功能障碍,而MPP患儿的小气道阻塞更加严重,且改善缓慢,恢复期仍存在一定程度气流受限。

儿童难治性肺炎支原体肺炎发病机制及治疗研究进展

肺炎支原体肺炎(MPP)常见于青少年和儿童,肺炎支原体(MP)是急性呼吸系统感染性疾病中较为常见的病原体。据统计,在所有社区获得性肺炎(CAP)的病原中,肺炎支原体占10%-40%。临床上将难治性支原体肺炎(RMPP)定义为予以大环内酯类抗生素抗感染治疗5-7 d后,患者仍有持续性发热的表现,并且患者的肺部体征以及影像学表现呈进行性加重。

白三烯D4支气管激发试验在儿童气道高反应性检测中的应用价值

目的探讨白三烯D4(LTD4)支气管激发试验(BPT)在儿童气道高反应性(AHR)检测中的应用价值。方法选取2017年11月~2018年8月在我院呼吸专科门诊随访的6~14岁患儿151例,其中哮喘缓解期患儿86例,急性支气管炎(急支)复查患儿65例。以上患儿按随机数字表法分为LTD4组和乙酰甲胆碱组(MCH组),LTD4组患儿共78例行LTD4-BPT,包括46例哮喘患儿和32例急支复查患儿;MCH组患儿共73例行MCH-BPT,包括40例哮喘患儿和33例急支复查患儿。LTD4组BPT阴性的哮喘患儿洗脱后再行MCH-BPT。记录两种BPT过程中患儿的主要不良反应。利用受试者工作特征(ROC)曲线对两种BPT的诊断学价值进行评估。结果LTD4组与MCH组患儿基础肺功能检测结果无显著差异(P>0.05)。LTD4组哮喘患儿BPT阳性率(26.1%)明显低于MCH组(72.5%)(P<0.05);LTD4组急支复查患儿BPT阳性率(3.1%)低于MCH组(15.2%)。LTD4组BPT阴性的哮喘患儿MCH-BPT的阳性率为58.8%,分度以轻度、极轻度为主。LTD4组敏感性(0.2609)低于MCH组(0.725),其特异度(0.9688)稍高于MCH组(0.8485),LTD4组的ROC曲线下面积(0.635)低于MCH组(0.787)。BPT过程中,LTD4组哮喘患儿主要不良反应为咳嗽(34.8%)、气促(19.6%)、胸部紧缩感(15.2%)以及喘息(10.9%),其发生率明显低于MCH组(P<0.05),两种试验中均未发生严重不良反应。结论LTD4-BPT在儿童临床应用中安全性高,与MCH-BPT特异性相似,但敏感性较低,诊断学价值较低,在儿童气道高反应性检测中的应用价值有限。

支气管激发试验在协助婴幼儿咳嗽变异性哮喘诊断中的应用体会

目的评价支气管激发试验(BPT)在婴幼儿咳嗽变异性哮喘(CVA)诊断中的应用价值。方法回顾性调查自2018年1月至2018年6月在我院哮喘专科门诊确诊的70例CVA患儿初诊时的潮气肺功能检测及BPT检测结果。结果 CVA患儿BPT的阳性率为98.6%,程度以中度(40.0%)及轻度(37.1%)阳性反应为主。在BPT的三个不同阶段(基础值、BPT后、给予支气管扩张剂后),RR、VT/kg、TPTEF/TE%、VPTEF/VE%、PEF/TEF25、TI/TE数值改变明显(P<0.01)。吸入激发剂后患儿主要出现的临床表现有气促(18.6%)、喘息(50.0%)、剧烈咳嗽(20.0%)和SPO2明显下降(91.4%),潮气流速容量(TBFV)环表现出典型的阻塞性病变的图形。吸入支气管扩张剂后15min以内所有患儿的症状均消失,肺功能恢复到激发前的状态。结论 BPT能够较好的协助CVA婴幼儿的诊断。在检测过程中密切观察患儿临床表现的前提下,该方法安全可靠。

2013~2018年重庆地区2066例急性下呼吸道感染住院患儿呼吸道合胞病毒流行特征分析

目的研究急性下呼吸道感染住院患儿呼吸道合胞病毒(RSV)检出率、流行规律及临床特征。方法收集2013年6月至2018年5月于重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心住院的2岁以下急性下呼吸道感染(ALRI)患儿鼻咽抽吸物,采用多重PCR检测16种常见呼吸道病毒,分析RSV流行特征。结果共纳入2?066例ALRI住院患儿,病毒检出阳性1?595份(77.20%)。其中RSV阳性检出826份(39.98%)。RSV阳性样本中,RSV-A阳性410份(49.6%),RSV-B阳性414份(50.1%),RSV-A与RSV-B均阳性2份(0.2%)。2013~2014年、2016~2017年主导流行亚型为RSV-B,2014~2015年、2017~2018年以RSV-A为主要检出亚型,2015~2016年为RSV-A与RSV-B共同流行。冬季检出率最高。RSV合并人鼻病毒为最常见的2种病毒混合检出组合(123份)。该组患儿较单一RSV检出患儿更易出现喘息(P=0.030)。在2?066例患儿中,单一RSV检出298份,RSV混合其他病毒检出148份,其他病毒检出389份,病毒检出阴性241份。RSV单一检出组较其他病毒检出组和病毒检出阴性组月龄更小,更易发生呼吸困难、呼吸衰竭及重症下呼吸道感染(P<0.0083)。RSV-A阳性患儿中的男性比例高于RSV-B阳性患儿(P=0.004),而临床表现二者未见显著差异。结论 2013~2018年重庆地区RSV-A与RSV-B既可分别主导流行,也可共同流行;RSV为急性下呼吸道感染住院患儿最主要病毒病原,易导致重症下呼吸道感染;RSV-A和RSV-B感染患儿临床表现无差异,但RSV-A更易感染男性患儿。[中国当代儿科杂志,2021,23(1):67-73]

维生素A联合地塞米松对哮喘小鼠气道上皮结构和功能的影响

目的探讨维生素A联合糖皮质激素对哮喘小鼠气道上皮的结构和功能的影响。方法将6~8周SPF级C57bl/6雌性小鼠按随机数字表法分为5组:对照组、哮喘组(asthma)、地塞米松组(Dex)、维生素A组(VA)、地塞米松+维生素A组(D+VA)。asthma组、Dex组、VA组、D+VA组用屋尘螨建立哮喘模型,Dex组在最后3次激发前30 min,腹腔注射200μL地塞米松溶液,VA组在建模第21天起给予维生素A特殊饲料,连续10 d,D+VA组的地塞米松和维生素A给予方法同Dex组和VA组,对照组用0.9%NaCl溶液代替,于末次激发24 h内行有创肺功能检测,测定小鼠气道高反应性(airway hyperresponsiveness,AHR),留取支气管肺泡灌洗液(BALF)行细胞计数,行气管及左肺病理学检测,免疫组化染色检测肺组织E-cadherin的表达,Western blot检测肺组织caspase 3、cleaved caspase 3的表达。结果 Dex组气管上皮损伤较asthma组加重,同时肺组织E-cadhein表达较asthma组降低(P<0.05),caspase 3及cl-caspase 3表达较asthma组升高(P<0.01)。VA组AHR较asthma组降低(P<0.05),但BALF细胞计数、肺病理学检测结果与Dex组无明显差异。D+VA组AHR低于Dex组(P<0.01),且气道上皮损伤较Dex组明显减轻,同时肺组织E-cadherin表达较Dex组增加(P<0.01),caspase 3及cl-caspase 3表达较Dex组降低(P<0.01)。结论地塞米松可以促进哮喘小鼠气道上皮凋亡,加重气道上皮的损伤,维生素A联合地塞米松应用哮喘小鼠时,可进一步降低哮喘小鼠的AHR,同时可以抑制气道上皮凋亡,减轻气道上皮的损伤。

经口气管插管激发和雾化激发建立哮喘小鼠模型的比较

目的通过建模比较小鼠哮喘模型效果及稳定性,以确定建模的最佳方式。方法将SPF级6~8周雌性BALB/c小鼠随机分为5组:20μg致敏雾化激发组(20-INH)、100μg致敏雾化激发组(100-INH)、20μg致敏经口气管插管激发组(20-ITI)、100μg致敏经口气管插管激发组(100-ITI)、control组。所有哮喘模型组小鼠用鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏和激发,在0、7、14 d分别使用20μg和100μg致敏,在21 d开始分别给予雾化激发和经口气管插管激发,在末次激发后24 h内对小鼠行气道高反应性(airway hyperresponsiveness,AHR)检测,留取支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞计数,左肺病理学检测,ELISA检测血清免疫球蛋白E(IgE)水平。结果20-INH、100-INH、100-ITI 3组的AHR、气道炎症、气道粘液高分泌、血清总IgE水平均有明显升高,其中以100-ITI组在以上各方面均较突出。经口气管插管激发哮喘模型各数据标准差低于雾化激发哮喘模型。结论经口气管插管激发方式能在100μg OVA致敏剂量时成功建立小鼠哮喘模型,且模型气道粘液分泌量及血清总IgE水平升高更明显,该模型稳定性高,值得推荐。

KIF3A通过结合Wnt/β-catenin通路中的β-arrestin参与哮喘气道上皮的炎症调控

目的研究KIF3A参与哮喘气道炎症调控的可能机制,为哮喘治疗提供新的靶点和方向。方法选取20只雌性6~8周龄C57BL/6小鼠建立哮喘模型,随机分为哮喘组与对照组(n=10)。Western blot和免疫组化(IHC)检测两组小鼠KIF3A的表达;在体外分别用磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution, PBS)和屋尘螨(house dust mite, HDM)干预人支气管上皮细胞16HBE,Western blot和RT-PCR检测KIF3A的表达;构建含有KIF3A的过表达组(LV-KIF3A-45894-J2,LV-KIF3A)和RNA干扰序列的慢病毒载体组(LV-KIF3A-RNAi-81183-1,RNAi),用含有空载的慢病毒和阴性对照序列的慢病毒载体作为对照,分别感染16HBE;免疫共沉淀检测过表达组中KIF3A与β-arrestin的结合,同时Western blot和RT-PCR检测各组细胞β-catenin的表达水平,RT-PCR检测KIF3A基因差异表达对趋化因子CCL-17和CCL-26表达的影响。结果哮喘组的KIF3A表达水平较对照组减少(P<0.05)。HDM干预16HBE后的KIF3A蛋白和mRNA表达水平较对照组有下降趋势,但无统计学差异(P>0.05)。慢病毒载体感染16HBE 72 h且经流式分选绿色荧光阳性细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示LV-KIF3A组和RNAi组的KIF3A蛋白和mRNA表达分别增多(P<0.05)和下降(P<0.05)。免疫共沉淀证实KIF3A与β-arrestin相结合。LV-KIF3A组和RNAi组的β-catenin蛋白总量无明显差异;与对照组相比,RNAi组的β-catenin mRNA表达显著下降(P<0.000 1),LV-KIF3A组则无统计学差异。RT-PCR结果显示,与对照组相比,RNAi组的趋化因子CCL-17和CCL-26的mRNA水平增加(P<0.001),LV-KIF3A组则降低(P<0.05)。结论 KIF3A与Wnt/β-catenin通路中的β-arrestin结合,通过调节趋化因子CCL-17和CCL-26的表达而参与哮喘气道上皮炎症的调控。

敲除Brg1基因对小鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞数量和功能的影响及其机制研究

目的研究染色质重构复合物核心催化亚基(Brahma-related gene 1,Brg1)对C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞数量和功能的影响及其可能的机制。方法取6~8周龄雌性野生型C57BL/6小鼠(Wild type,WT)及Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell Ⅱ,AECⅡs)上特异性敲除Brg1的C57BL/6小鼠(Brg1fl/fl)作为实验对象,每组选取8只小鼠,收取标本,利用免疫组化及免疫荧光分析肺组织中表面活性物质相关蛋白C(surfactant-associated protein C,SFTPC)阳性的细胞率,流式细胞术分析小鼠肺组织中表面活性物质蛋白C前体蛋白(prosurfactant protein C,pro SP-C)阳性的细胞(即AECⅡs)数量。Western blot检测各组小鼠肺组织中pro SP-C、SFTPC、表面活性物质相关蛋白A(surfactant-associated protein A,SFTPA)、表面活性物质相关蛋白D(surfactant-associated protein D,SFTPD)的表达水平。Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)表达及增殖相关信号转导途径中关键蛋白EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT及NF-κB p65的活化水平。结果抗SFTPC免疫组化、免疫荧光显示其在肺泡上皮表达较WT小鼠增多(P<0.05);流式细胞术显示Brg1fl/fl组小鼠肺组织中pro SP-C+的细胞百分比较WT小鼠明显增高(P<0.05),Western blot检测结果显示AECⅡs的功能性蛋白pro SP-C、SFTPC、SFTPA及SFTPD在Brg1^fl/fl小鼠中明显增多;Brg1^fl/fl组小鼠肺组织中NF-κB p65及周期蛋白CyclinD1的表达增加,且p-EGFR/EGFR、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT百分比显著提高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论特异性敲除C57BL/6小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞中的Brg1可促使AECⅡs数量和分泌功能的增加,其可能机制与敲除Brg1促进EGFR/PI3K/AKT/NF-κB信号通路的激活,且与增殖周期蛋白CyclinD1表达的增加有关。

肺炎并肺不张690例病原学分析

目的研究重庆地区肺炎并肺不张的病原学特点。方法收集690例肺炎并肺不张患儿的临床资料,回顾性分析其病原、受累肺叶、支气管肺泡灌洗的疗效等。结果690例患儿中男353例、女337例,中位年龄4.1(2.5~6.8)岁。其中病原明确者601例(87.1%),感染病原以肺炎支原体最常见(330例,47.8%),其次为细菌(271例,39.3%)和病毒(209例,30.3%)。不同年龄组、不同季节组之间病原体分布差异有统计学意义(P<0.001)。婴儿组与幼儿组细菌、病毒以及细菌+病毒混合感染的比例均较高,学龄前期和学龄期支原体感染比例较高;春、秋季细菌感染比例较高,冬季病毒感染比例较高,夏、秋季支原体感染比例较高。不同年龄段之间患儿肺炎并肺不张的好发部位差异有统计学意义(P<0.001)。婴儿组右肺上叶肺不张比例较高,幼儿、学龄前期和学龄组右肺中叶肺不张比例较高。支气管肺泡灌洗次数与病原种类、受累肺叶数量有相关性(P<0.01),单病原组以及单叶肺不张组灌洗次数为1次的比例较高。结论肺炎并肺不张的病原以肺炎支原体最常见,各年龄段、各季节之间病原组成存在差异,受累肺叶以右肺中叶常见,预后与病原体种类、受累肺叶数量密切相关,混合感染、多叶肺不张易导致难治性肺不张。

儿童临床诊断不明呼吸系统疾病97例基因二代测序结果分析

目的探讨基因二代测序在儿童呼吸系统疑难疾病中的诊断应用。方法回顾性分析2016—2021年采用二代测序对以呼吸系统症状为主要表现的疑难疾病的诊断情况,总结患儿的临床特征及基因二代测序结果。结果进行基因二代测序的患儿共97例,均以呼吸系统症状为首发或主要表现,中位年龄1.9(7.6)岁,男57例、女40例。确诊单基因病31例(诊断率32.0%),中位年龄4.0(7.6)岁;主要表现为慢性湿性咳嗽,部分患儿进展到后期有不同程度的营养不良、杵状指。其中原发性纤毛运动障碍20例,18例为复合杂合变异(HYDIN 7例、CCNO 3例、CCDC402例、DNAH12例、DNAAF31例、DNAI21例、DNAH111例、RSPH4A 1例);1例为DNAI2基因纯合变异;1例存在X连锁PIH1D3基因半合子缺失。囊性纤维化4例,其中3例为CFTR基因复合杂合变异,1例为CFTR基因c.4056G>C纯合变异。肺表面活性物质代谢障碍3例,均为SFTPC基因杂合变异。原发性免疫缺陷病2例,分别为PIK3CD基因变异致PI3Kδ过度活化综合征1例、CXCR4基因变异致WHIM综合征1例。神经肌肉疾病2例,为MTM1基因变异致中央核肌病1例、SMN1基因纯合缺失致进行性脊肌萎缩症1例。66例基因检测阴性患儿以反复呼吸道感染和慢性咳嗽表现为主,伴或不伴支气管扩张;部分患儿表现为不明原因气促、呼吸窘迫,伴或不伴肺部广泛间质改变。结论以呼吸系统症状为首发或主要表现的儿童单基因病具有高度的临床和遗传异质性,基因二代测序的应用给诊治带来了新思路,扩展对疾病谱的认识。

肝细胞癌的抗血管生成免疫联合介入治疗:肝动脉灌注化疗与化疗栓塞疗效的比较

目的:旨在比较抗血管生成免疫治疗联合肝动脉灌注化疗(hepatic artery infusion chemotherapy,HAIC)与联合肝动脉化疗栓塞(transcatheter arterial chemoembolization,TACE)治疗肝细胞癌的有效性和安全性。方法:回顾性分析天津医科大学肿瘤医院2019年1月至2020年12月收治93例肝细胞癌病人,B期18例,C期75例。男74例,女19例,中位年龄57(27~78)岁。50例行抗血管生成免疫联合TACE(TACE组)治疗,43例行抗血管生成免疫联合HAIC(HAIC组)治疗。采用实体肿瘤疗效评价标准RECIST1.1评估疗效。主要观察终点为客观反应率和疾病控制率,次要观察终点为中位无进展生存期及中位总生存期。结果:HAIC组客观反应率和疾病控制率显著高于TACE组(客观反应率:72.09%比44.00%,P=0.006;疾病控制率:88.37%比60.00%,P=0.002)。HAIC组及TACE组的中位随访时间分别为12.13个月及11.95个月。截至随访,TACE组中位无进展生存期11.83个月(95%CI:4.36~19.31个月),中位总生存期17.93个月(95%CI:11.80~24.06个月),而HAIC组均未到达中位无进展生存期和总生存期。两组无进展生存期及总生存期差异有统计学意义(P=0.017,P=0.007)。结论:针对进展期肝细胞癌,抗血管生成免疫联合HAIC相比联合TACE在疾病控制和生存上获益更大,不良反应相对可控,安全性好。