大口黑鲈形态特征、染色体核型及眼晶状体乳酸脱氢酶的电泳分析

旨在了解大口黑鲈(Micropterus salmoides)的种质特性,为其种质鉴定提供理论依据。采用传统形态学方法观测样品形态特征,借助肾细胞滴片空气干燥法制备染色体标本并进行核型分析,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳法研究大口黑鲈眼晶状体乳酸脱氢酶(LDH)。结果表明:大口黑鲈体呈纺锤形,口裂大,斜裂;背部黑绿色,体侧青绿;吻端至尾鳍基部有排列成带状的黑斑。鳃盖上有3条呈放射状的黑斑;背鳍鳍式D.VIII~XI-11~14;臀鳍鳍式A.III-9~12;左侧第一鳃弓外侧鳃耙数为6~7,鳔1室,脊椎骨总数30~32。染色体数目2n=46,核型公式为2m+2st+42t,臂数NF=48,未发现带有随体、次缢痕的染色体和异型性染色体,大口黑鲈进化上符合高位类群核型特征;眼晶状体中的LDH酶带5条,观察到LDHA、LDHB和LDHC 3个基因位点。综上所述,在对大口黑鲈进行种质鉴定时,建议采用多种种质鉴定技术手段系统化地考察和评价其种质状况。

基于罗氏沼虾染色体核型、同工酶及遗传多样性分析

为保护、评估及合理利用罗氏沼虾种质资源,为今后指导育种及养殖提供理论依据,以采自广西及江苏数丰良种场的罗氏沼虾为材料,采用PHA和秋水仙素肌肉注射、精巢或卵巢细胞直接制片法,对罗氏沼虾染色体核型进行了研究。采用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳技术,分析了罗氏沼虾肌肉或鳃组织乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、酯酶(EST)、醇脱氢酶(ADH)4种同工酶的组织表达模式,并初步分析了其生化遗传学特性及遗传结构。结果表明:罗氏沼虾为二倍体,2N=118=56M+24SM+10ST+28T,臂数(NF)为198。未发现带有随体或次缢痕的染色体及性染色体。4种酶共记录出22个等位基因15个基因位点,位点平均有效等位基因数(Ne)为1.47;4种酶有7个基因频率为0.1500~0.8500的多态位点;多态位点比例P为46.7%;平均期望杂合度(He)值为0.1917,平均观测杂合度(Ho)值为0.2611,Hardy-Weinberg遗传偏离指数(D)值为0.3797,表明其杂合子过剩及缺失现象并存,但杂合子过剩现象更突出,说明该群体遗传变异范围较宽,变异程度较大,群体遗传多样性高,可为今后的人工育种提供良好的亲本。

护理风险管理在重症急性胰腺炎患者连续性血液净化中的应用

目的探讨护理风险管理在重症急性胰腺炎患者连续性血液净化中的应用效果。方法选取2020年1月至2021年12月收治在成都市第二人民医院ICU的82例重症急性胰腺炎患者为研究对象,按照随机数表法分为对照组和观察组,每组各41例,两组均行连续性肾脏代替治疗(CRRT),对照组给予CRRT常规护理管理,观察组在此基础上行护理风险管理干预,比较两组患者治疗时间、效果、C反应蛋白、血淀粉酶、满意度和风险发生率的情况。结果观察组治疗时间明显短于对照组,观察组C反应蛋白明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血淀粉酶低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者治疗有效率、护理满意度显著高于对照组,风险发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论护理风险管理在重症急性胰腺炎患者CRRT中可以增强CRRT治疗稳定性及治疗效果,降低护理风险发生率,提高患者满意度。

分散固相萃取-液质联用法测定稻渔综合种养环境中四种农药残留

建立了液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定稻渔综合种养环境中苄嘧磺隆、双草醚、吡蚜酮和氯虫苯甲酰胺的分析方法.水样过滤后直接进样,土壤和水产品经乙腈匀浆提取,C18吸附剂净化.结果表明,在不同基质中,4种农药在各自的线性范围内线性关系良好(R2≥0. 995);水中氯虫苯甲酰胺的检出限为0.10μg·kg^-1,其它3种为0.05μg·kg^-1;土壤和水产品中氯虫苯甲酰胺的检出限(LOD)为0.20μg·kg^-1,其它3种为0.10μg·kg^-1;在不同添加水平下,4种农药的平均回收率为77.52%-93.86%,相对标准偏差(RSD)为3.73%-11.09%.

超高效液相色谱-串联质谱法测定稻田水产品中毒死蜱残留

以QuEChERS作为样品前处理手段,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测技术,建立了稻田水产品中毒死蜱残留的检测方法。样品经乙腈提取,由0.2 g乙二胺- N -丙基硅烷(PSA)和1.2 g无水硫酸镁分散萃取净化,采用Hypersil GOLD C 18 色谱柱(100 mm×2.1 mm, 5 μm)进行分离,用加热大气压电喷雾电离源、正离子模式进行扫描,在选择反应监测模式下检测,基质匹配标准曲线外标法定量。结果表明,毒死蜱在0.5~100.0 μg/L 范围内线性关系良好,相关系数大于0.999;毒死蜱的加标回收率为86.2%~103.6%,相对标准偏差为3.5%~7.6%( n =6),检出限为0.25 μg/kg ,定量限为0.5 μg/kg 。该方法简单、快速、灵敏,能够满足稻田水产品中毒死蜱残留的检测需求。

长江流域黄鳝中全氟化合物的残留特征及其来源探讨

为探究长江中上游养殖黄鳝(Monopterus albus)中全氟化合物(Perfluorinated compounds,PFCs)的残留特征和污染来源,调查研究了2015~2016年采自于湖南、湖北、江西、安徽、四川和重庆10个城市的150份黄鳝样品,同时,2016年在湖北省潜江市黄鳝养殖基地追踪了黄鳝养殖过程中的PFCs污染可能来源,并探究黄鳝中PFCs的来源。样品经提取,通过C18和碳黑(GCB)净化,利用超高效液相色谱–串联质谱联用分析了19种PFCs的含量,并对数据进行分析。结果显示,长江流域黄鳝中PFCs共8种物质残留,主要污染物是全氟辛酸(PFOA)和全氟辛烷磺酸(PFOS);长江流域PFCs污染最严重的是湖北省黄鳝,其次是江西省黄鳝;PFOS在湖北省黄鳝中含量最高,为5.42μg/kg,PFOA在四川省黄鳝中含量最高,为3.66μg/kg;同时,对整个黄鳝养殖过程进行追踪,结合黄鳝的特殊养殖方式,发现黄鳝中PFCs污染主要来源于黄鳝养殖中摄食的蚯蚓以及所处的养殖环境,包括池塘水和土壤。

气相色谱-串联质谱法同时测定水体和底泥中多氯联苯及有机氯农药残留

建立了气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)同时测定水体和底泥中7种指示性多氯联苯和19种有机氯农药残留的分析方法.水样由二氯甲烷萃取,弗罗里硅土固相萃取柱净化;底泥样品经二氯甲烷-正己烷(1∶1,V/V)超声提取,氨基固相萃取柱净化.采用TG-5MS(30 m×0.25 mm×0.25μm)色谱柱对目标物进行分离,在电子轰击电离源下以选择反应监测模式(SRM)进行检测.结果表明,26种目标物在1.00—200μg·L-1线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0.994.空白水样中低、中、高的3个添加浓度下的平均加标回收率为66.1%—109.1%,相对标准偏差(RSD)为2.3%—10.9%,检出限(LOD)为0.24—0.60 ng·L-1.空白底泥样品中低、中、高的3个添加浓度下的平均加标回收率为69.8%—109.9%,RSD为2.0%—11.3%,检出限(LOD)为0.06—0.15μg·kg-1.该方法选择性好、灵敏度高、重现性好,能够满足水体和底泥中多种多氯联苯和有机氯农药残留的检测要求.

大鲵不同部位肌肉和皮营养品质评价

【目的】探寻大鲵不同部位皮和肌肉的质构特性、营养成分差异。【方法】选取大鲵不同部位肌肉和不同部位皮进行营养成分、质构特性、pH和保水性进行差异研究,并进行感官评价。【结果】大鲵尾部肌肉和皮的粗脂肪含量分别为4.88 g/100g和2.68 g/100g,显著高于其他部位的肌肉和皮;尾部肌肉水分含量显著低于其他部位(P<0.05);大鲵皮和肌肉中第一限制性氨基酸均为Met+Cys,肌肉中必需氨基酸总含量和氨基酸总量均低于皮,各部位皮中呈味氨基酸总含量为28.23 g/100g,远高于肌肉的17.15 g/100g;大鲵肌肉质构特性中腹部的硬度和回复性显著低于背部和尾部肌肉(P>0.05);大鲵尾部肌肉脂肪酸种类最多,为20种;肌肉和皮中含量最高的脂肪酸均为油酸,其中以尾部肌肉中油酸含量最高,达到37.59%。尾部肌肉亚油酸、亚麻酸、EPA和DHA齐全,脂肪酸种类丰富;尾部肌肉pH值最低,保水性最差;背部肌肉嫩度、色泽及气味感官评分最高。【结论】大鲵各部位肌肉和皮均具有较高的营养价值和食用价值。

克氏原螯虾质量安全风险研究与分析

克氏原螯虾(Procam barus clarkii)作为中国加工出口的重要水产品之一,其质量安全备受消费者的关注。本研究介绍了克氏原鳌虾的质量安全总体概况,围绕苗种、渔药、养殖环境、饲料、非规范用药、重金属残留、寄生虫和水产品流通等环节,针对克氏原螯虾质量安全的现状和隐患进行了全面的分析,从而提出了保证苗种质量,加强饲料和非药品管理,完善行业标准、溯源体系等建议。本研究旨在促进克氏原螯虾质量的不断提升,为小龙虾产业的健康发展和消费者的安全食用提供技术保障。

斑点叉尾鮰形态观察及其两种同工酶的电泳分析

为从形态特征和生化遗传层面上丰富斑点叉尾鮰(Ietalurus Punetaus)种质资源研究内容,进一步为筛选鉴定斑点叉尾鮰种质的生化遗传标记提供前期基础,采用形态学方法观测斑点叉尾鮰(Ietalurus Punetaus)的形态特征,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了斑点叉尾鮰5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)的表达情况.结果表明:1)斑点叉尾鮰主要形态特征为体表无鳞,头小,口亚端位,具4对触须.背部呈灰褐色,腹部呈乳白色且浑圆,体侧具不规则灰黑色斑点.背鳍和胸鳍具棘.脂鳍肥厚,末端游离.尾鳍分叉深.各鳍鳍式为:背鳍D.i-6~8,胸鳍P.i-8~9,腹鳍V.8~9,臀鳍A.26~29,尾鳍C.29~30.鳔分两室,腹膜黑色.肋骨10对.脊椎骨总数93.左侧第一鳃弓外侧鳃耙数21~23.2)LDH同工酶在斑点叉尾鮰的心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中表达的酶带数分别为5条、3~4条、3条、4~7条和5条,MDH酶带数分别为4条、1条、2条、3条和6~8条,且同一组织不同个体间也存在明显差异.研究认为,LDH同工酶和MDH同工酶在斑点叉尾鮰5种组织中的表达具有组织特异性和个体差异性,各组织同工酶的表达与其生理功能相适应.

细鳞斜颌鲴5种组织2种同工酶的电泳分析

为了解细鳞斜颌鲴(Xenocypris microlepis)的生化遗传特征,并以此为基础为其种质资源鉴定提供理论依据,本研究采用不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对细鳞斜颌鲴5种组织(心脏、晶状体、肌肉、肾脏和肝脏)的乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行分析。结果表明:所测样本鱼的心脏、晶状体、肌肉、肾脏和肝脏中的LDH酶带数分别为:6～8、5、2～4、5和4～6条; MDH酶带数分别为:7～8、5～6、7～8、3～4和4条;细鳞斜颌鲴的LDH同工酶和MDH同工酶具有组织特异性,其心脏、肾脏和肝脏MDH分为上清液型(s-MDH)和线粒体型(m-MDH),肌肉和晶状体组织中未见上清液型MDH(s-MDH)。研究认为晶状体组织LDH可作为鉴定细鳞斜颌鯝种质特征的生化遗传参数。本研究可为鉴定细鳞斜颌鲴种质、制定其种质标准提供参考依据。

巨须裂腹鱼5种组织乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶的电泳分析

为了了解巨须裂腹鱼的生化遗传特性,丰富巨须裂腹鱼种质资源研究的内容,通过聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对巨须裂腹鱼5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行了电泳分析。结果表明:所测样本鱼心脏LDH酶带数为6~7条、眼睛晶状体LDH酶带数为6~10条、肌肉LDH酶带数为5~7条、肝脏LDH酶带数为8~11条和肾脏中的LDH酶带数为8~10条;LDH-C基因只在肝脏中特异性表达。心脏MDH酶带数为4~8条、眼睛晶状体MDH酶带数为2~4条、肌肉MDH酶带数为3~4条、肝脏MDH酶带数为4~5条和肾脏MDH酶带数为4~7条。5种组织中LDH在肝脏中表达的酶带数最多,肝脏MDH酶带着色最深,表达活性程度最强。巨须裂腹鱼的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性和个体差异性。组织特异性主要体现在LDH和MDH酶带数目和表达活性程度不同两方面,与各组织执行特定生理功能密切相关。巨须裂腹鱼同工酶个体差异性可能是其漫长的进化过程中为了能适应特殊生境的需要。研究结果可从生化遗传角度为巨须裂腹鱼制定种质标准和资源保护利用提供一定理论依据。

水产养殖环节“非规范药品”使用质量安全风险隐患分析

科学合理使用渔药是保证水产品安全的重要措施。近年来,个别未参加“升标协作组”的企业将没有升为国家标准的原渔药等产品以“非规范药品”名义进行销售。水质底质改良剂、微生物制剂等水产养殖用“非规范药品”的应用市场规模远大于国标渔药,甚至一些杀虫剂、除草剂等符合国家药品标准的主要成分也被包装成“非规范药品”在市场上销售,形成了“乱象多、禁不住、管不了、不清楚”的特殊产业形态。当前,“非规范药品”存在成分不明、欠缺生产技术及质量检测标准、无明确管理法规和风险研究缺失等问题,导致水产“非规范药品”市场安全隐患突出。本研究以水产养殖环节中的“非规范药品”为研究对象,通过实地抽样、定性定量分析和安全性评估等方法,初步探明了水产养殖环节“非规范药品”的基本情况,以期为科学制订监管措施提供参考依据。

拉萨裂腹鱼3种同工酶的电泳分析

为了了解拉萨裂腹鱼的生化遗传特性,丰富拉萨裂腹鱼种质资源研究的内容。借助聚丙烯胺凝胶对拉萨裂腹鱼5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和血清)中的乳酸脱氢酶(LDH)、5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)苹果酸脱氢酶(MDH)以及肝脏醇脱氢酶(ADH)进行了电泳分析。研究结果表明:所测样本鱼心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和血清中的LDH酶带数分别为:6~10条,8~10条,4~7条,0~7条和1~7条,LDH-C基因只在肝脏中表达;心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中MDH酶带数分别为6~7条,2~6条,5~7条,5条和3~5条;肝脏ADH酶带数为3条。拉萨裂腹鱼的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性和个体差异性。组织特异性主要体现在酶带数目和表达活性程度不同两方面,与各组织执行生理功能密切相关。拉萨裂腹鱼同工酶个体差异性可能是其漫长的进化过程中为了能适应特殊生境的需要。

气相色谱-串联质谱法测定稻田水产品中26种持久性有机污染物

建立了固相萃取净化气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)测定稻田水产品中26种持久性有机污染物残留的检测方法。样品经二氯甲烷-正己烷(1∶1,V/V)混合溶剂超声提取,由氨基固相萃取柱净化,采用气相色谱分离,在选择反应监测模式(SRM)下测定。结果表明,26种目标物在1~500μg/L范围内线性关系良好,相关系数R2均大于0.997,方法的检测限(LOD)为0.20~1.00μg/kg,定量限(LQD)为0.60~3.00μg/kg。26种目标物在鲤(Cyprinus carpio)和克氏原螯虾(Procambarus clarkii)空白样品中不同添加水平的平均回收率为70.6%~115.0%,相对标准偏差(RSD)为3.29%~10.90%。该方法适用于稻田水产品中26种持久性有机污染物的测定。

基于UPLC-QTOF/MS法快速靶向筛查与测定克氏原螯虾中的三环唑

建立了克氏原螯虾(Procambarus clarkii)中三环唑的快速筛查和定量检测的超高效液相色谱-四级杆/飞行时间质谱法(UPLC-QTOF/MS法)。筛查样品经酸化乙腈(0.1%甲酸)提取,减压旋蒸浓缩后,50%甲醇(0.1%甲酸)复溶测定。该方法采用全扫描方式采集,结合保留时间、精确分子量、同位素比与自建的二级标准谱库数据可进行快速准确的定性确证;对于阳性样品采用二级扫描模式(MRMHR)进行准确定量。采用QuEChERS法对克氏原螯虾肌肉样品中的三环唑进行测定,在0.5~100.0μg/L范围内,空白基质匹配标准曲线为Y=694.34X+29.16,r=0.9995,方法检测限(LOD)为0.5μg/kg,定量限(LOQ)为1.0μg/kg,平均回收率为65.15%~94.24%(n=6),相对标准偏差为5.31%~8.12%。结果表明,本筛查和测定方法具有快速、准确等优点,适用于克氏原螯虾中三环唑的快速筛查和定量测定,可为水产品中农药残留的快速筛查和定量测定提供参考。

黄尾鲴形态特征及其同工酶电泳分析

为了解黄尾鲴(Xenocypris davidi)的形态特征和生化遗传特性,为其种质鉴定提供理论依据,本研究采用传统形态观察和可数可量性状测定的方法对74尾样品进行了形态特征分析,并通过聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对黄尾鲴5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)的乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行了分析。结果表明:1)黄尾鲴的主要形态特征为:头小而尖,口下位,下颌有较发达的角质边缘。肛门靠近臀鳍,肛门前具小段腹棱。鳃盖骨后缘有一浅黄色斑块,背鳍末端呈黄色,胸鳍和腹鳍呈淡黄色,尾鳍呈橘黄色。鳍式为背鳍D.Ⅲ-7和臀鳍A.ⅲ-9~11;下咽齿齿式2·4·6/6·4·2;脊椎骨数为36~41;左侧第一鳃弓外侧鳃耙数为44~52。2)黄尾鲴的心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中的LDH酶带数分别为:6、6、3~4、7和5~8条;MDH酶带数分别为4~7、0~3、3~4、3~4和2~3条,心脏和肌肉MDH分为上清液型MDH(s-MDH)和线粒体型MDH(m-MDH)。研究认为:黄尾鲴的2种同工酶系统具有组织特异性,眼睛晶状体组织LDH可作为鉴定黄尾鲴种质的特征生化遗传参数。

江汉平原克氏原鳌虾分级现状、存在问题与对策

采用重点调查、抽样调查和问卷调查等方式对江汉平原克氏原螯虾(Procambarus clarkii)的分级情况进行了调研。调查发现江汉平原克氏原螯虾在养殖、销售、烹饪和加工等环节中进行分级操作与不论等级、统购统销现象并存。规格是上述分级的主要划分指标,兼顾以感官指标为主的其他分级要素。本研究分析了江汉平原克氏原螯虾分级存在问题和原因,提出相应对策和建议,旨在为克氏原螯虾分级评价以及等级划分体系合理化与标准化建设提供参考。

大鳞鲃形态特征及其同工酶电泳分析

为了解大鳞鲃(Barbus capito)的形态特征和生化遗传特性,为其种质鉴定提供理论依据,本研究采用传统形态观察和测定可数可量性状的方法对30尾样品鱼进行形态特征分析,并通过聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳对大鳞鲃5种组织(心脏、眼睛晶状体、肝脏、肾脏和脾脏)的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和酯酶(EST)进行分析。结果表明:大鳞鲃的主要形态特征为体呈梭形,头部较小,体修长,口亚下位,具有吻须和颌须各一对。身体被覆发光的鳞片,鱼体背部呈银灰色,腹部银白色。鳍式为背鳍D.Ⅲ-7~8、胸鳍P.Ⅰ-16~18、腹鳍V.Ⅱ-8、臀鳍A.Ⅲ-5和尾鳍C.22-28;侧线鳞数64-74、侧线上鳞数12~14、侧线下鳞数10~11;下咽齿齿式为2·3·5/5·3·2;脊椎骨数为46~49。大鳞鲃的LDH、MDH和EST同工酶具有组织特异性,这种特异性与组织行使其生理功能有关,肝脏组织3种同工酶表达活性最强,肾脏组织3种同工酶的表达活性较强,可能与肾脏具有调节渗透压功能有关。

江鳕生化遗传学特性及群体遗传结构初步分析

为了解江鳕(Lota lota)生化遗传特性及其遗传结构,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,分析了乳酸脱氢酶(LDH)、乙醇脱氢酶(ADH)、苹果酸脱氢酶(MDH)和异柠檬酸脱氢酶(IDHP)等4种同工酶在额尔齐斯河江鳕肌肉、肝脏、心脏、脾脏、肾脏和眼睛6种组织的组织表达模式。结果表明:额尔齐斯河江鳕的4种同工酶在6种组织中的分布具有明显的组织特异性;其中LDH、MDH、ADH 3种酶共记录出2个基因位点,其中LDH1~LDH5、ADH1~ADH3、MDH1和MDH2为10个多态位点;多态位点的基因频率为0.125~0.875,多态位点比例为83.33%;等位基因数为22个,位点平均有效等位基因数为1.8333;平均期望杂合度为0.3109,平均观测杂合度为0.4234,Hardy-Weinberg遗传偏离指数为0.3619。杂合子处于过剩状态,表明额尔齐斯河江鳕尚未经历人工定向改良,其群体种质资源库仍有较大的变异程度,可为后续的人工育种提供良好的亲本。此外,肌肉中IDHP可作为江鳕特有的生化遗传学标记,为种质鉴定提供理论依据。