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猪催乳素的真核表达与生物活性验证
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作者 谢社风 韩贝贝 +5 位作者 高凤磊 马莹 李莉 张守全 邹娴 卫恒习 《华南农业大学学报》 CSCD 北大核心 2024年第2期179-189,共11页
【目的】催乳素(Prolactin,PRL)具有广泛的生理调节作用,但其多效性机制仍不清楚。为了更好地研究猪PRL的多效性,本研究制备猪源PRL真核重组蛋白并验证其生物活性。【方法】利用分子克隆技术将猪PRL基因克隆到慢病毒表达载体pCDH-CMV-MC... 【目的】催乳素(Prolactin,PRL)具有广泛的生理调节作用,但其多效性机制仍不清楚。为了更好地研究猪PRL的多效性,本研究制备猪源PRL真核重组蛋白并验证其生物活性。【方法】利用分子克隆技术将猪PRL基因克隆到慢病毒表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-GFP+Puro中,经慢病毒包装获得携带猪PRL基因的PRL-慢病毒;用浓缩的PRL-慢病毒感染CHO-K1细胞,经嘌呤霉素筛选后,获得能够分泌PRL重组蛋白的阳性细胞系CHO-K1-PRL;利用镍柱亲和层析法对重组蛋白进行纯化并进行LC-MS/MS质谱鉴定,利用HC11细胞体外培养体系验证PRL重组蛋白的生物活性。【结果】成功构建了携带猪PRL基因的pCDH-CMV-6His-PRL-6HisEF1-GFP+Puro慢病毒表达载体;包装及浓缩后的PRL-慢病毒滴度为9.9×10^(8) TU/mL,其感染的CHO-K1细胞经嘌呤霉素筛选后得到阳性细胞系CHO-K1-PRL;从CHO-K1-PRL细胞培养液中成功纯化出重组蛋白,质量浓度为50μg/mL,LC-MS/MS质谱分析的覆盖率达94%,鉴定为猪PRL重组蛋白;重组PRL具有促进HC11细胞增殖及酪蛋白表达的生物活性。【结论】构建的细胞系CHO-K1-PRL可稳定表达具有生物活性的猪重组PRL,为猪PRL功能的研究和生产应用奠定了基础。 展开更多
关键词 催乳素 CHO-K1细胞 真核表达 慢病毒载体 重组蛋白
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猪β-防御素129和114的表达及其功能研究进展
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作者 李菊 黄晓刚 +6 位作者 韩贝贝 刘松柏 高凤磊 李莉 赵云翔 张守全 卫恒习 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期73-78,共6页
防御素是广泛分布于脊椎动物体内的高度保守的小型阳离子肽,具有抵抗病原微生物的能力,并在先天性免疫与适应性免疫中发挥重要作用。猪β-防御素129(Porcine β-Defensin 129,pBD129)和猪β-防御素114(Porcine β-Defensin,pBD114)广泛... 防御素是广泛分布于脊椎动物体内的高度保守的小型阳离子肽,具有抵抗病原微生物的能力,并在先天性免疫与适应性免疫中发挥重要作用。猪β-防御素129(Porcine β-Defensin 129,pBD129)和猪β-防御素114(Porcine β-Defensin,pBD114)广泛分布于猪的各个器官和组织中,它们除抵抗病原微生物、调节机体免疫功能外,还对猪的繁殖与发育具有重要作用。近年来研究表明,pBD129和pBD114在公猪附睾中有较高的表达量,并参与精子的成熟、运动和受精过程,对雄性动物的精子功能和受精能力具有重要影响。本文对pBD129和pBD114在猪体内的表达分布情况、参与调节的信号通路以及相关生物学功能等进行综述,旨在为pBD129和pBD114的功能研究和应用提供理论和参考依据。 展开更多
关键词 pBD129 pBD114 免疫 繁殖
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PG600对初产母猪和延迟发情经产母猪繁殖性能的影响
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作者 高凤磊 范玉珊 +3 位作者 舒会友 陆信堂 张守全 卫恒习 《广东农工商职业技术学院学报》 2023年第4期37-41,共5页
为了探究PG600对初产母猪及延迟发情经产母猪断奶后发情及繁殖性能的影响,本研究选取初产母猪和延迟发情的经产母猪,随机分为对照组和PG600试验组,统计分析各组的发情率、受胎率、分娩率和产仔性能指标。利用PG600处理初产母猪可显著提... 为了探究PG600对初产母猪及延迟发情经产母猪断奶后发情及繁殖性能的影响,本研究选取初产母猪和延迟发情的经产母猪,随机分为对照组和PG600试验组,统计分析各组的发情率、受胎率、分娩率和产仔性能指标。利用PG600处理初产母猪可显著提高参繁猪群的受胎率(68.97%vs 96.67%,P<0.05)和分娩率(68.97%vs 96.67%,P<0.05),并具有提高断奶发情率(79.31%vs 96.67%)的趋势(P=0.097),断奶-发情时间间隔显著缩短(P<0.05),且繁殖效率提高1.57头(P<0.01)。PG600处理能够显著提高延迟发情经产母猪的发情率(61.82%vs 92.31%,P<0.01)、参繁受胎率(58.18%vs 90.38%,P<0.01)和参繁分娩率(58.18%vs 90.38%,P<0.01),整体繁殖效率提高3.33头(P<0.01);PG600处理组的配种受胎率比对照组提高3.8%,但差异不显著(P>0.05)。PG600处理能够提高初产母猪和延迟发情经产母猪的利用率及繁殖性能,对提高母猪批次化生产水平具有促进作用。 展开更多
关键词 PG600 发情 延迟发情 初产母猪 经产母猪 繁殖性能
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A Review of Microplastics in China Marine Waters
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作者 gao fenglei LI Jingxi +2 位作者 HU Jun LI Xianguo SUN Chengjun 《Journal of Ocean University of China》 SCIE CAS CSCD 2023年第5期1326-1340,共15页
Microplastics(<5 mm)are ubiquitous in the environment and can pose potential danger to the ecosystem and even human health.As the sink of microplastics,the ocean,especially the densely populated coastal area,has be... Microplastics(<5 mm)are ubiquitous in the environment and can pose potential danger to the ecosystem and even human health.As the sink of microplastics,the ocean,especially the densely populated coastal area,has become a hotspot for research on microplastic pollution.In the last decade,the research of marine microplastics has been rapidly increasing in China.This review summarized the microplastic research conducted in China marine waters so far,and introduced the trends and progress of microplastic research in the four seas along the coast of China.We reviewed and compared the current sampling,extraction,and identification methodologies of China's microplastic research.According to the sampling method,the 30 reviewed studies were separated into two categories,trawl sampling and bulk sampling,to summarize relevant data,including abundance,sizes,shapes,colors and polymer types of microplastics.The main results showed that the distribution of microplastics in China's marine environment varied significantly,with offshore mariculture zones and the South China Sea being the most contaminated areas.Transparent,granules(or pellets)and fibers were the most dominant microplastic colors and shapes,and the size of microplastics was influenced significantly by the sampling method.Polyethylene(PE),polypropylene(PP)and polystyrene(PS)were the most common polymer types found in the China Sea,accounting for 49.96%,29.97%,and 12.38%of the total studies,respectively.Compared with other global data,China's coastal microplastic pollution is at an intermediate level and does not seem to be a major microplastic pollution source. 展开更多
关键词 microplastics seawater trawl sampling bulk sampling China
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发酵剑麻渣日粮对新西兰兔生长性能、屠宰性能和肉品质的影响 被引量:6
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作者 高凤磊 郑继昌 +8 位作者 范玉珊 黎陛成 李淑娴 黄小华 吴俭炜 杨雅 李德明 谢娴 黄标 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期193-196,201,共5页
试验旨在研究发酵剑麻渣日粮对新西兰大白兔生长性能、屠宰性能和肉品质的影响,为开发新饲料资源并降低剑麻产业下游污染提供参考。选择35日龄平均体重490 g的健康新西兰兔90只,公母各半,随机分成3组,每组15个重复,每个重复2只。3组分... 试验旨在研究发酵剑麻渣日粮对新西兰大白兔生长性能、屠宰性能和肉品质的影响,为开发新饲料资源并降低剑麻产业下游污染提供参考。选择35日龄平均体重490 g的健康新西兰兔90只,公母各半,随机分成3组,每组15个重复,每个重复2只。3组分别饲喂基础日粮(对照组)、10%发酵剑麻渣日粮和20%发酵剑麻渣日粮,预试期5 d,正试期30 d。结果表明:与对照组相比,饲喂20%发酵剑麻渣日粮能够提高新西兰兔的日采食量(86 g vs 74 g)、平均日增重(19 g vs 13 g)、胴体重(367 g vs 267 g)和屠宰率(33.33%vs 30.25%)(P<0.05);而10%发酵剑麻渣日粮组的各项指标与其他两组没有显著差异;耗料增重比、眼肌面积、肉色、肌肉嫩度和pH(pH_(45min)、pH_(24h))在三组间差异不显著。综上,在日粮中添加20%发酵剑麻渣能够显著提高家兔生长性能和屠宰性能,而对肉品质没有显著影响,发酵剑麻渣可作为饲养新西兰兔的饲料原料。 展开更多
关键词 发酵剑麻渣 新西兰兔 生长性能 屠宰性能 肉品质
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现代学徒制教学效果初探——以广东农工商职业技术学院畜牧兽医专业为例
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作者 高凤磊 董斌 +5 位作者 李春雨 刘海霞 叶存栋 王瑞 古国谦 郑继昌 《广东农工商职业技术学院学报》 2019年第2期37-41,共5页
为了进一步了解高职教育“2+1模式”和“现代学徒制”的实施效果和学生满意程度,采用调查问卷的形式从学生知识背景与专业认知程度、专业课程设置与学习效果满意程度、职业规划与发展等方面,对专业学习2年以上的普通班和学徒班在校学生... 为了进一步了解高职教育“2+1模式”和“现代学徒制”的实施效果和学生满意程度,采用调查问卷的形式从学生知识背景与专业认知程度、专业课程设置与学习效果满意程度、职业规划与发展等方面,对专业学习2年以上的普通班和学徒班在校学生进行调查分析。结果发现,高职“普通班”和“学徒班”学生的知识背景和专业认知度无显著差异;普通班和学徒班学生对“2+1”模式的认可度存在显著差异,对学徒制模式的认可程度稍高于“2+1”模式;普通班和学徒班学生对课程内容设置、教学设施和师资力量的满意度均无显著差异(p>0.05),但学徒班学生对师资力量的满意程度高于普通班9个百分点,表明配备专业师傅有助于提高学生对师资力量的认可程度;通过专业学习和实践,绝大部分同学对本行业有了更深刻的认识,且学徒班学生比普通班学生表现出更强的本行业就业创业信心。 展开更多
关键词 职业教育 人才培养模式 现代学徒制 教学效果 畜牧兽医
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定时输精对经产母猪繁殖性能及生殖激素的影响 被引量:5
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作者 范玉珊 吴俊辉 +6 位作者 高凤磊 郭聪慧 谢绍怡 孟立 李莉 张守全 卫恒习 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第10期3726-3733,共8页
试验旨在建立高效的经产母猪定时输精(timed artificial insemination,TAI)技术,研究了定时输精对经产母猪繁殖性能、断奶-分娩间隔、不同胎次母猪产仔性能及断奶后7 d内血清生殖激素水平的影响。选取309头2~8胎次二元(长×大)经产... 试验旨在建立高效的经产母猪定时输精(timed artificial insemination,TAI)技术,研究了定时输精对经产母猪繁殖性能、断奶-分娩间隔、不同胎次母猪产仔性能及断奶后7 d内血清生殖激素水平的影响。选取309头2~8胎次二元(长×大)经产母猪,随机分为对照组和试验组,对照组母猪进行常规人工授精(artificial insemination,AI),试验组母猪进行断奶后24 h注射PMSG 1000 IU,间隔72 h注射GnRH 100μg,在注射GnRH后24和40 h各输精1次的定时输精技术。通过统计两组母猪的断奶1周内发情率、受胎率、分娩率、窝均产仔数等,判断定时输精对经产母猪繁殖性能的影响;通过对断奶时间和分娩时间的统计,检测定时输精对经产母猪断奶-分娩间隔的影响;用放射免疫(RIA)方法检测2~4胎次母猪断奶1周内血清E2、LH、FSH和P4的含量,研究定时输精对母猪生殖激素的影响。结果显示,试验组母猪发情率显著高于对照组(P<0.05),但两组间受胎率、分娩率差异不显著(P>0.05),窝均产仔数、窝均合格仔数和繁殖效率有增加的趋势,但差异不显著(P>0.05);定时输精显著缩短了母猪的断奶-分娩间隔(P<0.05)。在胎次方面,3~4胎母猪使用定时输精的效果较好,其发情率、受胎率和分娩率均显著高于对照组(P<0.05)。在生殖激素方面,试验组E2水平在注射PMSG后迅速上升,且在定时输精处理后66~96 h内持续高于对照组(P<0.05),试验组P4水平在断奶后至配种前显著低于对照组(P<0.05),但配种后快速升高,并高于对照组;LH和FSH的含量在两组间无显著差异。综上,定时输精可有效提高经产母猪的断奶发情率,并减少其非生产天数,可显著提高3~4胎母猪的繁殖性能。 展开更多
关键词 经产母猪 定时输精技术(TAI) 繁殖性能 生殖激素 胎次
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催乳素及血管抑制素对哺乳动物卵泡发育的调控作用研究进展 被引量:1
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作者 谢社风 高凤磊 +3 位作者 李菊 韩贝贝 李承德 卫恒习 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2022年第10期107-113,共7页
哺乳动物卵泡发育主要受到卵巢轴生殖激素的调控。催乳素(PRL)作为经典的生殖激素可通过内分泌途径调控卵泡发育,也可以作为细胞因子对卵泡发育起局部调控作用。高水平的PRL能够抑制促性腺激素释放激素(GnRH)和黄体生成素(LH)等激素分泌... 哺乳动物卵泡发育主要受到卵巢轴生殖激素的调控。催乳素(PRL)作为经典的生殖激素可通过内分泌途径调控卵泡发育,也可以作为细胞因子对卵泡发育起局部调控作用。高水平的PRL能够抑制促性腺激素释放激素(GnRH)和黄体生成素(LH)等激素分泌,从而抑制卵泡发育。近期研究表明,PRL具有促进血管发生的功能,对有腔卵泡发育具有促进作用;而PRL经组织蛋白酶(CTSD、BMP-1和MMPs)裂解可产生血管抑制素(Vi),PRL/Vi的相对水平对血管发生起到重要影响。本文主要对PRL及Vi的结构、分泌、作用机制及其在哺乳动物卵泡发育过程中可能的调节作用进行综述,可为探究动物卵泡发育的调控机制提供参考。 展开更多
关键词 催乳素 卵泡发育 血管发生 血管抑制素
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富血小板血浆在犬骨缺损修复中的应用研究
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作者 叶存栋 郑继昌 +2 位作者 高凤磊 刘海霞 胡静思 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2023年第7期106-109,113,137,138,共7页
为了初步探讨富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)在犬大段骨缺损修复中发挥的作用,试验采用二次离心法处理抗凝血,制备PRP;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定被氯化钙与牛凝血酶激活后的PRP组和血清对照组中血小板衍生生长因子(P... 为了初步探讨富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)在犬大段骨缺损修复中发挥的作用,试验采用二次离心法处理抗凝血,制备PRP;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定被氯化钙与牛凝血酶激活后的PRP组和血清对照组中血小板衍生生长因子(PDGF)和转化生长因子β1(TGF-β1)的浓度;在3只比格犬的双侧股骨上分别构建3个直径为10 mm的圆形穿透性皮质骨缺损模型,随机分成对照组、自体骨移植组和自体骨+PRP移植组进行骨缺损修复的动物试验,4,8周时采样制作骨组织病理切片,检测组织新生毛细血管和新生骨小梁情况。结果表明:利用二次离心法可以分离制备出PRP,其富集的倍数平均为3.64倍;激活后的PRP释放出来的PDGF浓度为(435.00±49.41)pg/mL,TGF-β1浓度为(44.47±3.81)pg/mL,与血清对照组相比差异极显著(P<0.01);自体骨+PRP移植组的骨缺损修复程度较好,其骨组织新生毛细血管计数和新生骨小梁面积百分比极显著高于其他两组(P<0.01)。说明PRP可促进犬大段骨缺损修复,可在临床上治疗犬大段骨缺损。 展开更多
关键词 富血小板血浆 生长因子 骨缺损修复 血小板衍生生长因子 转化生长因子Β1
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膀胱副神经节瘤二例报告及文献复习
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作者 吴曦 宋文 +3 位作者 高风雷 董文奎 黄恒 黄兴 《中华腔镜泌尿外科杂志(电子版)》 2022年第6期555-558,共4页
目的探讨膀胱副神经节瘤的临床病理特征及其诊治方法。方法回顾性分析2例膀胱副神经节瘤患者的临床资料,分析该病的临床病理特征、诊断及治疗方法,并对相关文献进行回顾和总结。结果病例1为无功能性肿瘤,体检发现膀胱占位,CT增强扫描明... 目的探讨膀胱副神经节瘤的临床病理特征及其诊治方法。方法回顾性分析2例膀胱副神经节瘤患者的临床资料,分析该病的临床病理特征、诊断及治疗方法,并对相关文献进行回顾和总结。结果病例1为无功能性肿瘤,体检发现膀胱占位,CT增强扫描明显强化,肿瘤为单发,行经尿道膀胱肿瘤电切术。病例2为功能性肿瘤,主要临床表现为头痛、心悸、排尿后血压一过性升高,MRI增强结节不均匀强化,肿瘤为单发,术前降压扩容后行腹腔镜膀胱部分切除术,术后症状消失。术后病理诊断均为膀胱副神经节瘤。随访9~12个月,均无复发或转移。结论膀胱副神经节瘤临床罕见,可分为功能性和非功能性,术前需充分检查及准备,术中预防血压波动引起的高血压危象,经尿道膀胱肿瘤电切术及腹腔镜膀胱部分切除术均效果良好,术后需密切随访。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 副神经节瘤 诊断 治疗
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