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鸭疫里默氏杆菌AS87_05150基因缺失株的构建及部分生物学特性分析
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作者 单兴根 田祥强 +7 位作者 王佳玲 谢维娜 田朋 胡志群 高永恒 嵇辛勤 吴金节 胡青海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1001-1007,1018,共8页
为探究鸭疫里默氏杆菌(RA)IX型分泌系统(T9SS)分泌的假定蛋白AS87_05150的功能,本研究采用自杀质粒同源重组的方法构建RA Yb2株AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5150及其回补株cYb2Δ5150,经PCR及测序鉴定,结果显示AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5... 为探究鸭疫里默氏杆菌(RA)IX型分泌系统(T9SS)分泌的假定蛋白AS87_05150的功能,本研究采用自杀质粒同源重组的方法构建RA Yb2株AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5150及其回补株cYb2Δ5150,经PCR及测序鉴定,结果显示AS87_05150基因缺失株Yb2Δ5150和回补株cYb2Δ5150均正确构建,缺失株的表型为16S r RNA^(+)AS87_05150 ORF^(-),回补株的表型为16S r RNA^(+)AS87_05150 ORF^(+)。采用荧光定量PCR(qPCR)检测Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株AS87_05150基因的转录水平;根据上述3株菌不同时间的OD_(600nm)值绘制各菌株的生长曲线;采用微量结晶紫法检测各菌株生物被膜(BF)的形成能力;将10^(7)cfu/孔的Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株分别感染Vero细胞,检测各菌株对Vero细胞的黏附和侵袭力。q PCR检测结果显示,cYb2Δ5150株中AS87_05150 m RNA相对转录水平比Yb2株高约19倍(P<0.0001),Yb2Δ5150株未扩增到AS87_05150基因;生长曲线结果显示,Yb2Δ5150与Yb2株的生长曲线基本一致,但cYb2Δ5150生长速度与Yb2Δ5150株相比极显著下降(P<0.01);BF测定结果显示,Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株BF的形成能力与Yb2株相比均极显著降低(P<0.0001);黏附和侵袭力结果显示,这3株菌对Vero细胞的黏附和侵袭力均无显著差异。将3株菌分别以10^(8)cfu/只~10^(4)cfu/只、10^(10)cfu/只~10^(6)cfu/只和10^(9)cfu/只~10^(5)cfu/只的剂量经肌肉注射接种雏鸭,感染后观察雏鸭的发病情况,并采用Reed-Muench法计算3株菌对雏鸭的半数致死量(LD_(50));将3株菌均以10^(7)cfu/只经肌肉注射感染雏鸭,24 h后剖杀,无菌采集各组鸭血液、肝脏和脑组织,作相应处理后涂板采用平板计数法测定载菌量。根据各组鸭的死亡情况,计算Yb2、Yb2Δ5150和cYb2Δ5150株的LD_(50)分别为6.85×10^(5)cfu、8.75×10^(7)cfu和4.681×10^(8)cfu,即缺失株LD_(50)比野生株高约127倍,但回补株的LD_(50)比缺失株高约5倍。载菌量测定结果显示,Yb2Δ5150株和cYb2Δ5150株感染鸭血液、肝脏、脑组织中的细菌载量比Yb2株感染鸭的载菌量均极显著降低(P<0.001),但前两者之间上述指标均无显著差异。本实验结果表明AS87_05150与RA Yb2株的BF形成和致病性相关,但回补株对雏鸭的毒力和致病性均未回复到野生株的水平。本研究为进一步解析RA AS87_05150的功能及分子致病机制等奠定了基础。 展开更多
关键词 鸭疫里默氏杆菌 Ⅸ型分泌系统(T9SS) 基因缺失 生物被膜 致病性
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The Influence of Seasonal Snow on Soil Thermal and Water Dynamics under Different Vegetation Covers in a Permafrost Region 被引量:8
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作者 HANG Juan WANG Gen-xu +1 位作者 gao yong-heng WANG Yi-bo 《Journal of Mountain Science》 SCIE CSCD 2014年第3期727-745,共19页
Seasonal snow is one of the most important influences on the development and distribution of permafrost and the hydrothermal regime in surface soil. Alpine meadow, which constitutes the main land type in permafrost re... Seasonal snow is one of the most important influences on the development and distribution of permafrost and the hydrothermal regime in surface soil. Alpine meadow, which constitutes the main land type in permafrost regions of the Qinghai-Tibet Plateau, was selected to study the influence of seasonal snow on the temperature and moisture in active soil layers under different vegetation coverage. Monitoring sites for soil moisture and temperature were constructed to observe the hydrothermal processes in active soil layers under different vegetation cover with seasonal snow cover variation for three years from 2010 to 2012. Differences in soil temperature and moisture in areas of diverse vegetation coverage with varying levels of snow cover were analyzed using active soil layer water and temperature indices. The results indicated that snow cover greatly influenced the hydrothermal dynamics of the active soil layer in alpine meadows. In the snow manipulation experiment with a snow depth greater than 15 cm, the snow cover postponed both the freeze-fall and thawrise onset times of soil temperature and moisture in alpine LC(lower vegetation coverage) meadows and of soil moisture in alpine HC(higher vegetation coverage) meadows; however, the opposite response occurred for soil temperatures of alpine HC meadows,where the entire melting period was extended by advancing the thaw-rise and delaying the freeze-fall onset time of the soil temperature. Snow cover resulted in a decreased amplitude and rate of variation in soil temperature, for both alpine HC meadows and alpine LC meadows, whereas the distinct influence of snow cover on the amplitude and rate of soil moisture variation occurred at different soil layers with different vegetation coverages. Snow cover increased the soil moisture of alpine grasslands during thawing periods. The results confirmed that the annual hydrothermal dynamics of active layers in permafrost were subject to the synergistic actions of both snow cover and vegetation coverage. 展开更多
关键词 植被覆盖度 多年冻土地区 土壤温度 积雪变化 水分动态 季节性 土壤水分变化 高原多年冻土区
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CNP600机组替代二次中子源装料及无源临界
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作者 杨嗣 沈亚杰 +2 位作者 高永恒 刘臻 王勇智 《中国核电》 2021年第1期123-128,共6页
二次中子源组件是压水堆传统装料和临界中常用的相关组件,但是秦山第二核电厂(简称"秦二厂")1号机组所使用的二次中子源组件接近使用寿命,继续使用存在破损或失效风险,为此决定在秦二厂1号机组第14循环实施替代二次中子源项... 二次中子源组件是压水堆传统装料和临界中常用的相关组件,但是秦山第二核电厂(简称"秦二厂")1号机组所使用的二次中子源组件接近使用寿命,继续使用存在破损或失效风险,为此决定在秦二厂1号机组第14循环实施替代二次中子源项目。经过理论论证与试验验证,表明使用具有一定燃耗深度的燃料组件可以替代二次中子源的作用。随后秦二厂在制定了一系列安全措施、应急方案并优化了试验方法后成功实施了替代二次中子源装料以及无源临界启动。由此表明,CNP600机组取消二次中子源组件后,仍然可以在满足安全监督要求的前提下完成堆芯装料和临界启动。 展开更多
关键词 反应堆 替代二次中子源 装料 临界
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一种新的对流换热系数分离法
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作者 沈亚杰 高永恒 +5 位作者 刘臻 詹勇杰 王澄瀚 杨嗣 王勇智 邓云李 《中国核电》 2022年第2期200-203,共4页
在核电厂中,新型结构的换热器被应用地越来越广泛,而现有的绝大多数的对流换热系数的分离法难以适用于这些新型结构换热器中。为此,提出了一种新的分离法——线性约束法。该方法用同组数据作差的方法将多组实验数据相结合,并以线性相关... 在核电厂中,新型结构的换热器被应用地越来越广泛,而现有的绝大多数的对流换热系数的分离法难以适用于这些新型结构换热器中。为此,提出了一种新的分离法——线性约束法。该方法用同组数据作差的方法将多组实验数据相结合,并以线性相关性作为约束条件,进行对流换热系数的分离。对于粘度随温度变化的流体需加入粘度修正项。该方法能适用于两侧换热系数与雷诺数的方次关系都未知的情况;可采用多组实验数据,可信度高;拟合后误差小,一般条件下误差能控制在5%以内。 展开更多
关键词 换热器 对流换热系数 粘度修正
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秦二厂CNP600堆芯降功率过程轴向功率偏差的控制研究
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作者 沈亚杰 高永恒 +4 位作者 詹勇杰 刘臻 杨嗣 王澄瀚 王勇智 《中国核电》 2021年第4期577-580,594,共5页
随着我国能源的快速发展,核电机组调峰降功率已成常态。调峰降功率期间,轴向功率偏差ΔI控制存在较大难度,ΔI超带事件时有发生。本文先通过Tulip程序对秦二厂CNP600机组降功率过程实际ΔI和计算ΔI的对比,验证Tulip程序对降功率过程Δ... 随着我国能源的快速发展,核电机组调峰降功率已成常态。调峰降功率期间,轴向功率偏差ΔI控制存在较大难度,ΔI超带事件时有发生。本文先通过Tulip程序对秦二厂CNP600机组降功率过程实际ΔI和计算ΔI的对比,验证Tulip程序对降功率过程ΔI计算的精度满足要求。然后,通过Tulip程序计算,给出更优化的ΔI控制方案。最后,考虑到实际运行操作和理论计算的差异性,研究分析了几种不同ΔI控制方案对降功率后ΔI的影响。研究结果可为秦二厂CNP600堆芯调峰降功率过程中的ΔI控制提供技术支持。 展开更多
关键词 CNP600 降功率 轴向功率偏差
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多流程数板壳式滑油冷却器的流动与换热研究
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作者 沈亚杰 高永恒 +2 位作者 王澄瀚 杨嗣 邓云李 《中国核电》 2020年第4期451-455,共5页
增加流程数是现阶段常用的强化板壳式滑油冷却器的换热性能手段之一,它会对板壳式滑油冷却器的流动和换热产生一定的影响。以单流程的板壳式滑油冷却器来研究入口油温对流动与传热性能的影响,试验结果表明:入口油温升高,润滑油的黏度降... 增加流程数是现阶段常用的强化板壳式滑油冷却器的换热性能手段之一,它会对板壳式滑油冷却器的流动和换热产生一定的影响。以单流程的板壳式滑油冷却器来研究入口油温对流动与传热性能的影响,试验结果表明:入口油温升高,润滑油的黏度降低,流动和换热性能随着有明显改善;又通过两流程、三流程在相同入口流量和相同板间流速下的对比实验得:油侧入口流量相同时,三流程的总传热系数和压降分别约为两流程的1.5~2.5倍和2.5~2.9倍;油侧板间流速相同时,三流程的总传热系数和压降约为两流程的1.1~1.5倍和1.9~2.2倍。因此,滑油冷却器设计过程中,可以适当增加流程数以明显改善其传热性能。 展开更多
关键词 多流程 板壳式 流动与传热性能
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波纹夹角β对圆形板壳式滑油冷却器的性能影响
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作者 沈亚杰 高永恒 +3 位作者 詹勇杰 杨嗣 王澄瀚 刘臻 《中国核电》 2019年第2期171-176,共6页
滑油冷却器是核电站一种重要的辅助设备。圆形板壳式换热器应用于滑油冷却器,有很好的前景。采用CFD数值模拟手段研究:在低雷诺数下(约10~50),波纹夹角β对圆形板壳式换热器流动与换热特性的影响,并通过实验验证其可靠性。研究结果表明... 滑油冷却器是核电站一种重要的辅助设备。圆形板壳式换热器应用于滑油冷却器,有很好的前景。采用CFD数值模拟手段研究:在低雷诺数下(约10~50),波纹夹角β对圆形板壳式换热器流动与换热特性的影响,并通过实验验证其可靠性。研究结果表明:在研究工况范围内,流型一直保持曲折流,不随β的变化而变化;当15°≤β≤60°时,换热特性和压降随着β的增加而增加,当β≥60°时,换热能力基本不随β的增加而增加,而压降仍然增加。因此,β=60°为强化换热的优化设计值。研究结果为该类型换热器的优化设计提供了理论依据。 展开更多
关键词 CFD数值模拟 波纹夹角β 流动与换热
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微生物介导的甲烷厌氧氧化过程及其影响因子研究进展 被引量:8
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作者 刘俊霞 陈槐 +3 位作者 薛丹 高永恒 刘建亮 杨军 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期1033-1044,共12页
温室气体甲烷减排是全球变化领域的研究热点,甲烷厌氧氧化(anaerobic methane oxidation,AOM)过程是一个以前被忽视的甲烷汇,在调控全球甲烷收支平衡及减缓温室效应等方面扮演着十分重要的角色。AOM微生物以甲烷为唯一电子供体,与硫酸盐... 温室气体甲烷减排是全球变化领域的研究热点,甲烷厌氧氧化(anaerobic methane oxidation,AOM)过程是一个以前被忽视的甲烷汇,在调控全球甲烷收支平衡及减缓温室效应等方面扮演着十分重要的角色。AOM微生物以甲烷为唯一电子供体,与硫酸盐(SO42-)、亚硝酸盐(NO2-)/硝酸盐(NO3-)、金属离子(Fe3+、Mn4+、Cr6+)等结合完成氧化还原过程,该过程是耦合碳、氮、硫循环的关键环节。本文系统整理分析了不同AOM类型、发生机理、相关功能微生物类群(ANME-1、ANME-2、ANME-3、NC10、MBG-D)及影响AOM过程的关键调控因子的最新研究进展。结果发现,目前80%以上研究都集中在对最常见电子受体类型(SO42-/NO3-/NO2-/Fe3+/Mn4+)的AOM相关过程,而忽视了潜在的新型电子受体(AQDS/HAs O42-/Cr6+/ClO4-等)的耦合作用过程和相对应的微生物类型及作用机理。对未来AOM研究方向提出展望,以期为研究甲烷厌氧氧化菌在不同生态系统中的生态分布及减缓全球温室气体排放提供新的思路。 展开更多
关键词 甲烷厌氧氧化 甲烷厌氧氧化菌 电子受体 温室气体 全球变化
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