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血清Ⅱ型鸡马立克氏病毒的分离鉴定及SW14分离株pp24基因的序列分析
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作者 林雨萌 胡明雪 +10 位作者 刘长军 葛成菲 郭榕容 李凯 崔红玉 高立 祁小乐 王素艳 王笑梅 高玉龙 张艳萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期864-868,共5页
为了解鸡马立克氏病毒(MDV)在我国鸡群中的流行情况,本研究于2021年从福建省已免疫鸡马立克氏病(MD)疫苗鸡群且发生疑似MD病例的鸡场采集21份疑似发病蛋鸡外周血,分离其淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞(CEF),5 d后收集病毒,盲传1~2代后获得2... 为了解鸡马立克氏病毒(MDV)在我国鸡群中的流行情况,本研究于2021年从福建省已免疫鸡马立克氏病(MD)疫苗鸡群且发生疑似MD病例的鸡场采集21份疑似发病蛋鸡外周血,分离其淋巴细胞接种鸡胚成纤维细胞(CEF),5 d后收集病毒,盲传1~2代后获得21株能够形成典型MDV蚀斑的分离株,依次命名SW1~SW21,采用PCR分别扩增MDV血清Ⅰ型(MDV-1) Meq基因、Ⅱ型(MDV-2) ORF873基因、Ⅲ型(MDV-3) US3基因进行MDV分型鉴定,扩增鸡传染性贫血病毒(CAV) VP3基因、禽网状内皮组织增殖病病毒(REV) LTR基因、禽白血病病毒A亚群(ALV-A)、B亚群(ALV-B)、J亚群(ALV-J)的env基因进行外源病毒检测,结果显示MDV-1均为阴性,MDV-2均为阳性,MDV-3阳性率为38.1%(8/21),未检测到外源病毒基因。在MDV-2分离株中选择SW14株进行pp24基因的PCR扩增,测序后与MDV-2参考株SB-1、301B/1、HPRS24的pp24基因进行基因序列比对分析,结果显示,SW14和SB-1株同源性(96.3%)最高。通过透射电镜观察SW14,可见分离株呈双环型,直径约110 nm,符合MDV病毒粒子形态特征。本研究证实该鸡场中存在MDV-2流行,可能会影响疫苗的免疫效果,但其致病性有待进一步研究。本研究从疑似发病蛋鸡中分离到新的MDV-2株,为我国MDV-2的研究提供重要参考依据,同时为我国MD疫情防控提供有价值的研究材料。 展开更多
关键词 鸡马立克氏病毒 分离鉴定 血清Ⅱ型 血清Ⅲ型 pp24基因序列分析
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中国高岭土(岩)矿床新成因分类
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作者 程宏飞 高宇龙 +1 位作者 梁绍暹 刘钦甫 《地球科学与环境学报》 CAS 北大核心 2023年第5期1110-1117,共8页
随着我国经济结构的调整和产业的转型升级,高岭土已被建议列入国家15种战略性非金属矿产之中,因此,对高岭土矿产资源类型及其成因研究刻不容缓。依据高岭土(岩)矿床成因相关研究成果,采用母岩类型(或成矿原始物质来源)+形成作用+矿石类... 随着我国经济结构的调整和产业的转型升级,高岭土已被建议列入国家15种战略性非金属矿产之中,因此,对高岭土矿产资源类型及其成因研究刻不容缓。依据高岭土(岩)矿床成因相关研究成果,采用母岩类型(或成矿原始物质来源)+形成作用+矿石类型的复合命名原则,提出了我国高岭土(岩)矿床新的成因分类方案。高岭土(岩)矿床可以划分为4种成因类型、8个成因亚型和12种矿床类型。在现有的6个矿床类型基础上增加了6个新的矿床类型,其中3个为风化残积亚型高岭土矿床,即风化残积亚型木节土矿床、富长石砂(岩)风化残积亚型砂质高岭土矿床、变高岭岩风化残积亚型水铝英石-埃洛石-高岭土矿床。将耐火黏土矿床的硬质黏土、软质黏土和半软质黏土的成因归属于陆源碎屑及胶体化学沉积成岩亚型高岭岩(土)矿床。华北石炭纪—二叠纪含煤岩系中部分煤层夹矸和煤层顶、底板高岭岩是由降落火山碎屑沉积成岩形成的,该类型是一种独特的高岭岩资源,将其单独列为降落火山碎屑沉积成岩亚型。此外,变高岭岩亚型矿床是一种特殊矿床类型,(热)流体蚀变亚型砂岩型高岭土矿床较为罕见,但是一种有潜在经济价值的高岭土矿床类型。 展开更多
关键词 高岭土(岩) 成因分类 母岩类型 成岩作用 矿床类型 煤系高岭石 木节土矿床 风化残积亚型
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我国六省(自治区)全球基金项目地区耐多药肺结核诊疗效果的回顾性分析 被引量:11
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作者 徐彩红 张慧 +7 位作者 阮云洲 高雨龙 张修磊 侯双翼 彭颖 李建伟 胡慧懿 李仁忠 《中国防痨杂志》 CAS 2018年第6期559-563,共5页
目的了解我国六省(自治区)全球基金项目地区耐多药肺结核患者诊断、治疗、转归情况及影响因素。方法采用回顾性调查方法,收集并分析2010年1月至2011年12月在内蒙古、山东、河南、湖北、浙江和广东六省(自治区)全球基金项目点就诊的... 目的了解我国六省(自治区)全球基金项目地区耐多药肺结核患者诊断、治疗、转归情况及影响因素。方法采用回顾性调查方法,收集并分析2010年1月至2011年12月在内蒙古、山东、河南、湖北、浙江和广东六省(自治区)全球基金项目点就诊的19056例耐多药肺结核高危人群的筛查、治疗、转归情况及影响因素。结果对耐多药肺结核高危人群19056例进行筛查,耐多药肺结核检出率为12.3%(2338/19056)。2338例耐多药肺结核患者纳入治疗率为68.4%(1599/2338);739例患者未纳入项目治疗,主要原因为拒治(19.9%,147/739)。纳入治疗的1599例患者治疗6个月末痰菌阴转率为63.9%(1022/1599),其中,初治患者的痰菌阴转率(70.80.4,206/291)明显高于复治失败者(56.5%,187/331),差异有统计学意义(x2=17.11,P=0.009);随着年龄的增长,耐多药肺结核患者治疗6个月末痰菌阴转率逐步下降,0~24岁组痰菌阴转率(72.2%,130/180)明显高于45~64岁组(62.0%,376/606)和65岁以上年龄组(44.5%,69/155),差异有统计学意义(x2=36.20,P〈0.01)。纳人治疗患者的治疗成功率为43.2%(691/1599),其中,初治患者治疗成功率(48.5%,141/291)明显高于复治失败患者(38.1%,126/331),差异有统计学意义(x2=15.37,P=0.018);女性患者治疗成功率(47.4%,213/449)高明显于男性患者(41.6%,478/1150),差异有统计学意义(x2=4.54,P=0.033);随着年龄的增长,患者治疗成功率逐步下降,0~24岁组治疗成功率(54.4%,98/180)明显高于45~64岁组(38.4%,233/606)和65岁以上组(23.2%,36/155),差异有统计学意义(x2=49.83,P〈0.01)。结论耐多药肺结核可疑者筛查工作需要引起足够重视,采用标准化方案治疗耐多药肺结核的治疗成功率不理想,尤其是复治失败、男性及老年患者的治疗效果有待进一步提高。 展开更多
关键词 结核 结核 抗多种药物性 多相筛查 疗效比较研究 结果评价(卫生保健) 回顾性研究
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美国新引烤烟品种及其在不同产地烟叶主要化学成分分析 被引量:5
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作者 吴玉萍 曾建敏 +3 位作者 蔺忠龙 高玉龙 肖炳光 童治军 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期743-749,共7页
为筛选出品质好的烤烟新品系,丰富烤烟品种资源,选取美国新引进的5个抗病较好品种及K326、云烟87两个主栽品种在6个不同省份进行田间试验,取样检测总糖、还原糖、烟碱、总氮和钾5个常规化学成分,并对各品种及不同产地烟叶中的化学成分... 为筛选出品质好的烤烟新品系,丰富烤烟品种资源,选取美国新引进的5个抗病较好品种及K326、云烟87两个主栽品种在6个不同省份进行田间试验,取样检测总糖、还原糖、烟碱、总氮和钾5个常规化学成分,并对各品种及不同产地烟叶中的化学成分进行了统计分析,以掌握各品种对化学成分的累积特点.结果表明:以红塔集团对烟叶化学成分要求进行统计比较,总体上钾和总糖含量水平基本在红塔集团要求的适宜范围,NC-YATAS15品种的非烟碱氮与总氮比值与红塔集团要求符合性较好,NC-YATAS9的烟碱总体较稳定和适宜,所有试验品种两糖差符合性均较差;相较而言美引品种AOV405为高糖、高钾、低烟碱品种.5个新引品种和对照K326、云烟87烟叶中的烟碱、总糖、还原糖含量均不存在显著差异;总氮存在一定的差异,云烟87显著高于AOV405;品种间钾含量存在差异,5个新引品种钾含量均优于对照K326和云烟87,CC35品种钾含量显著高于其它品种.各个省间种植的烟叶常规化学成分存在显著差异.贵州贵阳的烟叶烟碱和钾较高,总糖较低;湖南永州烟碱、氮和钾较高,总糖和还原糖较低;重庆武隆县的烟叶还原糖较低;福建龙岩的烟叶总糖和还原糖较高,烟碱和总氮较低;云南楚雄苍岭的烟叶烟碱、钾和总氮较低,总糖和还原糖较高. 展开更多
关键词 主要化学成分 烤烟 品种 品质 产地
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一种聚合釜内乳液密度连续在线测试系统设计
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作者 郭开玺 张占东 +2 位作者 石转转 高宇龙 郝佩儒 《机械工程与自动化》 2023年第3期10-12,15,共4页
为提高聚合釜内乳液密度测量精度及化工设备的自动化程度,设计了一套以S7-1200PLC为控制核心的聚合釜内乳液密度连续在线测试系统,该系统主要由传感器模块、下位机子系统及上位机子系统组成,可实现对聚合釜内乳液密度的实时测量、数据... 为提高聚合釜内乳液密度测量精度及化工设备的自动化程度,设计了一套以S7-1200PLC为控制核心的聚合釜内乳液密度连续在线测试系统,该系统主要由传感器模块、下位机子系统及上位机子系统组成,可实现对聚合釜内乳液密度的实时测量、数据采集以及数据记录。利用TIA Portal软件对聚合釜内乳液密度连续在线测试系统进行软件开发与组态界面设计,并搭建实验平台对所设计系统进行实验,分析实验数据,验证其合理性。结果表明:所设计的聚合釜内乳液密度连续在线测试系统可靠稳定、自动化程度较高,可以连续在线准确测得乳液等流体的密度变化情况,并实现对密度数据的采集记录。 展开更多
关键词 乳液密度 在线测试系统 软件 硬件 聚合釜
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自适应大流量安全阀阀腔气蚀影响因素研究 被引量:1
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作者 高宇龙 姚丽英 张占东 《山西大同大学学报(自然科学版)》 2022年第6期110-114,共5页
基于自适应大流量安全阀的结构及工作原理,建立了三维实体模型,并利用ANSYS FLUENT软件对安全阀进行了流场分析,得到了一级直动阀与一级锥阀的压力、速度、气体体积分数等云图;为进一步研究自适应大流量安全阀二级差动锥阀不同开度下二... 基于自适应大流量安全阀的结构及工作原理,建立了三维实体模型,并利用ANSYS FLUENT软件对安全阀进行了流场分析,得到了一级直动阀与一级锥阀的压力、速度、气体体积分数等云图;为进一步研究自适应大流量安全阀二级差动锥阀不同开度下二级阀芯及阀套发生气蚀现象的位置,通过设置二级锥形差动阀芯开度为1、2、3 mm等进行了仿真分析。仿真结果表明:一级阀芯出液口处压力损失最大,一级阀芯出液口处流体最大速度及气体体积分数含量较高的区域面积都为一级直动阀的大;随着二级阀芯开度的增大,二级阀芯开口处压力值由负值变为正值且逐渐增大,阀芯密封处气体体积分数含量在逐渐减少;研究结果为安全阀后续的流场分析及加工工艺提供了理论依据。 展开更多
关键词 自适应大流量安全阀 FLUENT软件 流场分析 气体体积分数
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我国传染性法氏囊病病毒新型变异株分析研究 被引量:21
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作者 范林进 王雨龙 +13 位作者 吴甜甜 李凯 姜楠 高玉龙 高立 刘长军 崔红玉 潘青 张艳萍 刘玉凤 孙先本 刘俊启 王笑梅 祁小乐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1164-1169,共6页
近期非典型传染性法氏囊病(IBD)给养禽业带来了新的威胁,本研究团队率先鉴定发现其病原为IBDV新型变异株。为了解该IBDV新型变异株流行规律和致病特点,本研究对2018年9月~2019年6月分离自黑龙江、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、云南7... 近期非典型传染性法氏囊病(IBD)给养禽业带来了新的威胁,本研究团队率先鉴定发现其病原为IBDV新型变异株。为了解该IBDV新型变异株流行规律和致病特点,本研究对2018年9月~2019年6月分离自黑龙江、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、云南7个省的32个IBDV代表株的VP2基因高变区进行了遗传演化分析,结果显示,IBDV新型变异株虽然属于变异株分支,但却不同于美国早期变异株,其形成了一个独立的亚群。动物回归试验结果显示,IBDV新型变异株不致死鸡,但造成其中枢免疫器官法氏囊严重萎缩,B淋巴细胞崩解坏死,复制出了非典型IBD的症状。本研究测定了IBDV新型变异株的最低致病剂量,并依据病毒自身特殊性状,首次提出用法氏囊半数萎缩量(BAD50)作为IBDV新型变异株的病毒效价单位。本研究为IBDV新型变异株的流行规律监测和综合防控提供了数据支撑。 展开更多
关键词 非典型传染性法氏囊病 传染性法氏囊病病毒 新型变异株 法氏囊半数萎缩量
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中国部分地区鸡传染性贫血流行病学调查及病原分离鉴定 被引量:14
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作者 李岳 闫娜娜 +13 位作者 刘爱晶 兰兴鸽 杨搏 刘长军 高玉龙 高宏雷 祁小乐 崔红玉 高立 李凯 潘青 王永强 张艳萍 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期760-765,共6页
为了调查近年来鸡传染性贫血病(CIA)在我国发病鸡群中的流行特点、分布及其危害,本研究于2016年1月~2019年9月,从黑龙江、北京、山东等13个省市的381个疑似CIA发病鸡群中采集肝脏样品1677份,PCR检出鸡传染性贫血病毒(CAV)阳性样品共242... 为了调查近年来鸡传染性贫血病(CIA)在我国发病鸡群中的流行特点、分布及其危害,本研究于2016年1月~2019年9月,从黑龙江、北京、山东等13个省市的381个疑似CIA发病鸡群中采集肝脏样品1677份,PCR检出鸡传染性贫血病毒(CAV)阳性样品共242份,分布于85个鸡群,阳性样品检出率为14.43%(242/1677),阳性鸡群率为22.31%(85/381)。CAV与鸡马立克氏病病毒、鸡白血病病毒等免疫抑制病病毒混合感染在检测鸡群中普遍存在,占CAV感染总量的52.94%(45/85)。将来自山东临沂某CAV阳性鸡场的病鸡肝脏样品处理后接种MDCC-MSB 1细胞,连续传代6次,经PCR及间接免疫荧光鉴定,确定分离到一株CAV细胞适应病毒株,命名为CAV-SD19/4604。对分离株VP1基因测序并与GenBank中19株CAV参考株VP1基因序列比对,显示同源性为95.00%~98.80%,遗传进化树表明CAV-SD19/4604与多数亚洲病毒株位于同一分支。本研究为CAV感染的研究和疾病防控提供了数据支持。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病 鸡传染性贫血病毒 流行病学调查 分离鉴定 序列分析
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新型鸭呼肠孤病毒的分离鉴定及其σC基因遗传进化分析 被引量:10
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作者 罗丹 高立 +6 位作者 孟照洁 高玉龙 李凯 祁小乐 刘长军 崔红玉 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期445-450,共6页
新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)病,是一种以肝脾不规则坏死、出血斑/点和心肌、腔上囊出血为主要特征的新疫病。为研究某养鸭企业不同年份分离的NDRV病株的生物学特性,本研究将2019年从25份樱桃谷鸭脏器组织中分离的3株病毒以及2016年和2017年... 新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)病,是一种以肝脾不规则坏死、出血斑/点和心肌、腔上囊出血为主要特征的新疫病。为研究某养鸭企业不同年份分离的NDRV病株的生物学特性,本研究将2019年从25份樱桃谷鸭脏器组织中分离的3株病毒以及2016年和2017年分离的2株病毒同时进行了生物学特性比较研究。RT-PCR及基因测序结果表明,该5株分离病毒均为NDRV,且纯净性良好。体外复制研究表明,该5株分离病毒均能100%致死鸡胚,且在Vero细胞中增殖良好;除2017年的分离株外,其余4株分离病毒均能在CEF中产生明显的细胞病变。σC基因同源性及遗传进化分析显示,5株NDRV分离株与其它NDRV病毒株之间具有较高的同源性(90.0%~98.2%),而与番鸭呼肠孤病毒(MDRV)同源性较低(29.6%~46.1%),再次证明5株分离病毒均为NDRV,但2017年分离株NDRV-SD19/6202与其余4株病毒的遗传距离稍远。σC基因编码氨基酸序列分析结果显示,以CEF适应病毒为代表的NDRV-SD19/6201株与CEF非适应病毒NDRV-SD19/6202株之间存在13个氨基酸差异位点,但这些差异位点是否是引起两株病毒复制特性差异的关键氨基酸还需要进一步研究。综上,本研究结果表明来源于同一养殖企业不同年份分离的NDRV病毒株之间生物学特性存在一定差异,提示持续开展该病流行病学调查的必要性,同时为了解NDRV的遗传进化特征和基因变异情况提供参考。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 分离鉴定 σC基因 遗传进化
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黏附与聚集、抗肿瘤及抗菌特性乳杆菌的筛选 被引量:7
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作者 宋雨心 王文骞 +13 位作者 张园 刘琳琳 王婷婷 祁小乐 高玉龙 王永强 高宏雷 李凯 刘长军 张艳萍 高立 王笑梅 崔红玉 何高明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期986-991,共6页
为获得具有高黏附与聚集、抗肿瘤及抗菌特性的益生乳杆菌,本研究以10株经16s r DNA鉴定的乳杆菌为候选菌,以结肠癌HT-29细胞为体外模型研究其黏附能力和抗肿瘤特性及其黏附能力与自聚集能力的相关性。将乳杆菌与致病性大肠埃希氏菌、鸡... 为获得具有高黏附与聚集、抗肿瘤及抗菌特性的益生乳杆菌,本研究以10株经16s r DNA鉴定的乳杆菌为候选菌,以结肠癌HT-29细胞为体外模型研究其黏附能力和抗肿瘤特性及其黏附能力与自聚集能力的相关性。将乳杆菌与致病性大肠埃希氏菌、鸡白痢沙门氏菌及金黄色葡萄球菌分别共孵育,探究了乳杆菌的共聚集能力与抗菌能力。结果显示:有6株乳杆菌的自聚集能力在20%以上;4株乳杆菌粘附内化HT-29细胞的内化率超过5%,经荧光显微镜观察,菌株Lac.99对HT-29细胞具有最强的黏附特性;菌株Lac.117和Lac.56对HT-29细胞的生长具有较好的抑制作用;4株乳杆菌对指示致病菌具有较强的拮抗作用,其中Lac.117菌株作用最强。综上所述,候选菌株中Lac.56在黏附、抗菌和抗肿瘤方面均表现出良好的益生特性,本实验为进一步研究和开发具有潜在应用价值的益生菌制剂提供了依据。 展开更多
关键词 乳杆菌 黏附 抗肿瘤 抗菌活性
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鸡马立克氏病病毒感染对鸡神经系统损伤的研究 被引量:5
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作者 周林宜 张艳萍 +7 位作者 孙国荣 张峰 于正浩 高玉龙 祁小乐 李凯 王笑梅 刘长军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期113-117,共5页
为研究不同毒力的鸡马立克氏病毒(MDV)在鸡神经系统中的感染规律及其对神经系统的损伤进程,本研究选用不同毒力的血清1型MDV (MDV-1)病毒株感染4日龄的SPF鸡,在接毒后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、17 d、21 d、25 d、28 d和35 d动... 为研究不同毒力的鸡马立克氏病毒(MDV)在鸡神经系统中的感染规律及其对神经系统的损伤进程,本研究选用不同毒力的血清1型MDV (MDV-1)病毒株感染4日龄的SPF鸡,在接毒后1 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d、17 d、21 d、25 d、28 d和35 d动态检测病毒载量的变化,并对感染后5 d和21 d的不同病毒株感染鸡的脑部和坐骨神经进行组织病理学观察。结果显示,MDV-1强毒株在SPF鸡脑部的复制能力显著高于弱毒株(p<0.05);特超强病毒株BS在脑组织中出现的时间最早,早期复制最快。但不同毒力的MDV-1株在坐骨神经处的复制能力与其毒力无直接的关系。组织病理学观察显示,在感染早期MDV-1强毒株对SPF鸡脑组织的损伤强于弱毒株;在感染后21 d,强毒株和弱毒株造成的脑部损伤存在明显的不同;而在坐骨神经处,强毒株造成的损伤明显强于弱毒株。本研究揭示了不同MDV病毒株在SPF鸡脑和坐骨神经的复制动力学特征和组织病理学特征,为MDV-1在宿主神经系统中的感染、增殖及造成的损伤提供了实验依据。 展开更多
关键词 鸡马立克氏病 神经系统 病毒载量 病理损伤
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表达禽网状内皮组织增生病病毒gp90蛋白的重组马立克氏病病毒的构建及生物学特性分析 被引量:4
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作者 许曾焜 李凯 +7 位作者 刘永振 高立 刘长军 张艳萍 高玉龙 祁小乐 崔红玉 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期867-871,共5页
禽网状内皮组织增生病(RE)是禽类一种重要免疫抑制性疾病,目前尚无有效的商品化疫苗预防该病。为研制表达RE病毒(REV)gp90蛋白的重组鸡马立克氏病病毒(MDV),本研究构建了含有REV保护性抗原基因gp90的pCAGGS-gp90表达质粒,将gp90表达框... 禽网状内皮组织增生病(RE)是禽类一种重要免疫抑制性疾病,目前尚无有效的商品化疫苗预防该病。为研制表达RE病毒(REV)gp90蛋白的重组鸡马立克氏病病毒(MDV),本研究构建了含有REV保护性抗原基因gp90的pCAGGS-gp90表达质粒,将gp90表达框架克隆入pENTR1载体,获得重组质粒pENTR1-gp90。通过pENTR1-gp90与p814-5US2KanccdB重组粘粒的LR反应,将gp90表达框架插入p814-5粘粒中MDV 814疫苗株基因组US2基因内,构建重组粘粒p814-5-gp90。将该重组粘粒转染鸡胚成纤维细胞(CEF),获得重组MDV r814-gp90株。将该重组病毒在CEF中连续传至20代后对第5、10、15、20代病毒经PCR扩增并测序鉴定;利用间接免疫荧光试验(IFA)和western blot检测重组MDV感染细胞中gp90蛋白的表达;绘制重组MDV的生长曲线,分析其体外复制特性。结果显示,正确构建了含有gp90表达框架的重组粘粒p814-5-gp90。将该重组粘粒转染CEF后能够引起典型的蚀斑病变,且蚀斑形态大小与亲本病毒814株无明显差异。PCR及测序鉴定结果显示,重组病毒r814-gp90基因组中正确插入gp90基因表达框架,且其能够在该重组病毒中稳定存在。IFA及western blot检测结果表明,r814-gp90株能够在感染的CEF中表达gp90蛋白。体外生长曲线显示,r814-gp90株在CEF中的复制能力与亲本病毒无明显差异。以上结果表明,本研究正确构建了表达REV保护性抗原gp90基因的重组MDV,为研制RE重组MDV活载体疫苗奠定了基础,对RE以及REV与MDV混合感染的防控具有重要意义。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生病 gp90蛋白 马立克氏病病毒 重组病毒
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抗炎免疫调节活性益生菌的体外筛选及其相关组分的初步鉴定 被引量:2
13
作者 米洁兰 王志浩 +9 位作者 王婷婷 刘长军 祁小乐 张艳萍 李凯 高立 潘青 王笑梅 高玉龙 崔红玉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1283-1289,共7页
为筛选出具有抗炎、抗感染免疫调节活性的益生菌并探究益生菌免疫调节活性的主要成分,本研究分别以10株益生菌Lac.1~Lac.10作为候选菌株,将益生菌的活菌体、灭活菌体、菌体裂解物分别作用于由脂多糖+尼日利亚菌素(LPS+Nigericin)诱导的... 为筛选出具有抗炎、抗感染免疫调节活性的益生菌并探究益生菌免疫调节活性的主要成分,本研究分别以10株益生菌Lac.1~Lac.10作为候选菌株,将益生菌的活菌体、灭活菌体、菌体裂解物分别作用于由脂多糖+尼日利亚菌素(LPS+Nigericin)诱导的急性炎症巨噬细胞模型及NF-κB和IRF信号通路报告细胞系J774-DualTM巨噬细胞,经荧光定量PCR检测细胞因子Il-1β和Il-10 mRNA的转录水平,通过检测报告基因SEAP和Lucia荧光素酶的活性分析NF-κB和干扰素调节因子(IRF)信号通路的激活情况。结果显示,在排除发酵液中MRS培养基干扰的情况下,益生菌株Lac.5活菌体能够极显著下调巨噬细胞炎症模型下Il-1β mRNA的转录水平(P<0.0001)、极显著上调Il-10 m RNA的转录水平(P<0.0001),并且能够极显著激活巨噬细胞的NF-κB和IRF信号通路(P<0.0001),进一步将益生菌Lac.5活菌体热灭活和超声破碎后显示,益生菌Lac.5灭活菌体和菌体裂解物的免疫调节活性均显著降低,仅益生菌Lac.5活菌体组分起到抗炎、抗感染的免疫调节活性。综上所述,本研究筛选出一株具有抗炎、抗感染的免疫调节活性的益生菌株Lac.5,并确认了其活菌体为免疫调节组分,对功能益生菌的筛选和新型益生菌治疗制剂的开发具有重要意义。 展开更多
关键词 益生菌 抗炎 免疫调节 NF-ΚB信号通路 IRF信号通路
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禽网状内皮组织增生病病毒env蛋白在毕赤酵母中的表达及其免疫原性研究 被引量:2
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作者 杨彦超 王静 +6 位作者 李凯 祁小乐 崔红玉 高玉龙 刘长军 高宏雷 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1147-1151,共5页
为评价禽网状内皮组织增生病病毒(REV) env蛋白的免疫原性,本研究将env基因克隆至毕赤酵母表达载体pAO815,构建了含有两个env表达盒(已突变env基因中BglⅡ和Bam HⅠ酶切位点)的重组表达质粒pAO815-2env,并电转至毕赤酵母宿主菌GS115,构... 为评价禽网状内皮组织增生病病毒(REV) env蛋白的免疫原性,本研究将env基因克隆至毕赤酵母表达载体pAO815,构建了含有两个env表达盒(已突变env基因中BglⅡ和Bam HⅠ酶切位点)的重组表达质粒pAO815-2env,并电转至毕赤酵母宿主菌GS115,构建重组酵母菌株pAO815-2env/GS115,经发酵培养得到的env蛋白(蛋白含量达到4.8 g/L)经亲和层析纯化后免疫SPF鸡,利用ELISA试剂盒和中和试验检测血清中的REV抗体。结果显示,重组酵母菌株表达的env蛋白,不仅能够诱导SPF鸡产生抗REV抗体,还能诱导其产生中和抗体,且产生的中和抗体效价较高,具有良好的免疫原性。本研究为开展禽网状内皮组织增生病亚单位疫苗的研制提供了实验依据。 展开更多
关键词 禽网状内皮组织增生病病毒 ENV基因 毕赤酵母 发酵
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荧光定量PCR方法在鸡马立克氏病疫苗免疫监测中的应用分析 被引量:2
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作者 兰兴鸽 张艳萍 +9 位作者 于正浩 王亚楠 高玉龙 祁小乐 崔红玉 高立 李凯 潘青 王笑梅 刘长军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期727-733,共7页
鸡马立克氏病(MD)的防控主要依靠疫苗免疫,MD疫苗株在鸡体内的有效复制与最终的免疫效果直接相关,可通过这种相关性对MD疫苗进行免疫监测。为有效监测MD疫苗的免疫效果,本研究共采用两种血清1型MD疫苗免疫不同的鸡:(1)实验鸡分为两组:... 鸡马立克氏病(MD)的防控主要依靠疫苗免疫,MD疫苗株在鸡体内的有效复制与最终的免疫效果直接相关,可通过这种相关性对MD疫苗进行免疫监测。为有效监测MD疫苗的免疫效果,本研究共采用两种血清1型MD疫苗免疫不同的鸡:(1)实验鸡分为两组:一组在1日龄时免疫血清1型MD疫苗814株,另一组为不免疫的对照组,选用双重荧光定量PCR方法分别对两组鸡免疫后7 d和14 d的脾脏和羽髓中的马立克氏病病毒(MDV)载量(log10 MDV拷贝数/106个细胞)进行检测;(2)商品鸡:选用上述双重荧光定量PCR方法分别对经血清1型MD疫苗CVI988/Rispens株免疫后7 d和14 d的商品蛋鸡脾脏和羽髓中的MDV载量进行检测。并针对荧光定量PCR的检测结果结合常规PCR检测和meq基因的序列比对分析各组鸡脾脏和羽髓样品是否被野毒感染;同时监测正常免疫商品鸡的产蛋率和死淘率等至8个月鸡龄。结果显示,实验鸡免疫后7 d,免疫组鸡脾脏和羽髓的MDV载量为3.39~4.69,对照组鸡相应样品的MDV载量为3.36~4.90;免疫后14 d,免疫组鸡MDV载量为3.77~4.86,对照组鸡相应样品的MDV载量为5.06~6.22,对照组显著高于免疫组(p<0.01)。PCR鉴定和meq基因序列分析证实,对照组鸡被MDV野毒感染,导致其体内MDV载量的显著上升。商品鸡免疫后7 d,脾脏和羽髓的MDV载量为3.75~4.59;免疫后14 d,MDV载量为3.71~4.92,并且在监测期内没有发生MD。以上结果表明,利用双重荧光定量PCR方法对血清1型MD疫苗进行免疫监测时,免疫后7 d~14 d鸡体内的病毒载量为3.39~4.86,载量过高则可能发生了免疫失败或者野毒感染。本研究结果表明双重荧光定量PCR方法可以用于MD疫苗免疫效果的监测,为临床鸡MD疫苗的免疫监测提供了参考数据。。 展开更多
关键词 马立克氏病 病毒载量 双重荧光定量PCR 免疫监测
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表达禽β-防御素6重组乳酸菌的构建及其免疫调节活性检测 被引量:1
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作者 王婷婷 王志浩 +10 位作者 米洁兰 王文骞 高玉龙 刘长军 祁小乐 张艳萍 李凯 高立 潘青 王笑梅 崔红玉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期931-937,共7页
为构建表达禽β-防御素6(AvBD6)的重组乳酸菌并检测重组蛋白AvBD6(rAvBD6)的免疫调节活性,本研究根据GenBank AvBD6的参考序列,经过密码子优化后合成了AvBD6:AvBD6(G4S)3 AvBD6(G4S)3 AvBD6(G4S)3 AvBD6(4×AvBD6)串联基因序列,构... 为构建表达禽β-防御素6(AvBD6)的重组乳酸菌并检测重组蛋白AvBD6(rAvBD6)的免疫调节活性,本研究根据GenBank AvBD6的参考序列,经过密码子优化后合成了AvBD6:AvBD6(G4S)3 AvBD6(G4S)3 AvBD6(G4S)3 AvBD6(4×AvBD6)串联基因序列,构建了表达rAvBD6的食品级乳酸菌表达菌株。经western blot检测显示,目的蛋白呈可溶性表达于乳酸菌细胞质中。以重组乳酸菌裂解上清为重组蛋白,与鸡外周血单个核细胞进行体外相互作用试验,荧光定量PCR结果显示,经rAvBD6刺激鸡外周血单个核细胞能够显著提高IL-10(p<0.0001)、IL-12p70(p<0.05)转录水平;重组蛋白与鸡巨噬细胞体外相互作用试验的荧光定量PCR结果显示,经rAvBD6处理的鸡巨噬细胞也能够提高IL-10、IL-12p70的转录水平(p<0.05);重组蛋白刺激干扰素调节因子IRF信号激活报告细胞系774-DualTM,结果显示rAvBD6显著激活了该巨噬细胞的IRF信号通路(p<0.05);SPF鸡注射重组蛋白两周后,采用ELISA检测鸡血清IFN-γ、IL-2和IL-10表达水平,结果显示其IFN-γ、IL-10和IL-2的含量显著高于空菌对照组(p<0.05)。上述结果表明:rAvBD6在体内外显示了较强的免疫激活和免疫调节特性,具有作为免疫佐剂或免疫增强剂的潜力。本研究为新型食品安全级动物免疫佐剂或免疫增强剂的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 禽β-防御素6 重组乳酸菌 免疫调节活性 免疫佐剂 免疫增强剂
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基于AMESim自适应大流量安全阀动态特性影响因素研究
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作者 高宇龙 姚丽英 张占东 《山西大同大学学报(自然科学版)》 2022年第2期84-88,共5页
通过对某型自适应大流量安全阀的结构及工作原理的分析,建立了自适应大流量安全阀的数学模型;利用AMESim16.0软件搭建安全阀的仿真模型,得到了一级直动阀与一级锥阀的压力、流量、位移、阀芯速度等动态特性对比曲线;通过设置不同的二级... 通过对某型自适应大流量安全阀的结构及工作原理的分析,建立了自适应大流量安全阀的数学模型;利用AMESim16.0软件搭建安全阀的仿真模型,得到了一级直动阀与一级锥阀的压力、流量、位移、阀芯速度等动态特性对比曲线;通过设置不同的二级阀芯弹簧刚度、差动腔容积等关键参数,探究自适应大流量安全阀动态特性的影响因素。结果表明:一级锥阀的压力超调率及流量超调率都低于一级直动阀,压力稳定时间、阀芯最大位移及最大速度都是一级锥阀的小;适当增大二级阀芯的弹簧刚度及差动腔的容积都可得到动态性能更加优良的自适应大流量安全阀。 展开更多
关键词 自适应大流量安全阀 AMESIM软件 动态特性 仿真分析
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激光熔覆CoCrNiMnTi_(x)高熵合金涂层组织及耐磨性能研究 被引量:7
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作者 高玉龙 马国梁 +1 位作者 高晓华 崔洪芝 《表面技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第9期351-358,370,共9页
目的针对高铁制动盘等高速强力磨损的关键件,设计激光熔覆CoCrNiMnTi_(x)高熵合金涂层,提高表面的硬度和耐磨性。方法采用激光熔覆技术在Q235钢表面制备CoCrNiMnTi_(x)高熵合金涂层,利用XRD和SEM对涂层微观组织进行表征,通过显微硬度计... 目的针对高铁制动盘等高速强力磨损的关键件,设计激光熔覆CoCrNiMnTi_(x)高熵合金涂层,提高表面的硬度和耐磨性。方法采用激光熔覆技术在Q235钢表面制备CoCrNiMnTi_(x)高熵合金涂层,利用XRD和SEM对涂层微观组织进行表征,通过显微硬度计和纳米压痕仪测试涂层硬度,运用摩擦磨损试验机和三维形貌仪研究涂层的摩擦磨损性能。结果在激光熔覆CoCrNiMnTi_(x)涂层中,随着Ti含量的增加,涂层物相由单一的FCC相转变为FCC+Laves相。由于固溶强化以及Laves相含量增多,涂层的显微硬度不断提高,CoCrMnNiTi硬度达到523HV0.1,最高纳米硬度达到6.91 GPa。CoCrNiMnTi_(x)系涂层的弹性模量大小相近。随着Ti含量的增加,涂层的耐磨性呈现升高趋势,当Ti的摩尔分数增加至0.75时,涂层具有最好的耐磨性,但进一步增加Ti含量时,由于脆硬性的Laves相逐渐增多,磨损形式由低Ti含量时的粘着磨损逐渐转变为高Ti含量时的磨粒磨损,使涂层耐磨性能下降。结论激光熔覆CoCrMnNiTi_(x)涂层可以显著提高基体的耐磨性,Ti的摩尔分数为0.75时,在FCC基体中形成了少量Laves相,既提高硬度,又实现强韧配合,涂层表现出最佳的耐磨损性能。 展开更多
关键词 激光熔覆 高熵合金 微观组织 耐磨性 表面强化
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加工面点云数据深度学习的加工特征自动识别 被引量:5
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作者 高玉龙 张应中 《计算机系统应用》 2022年第2期143-149,共7页
加工特征识别是实现CAD/CAPP/CAM系统集成的关键技术.针对传统基于符号推理加工特征识别模式存在鲁棒性问题,提出一种基于加工面点云数据深度学习的加工特征自动识别方法;基于PointNet点云识别框架,构建了一个面向加工面点云数据的加工... 加工特征识别是实现CAD/CAPP/CAM系统集成的关键技术.针对传统基于符号推理加工特征识别模式存在鲁棒性问题,提出一种基于加工面点云数据深度学习的加工特征自动识别方法;基于PointNet点云识别框架,构建了一个面向加工面点云数据的加工特征自动识别卷积神经网络;通过收集CAD模型中的加工特征面集和采样点云,构建了适合该网络学习的三维点云数据样本库.通过样本训练获得加工特征识别器,实现了24类机械加工特征的自动识别,识别准确率达到99%以上,该方法简洁、高效,对有噪音和缺陷的点云数据不敏感,并且对由于特征相交造成加工面破坏仍然具有较好的鲁棒性和识别效果. 展开更多
关键词 加工特征 特征识别 三维点云 卷积神经网络
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汽车油位传感器挡位故障研究 被引量:1
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作者 王新超 贾艳伍 +2 位作者 肖剑涛 高玉龙 李睿哲 《汽车电器》 2018年第5期43-44,共2页
某车型油位传感器为干簧管式结构,传感器挡位故障表现为油表指针在3/4挡以下无反应。经过调查及试验分析,故障原因为生产传感器时需调整PCB板安装角度,但此时PCB板与外侧塑料管间已灌装部分防护树脂,树脂阻碍PCB板扭转,外力施加在干簧管... 某车型油位传感器为干簧管式结构,传感器挡位故障表现为油表指针在3/4挡以下无反应。经过调查及试验分析,故障原因为生产传感器时需调整PCB板安装角度,但此时PCB板与外侧塑料管间已灌装部分防护树脂,树脂阻碍PCB板扭转,外力施加在干簧管上,造成了3/4挡位干簧管损伤,经过一定使用时间后,簧片无法断开,传感器最大输出阻值只能达到3/4挡位的阻值,所以油表指针在3/4挡位以下无反应。为避免此类问题,PCB板外侧不再灌装树脂,PCB板两侧使用密封胶和橡胶座保护。 展开更多
关键词 油位传感器 PCB板 干簧管
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