转基因定量检测量值转换系数的研究进展

基于PCR技术测定的转基因成分定量结果主要是拷贝数比值,而“产品标识”规定检测结果必须以质量分数表示。量值单位的不统一,造成无法根据检测结果直接进行标识与否的判定。因此亟须研究转基因含量2种单位间的量值关系,建立实现量值转换的“转换系数”定值方法,从而保障检测结果与标识阈值的直接可比。通过对国际转基因“产品标识”制度进行总结,系统分析了影响“转换系数”量值的关键因素和欧盟建立的定值方法,并就我国开展相关研究的重要性进行了论述,为我国转基因“产品标识”制度的有效执行提供参考。

基于经食管超声心动图及经胸右心声学造影的模型预测卵圆孔未闭相关脑卒中风险的临床价值

目的应用经食管超声心动图(TEE)观察卵圆孔未闭(PFO)的解剖特征,联合经胸右心声学造影(cTTE)评估PFO所致右向左分流(RLS),构建PFO相关脑卒中风险预测模型并探讨其预测效能。方法选取我院经TEE联合cTTE确诊为PFO合并RLS的中青年患者105例,根据是否合并缺血性脑卒中分为卒中组47例和非卒中组58例。应用TEE观察是否合并希阿里氏网或下腔静脉瓣、房间隔瘤,测量房间隔活动度、PFO通道长度、PFO与下腔静脉角度,于Valsalva动作下测量PFO左房侧开口径、右房侧开口径;cTTE检查时依据静止的单帧图像上左心腔内最大微泡数量对静息状态及Valsalva动作下RLS进行分级,比较两组上述检查结果和临床资料的差异。采用二元Logistic回归分析预测中青年PFO相关脑卒中发生的独立影响因素,并建立风险预测模型;采用Hosmer-Lemeshow检验评价该模型的拟合度;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价该模型的区分度。结果两组年龄、男性占比、合并房间隔瘤占比、PFO左房侧开口径及右房侧开口径比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);两组合并阿里氏网或下腔静脉瓣占比、房间隔活动度、PFO通道长度、PFO与下腔静脉角度,以及静息状态和Valsalva动作下RLS分级、中大量分流(RLSⅡ、Ⅲ级)占比及静息状态下存在RLS占比比较,差异均无统计学意义。二元Logistic回归分析显示,性别、PFO左房侧开口径均为预测PFO相关脑卒中发生的独立影响因素(均P<0.05)。由此构建的风险预测模型经Hosmer-Lemeshow检验显示其拟合度好(χ^(2)=1.295,P=0.972);ROC曲线显示其具有较高的区分度(曲线下面积=0.728,P<0.001)。结论TEE联合cTTE可准确识别PFO的解剖及分流特征,基于二者构建的风险预测模型在中青年PFO相关脑卒中发生风险中有一定的预测价值。

基于UPLC-MS/MS技术测定大鼠血浆中的氨甲环酸

基于UPLC-MS/MS技术建立了大鼠血浆中氨甲环酸定量分析方法,探讨了不同血浆样品处理方法对方法灵敏度、基质效应的影响,考察了溶剂效应对色谱峰型的影响。选择以顺式-4-氨基环己烷羧酸为内标(Internal standard,I.S.),色谱柱为Nano ChromcoreHilic-Amide柱(150 mm×2.1 mm,3μm),流动相为10 mmol/L甲酸铵(pH 3.8)-乙腈(95∶5,体积比)等度洗脱,采用ESI+离子源、Targeted-MS^(2)扫描模式对血浆样品中氨甲环酸进行定量分析。氨甲环酸在0.2~70 mg/L范围内线性关系良好(R^(2)=0.9996),氨甲环酸日内、日间精密度为0.55%~5.42%,提取回收率为(83.90±12.6)%~(110.20±3.3)%,氨甲环酸的基质效应在(82.16±15.5)%~(86.47±5.6)%之间。建立的超高效液相色谱-质谱联用方法快速灵敏,重现性好,可用于氨甲环酸在大鼠体内药代动力学研究。

基于卷积神经网络的军棋判定系统

本文利用搭建的卷积神经网络,对采集到的军棋棋面图像进行训练,训练后的模型加载到树莓派中,用于双人对战时识别棋面,从而实现无需第三方人工就可自动判定双方棋力大小。经测试,该系统稳定,准确率高。

氨甲环酸在治疗黄褐斑领域中的应用进展

黄褐斑是一种常发于面部的难治性皮肤疾病,以不规则的色素沉着斑为特征.目前主要治疗药物有对苯二酚、维A酸等,但其副作用较大.氨甲环酸是一种人工合成的赖氨酸衍生物,属于抗纤维蛋白溶解剂,经美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗月经过多和预防出血.另外,氨甲环酸具有治疗黄褐斑的功效,它通过对纤溶酶原激活途径的抑制作用,从而减轻色素沉着症状.本文作者在PubMed、Web of Science、CNKI、ScienceDirect等数据库进行了广泛的文献检索,对氨甲环酸在治疗黄褐斑领域的制剂学研究和临床有效性研究进行了资料归纳与分析,为临床上应用氨甲环酸治疗黄褐斑提供参考.

染色质转座酶可及性测序研究与数据分析

在真核生物中,染色质作为遗传物质DNA的载体,直接参与基因的表达调控。染色质的可及性是指染色质中的DNA能与转录因子等蛋白复合物结合的区域,对染色质可及性的测定可为获取开放区域的信息、核小体定位信息以及转录因子结合信息提供基础依据。随着高通量测序技术的进步以及测序成本的降低,研究者已开发多种研究染色质可及性的测序方法,该文介绍4种常见的染色质可及性测序方法,对其中的染色质转座酶可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)的原理和数据分析方法进行重点描述,讨论ATAC-seq的应用与发展趋势,为染色质可及性以及基因表达调控的研究提供参考。

重组金黄色葡萄球菌肠毒素B蛋白可溶性微针制备及免疫效果研究

目的建立重组金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)蛋白的可溶性微针体外检测方法及体内免疫效果评价。方法通过动态光散射(DLS)检测蛋白粒径、BCA法检测单片微针的蛋白浓度、活体成像实验检测微针皮内注射后蛋白在体内的停留时间,通过DRIZE评分评价微针注射后的皮肤情况,通过动物实验评价重组SEB蛋白可溶性微针的免疫原性及免疫保护效果。结果DLS分析显示SEB蛋白可溶性微针负载的重组SEB蛋白粒径与重组SEB蛋白溶液中的SEB蛋白粒径无明显差别,单片微针中重组SEB蛋白含量为(13.2±1.4)μg,活体成像实验显示相对于肌肉注射,重组SEB蛋白可溶性微针皮内给药后荧光蛋白在体内的停留时间延长,动物实验显示13.0μg的重组SEB蛋白可溶性微针即能引发免疫反应,并且在2LD50SEB攻毒剂量下能够产生很好保护效果。结论重组SEB蛋白可溶性微针能够刺激小鼠机体产生较好的免疫原性及免疫保护效果,为发展疫苗新型免疫途径提供了新策略。

改性壳聚糖滴眼液对兔白念珠菌性角膜炎的治疗作用及安全性评价

目的评价改性壳聚糖滴眼液在白念珠菌性角膜炎动物模型中的治疗作用及安全性。方法选取10只健康成年雌性新西兰白兔,以右眼为实验眼,采用角膜接触镜法建立浅层白念珠菌性角膜炎模型。经裂隙灯显微镜及角膜刮片显微镜检查结果初步判定造模成功的新西兰白兔,采用随机数字表法分为模型组和改性壳聚糖点眼组,根据真菌培养结果最终判定造模成功的模型兔,另选5只兔为正常对照组,不做处理。正常对照组和改性壳聚糖点眼组局部给予改性壳聚糖滴眼液点眼,每日6次,1周后改为每日4次,继续用药1周后停药;模型组不给予治疗。用药期间每天裂隙灯显微镜下观察各组角膜病灶及眼表变化,于造模后第1、7、14、21、28天行裂隙灯显微镜照相并进行眼部症状评分,并记录角膜愈合时间。停药后继续观察各组实验眼角膜情况2周。结果8只模型兔实验眼角膜刮片显微镜检查结果为真菌菌丝和孢子阳性,培养分离的菌株与接种菌株一致,造模成功率为80%(8/10)。造模后第7、14、21天,模型组感染程度评分分别为(14.50±0.58)、(6.25±0.50)和(2.50±0.58)分,明显高于相应时间点改性壳聚糖点眼组的(7.25±1.26)、(2.75±0.50)和(1.25±0.50)分,差异均有统计学意义(均P<0.05)。模型组于造模后7 d内,角膜水肿明显加重,中央白色溃疡范围增大,造模后7~28 d角膜溃疡逐渐愈合,平均愈合时间为(24.5±2.6)d,最终遗留角膜瘢痕及新生血管。改性壳聚糖点眼组造模后7 d内角膜浸润明显减轻,造模后14 d角膜刮片镜检及真菌培养结果均为阴性,平均愈合时间为(13.5±1.3)d,明显短于模型组,差异有统计学意义(t=7.47,P<0.01)。造模后28 d改性壳聚糖点眼组实验眼未见角膜炎复发,治愈率为100%。正常对照组局部用药期间未见眼睑结膜充血水肿及角膜损伤表现。结论改性壳聚糖滴眼液治疗兔眼浅层白念珠菌性角膜炎模型安全、有效,眼表刺激性小。

超声联合微泡辅助卡铂抑制体外人肺癌A549细胞活性的适宜剂量和能量参数研究

目的探讨超声联合微泡辅助卡铂抑制体外人肺癌A549细胞活性的适宜剂量和超声能量参数。方法 96孔板接种A549细胞,加入浓度梯度0~300μg/ml的卡铂培养24 h,每孔加入10μl CCK-8溶液,孵育1.5 h,酶标仪测定450 nm处的吸光度值,计算卡铂24 h半数抑制浓度(IC_(50)),选择IC25为卡铂适宜剂量。设置无处理组(对照组)和实验组[超声辐照组(US组)、超声联合微泡组(USMB组)、卡铂组(CBP组)、卡铂+超声组(CBP+US组)、卡铂+超声联合微泡组(CBP+USMB组)],比较CBP+USMB组内不同声强下细胞存活率、相同声强的US组、USMB组与对照组细胞存活率,以及CBP+US组、CBP+USMB组与CBP组的细胞存活率。光学倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化。结果卡铂24 h IC_(50)值为65.7μg/ml,IC25值约为50.0μg/ml,即卡铂适宜剂量。不同声强(0.2~1.0 W/cm^2)CBP+USMB组细胞存活率比较差异无统计学意义(P=0.691)。当声强为0.6 W/cm^2时,US组和USMB组细胞存活率与对照组比较,差异无统计学意义(P=0.142)。当声强为0.6、1.4、2.2 W/cm^2时,CBP+US组和CBP+USMB组细胞存活率与CBP组两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。抑制A549细胞活性由强到弱依次为CBP+USMB组、CBP+US组、CBP组、USMB组、US组。实验组均可见A549细胞形态不规则、贴壁性降低,以CBP+USMB组为著。结论卡铂50μg/ml、声强0.6 W/cm^2为24 h联合疗法的适宜剂量和超声能量参数。超声联合微泡可以与卡铂协同抑制A549细胞活性,有望成为肿瘤联合疗法的新策略。

核酸分析工作组——有效推进核酸测量结果准确一致与可溯源

核酸测量在生物安全、医疗健康、食品安全、环境监测等多个领域具有重要应用,因此核酸测量结果的准确和可靠至关重要。核酸计量是关于核酸测量及其应用的学科,是研究核酸计量单位统一和量值准确可靠的生物计量分支。综述了国际化学和生物计量咨询委员会(Consultative Committee for Amount of Substance Metrology in Chemistry and Biology, CCQM)核酸分析工作组(Nucleic Acid Analysis Working Group, NAWG)在提高核酸分析测量结果准确、可靠和可比方面所做的工作。NAWG是一个致力于提高核酸测量结果可比性的国际组织,其主要工作是为核酸测量能力的维持与发展提供支持。近20年来,NAWG成员开展了一系列研究工作,为不同领域的核酸测量结果的准确、一致和可溯源提供了支持。

基于核酸检测的虾过敏源标准物质研究

选择最常食用的海产对虾作为虾过敏源标准物质的候选物,提取并纯化其基因组DNA,采用序列测定法对设定的目标基因成分进行定性鉴定。用数字PCR技术精确确定海虾16S基因、虾真核生物18S基因、胡萝卜真核生物18S基因的拷贝数,以胡萝卜基因组DNA为本底,重量法配置虾16S基因拷贝数/真核生物18S基因组拷贝数比值为1%。评定虾16S基因拷贝数/真核生物18S基因拷贝数比值的定值不确定度,扩展不确定度为0.09%。并利用数字PCR仪对配置的标准物质进行特性量值验证,结果一致性良好。可为基于核酸检测的食物过敏源标准物质的研制提供方法参考。

胎儿双主动脉弓的超声心动图特征分析

目的总结分析胎儿双主动脉弓的超声心动图特征,探讨产前超声心动图对其的诊断价值。方法回顾性分析我院17例经产前超声心动图诊断为双主动脉弓胎儿(病例组)和与其胎龄相匹配的17例正常健康胎儿(对照组)的超声心动图及临床资料,分析双主动脉弓超声心动图特征,并随访产后诊断结果。结果 17例胎儿产前超声心动图诊断为双主动脉弓,其中右弓优势型11例(1例左弓闭锁),对称型6例;合并室间隔缺损1例,合并双上腔静脉并冠状静脉增宽2例,余未合并其他心内畸形。出生6例,终止妊娠2例,失访9例。出生后有临床症状2例,无症状4例;接受手术治疗1例。对照组与病例组胎儿的左右心房内径、左右心室内径、卵圆孔大小、升主动脉与肺动脉内径及峰值流速比较,差异均无统计学意义。双主动脉弓胎儿典型的超声心动图特征表现为:①三血管-气管(3VT)切面显示两条主动脉,将气管与食管包绕,并与动脉导管形成"9"字形或"O"字形血管环;②3VT切面均显示左位动脉导管;③升主动脉冠状切面可见升主动脉发出两条主动脉弓,降主动脉冠状切面可见两条主动脉弓汇入降主动脉;④主动脉弓长轴切面可见左、右主动脉弓各发出两个分支;⑤3VT切面向头侧连续扫查显示两条主动脉弓及分支走行。结论双主动脉弓胎儿具有独特的产前超声心动图特征,3VT切面对诊断胎儿双主动脉弓具有重要意义,发现左、右两个主动脉弓及分支走行是诊断的关键。

实时三维经食管超声心动图诊断人工主动脉瓣血管翳

目的探讨实时三维经食管超声心动图(Real-time three-dimensional transesophageal echocardiography,RT-3DTEE)诊断人工主动脉瓣置换术后血管翳形成的临床价值。方法选择2017年9月-2019年9月我院心血管外科收治人工主动脉瓣置换术后瓣膜梗阻患者89例,所有患者均行二次换瓣手术,分析其经胸超声心动图(transthoracic echocardiography,TTE)、经食管超声心动图(transesophageal echocardiography,TEE)及实时三维超声心动图相关参数,比较三种方法的差异。结果经手术病理确诊人工瓣膜血管翳51例。血管翳标本厚度为(6.5±1.1)mm,RT-3DTEE、经胸超及二维经食管超声测量血管翳厚度分别为:(6.2±1.2)mm、(5.1±1.2)mm、(5.5±1.3)mm,RT-3DTEE测量厚度与手术标本厚度相关性良好(P<0.01),明显优于经胸超声心动图及二维经食管超声心动图(P<0.05),RT-3DTEE测量的血管翳厚度与经胸及二维食管超声心动图测值亦有统计学差异(P<0.05);RT-3DTEE诊断血管翳敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为84.3%、92.1%、93.5%、81.4%,经胸超声的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别41.1%、89.5%、84.0%、53.1%,经食管超声的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别64.1%、89.5%、89.2%、64.4%。RT-3DTEE的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值均显著高于经胸超声和二维经食管超声心动图(P<0.05);Rt-3DTEE显示血管翳最常见部位在右前象限,圆周范围(18.4±5.2)mm,面积(0.79±0.28)cm^2,人工主动脉瓣平均跨瓣压差(38±12)mmHg,RT-3DTEE测量血管翳面积与人工瓣平均跨瓣压差具有相关性(P<0.05),可根据血管翳面积和人工瓣膜平均压差两项指标判断瓣膜阻塞程度。结论 RT-3DTEE可提高超声诊断人工主动脉瓣血管翳敏感性及特异性,准确评价血管翳所致瓣膜梗阻程度,为临床提供可靠诊断和治疗策略。

超声心动图不同切面诊断胎儿法洛四联症疾病谱的价值分析

目的应用超声心动图观察不同切面对胎儿法洛四联症(TOF)疾病谱的诊断价值。方法回顾性分析我院产前超声诊断为TOF的33例胎儿超声资料,并与产后超声、引产后病理对照,对胎儿四腔心切面(4CV)、左右心室流出道切面(VOTV)、三血管切面(3VV)、主动脉根部短轴切面(AR-SAV)的超声特征进行总结。结果32例胎儿经产后超声或引产后解剖证实为TOF,1例胎儿产后超声诊断为单纯室间隔缺损。4CV联合VOTV+3VV+AR-SAV对胎儿TOF的诊断准确率(96.97%)显著高于4CV+VOTV+3VV(90.90%)、4CV+3VV(84.85%)、4CV+VOTV(72.73%)、4CV+ARSAV(63.64%)、4CV(33.33%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论胎儿TOF具有特征性超声表现,对肺动脉发育情况重点观察有利于胎儿TOF分型的判断。不同切面联合应用有助于提高TOF的诊断准确率。

心脏外科术后下腔静脉管径与中心静脉压的相关性研究

目的探讨心脏外科术后患者的下腔静脉管径及塌陷率与中心静脉压的相关性。方法选取我院心血管外科重症监护病房行瓣膜置换术后患者84例,术后48 h内首次行床旁超声检测,于右锁骨中线与右腋前线的中线上获取经肝的下腔静脉二维长轴超声图像,测量下腔静脉随呼吸变化的最大径和最小径(IVCmax、IVCmin),并计算其管径塌陷率;同时经颈外静脉入上腔静脉导管实时测定中心静脉压(CVP),分析机械通气和自主呼吸状态时IVCmax、IVCmin、塌陷率与CVP的相关性。结果 84例入组患者的下腔静脉IVCmax为(1.54±0.45)cm,IVCmin为(1.19±0.45)cm,塌陷率为(24.02±11.52)%,CVP为(9.46±4.02)cm H_2O(1 cm H_2O=0.1 kPa)。IVCmax和IVCmin与CVP均呈正相关(均P<0.01),下腔静脉塌陷率与CVP呈负相关(P<0.01)。机械通气和自主呼吸患者的IVCmax、IVCmin及下腔静脉塌陷率与CVP均有较好的相关性(P<0.01)。结论通过测量下腔静脉管径和塌陷率可无创预测心脏外科术后患者CVP,有利于判断容量反应性。

林果业小型果类采摘器机具设计与试验研究

目前,我国坚果收取方式多数为手工收取,机械化程度较低,效率不高。针对这一问题,首先分析了国内外坚果收取研究现状,研究了农林业中辊式机械的应用特点,并以夏威夷果为例,设计了一种橡胶套金属辊回转式坚果收取装置。设计完成后搭建了机械收取样机,并在室内进行了夏威夷果收取试验,以验证收取效果。结果表明:当上、下两组橡胶套金属辊的组间距为30mm、转速为28r/min时,直径在30mm以上的夏威夷果均能较快地被收取下来,且未发现果树花蕾受到明显损伤。所设计的样机具有较高的收取效率,能在收取过程中有效保护果树花蕾,适用于"花果同期"类的坚果收取工作。

经食管超声心动图在围手术期右心系统占位诊断中的应用价值

目的探讨经食管超声心动图(TEE)在围手术期右心占位性病变诊断中的应用价值。方法回顾性分析40例临床诊断为右心占位性病变患者的TEE和经胸超声心动图(TTE)检查资料及临床特征,并与手术及病理结果对照,比较TEE和TTE的诊断效能。结果本研究40例患者中,除5例经CT证实为界嵴外,余35例均经手术及病理证实。包括心脏肿瘤26例,血栓5例,赘生物4例。肿瘤病变中,原发性22例,包括良性19例、恶性3例;继发性肿瘤4例,良性和恶性各2例。术前TEE与TTE对右心占位性病变的诊断敏感性均为100%,虽然均有误诊,但TEE诊断准确率高于TTE(77.5%vs.47.5%)。结论在右心占位性病变的术前诊断、术中监测及术后随访方面,TEE较TTE诊断准确率高,在显示病变细节方面效果更好,具有重要的临床应用价值。

经胸超声心动图诊断左冠状动脉异常起源于肺动脉的初步研究

目的总结左冠状动脉异常起源于肺动脉(ALCAPA)的经胸超声心动图(TTE)特征及诊断思路。方法回顾性分析我院经手术证实的8例ALCAPA患者的临床及影像学资料,总结其TTE特征。结果8例ALCAPA患者左室收缩功能均正常,其中婴儿型1例,早期出现肺炎、ST改变和心影增大;成人型7例,多无明显症状,因发现心脏杂音就诊。8例患者首诊超声仅确诊1例,高年资医师复诊检查确诊6例,1例误诊冠状动脉-肺动脉瘘。ALCAPA的典型TTE特征为左室增大,右冠状动脉内径增宽,心肌侧支血流丰富,肺动脉内见来自左冠状动脉的异常血流信号。结论婴儿期发现心力衰竭、ST改变、心影增大,以及儿童或成人期发现冠状动脉侧支血流丰富、右冠状动脉内径增宽,均需警惕ALCAPA;仔细扫查左冠状动脉的起源和血流方向,有助于提高TTE对ALCAPA的早期诊断准确率。

疏肝理气类中药配方颗粒与饮片临床疗效的对比研究

目的探讨疏肝理气类中药配方颗粒与饮片的临床疗效。方法选取2015年1月—2017年5月笔者所在医院进行治疗的"肝郁气滞"患者共200例,其中100例采用传统的中药饮片治疗作为对照组,100例采用中药配方颗粒作为观察组,两组患者均治疗1个月时间,评价临床疗效与总费用。结果观察组患者临床总有效率91%,对照组患者临床总有效率92%,两组患者临床有效率差异无统计学意义(P>0.05)。观察组1个月总费用(1 584.39±53.02)元,对照组1个月总费用(894.30±15.49)元,观察组花费高于对照组花费,差异有统计学意义(P<0.05)。结论中药配方颗粒与饮片临床疗效相当,中药配方颗粒冲服方便,适合有经济实力的患者服用。

VIP控制技术降低稻米镉含量试验

为探明镉污染稻田农艺措施修复和降低稻米镉含量的效果,开展了镉污染VIP控制技术小区试验,对试验区域水稻产量、土壤pH值、土壤和稻米镉含量进行比较分析。结果表明:通过VIP控制技术,水稻产量有不同程度的增减,土壤pH值显著增加18.18%~21.18%,土壤镉含量减少0.033~0.041mg/kg,稻米镉含量显著降低,降幅在43.7%~64.1%。"低镉品种+优化水分管理+施用生石灰"控镉技术为降低重金属镉污染稻田稻米镉含量的最佳推广模式,经济、实用、环保又有效。