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水稻锌指蛋白基因CRISPR/Cas9突变体的构建及突变分析 被引量:4
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作者 易勇 郑瑞 +3 位作者 杨波 栾维江 郭嗣斌 沙爱华 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2607-2613,共7页
【目的】通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对水稻锌指蛋白基因(OsC3H54)进行基因编辑,筛选鉴定出其突变体植株,为深入研究OsC3H54的生物学功能提供良好材料,也为水稻锌指蛋白研究提供参考依据。【方法】通过E-CRISP在Os C3H54基因的外显子... 【目的】通过CRISPR/Cas9基因编辑技术对水稻锌指蛋白基因(OsC3H54)进行基因编辑,筛选鉴定出其突变体植株,为深入研究OsC3H54的生物学功能提供良好材料,也为水稻锌指蛋白研究提供参考依据。【方法】通过E-CRISP在Os C3H54基因的外显子上设计靶点序列,将靶点序列连接至OsU6SK载体上,再与Cas9一起连接到pCAMBIA1300双元载体上,获得CRISPR/Cas9重组双元载体,通过农杆菌介导将其转入日本晴水稻愈伤组织,利用潮霉素进行抗性筛选,获得突变体植株,并分析其靶点位置的碱基及编码氨基酸突变情况。【结果】在OsC3H54基因第2个外显子上找到2个符合靶点设计要求的靶点,分别为TG1:5'-CCGCCGCGGCTGCCTTTGGATAC-3'和TG2:5'-CCTTCCC CAATGGCGGGGGTGGC-3'。将OsU6SK载体和靶点序列正确连接的重组载体与Cas9一起连接至pCAMBIA1300双载体上,成功获得CRISPR/Cas9重组双元载体(pCAMBIA1300-Cas9-TG1和pCAMBIA1300-Cas9-TG2)。通过农杆菌介导转入日本晴水稻,经潮霉素抗性筛选获得TG1靶点株系和TG2靶点株系,共16株CRISPR/Cas9突变体植株。CRISPR/Cas9突变体植株在靶点序列的突变位点位置附近出现套峰,表明2个株系的植株均发生碱基突变,其中Y1、Y2、Y3和Y4突变体植株均为单碱基插入突变,最终导致编码的氨基酸发生移码突变,蛋白翻译提前终止。【结论】水稻OsC3H54基因CRISPR/Cas9突变体植株的获得为进一步研究水稻锌指蛋白生物学功能提供了良好材料。 展开更多
关键词 水稻 锌指蛋白 C3H54 CRISPR/Cas9 基因编辑 突变体植株 突变分析
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Development and Identification of Introgression Lines from Cross of Oryza sativa and Oryza minuta 被引量:5
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作者 guo si-bin WEI Yu +4 位作者 LI Xiao-qiong LIU Kai-qiang HUANG Feng-kuan CHEN Cai-hong GAO guo-qing 《Rice science》 SCIE 2013年第2期95-102,共8页
Introgression line population is effectively used in mapping quantitative trait loci(QTLs),identifying favorable genes,discovering hidden genetic variation,evaluating the action or interaction of QTLs in multiple co... Introgression line population is effectively used in mapping quantitative trait loci(QTLs),identifying favorable genes,discovering hidden genetic variation,evaluating the action or interaction of QTLs in multiple conditions and providing the favorable experimental materials for plant breeding and genetic research.In this study,an advanced backcross and consecutive selfing strategy was used to develop introgression lines(ILs),which derived from an accession of Oryza minuta(accession No.101133) with BBCC genome,as the donor,and an elite indica cultivar IR24(O.sativa),as the recipient.Introgression segments from O.minuta were screened using 164 polymorphic simple sequence repeat(SSR) markers in the genome of each IL.Introgressed segments carried by 131 ILs covered the whole O.sativa genome.The average number of homozygous O.minuta segments per introgression line was about 9.99.The average length of introgressed segments was approximate 14.78 cM,and about 79.64% of these segments had sizes less than 20 cM.In the genome of each introgression line,the O.minuta chromosomal segments harbored chromosomal fragments of O.sativa ranging from 1.15% to 27.6%,with an overall average of 8.57%.At each locus,the ratio of substitution of O.minuta alleles had a range of 1.5% 25.2%,with an average of 8.3%.Based on the evaluation of the phenotype of these ILs,a wide range of alterations in morphological and yield-related traits were found.After inoculation,ILs 41,11 and 7 showed high resistance to bacterial blight,brown planthopper and whitebacked planthopper,respectively.These O.minuta-O.sativa ILs will serve as genetic materials for identifying and using favorable genes from O.minuta. 展开更多
关键词 Oryza sativa Oryza minuta introgression line bacterial blight brown planthopper whitebacked planthopper
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塔机附着装置连接销轴的轴向位移与预防措施 被引量:1
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作者 朱俊成 郭泗宾 +1 位作者 张虎 左骁 《建筑机械化》 2021年第1期65-67,共3页
结合日常检查所发现的塔机附着装置安全隐患情况,通过分析连接销轴产生轴向位移掉落可能带来的不良影响,强调防止连接销轴轴向位移的重要性,提出相应预防措施。
关键词 塔式起重机 附着装置 连接销轴 轴向位移 预防措施
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高温雨季建筑施工现场起重机械的安全管理 被引量:5
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作者 郭泗宾 蔡明利 张海君 《建筑机械化》 2018年第9期66-68,共3页
高温雨季异常天气建筑施工现场塔机等起重机械设备的使用极易发生较重大安全事故,笔者根据多年的施工现场管理经验,对起重机械安全管理加以总结,以期与业内同行共同探讨。
关键词 起重机械 高温雨季 安全管理
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