一例赤大袋鼠梭菌性肠炎的诊断和病原分离鉴定

通过临床症状、尸体剖检、组织病理学、毒素实验和细菌分离鉴定的方法确诊了1例由A型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)引起的赤大袋鼠(Macropus rufus)梭菌性肠炎的自然病例。动物园1只成年赤大袋鼠突然精神沉郁、厌食,于20 h后死亡,尸体角弓反张,腹围膨大。尸体剖检和组织学检查表明:胃肠道、肝脏和肾脏出现具有梭菌性肠炎证病意义的病变。小白鼠毒素实验结果显示,血样肠内容物内有急性致死性毒素。从出血的肠黏膜面分离到单一、有芽孢、粗大的革兰阳性杆菌,经产气荚膜梭菌毒素基因型多重PCR鉴定为A型产气荚膜梭菌。研究结果可为赤大袋鼠梭菌性肠炎的诊断和防控提供依据。

不同方法治疗结肠多发腺瘤性小息肉的临床研究

目的比较热圈套息肉切除术(HSP)、冷圈套息肉切除术(CSP)、黏膜下注射冷圈套切除(CS-EMR)治疗结肠多发腺瘤性小息肉的临床价值。方法本研究为回顾性分析,选取2021年10月至2022年8月内蒙古医科大学附属医院消化内科行结肠息肉切除的450例结肠息肉患者为研究对象。根据手术方案的不同分为三组,选择采取热圈套息肉切除术治疗的患者150例为HSP组、选择采取冷圈套息肉切除术治疗的患者150例为CSP组、选择采取黏膜下注射冷圈套切除术治疗的患者150例为CS-EMR组。收集患者的基线资料,对比分析组间手术指标及息肉基本特征。结果三组患者的基线资料、息肉基本特征比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。息肉切除时间比较,CSP组<CS-EMR组<HSP组,差异有统计学意义(P<0.05);止血夹使用数量比较,HSP组低于CSP组和CS-EMR组(P<0.05);息肉完整切除率,CSP组低于CS-EMR组和HSP组(P<0.05);术中出血率比较,HSP组、CS-EMR组低于CSP组(P<0.05);迟发性出血率比较,HSP组高于CSP组和CS-EMR组(P<0.05)。结论CSP、HSP、CS-EMR均是治疗结肠多发小息肉的有效方案,CSP术中出血率较高、息肉完整切除率较低,HSP迟发性出血率较高,CS-EMR息肉完整切除率较高、术中出血率和迟发性出血率均较低。

抗-E、抗-c、抗-M、抗-S多重抗体分析

目的对1例存在多重抗体的肾积水伴输尿管结石合并休克老年患者进行抗体特异性鉴定。方法微柱凝胶法进行红细胞不规则抗体筛查和抗体鉴定,酶法,抗体吸收法协助判断患者的抗体特异性;盐水试管法检测患者ABO血型鉴定、Rh血型鉴定、MNS血型。结果患者血型:O、CCDee、NNss,患者体内检测出抗-E、抗-c、抗-M、抗-S联合抗体。结论反复输血可能引起患者存在1种或者多种意外抗体,体内多种或高频率抗体的患者,可能引起鉴定困难和用血延迟。

阿托伐他汀联合达格列净治疗代谢相关脂肪性肝病的临床效果观察

目的分析阿托伐他汀联合达格列净治疗代谢相关脂肪性肝病的临床效果。方法选取2021年6月至2023年6月内蒙古医科大学附属医院收治的代谢相关脂肪性肝病患者86例,采取双盲、随机数字表法分为对照组和观察组,各43例。对照组采用阿托伐他汀治疗;观察组采用阿托伐他汀联合达格列净治疗,2组均治疗6个月。比较2组治疗前后肝功能指标、肝脏物理指标、血脂指标和糖脂代谢指标。结果治疗6个月后,观察组肝功能指标丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶水平均低于对照组[(44±6)U/L比(68±7)U/L、(37±4)U/L比(45±4)U/L、(41±7)U/L比(50±9)U/L](均P<0.001)。治疗6个月后,观察组肝脏物理指标脂肪肝指数、肝脏硬度值低于对照组,肝/脾CT值高于对照组(均P<0.05)。治疗6个月后,观察组高密度脂蛋白胆固醇水平高于对照组,低密度脂蛋白胆固醇、三酰甘油、总胆固醇水平低于对照组(均P<0.001)。治疗6个月后,观察组糖脂代谢指标稳态模型胰岛素抵抗指数、三酰甘油葡萄糖乘积指数均低于对照组[(2.1±0.3)比(2.7±0.5)、(4.1±0.7)比(4.6±0.6)](均P<0.001)。结论阿托伐他汀联合达格列净治疗代谢相关脂肪性肝病,能够改善患者肝功能、血脂指标和糖脂代谢指标。

内蒙古牛呼吸道合胞体病毒的分离鉴定及其全基因组分析

为确定引起内蒙古地区3月龄~6月龄荷斯坦犊牛暴发呼吸系统疾病的病原,并分析其基因组序列,本研究对病死犊牛剖检并观察其各脏器的剖检病变,制备各组织病理切片,观察其组织病变。结果可见犊牛肺脏呈深红色有光泽的肌肉样实变,心脏肥大,肝脏表面散在细小的结节状灰白色病灶,肾脏表面散在细小深红色出血点;组织病理学观察可见典型间质性肺炎,多数各级细支气管腔和肺泡腔内巨噬细胞和淋巴细胞大量增生和浸润,偶见合胞体细胞,在各级细支气管部分黏膜上皮细胞浆内有大小不等的圆形红染的病毒包涵体;轻度纤维化和小坏死灶的变质性肝炎,急性炎性脾肿,多发性小出血灶的慢性硬化性肾小球肾炎。进一步进行RT-PCR检测,结果显示,扩增获得约600 bp的目的条带,测序后与GenBank中相关基因序列比对,结果显示目的基因与牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)美国分离株USII/S1(KU159366)的同源性最高(98.42%),表明该地区某牧场犊牛感染了BRSV。将该病例肺组织研磨上清液接种牛肾细胞(MDBK)盲传3代出现典型的细胞病变,经RT-PCR检测确认为BRSV,进一步表明分离到1株BRSV,命名为IM BRSV-39。分段扩增IM BRSV-39株的全基因组序列,经测序后拼接获得长度为15130 bp的BRSV全基因组序列。采用MegAlign软件分析IM BRSV-39株的全基因组序列、G基因序列和F基因序列的同源性及突变位点;采用MEGA 11软件构建分离株全基因组进化树分析其遗传进化关系。结果显示,IM BRSV-39株的全基因组序列、G基因和F基因序列均与BRSVⅢ亚型分离株相应基因序列的同源性最高、且位于同一进化分支,证实IM BRSV-39株属于BRSVⅢ亚型;突变位点分析结果显示:与BRSVⅢ亚型参考株相比,IM BRSV-39株G基因序列存在7个突变位点,F基因序列存在12个突变位点;G蛋白氨基酸序列存在4个突变位点,其中L13H处在G蛋白的胞质结构域(aa1~aa37);Y^(127)H、I^(139)T、P^(177)L、A^(186)T处在G蛋白的胞外结构域(aa66~aa257);F蛋白氨基酸序列存在5个氨基酸突变位点,其中M^(4)T、M^(7)T、S^(14)C处在F蛋白氨基末端信号肽区(aa1~aa26)。本研究检测并分离到1株BSRV,揭示了该病毒基因组的遗传进化特征,为国内BRSV的深入研究奠定了基础。

一株大黄鱼虹彩病毒的分离鉴定及多克隆抗体的制备

2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼(Larimichthys crocea)出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞(EPC)后出现空斑、脱落的细胞病变症状。根据虹彩病毒MCP和ATPase基因保守序列设计特异性引物对病毒组织样本进行PCR扩增,得到分别为1 367 bp和740 bp的目的基因片段。将MCP基因扩增片段测序,经BLAST对比及系统发育树聚类分析,确定该分离的病毒属虹彩病毒科细胞肿大病毒属。通过蔗糖密度梯度离心纯化,用透射电镜观察该病毒粒子呈正六边形,直径为120~150 nm。用纯化病毒作为抗原免疫小鼠获得抗大黄鱼虹彩病毒的多克隆抗体,效价为1∶7 000;通过SDS-PAGE和Western blotting初步确定3个免疫蛋白。本研究为大黄鱼虹彩病毒纯化提供一种新方法,并初步分离出免疫蛋白,为该病毒相关分子生物学研究、蛋白研究以及疫苗制备等提供理论依据。

强化厌氧表达dld基因以提高大肠杆菌工程菌发酵产L-乳酸的光学纯度

为去除廉价发酵原料中的D-乳酸从而提高发酵最终产物L-乳酸的光学纯度,该研究通过构建带有不同厌氧诱导启动子(pflBp6、pnirB、pflBp6-pnirB)的D-乳酸脱氢酶基因(dld)的表达质粒,并将其分别转入大肠杆菌(Escherichia coli)HBUT-L,加强其在发酵产L-乳酸的同时消除外源D-乳酸的能力。通过装液量与转速的单因素试验筛选最优的质粒表达条件及菌株,并在无机盐培养基与玉米浆培养基中进行发酵验证。结果表明,在装液量为200 mL/250 mL、转速为150 r/min的条件下,含有启动子pflBp6-pnirB的表达质粒的工程菌株HBUT-L4发酵18 h时D-乳酸脱氢酶活力最高,为81.1 U/g。在此条件下进行无机盐培养基和玉米浆培养基发酵时,工程菌株HBUT-L4相对于出发菌株HBUT-L,D-乳酸消耗速率分别提高250%、217%,L-乳酸的光学纯度分别从96.32%、98.48%提升至99.95%、99.98%。在大肠杆菌工程菌发酵L-乳酸的过程中,带有厌氧诱导启动子pflBp6-pnirB的表达质粒可提高D-乳酸脱氢酶活力,强化菌株消除外源D-乳酸,进而提高L-乳酸的光学纯度的能力,具有重要的工业化应用价值。

内蒙古地区神经致病型马疱疹病毒1型的分离与鉴定

为调查内蒙古四子王旗某马场马流产是否由马疱疹病毒1型(EHV-1)感染导致,本研究采集该场马流产胎儿肝、脾等组织,将组织研磨上清液接种MDBK细胞,盲传5代,待出现细胞病变时收集细胞及培养上清,通过gB基因的PCR及透射电镜对分离病毒进行鉴定,采用2代测序技术对分离病毒全基因组测序,并进行分离病毒gB基因的同源性及遗传进化分析。采用SnapGene6.0.2软件分析分离病毒ORF30基因及其编码氨基酸序列。结果显示,组织上清液接种MDBK细胞并盲传5代后,细胞出现典型的圆缩、融合、脱落和聚堆成葡萄串状等细胞病变特征;EHV-1 gB基因的PCR检测结果呈阳性;电镜观察可见疱疹病毒典型的形态特征,表明分离到1株EHV-1,命名为EHV-1-NM2021。同源性分析结果显示:分离株EHV-1-NM2021 gB基因序列与国内外EHV-1参考株gB基因序列的同源性为97.7%~100%;构建gB基因的系统发育进化树,结果显示该基因与EHV-1德国株(RacL11)、澳大利亚株(438-77)处于同一进化分支,亲缘关系较近。此外,ORF30基因序列及氨基酸序列比对结果显示,EHV-1-NM2021 ORF30基因nt2254为鸟嘌呤(G),aa752为天冬氨酸(D),该分离株为神经致病型病毒。本研究首次在内蒙古鉴定并分离到神经致病型EHV-1,丰富了国内EHV-1的流行病学数据库,为EHV-1感染所导致马流产的防控奠定了研究基础。

重组大肠杆菌全细胞转化苹果酸合成丙酮酸

拟建立一条以苹果酸为原料,通过大肠杆菌全细胞转化获得丙酮酸的合成途径。以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,在pET28a上共表达内源的苹果酸酶(ME)和来自博伊丁假丝酵母(Candida boidinii)的醛糖还原酶(AR),并对细胞浓度、底物浓度、温度和pH值等催化关键因素进行研究。共表达后大肠杆菌苹果酸酶和博伊丁假丝酵母醛糖还原酶酶活分别为(2.8±0.21),(3.1±0.34)U/mL。适宜的催化条件为:细胞浓度OD600nm值为30,底物苹果酸质量浓度为30 g/L,木糖和苹果酸物质的量比为1.0,温度为40℃,反应体系pH值为7.8,丙酮酸产量最高可达23.16 g/L。本研究为生物法合成丙酮酸提供了一种新的方法。

基于氢氧化钙为中和剂的大肠杆菌丁二酸发酵

氢氧化钙因其价格相对低廉且与其配套的有机酸分离纯化工艺成熟,常作为中和剂应用于有机酸发酵中。但在丁二酸发酵中,因其不能提供丁二酸合成所必需的二氧化碳,存在发酵产量低的问题。文章建立并优化了以氢氧化钙为中和剂结合二氧化碳脉冲补料发酵生产丁二酸的方法。发酵初期不添加中和剂,pH值自然下降至5.7时,立即流加23%氢氧化钙溶液使pH值升至7.5,然后停止添加中和剂,通入0.2 m^(3)/(m^(3)·min)二氧化碳气体至pH值降至6.5时停止通气使发酵液自然发酵,当pH值下降至5.7时,再循环上述操作。使用该方法时,发酵产量为88.47 g/L,糖酸转化率为96.03%,平均生产强度为2.21 g/(L·h),相较于以氢氧化钙为中和剂不补入或者连续通入二氧化碳的方式,糖酸转化率分别提高了298%和95%。该方法为解决使用氢氧化钙作中和剂发酵丁二酸产量低的问题提供了新思路,也为利用现有有机酸分离设备大规模生产丁二酸打下了良好基础。

球孢白僵菌利用D-PPA合成D-HPPA的发酵条件优化

为了提高球孢白僵菌(Beauveria bassiana)利用R-(+)-2-苯氧基丙酸(D-PPA)合成R-(+)-2-(4-羟基苯氧基)丙酸(D-HPPA)的能力,在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman设计和Box-Behnken中心组合设计优化球孢白僵菌生物合成D-HPPA的液态发酵条件。结果表明,当D-PPA初始添加浓度为40 g/L时,液态发酵最优条件为葡萄糖38.70 g/L、蚕蛹粉15 g/L、FeCl_(2)1.0 g/L、接种量15%(V/V)、pH 6.6及发酵温度28℃时,D-HPPA的产量为(25.10±0.43)g/L,D-HPPA的产率为57.24%±0.97%,比优化前提高了159%。

5种中草药提取液对糙皮侧耳发酵产麦角硫因的影响

为了提高食用菌液体发酵产麦角硫因的产量,以糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)P105为发酵菌种,探讨了五种中草药提取液(党参、茯苓、薏苡仁、枸杞子和甘草)对其摇瓶发酵的影响。通过分析测定菌丝体生物量和麦角硫因产量,发现添加中草药复配提取液的效果明显优于对照组,其中添加枸杞子和党参的复配提取液最佳,菌丝体生物量为25.89 g/L,高于对照组7.31 g/L,麦角硫因产量为7.67 mg/L,高于对照组1.85 mg/L。利用响应面分析法,优化发酵工艺参数,得到最佳发酵条件:枸杞子/党参提取液添加比例为2.1∶1,pH 6.5,转速165 r/min,接种量8%。在此条件下,麦角硫因产量可达到8.53 mg/L,比优化前提高了4.61倍。本研究为利用中草药提取液促进糙皮侧耳发酵生产麦角硫因提供了新的思路和理论依据。

聚焦手功能康复的智能产品交互设计

在手功能康复产品智能化发展趋势背景下,探索该领域产品交互设计路径。采用文献定量分析、设计定性调研、交互要素分析与框架设计等研究方法,梳理近5年手功能康复领域交互设计相关文献情况,结合在康复中心的实地调查、以及专业治疗师访谈,提炼手功能康复产品的交互设计需求;分析手功能康复智能产品系统的交互要素,通过交互框架构建用户康复目标与产品交互目标的联系和提炼手功能康复智能化产品的多通道交互设计要点。阐述了手功能康复智能产品的交互设计路径,并展示了相应的APP设计方案。为同类和相关智能康复产品的交互设计提供参考。

基于时序聚类算法的家宽大数据运营分析系统方案研究与实践

随着家宽用户规模不断扩大,家宽业务泛视频化,用户对宽带网络质量要求越来越高,如何提高客户满意度,快速定位宽带故障点成为亟需解决的问题。文章从内蒙古移动家宽故障定位目前的现状痛点入手,引入时序聚类算法,提出基于时序聚类算法的家宽大数据运营分析系统,并提出该系统的两种实现方式。随后根据内蒙古家宽建设情况提出家宽大数据分析系统网络部署架构、工程实践、以及使用该技术获得的建设成效,并对未来系统建设思考提出展望。

论特定性原则在诉讼引渡中的适用

特定性原则是引渡制度中的一项基本原则。在诉讼引渡中,特定性原则旨在规制对被引渡人的定罪及量刑,主要目的是保护被引渡人的基本人权,附带保护被请求国的司法主权。引渡完成后,请求国对被引渡人的定罪和量刑应恪守特定性原则,但不应陷入教条主义,只要是对被引渡人有利的变更,都不违背特定性原则。至于如何判断“是否对被引渡人有利”,应结合特定性原则设置目的和保护利益及引渡双方国内法律尤其是刑事法律的规定来综合判定。

老年患者结肠镜检查安全性和有效性的现状研究

随着世界人口平均寿命增长,老年结肠镜检查人数逐年增多,但结肠镜检查相关风险和并发症需要关注,肠道准备不足、检查完成率低等问题也值得重视。关于老年人结肠镜筛查的终止时间尚无定论,无结直肠癌报警症状,可筛查至75岁,75岁以上则根据结直肠癌报警症状、身体一般状况、预期寿命等因素综合评估风险获益比。年龄、基础疾病、行走功能状态、不同肠道准备方案等都会影响老年人肠道准备的质量,进而影响结肠镜检查的安全性和有效性,需要针对不同年龄段、不同基础疾病的老年患者,给予个体化肠道准备方案,必要时给予麻醉镇静辅助检查,以提高完整检查率及准确率,减少结肠镜检查相关不良反应及并发症,最大程度降低风险。

猫传染性腹膜炎病毒的检测及ORF 7 ab、N和S基因遗传进化分析

采用剖检、组织病理学和免疫组织化学的方法检测并确诊了2例猫传染性腹膜炎(FIP)病例,并通过RT-PCR扩增2例组织样品中猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的ORF 7 ab、N和S基因,测序后进行基因遗传进化分析,阐明病毒的遗传进化特征。结果显示,2个病例均表现典型的混合型FIP的大体病变,腹腔积满浆液纤维素性渗出物,在腹腔浆膜面散在或弥漫分布细小的灰白色结节。组织病理学显示腹膜表面上附着大小不等的炎性细胞浸润灶,以及坏死性肠炎、间质性胰腺炎和间质性肺炎。免疫组织化学染色结果显示,FPIV特异性的强阳性信号见于炎性细胞浸润灶、脾脏和胰腺内。基因同源性和遗传进化分析结果显示,2例基因均属于FCoVⅠ型。IMAU No.11685与浙江杭州ZJU1709毒株(MT239440)同源性最高,亲缘关系最近;IMAU No.11824与湖北武汉QS毒株(MW030108)同源性最高,亲缘关系最近。说明2例FIPV与国内流行毒株起源于共同祖先,其中ORF 7 ab、N基因相对保守,变异不明显,S基因发生一定的变异。研究结果可为我国FIP的分子流行病学研究和防控提供参考。

一例扬子鳄痛风病自然病例的病理诊断

通过尸体剖检、组织病理学方法诊断1例扬子鳄(Alligator sinensis)痛风病自然病例。尸体剖检可见鳄鱼颈部肌肉、胸部肌肉、腹部肌肉、肋间肌肉、胸腔脂肪、腹腔脂肪、肾脏、心脏周围脂肪、心脏表面及切面、二尖瓣与三尖瓣、脾脏、肝脏和胰腺分布大小不等的圆形、针尖状、条索状灰白色尿酸盐沉积灶。组织病理学变化观察显示,扬子鳄的肾脏肾盂、肝脏间质、胃黏膜层、脾脏、肌肉和脂肪均弥漫性分布大小不等的圆形或椭圆形痛风结节,痛风结节中央为向外周呈放射状的红色尿酸盐结晶,边缘为含有多核巨细胞和上皮样细胞的特殊肉芽组织。痛风结节的形成使组织器官的实质细胞有不同程度的坏死。研究结果可为鳄鱼痛风病的诊断提供依据。

捻转血矛线虫伊维菌素敏感虫株与耐药虫株差异miRNA的转录组学分析

为探究捻转血矛线虫的伊维菌素(IVM)敏感虫株与耐药虫株显著差异的microRNA(miRNA)转录谱,发掘其耐药相关的miRNA,本实验采用Illumina Hiseq2000平台分别对捻转血矛线虫IVM敏感虫株与耐药虫株测序,构建cDNA文库,通过质控后采用生物信息学软件筛选捻转血矛线虫IVM敏感与耐药虫株的差异mi RNA。结果显示,捻转血矛线虫的IVM敏感与耐药虫株筛选出转录显著差异的miRNA共375个,其中253个转录上调,122个转录下调。利用RNAhybrid(V6.01)、Miranda(V3.3a)、TargetScan(V7.0)软件对筛选到的mi RNA靶基因进行预测,并取交集作为mi RNA靶基因预测结果,将筛选出显著差异的靶基因通过perl脚本与显著差异的miRNA进行关联分析,结果显示共关联到2106对miRNA-mRNA为负调控关系,其中涉及到477个差异的m RNA和603个差异的miRNA。对显著差异的miRNA靶基因进行GO富集分析,结果显示其中有492个GO terms,包括生物过程(BP)322个、细胞组分(CC)47个、分子功能(MF)123个。按照q值由小到大的顺序排列,被显著富集的有肌细胞发育分化及内肽酶活性等功能;按照富集基因数目由多到少排列,被显著富集的为有机物代谢、细胞代谢等功能。对显著差异的miRNA靶基因进行KEGG信号通路富集分析,按照q值由小到大的顺序排列,被显著富集到的有抗原处理与递呈等信号通路,其中显著差异靶基因也被富集到药物代谢-其他酶等与药物代谢相关的信号通路,以及一些在捻转血矛线虫耐IVM中起重要作用的通路,如:药物代谢细胞色素P450、细胞色素P450对外源药物代谢通路、ABC转运蛋白等。随机从差异miRNA中选10个进行RT-q PCR的验证,结果显示,相对转录水平结果与测序结果一致。本研究上述结果首次证实,捻转血矛线虫对IVM耐药性的产生与其代谢过程、肌细胞的分化发育过程及免疫过程中的某个或多个环节有一定的联系,本研究为进一步探究捻转血矛线虫耐药机制提供了科学依据。

表达木质素降解酶的基因工程产朊假丝酵母菌部分生物学特性研究

木质素是农作物秸秆饲用化利用的主要限制因素,现仅有少数微生物产生木质素降解酶,且产量少、酶活低,不适合工业化生产,酶蛋白的高效异源表达是提高木质素降解酶产量的有效途径。工程菌ZHMX4和ZHQX1是分别从黄孢原毛平革菌和云芝栓孔菌中扩增出木质素过氧化物酶基因(lip)和漆酶基因(lac),利用同源整合重组技术构建所得的工程菌。对前期构建的表达木质素降解酶工程菌ZHMX4和ZHQX1进行了部分生物学特性研究,包括木质素降解酶适宜反应条件、木质素降解酶基因拷贝数和工程菌降解天然木质素能力的测定及工程菌营养需要分析,了解2株工程菌特性的同时为后续研究工作奠定基础。结果显示:工程菌ZHMX4和ZHQX1产木质素降解酶最适反应温度和pH分别为30℃、3.0和30℃、4.5;2株工程菌各2 mL(添加量为109 cfu/g)混合对100 g玉米秸秆进行发酵时,木质素的降解率达到50.12%;根据Biolog YT微孔板试验结果,可优化2株工程菌的培养基,在培养基中添加一些营养物质,可促进工程菌的生长。