基于网络药理学的三黄汤治疗湿疹作用机制研究

目的:基于网络药理学方法并结合体外THP-1巨噬细胞炎症模型预测三黄汤治疗湿疹的有效成分及可能作用机制。方法:采用中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)筛选三黄汤中的活性化学成分,通过GeneCard数据库查找化合物与湿疹共有靶点;采用Cytoscape软件构建“成分-靶点-疾病”网络,利用STRING数据库进行蛋白互作(PPI)网络分析,用DAVID数据库进行基因功能注释分析(GO)和信号通路富集分析(KEGG),预测三黄汤治疗湿疹的作用机制。使用PMA联合脂多糖(LPS)刺激THP-1细胞,同时三黄汤干预,荧光定量(qRT-PCR)、酶联免疫吸附(Elisa)分别检测细胞炎症因子表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测相关蛋白表达。结果:共筛选出42个活性化合物,74个共有靶点,分析出91条生物过程,包括细胞因子受体结合、受体配体活性、受体调节活性、转录因子活性调节序列特异性DNA结合、核受体的活动、辅因子结合等。密切相关的通路有AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路、Toll样受体信号通路、人巨细胞病毒感染、C型凝集素受体信号通路、Th17细胞分化等;细胞实验表明三黄汤能够下调PI3K、AKT蛋白表达。结论:本研究揭示了三黄汤通过AGE-RAGE信号通路调控IL-1β、IL-6、IFN-γ等细胞因子发挥治疗湿疹的作用,为探讨三黄汤治疗湿疹的物质基础、作用机制等提供参考。

冷凝集对血细胞分析多项参数检测结果的影响

目的探讨红细胞冷凝集对血细胞分析各项检测参数的影响及处理方法。方法选择福建省肿瘤医院2017年12月至2020年2月有红细胞冷凝集的全血标本73份。应用Sysmex XN-9000全自动血细胞分析仪对标本进行检测,比较37℃水浴前后红细胞(RBC)、血细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)和血小板(PLT)的结果差异。结果RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC在经水浴处理前后其结果差异有统计学意义(P<0.05),而WBC、Hb和PLT结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论冷凝集标本会使RBC、HCT、MCV、MCH、MCHC指标结果失真,WBC、Hb和PLT指标结果不受冷凝集干扰。在血细胞分析时,检验人员应加强质量控制,及时发现冷凝集标本并通过37℃水浴处理,排除干扰。

佛波酯诱导小鼠慢性炎症模型考察肤光方抗炎作用的研究

目的:研究肤光方对佛波酯诱导的小鼠慢性炎症模型的抗炎疗效。方法:采用佛波酯(TPA)诱导昆明种小鼠耳部的慢性炎症模型,外用阳性药物吲哚美辛、肤光方,每日2次,连续给药3日后,观察药物对实验小鼠的耳厚度、耳重量、组织病理和髓过氧化物酶(MPO)的改变。结果:造模给药后的耳厚度、耳重量及MPO酶活性方面,阳性药吲哚美辛组同模型组比较,具有显著性差异(P<0.01);肤光方高剂量组同模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);皮损病理切片方面,模型组和正常空白对照组比较,棘层明显增厚,有明显的炎症细胞浸润,用药后,阳性药物组和肤光方高剂量组中增厚的棘层有所恢复,炎症细胞浸润有所改善。结论:佛波酯诱导的小鼠慢性炎症模型稳定,操作简单,可用于炎症的药效学研究,同时提示肤光方具有较强的抗炎作用。

2000-2015年三江源区土壤保持功能及其价值时空变化分析

在地理信息系统的支持下,利用已有的资料和数据,将三江源区划分为30 m×30 m的栅格,并以栅格为单元对其土壤保持功能及价值进行分析和计算。运用《土壤侵蚀分类分级标准》(SL190-2007)中的评估方法研究该地区土壤侵蚀量和土壤保持量及其时空分布,并利用市场价值法评估土壤保持功能的价值。结果表明:1)2000年土壤保持量最低为8.14亿t,2005年和2015年略高分别为9.68亿t和9.69亿t,2010年最高为10.18亿t,2000-2015年空间差异较大,总体上均呈现由西向西南部和东部递增的趋势;2)2000年土壤保持价值最低为494.91亿元,2015年和2005年略高分别为576.26亿元和583.83亿元,2010年最高为613.07亿元,2000-2015年土壤保持价值同样均呈现由西向西南部和东部递增的趋势;3)降雨量对三江源区土壤保持功能及其价值时空变化有着至关重要的作用。

Biquartic Finite Volume Element Method Based on Lobatto-Guass Structure

In this paper, a biquartic finite volume element method based on Lobatto- Guass structure is presented for variable coefficient elliptic equation on rectangular partition. Not only the optimal H1 and L2 error estimates but also some superconvergent properties are available and could be proved for this method. The numerical results obtained by this finite volume element scheme confirm the validity of the theoretical analysis and the effectiveness of this method.

非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定

为了解析非洲猪瘟病毒(ASFV)p30蛋白的抗原表位,以原核表达的重组p30蛋白为免疫原免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,以杆状病毒系统表达纯化的p30蛋白间接ELISA为单抗筛选方法,研制出12株单抗,细胞培养上清抗体效价均大于1∶6400。1G2单克隆抗体的重链属于IgG2b,其余11株单抗的重链均属于IgG1,轻链均为κ型。Western-blot和间接免疫荧光试验结果显示,这些单克隆抗体均能与ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞发生特异性反应。通过p30蛋白基因截短表达和Western-blot发现,这12株单抗分别识别4个抗原表位,包括11MEVIFKTDLRSS22,82EWNMILHVLFEEETES97,107KNDNETNECTSSFETL122,122LFEQEPSSEVPKDSKL137。本研究结果为非洲猪瘟病毒诊断和生物学研究提供了有用的生物学材料。

G3BP1^(-/-)293T细胞系的构建及其影响塞内卡病毒A复制的研究

本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建G3BP1基因稳定敲除的293T细胞系,对塞内卡病毒A(Senecavirus A,SVA)的增殖特性进行初步研究。设计、构建靶向G3BP1基因的sgRNA表达载体,转染293T细胞,经过Western-blot、基因测序筛选鉴定G3BP1敲除细胞系,CCK-8法检测细胞增殖速度;荧光定量RT-PCR方法检测SVA感染后基因组拷贝数,Western-blot检测病毒蛋白VP1表达水平;间接免疫荧光(IFA)检测敲除G3BP1基因对细胞内应激颗粒形成的影响。结果显示,筛选出1株G3BP1基因缺失5 bp的293T细胞(G3BP1-/-293T),其增殖速度与正常细胞相比未见显著差异;荧光定量RT-PCR结果和Western-blot结果表明,在病毒感染早期,敲除G3BP1基因显著抑制SVA基因组复制和病毒蛋白表达;IFA结果显示,敲除G3BP1基因不会影响其细胞内应激颗粒的形成,表明G3BP1对SVA复制的影响与应激颗粒的形成无关。综上,本研究获得1株G3BP1-/-293T细胞系,该细胞能够在病毒感染早期抑制SVA复制,为进一步研究G3BP1对SVA复制的影响奠定了基础。

不同土地利用/覆盖数据在中国北方草地的精度评价

草地是全球分布最广的植被类型之一,精确界定草地边界对于开展草地资源研究和管理具有重要意义。本研究以中国草地分布最集中的北方地区为研究区域,以野外调查获取的草地样点数据为主要评价依据,对来源于7种土地利用/覆盖数据的中国北方草地边界精度进行评价,包括全球30 m地表覆盖数据(GlobeLand30)、1∶1000000中国草地资源图(GLT80s)、中国土地利用现状遥感监测数据(LUCC2010)、中国土地覆盖数据(MICLCover)、全球陆地覆盖数据(Globcover2009)、全球土地覆盖数据(GLC2000)和MODIS土地覆盖数据(MCD12Q1)。结果表明:GLT80s划定的北方草地面积最大,与其他土地利用/覆盖数据划定的草地分布一致区域最多,基于采样点验证的精度也最高,数值为88.32%,而Globcover2009的精度最低,仅为29.31%,MCD12Q1和GLC2000的采样点验证精度分别为83.74%和83.45%,其他草地图的采样点验证精度则介于73.42%～78.97%;分省统计分析显示,在青海省MCD12Q1的精度最高,数值高达94.23%,GLC2000和GlobeLand30的精度在90%以上,而在新疆、西藏、内蒙古、甘肃则均为GLT80s的精度最高;与GLT80s对比分析显示,其他数据源与其分布不一致的主要原因是将GLT80s中的温性荒漠类草地部分划为裸地,面积占分布不一致区域总面积的22.59%～42.87%。建议在开展有关北方草地资源及功能评价时,除青海省优先选用MCD12Q1数据外,其他省份优先选用GLT80s数据,但要特别注意其在温性荒漠类草地区域划分的准确性。