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ARTP-MMC高通量筛选耐木质纤维素预处理抑制物酿酒酵母的研究
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作者 古永红 付少虎 +4 位作者 廖蓓 龚大春 吕育财 王昕 李志军 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第9期99-104,共6页
为了提升酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)对木质纤维素预处理所产生的甲酸、糠醛、5-羟甲基糠醛等抑制物的耐受性,保障酿酒酵母产乙醇能力不受影响,该文以安琪超级酿酒酵母为出发菌株,研究了一种常温常压等离子体(ARTP)诱变和微液... 为了提升酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)对木质纤维素预处理所产生的甲酸、糠醛、5-羟甲基糠醛等抑制物的耐受性,保障酿酒酵母产乙醇能力不受影响,该文以安琪超级酿酒酵母为出发菌株,研究了一种常温常压等离子体(ARTP)诱变和微液滴细胞培养(MMC)相结合的适应性进化和高通量筛选耐木质纤维素预处理抑制物的酿酒酵母方法,获得抗性强的酿酒酵母优势突变株,并评价其耐抑制物、耐高温和产乙醇能力。结果表明,菌株最佳诱变条件为:诱变功率110 W,诱变时间140 s,培养12 h,微液滴微生物培养的适应性进化复合抑制剂梯度组合为CI4~CI6,经过高通量筛选获得最佳的突变株M8;该菌株可耐受体积分数16%乙醇,具有较好的耐高温特性,55℃热激5 min可正常生长;经过10 L发酵罐培养,其最大乙醇产量为56.29 g/L,糖醇转化率为0.49 g/g,达到理论值的96.67%。该研究对木质纤维素高质化利用提供了优良的酿酒酵母,对推动纤维素乙醇具有重要意义。 展开更多
关键词 常温常压等离子体诱变 微液滴细胞培养 高通量筛选 耐抑制物 酿酒酵母
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贝托司汀手性中间体(S)-CPMA整细胞催化合成工艺研究
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作者 古永红 王德林 +2 位作者 饶振辉 龚大春 肖玲玲 《三峡大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期105-112,共8页
针对不同条件对贝托司汀手性中间体(S)-CPMA的整细胞催化合成影响,进行单因素实验和正交设计优化研究.首先从耐热克鲁维酵母突变株SXBP-02预处理方式、不同催化反应介质、pH、底物质量浓度、温度、时间、催化剂用量、补料次数等8个方面... 针对不同条件对贝托司汀手性中间体(S)-CPMA的整细胞催化合成影响,进行单因素实验和正交设计优化研究.首先从耐热克鲁维酵母突变株SXBP-02预处理方式、不同催化反应介质、pH、底物质量浓度、温度、时间、催化剂用量、补料次数等8个方面进行考察,揭示其中pH、底物质量浓度、补料次数和催化剂用量4个因素对(S)-CPMA催化效率的影响较大;进一步对其进行正交优化,得出最佳工艺条件:在pH8的PEG4000双水相体系中,底物质量浓度为6g/L、补料次数为4次、催化剂用量为3g/L,温度为40℃条件下反应36h,可得到(S)-CPMA产率为88.1%,对映选择性在98.5%以上,4个因素对(S)-CPMA收率的影响主次顺序依次为补料次数>pH>催化剂用量>底物质量浓度,其中补料次数、pH为显著性影响因素,与优化前相比,底物质量浓度提高3倍,产率提高了6%. 展开更多
关键词 整细胞催化 (S)-CPMA 工艺 优化
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重组大肠杆菌S3-2产羰基还原酶发酵工艺优化及动力学研究
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作者 田俊 龚大春 饶振辉 《化学与生物工程》 CAS 北大核心 2024年第5期25-30,43,共7页
以重组大肠杆菌S3-2为发酵菌株,通过单因素实验和正交实验对重组大肠杆菌S3-2产羰基还原酶的1 L发酵罐发酵工艺进行优化,并通过Logistic方程和Luedeking-Piret方程对重组大肠杆菌S3-2分批发酵产羰基还原酶的动力学过程进行模拟。结果表... 以重组大肠杆菌S3-2为发酵菌株,通过单因素实验和正交实验对重组大肠杆菌S3-2产羰基还原酶的1 L发酵罐发酵工艺进行优化,并通过Logistic方程和Luedeking-Piret方程对重组大肠杆菌S3-2分批发酵产羰基还原酶的动力学过程进行模拟。结果表明,重组大肠杆菌S3-2的最佳发酵工艺为:IPTG在OD600值为1.0时诱导、IPTG终浓度为0.30 mmol·L^(-1)、种子液OD600值为3.0时接种、诱导温度为26℃,在此条件下,菌体细胞干重为1.586 g·L^(-1)、羰基还原酶酶活为0.712 U·mL^(-1);菌体生长、羰基还原酶酶活及甘油消耗的动力学模型的拟合度分别为0.9883、0.9917和0.9807,说明该模型对重组大肠杆菌S3-2的发酵动力学模型拟合良好,为后续中试放大研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 重组大肠杆菌S3-2 羰基还原酶 发酵工艺优化 正交实验 动力学模型
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分子改造羰基还原酶CpCR提高其催化合成2-苯乙醇能力
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作者 陈孟军 吕育财 +1 位作者 龚大春 郭金玲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第19期30-37,共8页
该研究对近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶CpCR进行分子改造,以提高其催化合成2-苯乙醇的能力。通过易错PCR构建突变文库,利用2,4-二硝基苯肼高通量筛选阳性突变株,测序确定氨基酸突变位点。再通过蛋白质半理性设计进行虚拟饱和突变,... 该研究对近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶CpCR进行分子改造,以提高其催化合成2-苯乙醇的能力。通过易错PCR构建突变文库,利用2,4-二硝基苯肼高通量筛选阳性突变株,测序确定氨基酸突变位点。再通过蛋白质半理性设计进行虚拟饱和突变,采用定点突变技术进行构建和评价。筛选获得突变体T171F具有更强的催化能力和热稳定性。进一步考察了催化时间、温度、pH值和底物浓度对wtCpCR和T171F催化合成2-苯乙醇的影响。研究表明,酶最适催化合成2-苯乙醇的温度为30℃;T171F最适催化合成2-苯乙醇的pH为6.5;苯乙醛的质量浓度为1000 mg/L时T171F产率可达91.24%,是wtCpCR的2.8倍。此外,突变体T171F相比wtCpCR催化时间由10 h降低到4 h,催化效率得到很大的提高。该研究为羰基还原酶催化合成2-苯乙醇提供科学基础,同时具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 羰基还原酶 易错PCR 2 4-二硝基苯肼 半理性设计 2-苯乙醇
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面向产出人才培养的生物工程专业师资队伍建设思考 被引量:1
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作者 苏香萍 龚大春 +2 位作者 涂璇 郭金玲 雷生姣 《农产品加工》 2023年第22期118-120,共3页
培养面向产出的符合工程教育专业认证标准的人才是地方高校人才培养目标的核心,教师队伍建设是实现这一目标的重要环节。针对生物工程专业目前师资队伍建设中出现的教师工程实践经验不足、教师学术水平和国际视野不足和教师的“立德树... 培养面向产出的符合工程教育专业认证标准的人才是地方高校人才培养目标的核心,教师队伍建设是实现这一目标的重要环节。针对生物工程专业目前师资队伍建设中出现的教师工程实践经验不足、教师学术水平和国际视野不足和教师的“立德树人”动力不足等问题,进行相关分析并提出解决途径,为生物工程专业师资队伍建设提供重要参考。 展开更多
关键词 工程教育认证 面向产出 生物工程专业 师资队伍建设
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复合菌系降解黄曲霉毒素B_1的效果及组成多样性研究 被引量:4
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作者 赵春霞 王轶 +3 位作者 程薇 吕育财 龚大春 郭鹏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期106-112,共7页
采用"外淘汰法"筛选了一组对黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)具有高效降解能力的复合菌系FBAD-2,该复合菌系在120 h内能将质量浓度为2 000μg/L的AFB_1完全降解,对质量浓度为5 000μg/L的AFB_1能降解90%。FBAD-2在30~70... 采用"外淘汰法"筛选了一组对黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB_1)具有高效降解能力的复合菌系FBAD-2,该复合菌系在120 h内能将质量浓度为2 000μg/L的AFB_1完全降解,对质量浓度为5 000μg/L的AFB_1能降解90%。FBAD-2在30~70℃的范围内均能保持对AFB_1的高效降解能力,其最适温度为60℃。毒素降解实验分析表明,FBAD-2对AFB_1的降解主要是胞外酶的作用,其最适产酶时间为24 h,此时的胞外粗酶液在48 h内能将5 000μg/L的AFB_1完全降解。16S rDNA基因组测序分析结果表明,FBAD-2的微生物组成主要包括土芽孢杆菌(Geobacillus)、嗜热小杆菌(Symbiobacterium thermopilum)、梭菌(Clostridium)和热厌氧杆菌(Tepidanaerobacter)等。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 生物降解 复合菌系 微生物组成多样性
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基于Zuvio的对分课堂在《兽医内科学》教学中的应用及其效果评价 被引量:4
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作者 杨丰利 龚大春 +5 位作者 万春云 汪招雄 李鹏 何宝祥 李恭贺 李小杉 《家畜生态学报》 北大核心 2020年第8期90-93,共4页
对分课堂(Presentation,Assimilation and Discussion,简称PDA)作为一种新兴的教学模式,分为讲授、内化吸收和讨论3个环节,其中1、3环节在课堂上完成,第2环节留给学生课后进行。Zuvio软件(中文名:出题优)是一种实时互动的课堂教学辅助AP... 对分课堂(Presentation,Assimilation and Discussion,简称PDA)作为一种新兴的教学模式,分为讲授、内化吸收和讨论3个环节,其中1、3环节在课堂上完成,第2环节留给学生课后进行。Zuvio软件(中文名:出题优)是一种实时互动的课堂教学辅助APP软件。针对兽医内科学教学效果不佳的现状,从课程特点和学生学习习惯出发,将出题优软件有机地融入对分课堂教学模式,在课程结束前向全体学生(97名)发放问卷反馈实施效果,结果表明:参与调查的97名学生认为出题优软件对兽医内科学的对分课堂有应用价值,集中表现为能够增强学习兴趣、活跃课堂气氛以及激发课后主动学习的意愿,同时认为有必要在专业其他课程的教学中推广应用。 展开更多
关键词 互联网+ 动物医学 教学模式 教学辅助技术
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近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶CpCR突变体酶的稳定性研究
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作者 龚大春 王德林 +4 位作者 万里 刘润 吕育财 罗华军 宋婷 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期59-64,共6页
通过蛋白质理性设计和定点突变技术,在近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶wtCpCR的基础上,构建5个突变体酶A98N、S307N、G262N、S216N和S258N,考察了有机溶剂、温度、剪切力、氧气、辅酶NADPH浓度对突变体酶的稳定性影响。研究表明,A98 ... 通过蛋白质理性设计和定点突变技术,在近平滑假丝酵母ATCC 7330羰基还原酶wtCpCR的基础上,构建5个突变体酶A98N、S307N、G262N、S216N和S258N,考察了有机溶剂、温度、剪切力、氧气、辅酶NADPH浓度对突变体酶的稳定性影响。研究表明,A98 N在磷酸盐(potassium phosphate,PB)缓冲溶液中比酶活力提高10%,而S307 N没有酶活力,其他3个突变体比酶活力均有降低;A98 N和G262 N在PB/甲基叔丁基醚的双相体系中界面稳定性比原始酶wtCpCR分别提高1.7和1.4倍;4个突变体酶的耐热特性略有下降,T_(50)值介于31~36℃;在100、200 r/min条件下,4个突变体耐剪切力均增强,在300 r/min条件下G262 N突变酶的耐剪切稳定性比wtCpCR增强1.3倍;G262 N突变酶在有氧条件下的稳定性更好,比野生酶提高1.4倍,半衰期(t_(1/2))达到11.87 h;辅酶浓度为0~0.4 mmol/L时,G262 N突变酶更加稳定。该研究为该羰基还原酶wtCpCR的多点突变进一步改善酶稳定性提供重要的科学依据,同时可提高该酶在双相体系生物催化工艺的经济性。 展开更多
关键词 近平滑假丝酵母 羰基还原酶 理性设计 定点突变 酶稳定性
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浓香型白酒生态系统中己酸菌研究进展 被引量:10
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作者 张晓宇 郭子贤 +5 位作者 吕育财 任立伟 龚大春 杨潇 陈萍 郭金玲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期302-308,共7页
浓香型白酒采用多菌种混合固态发酵,多种微生物共同作用使其具有独特的风味。己酸乙酯是其中主要的呈香物质,因此,己酸菌被普遍认为是浓香型白酒酿造中最重要的一类功能微生物。该文总结了目前已报道的己酸菌的种类及特性,系统阐述了产... 浓香型白酒采用多菌种混合固态发酵,多种微生物共同作用使其具有独特的风味。己酸乙酯是其中主要的呈香物质,因此,己酸菌被普遍认为是浓香型白酒酿造中最重要的一类功能微生物。该文总结了目前已报道的己酸菌的种类及特性,系统阐述了产己酸的代谢途径及其竞争途径,并介绍了己酸菌的己酸代谢调控策略及己酸代谢途径的构建。同时,分析了浓香型白酒生态系统中己酸菌与其他微生物的关系,概述了己酸菌在白酒酿造及其他工业领域的应用现状。对白酒酿造领域中己酸菌的应用前景进行了展望,指出其在窖池微生物结构调整方面还有待继续深入研究,以期为进一步增加白酒酿造的科学性、提高白酒品质提供理论依据。 展开更多
关键词 己酸菌 浓香型白酒 代谢途径 筛选
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Effect of Anterior Stomach Disease on Rumen Function of Beef Cattle 被引量:1
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作者 Wan Chunyun gong dachun Yang Fengli 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2017年第5期315-317,共3页
[Objective] To explore the effect of anterior stomach disease on the rumen function of beef cattle. [Method]The ruminal contraction function of beef cattle was recorded by multi-channel physiological recorder,the freq... [Objective] To explore the effect of anterior stomach disease on the rumen function of beef cattle. [Method]The ruminal contraction function of beef cattle was recorded by multi-channel physiological recorder,the frequency of rumination and belching was observed to detect their effects on the motor function of rumen. Changes of ciliates in the rumen and the intensity of fermentation were determined to detect their influences on digestive function. [Results] The ruminal tension and systolic frequency significantly decreased and the rumination frequency decreased or even stopped under the condition of impactio ruminis,and the belching frequency also decreased. Ciliate numbers of atonia proventriculorum,rumen impaction and rumen expansion cattle were significantly lower than that of normal cattle( P < 0. 01),and the viability of ciliates also significantly decreased. [Conclusion] Occurrence of the stomach disease of beef cattle had significant adverse effects on ruminal function of cattle. 展开更多
关键词 ANTERIOR STOMACH DISEASE RUMINAL motor FUNCTION RUMEN digestive FUNCTION
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厌氧发酵液中微好氧功能菌的分离与鉴定
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作者 龚艳丽 李珊珊 +4 位作者 李宁 吕育财 郭金玲 龚大春 田毅红 《三峡大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第4期103-107,共5页
在发酵前期,体系中微好氧微生物可以消耗掉氧气,为了给产甲烷菌提供一个厌氧环境,该研究的是甲烷发酵前期的微好氧微生物,通过实验,分离纯化得到3株纯功能菌1、3和4号菌;对其革兰氏染色发现均为革兰氏阳性菌;找到其最适生长温度为40℃... 在发酵前期,体系中微好氧微生物可以消耗掉氧气,为了给产甲烷菌提供一个厌氧环境,该研究的是甲烷发酵前期的微好氧微生物,通过实验,分离纯化得到3株纯功能菌1、3和4号菌;对其革兰氏染色发现均为革兰氏阳性菌;找到其最适生长温度为40℃及pH为7;对其生长曲线进行测定得出,1、3和4号菌的生长周期分别为2d、2d和1d;测得不同碳源浓度,不同菌株的生长情况也有极大区别,三株菌的相似之处是对淀粉的分解利用率极高,对麦芽糖的分离利用率低.对于甲烷发酵这个复合体系,前两个阶段微好氧功能菌的耗氧作用对第三阶段产甲烷至关重要.因此,对微生物进行分离,获得厌氧消化体系内微好氧微生物的纯培养,深入研究功能菌株的相关性质,对进一步提高甲烷发酵效率具有重要意义. 展开更多
关键词 微好氧微生物 碳源 耐受度 分离
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“产学研用”协同提升生物工程专业新工科人才创新创业能力 被引量:5
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作者 刘朝霞 雷生姣 +2 位作者 苏香萍 龚大春 汪鋆植 《农产品加工》 2021年第8期111-113,共3页
培养具备创新创业能力的“新工科”人才,是全国高校教育当前急需解决的问题。通过建立“产学研用”创新创业网上师生交流平台,方便师生掌握专业动态;教师开展“探索式”教学,注重激发学生的学习内生动力和人文素质的培养;引导本科生、... 培养具备创新创业能力的“新工科”人才,是全国高校教育当前急需解决的问题。通过建立“产学研用”创新创业网上师生交流平台,方便师生掌握专业动态;教师开展“探索式”教学,注重激发学生的学习内生动力和人文素质的培养;引导本科生、全日制研究生和非全日制研究生组建“X+1+1”创新科研团队,培养学生主人翁意识和团队合作意识;鼓励学生参加各类竞赛培养学生的创新创业的综合能力。 展开更多
关键词 生物工程 创新创业 产学研用 网络平台
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硫酸新霉素制药废水好氧活性污泥中优势硝化菌的分离鉴定及实验研究
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作者 吴媛媛 乐超银 +1 位作者 龚大春 谢飞 《生物化工》 2022年第5期70-73,79,共5页
本实验采用目标微生物富集培养的方法,从硫酸新霉素制药废水好氧活性污泥中分离得到1株具有较高脱氮效率的硝化菌株;经形态学鉴定、16S rDNA基因测序比对分析,鉴定其为泛养副球菌(Paracoccus pantotrophus)。对该菌株进脱氮性能分析,在... 本实验采用目标微生物富集培养的方法,从硫酸新霉素制药废水好氧活性污泥中分离得到1株具有较高脱氮效率的硝化菌株;经形态学鉴定、16S rDNA基因测序比对分析,鉴定其为泛养副球菌(Paracoccus pantotrophus)。对该菌株进脱氮性能分析,在以(NH)SO为唯一氮源的液体培养基中培养72 h,其总氮脱除率约为50%;在整个过程中,中间产物硝酸盐和亚硝酸盐积累几乎为零,确定该菌株具有硝化-反硝化能力。研究结果对从高氨氮制药废水中发掘高效脱氮菌株资源具有较大意义。 展开更多
关键词 硫酸新霉素 制药废水 活性污泥 硝化作用 泛养副球菌
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维生素生物合成途径中酶的代谢与功能的探索 被引量:1
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作者 蒲春香 李金龙 +2 位作者 龚大春 罗华军 张大伟 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期2570-2603,共34页
维生素作为生命活动中不可或缺的有机化合物,其生物合成途径依赖于生物体内复杂而精细的代谢网络。这一网络不仅涉及多种酶的协同作用,还包括多条代谢途径的交叉与整合。虽然在代谢工程和催化机制研究方面已取得了一些成果,但大量关键... 维生素作为生命活动中不可或缺的有机化合物,其生物合成途径依赖于生物体内复杂而精细的代谢网络。这一网络不仅涉及多种酶的协同作用,还包括多条代谢途径的交叉与整合。虽然在代谢工程和催化机制研究方面已取得了一些成果,但大量关键酶缺乏详细的酶学属性研究,这一现状限制了维生素生产效率的提升,同时也阻碍了对维生素合成机制的深入理解与优化。这不仅制约了维生素的工业化应用,也限制了相关生物技术的发展。本文综述了维生素合成途径酶领域的研究进展,详细阐述了13种维生素合成途径酶的研究现状,包括它们的代谢特性、动力学性质以及在生物工程中的应用,同时探讨了不同维生素代谢途径间以及与糖酵解途径合成酶的酶学性质差异,揭示了维生素合成途径中催化效率和底物亲和力的特点。此外,本文还探讨了深度学习方法在推进维生素酶学性质研究方面的潜力和应用前景,为维生素生产和优化提供了新的思路。 展开更多
关键词 维生素 酶动力学性质 代谢途径 生物酶功能 深度学习
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多片段酶切/连接反应结合同源重组的DNA组装方法
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作者 饶欣悦 崇金阳 +5 位作者 贺诚 毕莹莹 唐刚敏 吕育财 龚大春 杨潇 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1559-1570,共12页
为了寻找一种准确高效的多片段组装及多点突变方案,将目前常用的多片段组装方法进行了整合与优化,并以果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-diphosphatase 1,FBP1)基因4位点突变为例进行验证。通过引入突变位点和Bsa I识别序列连接含有突... 为了寻找一种准确高效的多片段组装及多点突变方案,将目前常用的多片段组装方法进行了整合与优化,并以果糖-1,6-二磷酸酶1(fructose-1,6-diphosphatase 1,FBP1)基因4位点突变为例进行验证。通过引入突变位点和Bsa I识别序列连接含有突变位点的片段,经过酶切/连接反应后扩增组装成功的目的片段,并引入与线性化载体两端同源的序列,最后进行片段与线性化载体的重组并转化大肠杆菌。经筛选与测序,得到4位点突变重组质粒。该方案弥补了常规的Gibson组装和Golden Gate组装的部分缺点,是一种高效进行多片段组装和多点突变的实验方案。 展开更多
关键词 定点突变 多片段组装 ⅡS限制性内切酶 同源重组克隆
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γ-谷氨酰转肽酶在枯草芽孢杆菌中高效表达及发酵培养基优化
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作者 张祖政 毛泽敬 +4 位作者 余华顺 张彦 杨潇 龚大春 郑贤良 《食品与发酵工业》 CAS 2024年第24期76-83,共8页
γ-谷氨酰转肽酶是一种能催化底物谷胺酰胺形成γ-谷氨酰-酶复合体,再被受体底物(如氨基酸、短肽)亲核取代,发生转肽反应形成γ-谷氨酰肽的酶,在食品、医药等领域有重要应用价值。该研究选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SCK6作为表... γ-谷氨酰转肽酶是一种能催化底物谷胺酰胺形成γ-谷氨酰-酶复合体,再被受体底物(如氨基酸、短肽)亲核取代,发生转肽反应形成γ-谷氨酰肽的酶,在食品、医药等领域有重要应用价值。该研究选用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)SCK6作为表达宿主,以来源于枯草芽胞杆菌的173种信号肽为基础构建γ-谷氨酰转酶信号肽筛选文库,筛选出最优信号肽SP_(cotC),在此基础上进行启动子筛选,得到最优启动子P_(aprE),最终构建了一株高效分泌表达γ-谷氨酰肽酶的重组菌株BS-gts3,摇瓶发酵胞外酶活力最高为5.04 U/mL。通过单因素试验和响应面试验筛选出最优培养基:乳糖31.73 g/L、FM80250.26 g/L、硫酸镁1.24 g/L、KH_(2)PO_(4)1.25 g/L、K_(2)HPO_(4)0.75 g/L,胞外酶活提高了12%,为5.623 U/mL。并进行5 L发酵罐放大培养,在38 h,胞外酶活力达到最高28.18 U/mL,是已报道的最高水平。该研究对γ-谷氨酰转肽酶的产品开发及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 γ-谷氨酰转肽酶 启动子 信号肽 重组表达
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卡氏德巴利酵母植酸酶在毕赤酵母中的异源表达及优化 被引量:4
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作者 望松柏 盖园明 +2 位作者 龚大春 涂璇 张大伟 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期3421-3431,共11页
【背景】植酸是一种能螯合金属离子和蛋白质的有机磷类化合物,广泛存在于植物组织中,影响动物对营养元素的吸收。在饲料中加入植酸酶可有效降解植酸。【目的】构建毕赤酵母异源表达卡氏德巴利酵母(Debaryomyces castellii,D. castellii... 【背景】植酸是一种能螯合金属离子和蛋白质的有机磷类化合物,广泛存在于植物组织中,影响动物对营养元素的吸收。在饲料中加入植酸酶可有效降解植酸。【目的】构建毕赤酵母异源表达卡氏德巴利酵母(Debaryomyces castellii,D. castellii)植酸酶的菌株,促进卡氏德巴利酵母植酸酶的研究及工业应用。【方法】将卡氏德巴利酵母植酸酶基因进行密码子优化后转入毕赤酵母GS115中,通过筛选多拷贝、敲除蛋白酶、过表达分子伴侣及转运蛋白的方法获取优势菌株。【结果】所得重组菌株GS115/DCphy(ΔPep4)(BFR2)的产酶酶活是低拷贝菌株的7倍。【结论】研究结果为卡氏德巴利酵母植酸酶的异源表达及潜在工业应用提供了一定的指导。 展开更多
关键词 植酸酶 毕赤酵母 卡氏德巴利酵母
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