脂肪来源干细胞在神经元媒介中的增殖和分泌蛋白质功能的研究

目的现有的证据证明脂肪来源干细胞（ADSCs）在促进组织再生中起到旁分泌的作用。此外，体内和体外实验表明，加入未分化和神经分化的ADSCs能提高神经功能和再生。本研究中，我们假设ADSCs能在神经元培养基中存活，且细胞能分泌细胞因子，促进伤口愈合和神经再生能力。方法将人脂肪提取物进行胶原酶消化得到基质血管成分（SVF）。然后按照国际生物治疗协会指南采用标准的细胞培养技术将ADSCs从SVF中分离出来。将ADSCs在不同浓度的24和96孔胚胎运动神经 元培养基（NBM）或施万细胞培养基中培养16d，并设立对照组（CM）。2-（2-甲氧基4硝苯基）-3-（4-硝苯基）-5-（2，4-二磺基苯）-2H-四唑单钠盐（WST-8）试验测定不同细胞群的增殖数量。细胞分泌的VEGF、HGF和bFGF用多元ELISA阵列系统进行测定。结果流式细胞仪分析对ADSC表型进行分析，检测到表面标记物CD73（99．9％）、CD90（84．3％）和CD105（92．6％）活性强，并能分化成脂肪细胞、成骨细胞和成软骨细胞。ADSCs在5％SCM组，25％、50％和100％NBM组的增殖与对照组一致（P〉0．05）。培养2d，ADSCs在100％SCM组与对照组相比，分泌的bFGF较多（1164．8：131．9pg／m1），在培养6d时，50％NBM组表达的最多（1892．2：78．1pg／m1）。在第6天时，除了100％NBM组，其他组HCF都不再增加（695．9±22．2Pg／m1）。在第8天时，50％NBM组表达的VEGF最多（230．0：0．3Pg／m1）。结论我们的研究结果表明，ADSCs不仅能在神经元培养基中存活，还能分泌细胞因子促进伤口愈合和神经再生。无论是在CM、SCM还是NBM中，ADSCs的增殖不受影响，然而，我们观察到，在第6、8天时，HGF、bFGF和VEGF的表达显著增加，特别是在NBM组中。这个数据表明，ADSCs能分泌出促进再生所需的细胞因子。