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Wastewater treatment performance and microbial community structure in the constructed wetland under double-pressure of low temperature and Ag NPs exposure 被引量:1
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作者 Huang Juan Cao Meifang +2 位作者 Ma Yixuan Liu Jialiang guan wenzhu 《Journal of Southeast University(English Edition)》 EI CAS 2022年第3期291-299,共9页
To investigate the effects of silver nanoparticles(Ag NPs)and low temperature double-pressure on the wastewater treatment efficacy and the microbial community structure of constructed wetlands,a pilot-scale vertical f... To investigate the effects of silver nanoparticles(Ag NPs)and low temperature double-pressure on the wastewater treatment efficacy and the microbial community structure of constructed wetlands,a pilot-scale vertical flow constructed wetland was set up to treat synthetic wastewater under laboratory conditions.By measuring the effluent concentration of ammonia nitrogen(NH_(4)^(+)-N),total nitrogen(TN),total phosphorus(TP),chemical oxygen demand(COD),and the diversity,richness,and community structure of microorganisms of the upper and lower soil layers in the wetland,the nutrient removal effect of the constructed wetland and the changes in the microflora of the soil layer were studied.The results reveal that the correlation coefficients between the removal rates of TN and NH_(4)^(+)-N and the temperature are 0.463 and 0.692,respectively,indicating a significant positive correlation.From the warm to the cold season,both the diversity and richness of microorganisms in the lower soil layer of wetlands are inhibited under the double-pressure of Ag NPs and low temperature,and the abundances of the denitrogenation functional bacteria such as Candidatus nitrososphaera,Sulfuritalea,Anaeromyxobacter,Candidatus solibacter,Nitrospira,and Zoogloea are altered.Low temperature and Ag NPs exposure can thus affect the wastewater treatment performance of constructed wetlands,possibly because of the seasonal changes of the microflora. 展开更多
关键词 silver nanoparticles constructed wetland wastewater treatment low temperature microbial community structure water quality
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G9P[8]型轮状病毒HN-28灭活病毒在小鼠中的免疫原性和保护效力评价
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作者 寇桂英 火文 +6 位作者 程亚慧 唐悦 关文竹 王云瑾 陈汉泉 包红 李雄雄 《微生物学免疫学进展》 CAS 2024年第2期1-7,共7页
目的 将G9P[8]型轮状病毒HN-28灭活后与弗氏佐剂配伍免疫小鼠,评价其免疫原性和保护效力。方法 将冻融1次的HN-28病毒收获液离心去除细胞碎片,上清用50%蔗糖垫底进行超速离心,用MEM培养液重悬沉淀得到纯化的病毒,通过SDS-PAGE和Western ... 目的 将G9P[8]型轮状病毒HN-28灭活后与弗氏佐剂配伍免疫小鼠,评价其免疫原性和保护效力。方法 将冻融1次的HN-28病毒收获液离心去除细胞碎片,上清用50%蔗糖垫底进行超速离心,用MEM培养液重悬沉淀得到纯化的病毒,通过SDS-PAGE和Western blot分析纯化后的病毒;然后用甲醛灭活病毒,将灭活病毒在MA-104细胞上连续盲传代3次,通过观察细胞病变(cytopathic effect, CPE)和半数细胞感染病变法(CCID_(50))进行病毒灭活验证检测;将灭活病毒与弗氏佐剂按1∶1比例混合,免疫BALB/c小鼠,对照组用MEM与弗氏佐剂按1∶1比例混合后按相同方法和剂量免疫BALB/c小鼠。定期采血并用ELISA检测小鼠血清中抗轮状病毒IgG和IgA滴度;3剂免疫后用病毒微量中和试验测定每剂免疫后血清中和抗体并计算几何平均滴度(geometric average titer, GMT);3剂免疫后28 d,用HN-28活病毒灌胃攻毒,评价血清抗体对小鼠的保护效力。结果 SDS-PAGE和Western blot分析结果显示,纯化后的病毒纯度较高,在预期分子量处出现了对应的条带;HN-28灭活病毒在MA-104细胞连续传3代,显微镜下均未观察到CPE,CCID_(50)检测结果为阴性;免疫小鼠血清检测结果显示,HN-28灭活病毒在小鼠体内诱导产生的IgG抗体平均滴度为4.53 lg、IgA抗体平均滴度为2.54 lg、中和抗体平均滴度为2.86 lg,而对照组和免疫前血清中IgG、IgA均为阴性;与实验组小鼠相比,攻毒后1周,对照组小鼠体温明显升高,腹泻率增加,对照组小鼠粪便中轮状病毒的检出率高于实验组。结论 HN-28灭活病毒在BALB/c小鼠中具有良好的免疫原性和保护性。 展开更多
关键词 轮状病毒 HN-28毒株 免疫原性 攻毒试验 保护性 评价
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G1P[8]型轮状病毒HN15D2株在Vero细胞上适应及传代稳定性的研究
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作者 寇桂英 关文竹 +5 位作者 王云瑾 火文 王名强 包红 周旭 李雄雄 《微生物学免疫学进展》 CAS 2023年第4期12-17,共6页
目的 将G1P[8]型轮状病毒HN15D2株适应于Vero细胞,评价其在Vero细胞上的传代稳定性。方法 将从MA-104细胞上分离纯化的HN15D2毒株按照感染复数(multiplicity of infection, MOI)为0.01、0.05和0.10分别接种Vero细胞,通过显微镜观察细胞... 目的 将G1P[8]型轮状病毒HN15D2株适应于Vero细胞,评价其在Vero细胞上的传代稳定性。方法 将从MA-104细胞上分离纯化的HN15D2毒株按照感染复数(multiplicity of infection, MOI)为0.01、0.05和0.10分别接种Vero细胞,通过显微镜观察细胞病变(cytopathogenic effect, CPE),采用细胞培养半数感染量(50%cell culture infective dose,CCID_(50))检测病毒滴度并绘制病毒增殖曲线,确定HN15D2在Vero细胞上的最适MOI。在病毒传代过程中,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis, PAGE)检测病毒基因带型;通过全基因测序分析病毒在MA-104细胞和Vero细胞中基因序列的同源性;电镜观察HN15D2毒株病毒形态;将HN15D2毒株在Vero细胞上连续传15代后分析各代次病毒滴度及基因电泳带型变化。结果 HN15D2毒株感染Vero细胞后形成明显的细胞病变;当MOI为0.05时,获得的病毒收获液滴度最高,为5.75 lgCCID_(50)/mL,确定病毒接种的最适MOI为0.05;全基因测序结果显示,2种细胞培养获得的病毒11个基因节段同源性在99.7%~100.0%;电镜下可以观察到典型的轮状病毒颗粒;HN15D2毒株在Vero细胞上连续传15代,病毒基因带型未发生变化,滴度稳定在5.25~5.75 lg-CCID_(50)/mL。结论 轮状病毒HN15D2毒株成功适应于Vero细胞,在连续传代过程中具有良好的稳定性。 展开更多
关键词 轮状病毒 VERO细胞 病毒适应 病毒传代 稳定性
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人G1P[8]型轮状病毒HN15D2毒株的分离纯化及鉴定
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作者 寇桂英 王云瑾 +7 位作者 程亚慧 关文竹 火文 王名强 包红 陈汉泉 周旭 李雄雄 《国际生物制品学杂志》 CAS 2023年第2期76-81,共6页
目的对轮状病毒(rotavirus,RV)阳性临床粪便标本进行毒株分离、纯化及鉴定。方法将感染RV的腹泻患儿粪便标本在单层恒河猴肾细胞MA104上传代培养,分离毒株,通过噬斑法克隆纯化病毒,电子显微镜(电镜)观察病毒形态和大小;采用SDS-PAGE、... 目的对轮状病毒(rotavirus,RV)阳性临床粪便标本进行毒株分离、纯化及鉴定。方法将感染RV的腹泻患儿粪便标本在单层恒河猴肾细胞MA104上传代培养,分离毒株,通过噬斑法克隆纯化病毒,电子显微镜(电镜)观察病毒形态和大小;采用SDS-PAGE、免疫印迹法和间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay,IFA)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)、反转录PCR及全基因组测序对病毒进行鉴定。结果对大量临床标本进行传代筛选和噬斑纯化,得到1株RV野毒株。50%蔗糖超速离心纯化病毒在电镜下可见直径约75 nm的典型RV颗粒;SDS-PAGE和免疫印迹法结果显示在预期位置出现目的条带;IFA结果显示所分离病毒为RV;RNA-PAGE显示分离株电泳型为长型,电泳图谱中11个条带呈现4∶2∶3∶2排列;PCR扩增片段及全基因组测序结果表明分离毒株为G1P[8]型。结论成功分离出1株人G1P[8]型RV野毒株,并命名为HN15D2。 展开更多
关键词 轮状病毒 分离 纯化 鉴定
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2018年甘肃省10岁以下儿童流感病毒和呼吸道合胞病毒感染特征 被引量:11
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作者 于德山 傅生芳 +10 位作者 徐丛杉 马超 张慧 王婉 陈建华 唐悦 李保娣 赵忆宁 李红育 关文竹 王健 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2020年第2期155-159,共5页
目的为了解甘肃省2018年10岁以下儿童中门诊流感样(influenza-like illnes,ILI)病例中流感病毒(influenza virus,Flu)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的病原学特点及流行特征,为Flu、RSV疾病的诊断治疗及防控提供依... 目的为了解甘肃省2018年10岁以下儿童中门诊流感样(influenza-like illnes,ILI)病例中流感病毒(influenza virus,Flu)、呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的病原学特点及流行特征,为Flu、RSV疾病的诊断治疗及防控提供依据。方法选取甘肃省19家国家级流感监测哨点医院ILI病例咽拭子标本共8559份,用实时荧光PCR检测流感病毒,对其中的3436份,用RT-PCR法对RSV检测。结果Flu阳性934份,阳性率10.91%,其中甲型H1N1阳性431例、H3N2阳性70例、乙型428例、甲型H1N1和乙型混合5例;RSV阳性320份,阳性率9.31%。14个市州之间Flu、RSV检测阳性率差异存在统计学意义(χ^2=56.99,Р<0.01;χ^2=263.34,Р<0.01)。流感1月份为最高峰,阳性率为50.70%,乙型B/Yamagata系(占53.53%)和甲型H1N1(占39.93%)同时流行。RSV的流行高峰在2~4月,阳性率达13.98%,5岁以下儿童RSV阳性率10.11%,高于5岁及以上儿童RSV的阳性率6.94%.具有统计学意义(χ^2=7.67,Р<0.01)。结论10岁以下儿童ILI就诊病例中RSV和Flu是主要的病原,每年冬春季节存在流行高峰,建议加强RSV的监测。 展开更多
关键词 呼吸道合胞病毒 流感病毒 儿童 流行病学
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人3型副流感病毒感染小鼠模型的建立及免疫应答特点 被引量:1
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作者 关文竹 火文 +6 位作者 傅生芳 高晶晶 马超 李雄雄 王云瑾 董晖 白慕群 《国际生物制品学杂志》 CAS 2021年第3期139-145,共7页
目的建立人3型副流感病毒(human parainfluenza virus type 3,HPIV3)感染小鼠模型,并研究其免疫应答特点。方法用HPIV3兰州分离株HPIV3LZ1728C19毒株鼻腔接种BALB/c小鼠,每天检测体温和体质量。用ELISA检测血清HPIV3特异性IgG、IgA滴度... 目的建立人3型副流感病毒(human parainfluenza virus type 3,HPIV3)感染小鼠模型,并研究其免疫应答特点。方法用HPIV3兰州分离株HPIV3LZ1728C19毒株鼻腔接种BALB/c小鼠,每天检测体温和体质量。用ELISA检测血清HPIV3特异性IgG、IgA滴度,实时定量PCR检测鼻腔灌洗液和肺组织病毒滴度,流式细胞术检测外周血、肺、脾淋巴细胞中的HPIV3特异性IFN-γCD4^(+)和IFN-γCD8^(+)T细胞,酶联免疫斑点法检测分泌HPIV3特异性IgG/IgA的B淋巴细胞,肺组织切片观察病理变化。结果感染后第3天,小鼠鼻腔和肺的病毒负载量分别到达峰值104拷贝/ml鼻洗液和107拷贝/g组织,肺部发生炎症性病理变化。感染组早期体质量增加显著滞后于对照组(感染后第3天:t=4.64,P<0.05)。感染组血清中HPIV3特异性IgG(t=2.94,P<0.05)和IgA水平(t=18.66,P<0.05)显著增高,外周血、肺、脾均出现HPIV3特异性抗体分泌淋巴细胞。病毒感染诱导小鼠肺产生记忆性IFN-γCD8^(+)T和IFN-γCD4^(+)T细胞应答,脾和外周血产生IFN-γCD4^(+)T细胞应答。结论成功建立了HPIV3感染小鼠动物模型,感染小鼠产生了显著的肺黏膜体液和细胞免疫应答。 展开更多
关键词 人3型副流感病毒 动物模型 免疫应答
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Effects of Silver Nanoparticles on Soil Ammonia-Oxidizing Microorganisms Under Temperatures of 25 and 5℃
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作者 HUANG Juan CAO Chong +1 位作者 LI Runqing guan wenzhu 《Pedosphere》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期607-616,共10页
The excellent bactericidal performance of silver nanoparticles (Ag NPs) has led to their wide applications, resulting in increasing concerns about their potential environmental impacts. This study evaluated the infl... The excellent bactericidal performance of silver nanoparticles (Ag NPs) has led to their wide applications, resulting in increasing concerns about their potential environmental impacts. This study evaluated the influences of different concentrations of Ag NPs (0, 1, 10, and 100 μg g^-1 dry soil) on the ammonia-oxidizing microorganisms in soil at cultivation temperatures of 25 and 5 ℃ for 37 d. The results showed that 1μg g^-1 dry soil of Ag NPs had no acute effects on the ammonia-oxidizing microorganisms. However, 10 and 100μg g^-1 dry soil of Ag NPs levels were found to significantly inhibit the activities of soil nitrification, with a decrease of 69.89% and 94.55%, respectively, at 25 ℃ and 61.65% and 83.79%, respectively, at 5℃ compared to the control (0 μg g^-1 dry soil of Ag NPs). These levels of Ag NPs also obviously decreased soil urease activity from about 380.47 ± 0.07 (at 5℃) and 529.76 ± 13.44 (at 25℃) mg N g^-1 dry soil d^-1 to 61.70 ± 2.97 and 68.29 ± 8.22 mg N g^-1 dry soil d^-1, respectively, after 37 d of cultivation. Quantitative polymerase chain reaction showed the abundance of ammonia-oxidizing archaea and bacteria. For the same exposure time, the effects of Ag NPs on the activities of ammonia-oxidizing microorganisms and urease decreased with decreasing temperature. The threshold concentration of Ag NPs that induced negative effects on ammonia-oxidizing microorganisms was higher at 5 -C than at 25 -C. Therefore, the temperature has a major impact on the toxicity of Ag NPs to ammonia-oxidizing microorganisms and on the urease activity, with toxicity being reduced with decreasing temperature. 展开更多
关键词 ARCHAEA bacteria biological toxicity nitrification activity polymerase chain reaction urease activity
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