卷曲螺旋结构域蛋白2通过促进线粒体自噬抑制帕金森病SH-SY5Y细胞凋亡

背景:卷曲螺旋结构域蛋白2(coiled-coil-helix-coiled-coil-helix domain-containing 2,CHCHD2)能否调控PINK1/Parkin介导的线粒体自噬在帕金森病中发挥神经保护作用尚未可知。目的:探讨CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中对PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬发挥的作用及机制。方法:利用重组质粒转染技术过表达或敲低CHCHD2,用6-羟基多巴胺构建SH-SY5Y细胞帕金森病模型后分对照组、模型组、过表达阴性对照+6-羟基多巴胺组、敲低阴性对照+6-羟基多巴胺组、过表达CHCHD2+6-羟基多巴胺组和敲低CHCHD2+6-羟基多巴胺组。Western blot及RT-qPCR检测CHCHD2的表达;Western blot检测LC3Ⅰ/Ⅱ、p62、MFN1、COXⅣ、DRP1、PINK1、Parkin、TIM23、Bax、Bcl-2及cleavedcaspase3蛋白表达;CCK-8、JC-1和活性氧试剂盒检测细胞活性、线粒体膜电位和活性氧水平,单丹磺酰尸胺染色观察细胞自噬情况,透射电镜观察自噬溶酶体。结果与结论:①与对照组相比,模型组细胞活性、线粒体膜电位及CHCHD2、PINK1、Parkin蛋白表达降低,活性氧水平、凋亡水平及LC3Ⅰ/Ⅱ、p62蛋白表达升高(P<0.05),并观察到自噬溶酶体的存在;②与模型组相比,过表达CHCHD2能降低细胞活性氧水平,升高线粒体膜电位及PINK1、Parkin和MFN1蛋白表达水平,并观察到线粒体自噬溶酶体增多,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用,并伴有COXⅣ、TIM23和p-DRP1蛋白表达的升高(P<0.05);③与模型组相比,过表达CHCHD2能减少细胞凋亡,上调Bcl-2并下调Bax及cleavedcaspase3蛋白的表达,而敲低CHCHD2后有与上述相反的作用(P<0.05);④结果提示,CHCHD2在6-羟基多巴胺诱导的帕金森病细胞模型中可以通过促进PINK1/Parkin介导的线粒体自噬改善线粒体功能从而减轻细胞凋亡发挥神经保护作用。

面向Web的CAD数据在线解析方法研究

CAD数据在自然资源和规划领域的应用范围较广,在Web端的应用则受限于CAD数据格式的转换解析困难。针对在线解析CAD数据的难题,文章重点以CAD原生的DWG格式为例分析了3种解析思路,阐述各种解析方式的优缺点,选取了具有可操作性的服务器端解析方式,研究了服务器端解析CAD数据的关键技术,具体实现了CAD数据的在线解析。通过实验验证了FME Server在线解析CAD数据的效率更高,本研究为空间数据的动态解析和共享提供了参考经验。

“互联网+”消费升级背景下江苏省生鲜农产品供应链模式发展研究

“互联网+”背景下叠加消费升级及疫情,消费者对生鲜农产品的需求体现出优质、便利、高效等新消费特点,并深刻影响着生鲜农产品供应链结构及模式的发展。本文梳理了“互联网+”背景下生鲜农产品供应链模式类型,一方面以农贸批发市场、超市等为核心的传统生鲜产品供应链不断触网焕新,线上、线下融合发展,另一方面涌现出以平台电商、县域电商、休闲旅游+、直播带货、短视频+电商、社区拼购团购等生鲜农产品供应链新业态新模式。

洛南手斧上的淀粉粒与古人类使用石器的策略

本项研究通过对陕西洛南张豁口遗址发现的淀粉粒进行分析,聚焦旧石器时代早期人类如何利用植物性食物资源。张豁口遗址出土的阿舍利工业产品上保存了微量的淀粉粒,尽管数量较低,但却为研究早期人类利用植物性资源提供了宝贵的证据,为解读人类早期历史提供了重要线索。此外,本研究深入探讨了早期人类对根茎类植物挖掘、采集和食用行为的可能性,指出根茎类植物不仅为早期人类提供了重要的营养价值,在人类饮食结构中占据核心地位,而且对于理解旧石器时代早期石制品使用方式、环境适应策略、古人类认知水平的演变等问题也具有重要意义。

头穴丛刺联合取食训练对2型糖尿病认知障碍大鼠海马神经元损伤的治疗作用

目的观察头穴丛刺联合取食训练对2型糖尿病(T2DM)认知障碍大鼠海马神经元损伤的治疗作用。方法健康雄性SD大鼠72只,随机分为对照组、T2DM组、模型组、头穴丛刺组、取食训练组、联合组,每组12只。对照组常规饲养,T2DM组制备T2DM模型,模型组、头穴丛刺组、取食训练组和联合组制作T2DM认知障碍模型。头穴丛刺组予头穴丛刺,取食训练组进行取食训练,联合组在头穴丛刺长留针期间进行取食训练;对照组、T2DM组、模型组不予任何干预。分别于造模14、28 d后,采用Morris水迷宫评价大鼠学习和记忆能力;处死大鼠取海马组织,透射电镜下观察海马组织超微结构,采用ELISA法检测超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),采用Western blotting法检测脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白。结果与T2DM组相比,模型组逃避潜伏期延长,穿越平台次数和目标象限停留时间缩短,海马神经元髓鞘不完整,线粒体呈空泡化倾向、嵴溶解消失,海马组织SOD活性、BDNF蛋白表达降低,MDA含量增加(P均<0.05)。与模型组相比,头穴丛刺组、取食训练组、联合组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数和目标象限停留时间延长,海马神经元超微结构改变减轻,海马组织SOD活性、BDNF蛋白表达增加,MDA含量减少(P均<0.05)。联合组各项优于头穴丛刺组和取食训练组,且造模28 d指标优于造模14 d(P均<0.05)。结论头穴丛刺联合取食训练治疗能够减轻氧化应激损伤,修复海马神经元超微结构,改善T2DM认知障碍大鼠学习记忆功能,且治疗时间越长,效果越显著。

二乙二醇丁醚好氧污泥微生物群落结构及降解途径分析

采用好氧生物法对二乙二醇丁醚(DGBE)进行降解,过程中逐步提升进水DGBE浓度考察其降解效果。分别在驯化前、驯化稳定期和高浓度驯化期获取活性污泥样品进行高通量测序分析,并基于降解中间产物推测出DGBE可能存在的降解途径。实验结果表明:DGBE质量浓度低于832.85 mg/L时,DGBE和COD的去除率分别可达到99%和93%以上,继续提升进水浓度则去除率出现下降趋势。DGBE驯化后活性污泥微生物的丰富度和多样性大幅降低,驯化稳定期的优势菌门为Proteobacteria(78.59%),优势菌属为Cupriavidus(42.44%)和Rhodanobacter(20.02%),高浓度驯化期Actinobacteriota(51.15%)超越Proteobacteria(43.41%)成为丰度最高的菌门,Nakamurella(49.81%)为主要优势菌属。检测到DGBE的主要中间产物包括乙二醇丁醚、丁醛和乙烯基正丁醚,分析其可能的降解途径为ω-β-氧化降解途径和次末端氧化导致的醚键断裂降解途径。

短链化农产品供应链及优化发展策略研究

数字化及网络科技的发展及消费需求变化对农产品供应链的安全性、透明度、响应速度等提出了新的要求,短链化农产品供应链发展为农产品供应链优化提供了新思路。本文通过梳理国内外农产品供应链短链化研究进展,总结短链化农产品供应链的特点、优势及发展趋势,进而提出数字化重塑短链化农产品供应链,构建以消费者为中心的拉式供应链模式、健全全程可溯的农产品质量安全管理体系、建设高效的冷链农产品物流配送体系等农产品供应链短链化优化发展策略。

“互联网+”背景下江苏省农产品供应链模式优化创新研究

互联网+背景下消费升级深刻影响了农产品供应链结构及模式发展,江苏省农产品在批发市场、超市、龙头企业等为主导的传统供应链模式基础上,涌现出以平台电商、县域电商、直播带货等农产品供应链新业态新模式,文章分析了江苏省农产品供应链运行模式存在的问题,进而提出今后农产品供应链创新发展路径:加快推进传统农产品供应链数字化升级建设,促进线上线下渠道融合发展;加速推广互联网+平台电商供应链模式,促进产消直连;加快培育县域电商平台+特色农产品供应链模式等,让小农户直享价值链。

强化流道内R134a沸腾换热数值模拟

为了提高动车组CRH3运行中牵引变流器冷却基板流体沸腾换热冷却效果,设计了一种新型四面体肋板结构。采用CFD数值模拟计算的方法,建立了三维单流道模型,对不同肋板高度和入口速度与沸腾换热之间的规律进行分析。结果表明:随着肋板高度的增大,换热系数逐渐升高;肋板的扰动作用提升了流动速度,强化了流动涡旋,可提高对流换热性能;随着入口速度的增大,热源壁面温度方差降低,散热均匀性提高,但流动能耗也随之提高。

经颅重复针刺对血管性痴呆模型大鼠认知功能及海马突触超微结构的影响

目的 观察经颅重复针刺对血管性痴呆(vascular dementia, VaD)大鼠认知功能及海马CA1区突触素(synaptophysin, SYN)、微管相关蛋白-2(microtubule associated protein-2, MAP-2)表达的影响。方法 将56只SD大鼠随机分为空白组(14只)和造模组(42只)。造模组建立VaD模型,将造模成功大鼠随机分为模型组(14只)、常规针刺组(14只)和经颅重复针刺刺激(repetitive transcranial acupuncture stimulation, rTAS)组(14只)。造模成功后第2天,rTAS组采用经颅重复针刺;常规针刺组仅给予常规针刺手法;模型组与空白组给予以同等条件抓取及固定,不予针刺。采用水迷宫评价大鼠学习记忆能力,采用旷场实验评价大鼠探索行为和自主活动能力,免疫印迹法检测海马CA1区SYP、MAP-2蛋白表达水平,透射电镜观察海马组织中突触超微结构。结果与空白组比较,模型组逃避潜伏时间明显增加(P<0.05),穿越平台次数明显减少(P<0.05);与模型组比较,常规针刺组与rTAS组逃避潜伏时间明显减少(P<0.05),穿越平台次数明显增加(P<0.05);与常规针刺组比较,rTAS组逃避潜伏时间与穿越平台次数改变不明显(P>0.05)。与空白组比较,模型组穿越格子数与后肢站立数明显减少(P<0.05);与模型组比较,常规针刺组与rTAS组穿越格子数与后肢站立数明显增加(P<0.05);与常规针刺组比较,rTAS组穿越格子数与后肢站立数明显增加(P<0.05)。与空白组比较,模型组SYP、MAP-2表达水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,常规针刺组与rTAS组SYP、MAP-2表达水平显著增高(P<0.05);与常规针刺组比较,rTAS组SYP、MAP-2表达水平显著增高(P<0.05)。电镜下,模型组突触结构欠清晰,突触间隙模糊不清,突触小泡较少,突触前致密物质减少,胞浆内细胞器稀疏,线粒体变形肿大明显;而rTAS组突触结构较完整,突触间隙、突触前后膜分界清晰,突触前膜内囊泡较多,突触后膜均匀增厚,周边线粒体丰富、结构完整。结论 经颅重复针刺较常规针刺可能通过调控SYP、MAP-2表达,更有效促进突触再生,改善突触可塑性,修复受损神经元,从而改善认知功能。

芒针透刺联合针康法治疗中风后上肢痉挛性瘫痪的疗效及对血清GABA的影响

目的:观察芒针透刺联合针康法治疗中风后上肢痉挛性瘫痪的疗效。方法:76例中风后上肢痉挛性瘫痪患者随机分为治疗组(38例,脱落1例)和对照组(38例,脱落1例)。两组患者均给予常规药物治疗,对照组给予针康法治疗,治疗组采用针康法联合芒针透刺治疗,1次/d,疗程均为4周。观察并比较两组患者治疗前后改良Ashworth量表(MAS)评分、上肢简式Fugl-Meyer评定量表(FMA)评分、改良Barthel指数(MBI)评分与脑卒中专门化生活质量量表(SS-QOL)评分变化情况,检测两组治疗前后血清中γ-氨基丁酸(GABA)的含量,并评估临床疗效。结果:治疗前两组各项评分及GABA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组MAS评分较治疗前显著降低;FMA评分、MBI评分、SS-QOL评分及GABA含量较治疗前明显升高;且治疗组对各项评分及血清学指标的改善程度明显优于对照组(P<0.05);观察组临床治疗愈显率为75.68%(28/37)、总有效率为97.30%(36/37),明显优于对照组愈显率45.95%(17/37)及总有效率86.49%(32/37),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:芒针透刺联合针康法能有效降低中风后上肢痉挛性瘫痪患者肌张力,改善上肢运动功能,提升日常生活活动能力及生活质量,有效调节神经递质水平,临床疗效显著。

泥河湾盆地下马碑遗址2013年发掘简报

下马碑遗址位于广义泥河湾盆地南部的蔚县盆地中东部,是坐落于壶流河二级阶地上的一处旷野遗址。2013年,河北省文物考古研究院对该遗址进行了考古发掘,揭露出丰富的遗物和遗迹现象;2018年起,国内外多家单位共同完成了遗址地层年代、埋藏过程、古环境和出土文化遗存的系统性多学科研究工作。该遗址发掘揭露面积12 m^(2),地层剖面深度约为290 cm,自上而下分为7个地层单位,其中第6层为原地埋藏的主文化层,基于光释光与^(14)C测年并经贝叶斯模型计算为距今4.1~3.9万年。本文对下马碑第6层出土的各类遗物与遗迹进行系统报道,主要包括382件石制品、445件动物化石碎片、1件骨器和1套赭石颜料加工遗存,以及1处火塘。该遗址的发现与研究再现了距今4万年前东亚早期现代人加工、使用赭石颜料和复合工具的生活图景,更新了国际学术界对东亚早期现代人行为适应的认识。

超声评分系统联合MRI预测穿透性胎盘植入的临床价值

目的:探讨超声评分系统联合MRI鉴别诊断穿透性与非穿透性胎盘植入的临床价值,提高对穿透性胎盘植入的预测。方法:回顾性分析2019年1月~2022年1月海南医学院第一附属医院收治的76例胎盘植入患者的临床及影像资料,所有患者产前均行超声评分及MRI检查,依据产后病理学及临床诊断将其分为穿透性组(n=8)与非穿透性组(n=68),分析两组影像图像特征,并比较两组单独的超声评分、MRI征象与超声评分联合MRI检查诊断穿透性胎盘植入的灵敏性、特异性、准确率。结果:超声评分总值≥10分时,穿透性组的发生率75.00%(6/8)高于非穿透性组[2.94%(2/68)];超声评分总值3~9分时,非穿透性组的发生率[73.53%(50/68)]高于穿透性组[25.00%(2/8)]。穿透性组子宫肌层信号中断[87.50%(7/8)]高于非穿透性组[10.29%(7/68)],胎盘侵犯宫旁组织[87.50%(7/8)]高于非穿透性组[0.00%(0/68)],差异有统计学意义(P<0.05)。超声评分联合MRI诊断穿透性胎盘植入的灵敏度、特异度、准确率性均高于单独的超声、MRI检查。结论:超声评分≥9分且MRI出现子宫肌层信号中断、胎盘侵犯宫旁组织等征象可预测胎盘穿透性植入,对穿透性胎盘植入的诊断具有较高的灵敏度、特异度、准确率,为临床鉴别诊断穿透性与非穿透性胎盘植入提供较高参考价值。

负载柚皮素的表没食子儿茶素没食子酸酯共价修饰的玉米醇溶蛋白-透明质酸复合纳米颗粒的构建与表征

柚皮素具有良好的生物活性和治疗作用,但同时也具有水溶性差、生物利用率低等缺点。因此,建立简单、高效的递送方式对于柚皮素的广泛应用至关重要。该研究通过反溶剂沉淀法制备了负载柚皮素的表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)共价修饰的玉米醇溶蛋白-透明质酸(hyaluronic acid,HA)复合纳米颗粒。与没食子酸和单宁酸共价修饰相比,EGCG修饰后玉米醇溶蛋白具有低游离氨基含量和高多酚当量,修饰效果良好。EGCG共价修饰的玉米醇溶蛋白和HA通过静电作用、氢键和疏水相互作用形成复合纳米颗粒,其粒径在180~240 nm,且当两者质量比为10∶1时,粒径最小(183.62 nm)。由于EGCG的共价修饰,复合纳米颗粒对柚皮素的包埋率和负载能力均明显提高,且在柚皮素与EGCG共价修饰的玉米醇溶蛋白质量比为1∶10或以下时,包埋率>99%。结构表征显示,绝大部分柚皮素被包埋在复合纳米颗粒内部,且与EGCG和玉米醇溶蛋白之间存在氢键和疏水相互作用。抗氧化性测定表明,负载柚皮素的复合纳米颗粒的抗氧化能力显著高于游离柚皮素。因此,采用EGCG修饰的玉米醇溶蛋白-HA体系负载柚皮素对柚皮素的抗氧化能力具有促进作用。

尼古丁对鱼藤酮诱导帕金森病小鼠模型的神经保护作用机制

背景:研究发现尼古丁可以激活脑部的多巴胺系统,减缓帕金森病的发展,但具体机制尚不明确,目前缺乏对帕金森病动物模型神经保护作用的机制研究。目的:探讨尼古丁对鱼藤酮诱导帕金森病小鼠的神经保护作用机制。方法:将28只C57BL/6小鼠随机分为溶剂组、鱼藤酮组、自噬激动剂+鱼藤酮组和尼古丁+鱼藤酮组,每组7只,利用鱼藤酮诱导C57BL/6小鼠多巴胺能神经损害,在造模前给予自噬激动剂(雷帕霉素)或尼古丁,干预结束后进行旷场实验观察小鼠空间探索功能;采用Western blot和Q-PCR检测黑质中α-突触核蛋白的表达,自噬相关因子Beclin-1、P62的表达以及凋亡相关因子Bax、Bcl-2和Cleaved-caspase-3的表达;透射电镜观察黑质中线粒体、自噬小体和脂褐素沉积情况;尼氏染色观察神经元的存活情况;免疫荧光和免疫组化染色观察黑质中酪氨酸羟化酶的表达。结果与结论:(1)旷场实验显示,与溶剂组相比,鱼藤酮组小鼠表现出运动距离、平均速度和运动时间均减少;与鱼藤酮组相比,尼古丁+鱼藤酮组和自噬激动剂+鱼藤酮组小鼠运动距离、平均速度和运动时间均增加(P<0.05)。(2)免疫荧光和免疫组化结果显示,与溶剂组相比,鱼藤酮组酪氨酸羟化酶平均荧光强度和平均吸光度值减小;与鱼藤酮组相比,尼古丁+鱼藤酮组和自噬激动剂+鱼藤酮组酪氨酸羟化酶平均荧光强度和平均吸光度值增加。(3)Western blot和Q-PCR结果显示,与溶剂组相比,鱼藤酮组α-突触核蛋白、P62表达升高,Beclin-1表达减少(P<0.05);与鱼藤酮组相比,尼古丁+鱼藤酮组和自噬激动剂+鱼藤酮组α-突触核蛋白、P62表达减少,Beclin-1表达增多(P<0.05)。与溶剂组相比,鱼藤酮组Bax、Cleaved-caspase-3表达增多,Bcl-2表达减少(P<0.05);与鱼藤酮组相比,尼古丁+鱼藤酮组和自噬激动剂+鱼藤酮组Bax、Cleaved-caspase-3表达减少,Bcl-2表达增多(P<0.05)。结果提示,尼古丁可能是通过改善自噬功能障碍和减少细胞凋亡,对鱼藤酮诱导的帕金森病小鼠模型产生多巴胺能神经保护作用。

蓝靛果酵素粉体制备及加工特性的研究

为探究蓝靛果酵素粉的发酵工艺及其加工特性,选取蓝靛果为原料,通过单因素试验研究酵母菌添加量、发酵温度、醋酸菌添加量、发酵时间对总酚含量、总黄酮含量、花色苷含量、SOD活力的影响,结合正交试验确定最佳发酵条件。通过试验探究不同贮藏温度4,25,37℃对粉体的堆密度、滑角、休止角等加工特性的影响。结果表明,酵母菌添加量1.5%、发酵温度22℃、无氧发酵10 d,再接种醋酸菌1.5%、发酵温度34℃、有氧发酵5 d,此时感官评分最高,为93分,在此条件下总酚含量为7.63 mg/L,总黄酮含量为38.63 mg/L,花色苷含量为6.56 mg/L,SOD活力为7539 U/mL,将蓝靛果酵素经冷冻干燥避光磨粉,在4,25,37℃下测定粉体的加工特性,结果表明随着温度的升高,堆密度、滑角、休止角的变化逐渐增大,在4℃时蓝靛果酵素粉的加工特性指标最高。该试验为蓝靛果的深加工及应用提供了理论参考。

杂粮奶冻研制及品质分析

采用单因素及正交试验对奶冻的配方进行优化,以感官评分的结果确定杂粮奶冻的最佳配方,根据理化性质测定和营养、功能成分分析评价奶冻品质。结果表明,当复配胶粉添加量为2.0%(卡拉胶、魔芋胶、刺槐豆胶比例2:2:1)、生牛乳添加量为35%、复配杂粮浆添加量为35%(玉米、薏米、燕麦质量比例为2:1:1)、白砂糖添加量为8%、柠檬酸添加量为0.2%,制作的杂粮奶冻营养丰富,口感顺滑,富含独特的杂粮香气和奶香。

工业用地更新调查及应用研究——以常州市为例

文章在往年已建成的工业企业用地调查数据库的基础上,确立工业企业用地更新调查的内容,阐述了更新调查的方法,针对更新调查存在的难点问题提出了解决方案和质量控制方法,建成了工业企业用地更新调查数据库,完成工业用地的年度更新。以常州市工业企业用地更新调查为例,基于更新调查的成果分析研究了常州市工业企业用地集约利用情况,为低效用地再开发、土地资源的优化配置提供科学依据。

基于根际互惠功能体的微生物肥料研发思考

微生物肥料是指以有益菌的生命活动为核心,使农作物获得特定的有益效应的一类肥料制品。施用微生物肥料能够增加养分吸收效率、提高植物耐逆能力、抑制土传病害、消减土壤污染因子等,从而提升土壤健康和作物产量。在实际生产应用中,微生物肥料存在有益菌在土壤中定殖能力差,功能难发挥和效果不稳定等共性问题。本文以构建植物-有益菌互惠关系为核心出发点,从有益菌筛选、营养载体配伍、合成菌群构建、高密度菌剂制备以及微生物肥料应用策略等角度,概述国内外相关领域的研究进展,提出微生物肥料创新开发的一些思考,包括:1)高通量定向筛选与植物匹配且互惠互利的有益菌,并建立精准挖掘技术;2)研究与有益菌匹配的根际“益生元”,特异性提升有益菌定殖和功能发挥,并构建可智能匹配有益菌与根际“益生元”的高通量筛选技术及体系;3)构建稳定的合成菌群或挖掘具有多功能的单一有益菌,消减土壤复合障碍;4)利用农业有机废弃物发酵,制备高密度有益菌剂,建立有益菌-有机废弃物生物高值发酵技术体系;5)通过土体土壤中施用有机肥等土壤整体改良措施,以及根际精准施用与作物系统匹配的“合生元”(有益菌与“益生元”的复合)微生物肥料产品,形成土体提质和根际增效的综合策略。未来总的目标,是通过多学科交叉和多技术融合,开发不同植物-土壤系统中可维持效果稳定性的高质量微生物肥料。

新时代“第二个结合”的学理意蕴探析

要把握好马克思主义基本原理同中华优秀传统文化相结合的深层逻辑,我们须从二者文化契合性的角度上加以理解,更应该立足于新时代中国特色社会主义伟大实践的现实场域,从二者何以能结合、为何要结合以及结合的效应三个层面深入探讨其价值意蕴。具体表现为:中华优秀传统文化内蕴的价值理念与马克思主义理论所包含的价值主张具有内在一致性,在天然属性上高度契合;二者的结合突显了中国共产党作为马克思主义政党的使命与担当,不仅符合自身的实践要求,也是理论创新的必然选择;二者的结合不仅顺应了社会主义中国的发展大势,还为化解全球发展难题提供了方法论遵循。