基于免疫信息学技术的雏沙门菌多表位疫苗构建

【目的】设计针对雏沙门菌(Salmonella Pullorum)IpaJ蛋白的多表位疫苗(multi-epitope vaccine, MEV),为净化鸡白痢提供新的疫苗。【方法】选用IEDB预测雏沙门菌IpaJ蛋白的T淋巴细胞主要组织相容性复合体Ⅰ(MHCⅠ)类分子结合表位;用NetMHCIIpan 4.0 Server预测T淋巴细胞MHCⅡ类分子结合表位;用IEDB预测B淋巴细胞表位。将各个服务器预测结果筛选出的表位经过VaxiJen v 2.0评估抗原性后,将合格的表位通过柔性linker串联成多表位疫苗。对构建的多表位疫苗进行抗原性、理化性质、N-糖基化位点、二级结构和三级结构预测。使用分子对接评估多表位疫苗与免疫受体的结合能力,使用免疫模拟评估多表位疫苗的免疫效果,最后优化密码子便于克隆表达。【结果】经筛选后,选择4个MHCⅠ、4个MHCⅡ和8个B淋巴细胞表位优势表位构建的多表位疫苗MEV-IpaJ。多表位疫苗MEV-IpaJ的分子质量为28.18 ku,为稳定亲水蛋白,具有良好的抗原性,存在4个潜在的N-糖基化位点,α-螺旋、延长链、β-转角和无规则卷曲分别占20.38%、19.23%、8.08%和52.31%。三级结构Ramachandran作图显示,优势区域中含有残基数占89.9%%,进行细化后优势区域的残基数增加到94.0%,三级结构突出表位作图也证明MEV-IpaJ具有良好的免疫原性。分子对接结果显示,MEV-IpaJ与Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)和TLR4蛋白分子可对接。免疫模拟结果显示,MEV-IpaJ具有较好的免疫应答,能提高部分细胞因子的表达,经密码子优化确保设计的MEV-IpaJ可在大肠杆菌K12表达系统中高效、稳定地表达。【结论】本研究构建的多表位疫苗MEV-IpaJ可有效表达并可能诱导强烈的T细胞和B细胞免疫应答。本研究为雏沙门菌多表位疫苗的设计提供了一种新的方法,为雏沙门菌多表位疫苗的研发提供了理论依据及数据支持。

栀子四黄散抗猪繁殖与呼吸综合征的研究

为探索栀子四黄散对猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)的治疗效果,本研究将45头组随机分为对照组、病毒组及中药高、中、低剂量组5组,每味中药400目超微粉碎后分别添加饲喂接种猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的试验猪,连续饲喂14 d,每日观察临床症状,7、14和21 d时随机采集5组血清样品进行细胞因子检测,并进行病理剖检和采集肺脏样品进行病理组织切片观察。结果显示,添加中药7 d后临床症状均减轻,中剂量和高剂量组第14天时体温恢复正常,呼吸困难症状消失,食欲恢复,中药治疗组肺脏未见肉样变,肺脏表面有出血点或出血斑。中剂量组肺泡间隔增厚,轻度淤血,肺实质轻度炎性细胞浸润。病毒组猪血清中IgG和γ-干扰素(IFN-γ)含量逐渐降低,白介素-10(IL-10)含量逐渐上升。添加中药的3组血清中IgG含量均高于病毒组,并且IgG含量均随时间延长逐渐上升,中剂量组血清中IgG含量均极显著高于对照组和病毒组(P<0.01);添加中药的3组IFN-γ含量逐渐上升,14和21 d时中剂量组血清中IFN-γ含量均极显著高于对照组和病毒组(P<0.01);中剂量组血清中IL-10含量逐渐降低,14和21 d时与病毒组差异极显著(P<0.01),与对照组差异不显著(P>0.05)。综上,栀子四黄散可有效改善试验猪临床症状、病理变化和细胞因子的分泌,中剂量组效果最好。本研究为中药防治PRRS提供了试验依据。

日粮中添加复方中草药对巴马香公猪精液品质及免疫功能的影响

试验选用巴马香公猪为研究对象,旨在研究复方中草药在提高公猪精液品质和免疫功能方面的作用。将12只巴马香公猪随机分为4组,每组3只,分别为对照组和3个给药组(低、中、高剂量给药组)。对照组仅饲喂基础日粮,低、中、高剂量组在基础日粮中分别添加1%、2%和3%的复方中草药。分别在给药后第0、7、14和21天采集精液,检测精液量、精子活力和精子畸形率;空腹前腔静脉采血,测定IgA、IgG和IgM含量。结果表明,日粮中添加复方中草药可提高巴马香公猪精液品质和免疫功能。其中,以添加中剂量复方中草药效果最好。

银芩麻杏石甘汤与桔芪麻杏石甘汤抗山羊支原体肺炎研究

为了研究方剂对羊支原体肺炎的防治效果,将感染山羊支原体前后的羊采集静脉血,分离血清,用ELISA方法检测IL-10、IFN-γ和TNF-α含量。同时,每日观察临床症状,对迫杀的试验羊进行病理剖检和组织切片观察。结果显示:正常对照组未见异常,阳性对照组症状明显,死亡4只,方剂治疗组均比阳性对照组临床症状有明显的改善,银芩麻杏石甘汤中剂量组全部治愈。7天时阴性对照组与其他7组之间IL-10、IFN-γ和TNF-α差异均极显著(P<0.01);14天时阴性对照组与其他7组差异极显著(P<0.01),阳性对照组与6组中药组差异极显著(P<0.01),银芩中剂量组与其他5组中药组差异显著(P<0.05);21天时IL-10、IFN-γ阴性对照组与其他7组差异极显著(P<0.01),阳性对照组与6组中药组差异极显著(P<0.01),银芩中剂量组与其他5组中药组差异极显著(P<0.01),银芩中剂量组与阴性对照组差异不显著(P>0.05)。21天时TNF-α阴性对照组与其他7组差异极显著(P<0.01),阳性对照组与6组中药组差异极显著(P<0.01),桔芪高剂量组与其他5组中药组差异极显著(P<0.01),桔芪高剂量组与阴性对照组差异不显著(P>0.05)。由结果得到2个方剂均对治疗羊支原体肺炎有一定的效果,银芩麻杏石甘汤中剂量组对羊支原体肺炎的治疗效果最佳。

犬继发性腹壁瘘管的诊治初探

患犬经病史调查、临床检查、血常规检查及病变组织观察确诊为继发性腹壁瘘管。通过手术将瘘管及周边瘢痕组织整体切除,并结合消炎治疗1周,该犬完全康复,至今未再复发。结果表明,病理管道及周边增生组织全切除术能有效根治瘘管。

Investigation on Infection of PCV2 in Taizhou Areas of Jiangsu Province

In order to investigate infection and harm extent of swine porcine circovims 2 （PCV2） in pigs in Taizhou of Jiangsu, and to control the prevalence of PCV2 in Taizhou areas. A total of 116 PCV2 clinical samples came from six different cities （districts） from 2011 to 2012 were tested in etiologic by the method of PCR. The test restdts showed that the total positive rate of PCV2 clinical samples was 53.45%, and PCV2 existed in all the six places. The positive rate of the scale pig farms was 48.33%, the positive rate of free-range farmers was 58.93%. Thus, PCV2 was prevalent in pigs in Taizhou areas, and which should be paid more attention to.

不同润滑状态下游离水对点接触油润滑润滑性能的影响

为研究水污染对润滑油性能的影响,通过点接触光干涉试验得到充分供油、轻微乏油及严重乏油3种润滑状态下的油膜光干涉图和膜厚形状曲线,研究游离水对接触区油润滑润滑性能的影响。结果表明:在充分供油条件下,游离水对点接触润滑油膜厚度的影响不大,主要影响中心膜厚;在乏油润滑状态下,游离水对点接触润滑油膜厚度有增益效果;但3种润滑状态下,游离水都会使气穴区边界变得模糊不清,提高了油润滑的弹流润滑性能。

高职高水平骨干专业动物防疫与检疫专业建设研究

以产教融合为主线,以信息化建设为手段,以高水平师资队伍建设为重点,以高端技术技能型人才培养为中心,进一步深化专业内涵建设,坚持立德树人。经过3年的建设,打造一支专兼结合的省级以上优秀教学团队,建成一批优质微课程资源,建设一个融学生实习实训、教师科研、第三方检测、技能竞赛于一体的省级以上社会服务平台,把动物防疫与检疫专业建成人才培养特色鲜明,在全国同层次同类专业中具有领先优势,在世界同领域具有一定影响力和竞争力的高水平骨干专业。