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基于脱细胞方法制备3D植物肝组织工程支架及表征
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作者 胡婧婧 何松霖 +7 位作者 张大旭 赵烁 史潇楠 李伟龙 叶淑君 王静怡 郭全义 阎丽 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第29期4645-4651,共7页
背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜... 背景:组织工程为肝衰竭这一临床困境带来了新的希望,通过简单的制备方法制备植物脱细胞纤维支架对肝脏组织工程具有重要意义。目的:采用新鲜苹果切片和十二烷基硫酸钠溶液制备苹果组织脱细胞支架材料,并评估其生物相容性。方法:将新鲜苹果分别采用磷酸盐缓冲液和十二烷基硫酸钠溶液进行脱细胞处理,然后用磷酸盐缓冲液进行脱毒获得处理后的苹果组织和苹果脱细胞支架材料,然后在扫描电镜下观察苹果材料的脱细胞效果。实验从BALB/C小鼠腹股沟脂肪中提取脂肪干细胞,并且通过流式细胞术鉴定其干细胞相关标记物(CD45,CD34,CD73,CD90,CD105)的表达。然后分为无支架对照组和有支架组,在两组中接种等量脂肪干细胞,通过CCK-8、苏木精-伊红染色、鬼笔环肽骨架染色评价该脱细胞支架与脂肪干细胞的生物相容性,在光学显微镜、扫描电镜下观察细胞在支架上的黏附及生长情况。然后将支架分为非诱导组和成肝诱导组,将脂肪干细胞种植在脱细胞苹果支架上,分别在普通培养基和成肝诱导培养基中培养14 d后进行对比,通过肝细胞标记物(白蛋白、细胞角蛋白18、细胞色素P450家族1亚家族1)进行免疫荧光染色,通过酶联免疫吸附实验来检测白蛋白、甲胎蛋白的分泌情况,并通过扫描电镜观察支架上诱导培养的细胞形态,验证该脱细胞支架材料上肝细胞相关蛋白的表达。最后,实验通过将钴60照射消毒后的苹果脱细胞支架移植于小鼠肝脏表面,28 d后通过大体观及苏木精-伊红染色观察该支架的降解情况。结果与结论:①扫描电镜结果显示,脱细胞后的苹果支架材料具有约100μm大小的孔隙结构,不存在残余细胞。②通过流式细胞学鉴定,提取培养的细胞为脂肪间充质干细胞。③CCK-8结果表明,所制备的苹果组织脱细胞支架材料无细胞毒性;苏木精-伊红染色和鬼笔环肽骨架染色观察到脂肪间充质干细胞能够在苹果组织脱细胞支架上黏附和聚集生长。④免疫荧光染色、酶联免疫吸附实验结果显示,培养在苹果组织脱细胞支架上的脂肪间充质干细胞高表达白蛋白、甲胎蛋白、细胞角蛋白18及细胞色素P450家族1亚家族1肝脏相关蛋白,说明被诱导分化为了具有肝细胞功能的肝细胞样细胞。⑤干预7 d时植入的苹果脱细胞支架与肝脏融合,部分支架已经降解,干预28 d时苹果脱细胞支架已完全降解,被新生组织替代。⑥结果表明,来源于苹果组织制备的脱细胞支架材料具有良好的生物相容性,可促进脂肪间充质干细胞的增殖、黏附及成肝细胞分化。 展开更多
关键词 植物组织 支架 脱细胞 肝衰竭 脂肪间充质干细胞 组织工程 肝细胞样细胞
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逆行螺钉置入固定骨盆耻骨上支骨折的数字解剖学参数 被引量:8
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作者 孟昊业 汪爱媛 +4 位作者 许文静 王玉 郭全义 彭江 卢世璧 《解放军医学院学报》 CAS 2018年第6期520-522,550,共4页
目的对骨盆3D模型进行数字螺钉模拟及置入,以获取逆行螺钉在耻骨联合下角入钉时的最佳通道参数,为临床安全置入螺钉固定骨盆耻骨上支骨折提供理论依据。方法随机收集解放军总医院CT室于2016年7月-2017年9月归档的50例非骨盆骨折患者的C... 目的对骨盆3D模型进行数字螺钉模拟及置入,以获取逆行螺钉在耻骨联合下角入钉时的最佳通道参数,为临床安全置入螺钉固定骨盆耻骨上支骨折提供理论依据。方法随机收集解放军总医院CT室于2016年7月-2017年9月归档的50例非骨盆骨折患者的CT图像,导入MIMICS软件重建骨盆3D模型。分别用数字螺钉进行模拟置入,从耻骨结合处开始测量逆行钉道的直径和钉道长度以及钉道与矢状面和冠状面的夹角。结果男性最狭窄区平均直径为(7.54±1.02)mm;女性最狭窄区平均直径为(6.23±1.61)mm;以φ4.5 mm数字螺钉模拟置入时,样本中钉道与矢状面、冠状面和横截面的平均夹角:男性[(51.10±3.26)°、(8.24±1.33)°、(39.47±2.58)°],女性[(53.44±3.78)°、(8.45±2.15)°、(35.26±4.76)°]。结论根据Nakatani骨折分型,当耻骨上支骨折发生在Ⅰ区时,以耻骨联合下角作为穿针点,参考上述夹角可以获得内侧骨折部分足够的螺钉通道长度。 展开更多
关键词 耻骨上支骨折 逆行螺钉 CT三维重建 数字解剖
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不同交联密度甲基丙烯酰酯明胶/脱细胞半月板细胞外基质复合水凝胶的性能 被引量:3
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作者 周建 田壮 +9 位作者 田沁玉 罗旭江 彭礼庆 李坤 眭翔 黄靖香 刘舒云 郝利波 郭全义 姚琦 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第16期2493-2499,共7页
背景:交联后的聚合物链对水凝胶的基本性质和细胞相容性存在显著影响,而交联密度可明显改变聚合物链的形成情况,有关交联密度对水凝胶性能影响的针对性研究较少。目的:制备一种细胞相容良好性的复合水凝胶,探究交联密度对该水凝胶性能... 背景:交联后的聚合物链对水凝胶的基本性质和细胞相容性存在显著影响,而交联密度可明显改变聚合物链的形成情况,有关交联密度对水凝胶性能影响的针对性研究较少。目的:制备一种细胞相容良好性的复合水凝胶,探究交联密度对该水凝胶性能的影响。方法:配制甲基丙烯酰酯明胶溶液,然后加入脱细胞半月板细胞外基质溶液与LAP溶液,制备预凝胶溶液,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60s,检测3种水凝胶的压缩弹性模量、溶胀倍率与降解性能。将半月板纤维软骨细胞加入预凝胶溶液中,采用蓝光对溶液进行交联,交联时间分别为10,30,60 s,检测培养对应时间的细胞活性、形态与聚集。结果与结论:①交联60 s水凝胶的压缩模明显高于交联10,30 s的水凝胶(P<0.05);②交联10 s水凝胶的溶胀倍率明显高于交联30,60 s的水凝胶(P<0.05),交联30,60 s的水凝胶的溶胀倍率比较差异无显著性意义(P>0.05);③随着交联时间的延长,水凝胶的降解时间延长,交联60 s的水凝胶需要80 min完全降解,交联10 s的水凝胶50 min就可以完全降解;④培养24h后,3组水凝胶中的细胞活性均在95%以上,各组之间无差异(P>0.05);⑤培养1 d时,3组水凝胶中的细胞均呈球形且均匀分布;4 d时,3组细胞均开始伸展,交联10 s水凝胶中有较小的细胞团;7 d时,3组细胞树突状伸展更为明显,其中交联10 s水凝胶中形成了较为明显的细胞团;⑥培养1,7,14 d时,交联10 s水凝胶中的细胞活性均在85%以上。培养1 d时,交联10 s水凝胶中的细胞呈球形分布,且分布均匀;培养28 d时,细胞呈树突状伸展,并聚集形成网状结构;⑦结果表明,甲基丙烯酰酯明胶/脱细胞半月板细胞外基质复合水凝胶的性能可通过调整交联密度进行优化。 展开更多
关键词 水凝胶 甲基丙烯酰酯明胶 脱细胞外基质 性能 交联密度 细胞相容性 光交联 半月板
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脱细胞软骨基质对巨噬细胞极化的调控 被引量:2
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作者 田广招 杨振 +6 位作者 查康康 孙志强 李旭 眭翔 黄靖香 郭全义 刘舒云 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第22期3545-3550,共6页
背景:细胞外基质来源的生物材料在组织工程再生领域应用广泛,近年来生物材料对巨噬细胞表型极化作用受到极大关注。目的:探究脱细胞软骨基质(decellularized cartilage extracellular matrix,DCM)及胃蛋白酶处理脱细胞软骨基质(pepsin t... 背景:细胞外基质来源的生物材料在组织工程再生领域应用广泛,近年来生物材料对巨噬细胞表型极化作用受到极大关注。目的:探究脱细胞软骨基质(decellularized cartilage extracellular matrix,DCM)及胃蛋白酶处理脱细胞软骨基质(pepsin treated decellularized cartilage extracellular matrix,PDCM)对巨噬细胞表型极化的调控作用。方法:采用物理粉碎、反复冻融及差速离心方法制备猪关节软骨脱细胞软骨基质(DCM),溶解于胃蛋白酶溶液内得到其生物降解产物(PDCM)。将小鼠巨噬细胞系RAW264.7分5组培养:对照组加入巨噬细胞完全培养基,M1型阳性对照组加入含脂多糖+干扰素γ的完全培养基,M2型阳性对照组加入含白细胞介素4的完全培养基,PDCM组加入含PDCM的完全培养基,胃蛋白酶组加入含胃蛋白酶的完全培养基,培养18 h后进行CD86(M1型巨噬细胞)、CD206(M2型巨噬细胞)免疫荧光染色鉴定。另外将小鼠巨噬细胞系RAW264.7分6组培养:对照组、M1型阳性对照组、M2型阳性对照组、胃蛋白酶组、DCM涂布组与PDCM涂布组,培养24 h后进行CD86、CD206流式细胞术检测。结果与结论:①免疫荧光结果显示,PDCM组诱导巨噬细胞CD86表达阳性比约为0.13,诱导巨噬细胞CD206表达阳性比约为0.5;②流式细胞术检测结果显示,DCM诱导巨噬细胞表达CD86(20.1%)及CD206(28.8%),PDCM只诱导巨噬细胞表达CD206(23.2%);③结果表明,DCM及其生物降解产物PDCM具有促进巨噬细胞M2型极化的作用。 展开更多
关键词 软骨 材料 组织工程 脱细胞 软骨基质 巨噬细胞极化 巨噬细胞表型
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超临界二氧化碳萃取的猪松质骨
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作者 罗旭江 鲜海 +10 位作者 彭礼庆 沈师 张彬 高超 王振勇 眭翔 黄靖香 韩刚 刘舒云 郭全义 鲁晓波 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第10期1508-1514,共7页
背景:近年来国外使用超临界流体进行生物材料处理的研究较多,但是超临界流体应用于骨组织清洗的研究少见,国内相关报道更少。目的:评估超临界二氧化碳萃取技术处理猪股骨松质骨的有效性及对骨生物学性能的影响。方法:分别制备超临界二... 背景:近年来国外使用超临界流体进行生物材料处理的研究较多,但是超临界流体应用于骨组织清洗的研究少见,国内相关报道更少。目的:评估超临界二氧化碳萃取技术处理猪股骨松质骨的有效性及对骨生物学性能的影响。方法:分别制备超临界二氧化碳萃取前(对照组)及萃取后猪股骨骨块(实验组),检测两组骨密度、微观结构、最大抗压强度、弹性模量、骨组织组成成分、胶原含量与组织学分析。将骨髓间充质干细胞分别接种于两组骨块上,培养1 d后,扫描电镜观察材料骨小梁微孔结构及骨材料-细胞复合物中细胞黏附及生长情况。将两组骨块分别植入SD大鼠皮下,术后1,2,4周组织学观察皮下包埋炎症反应。动物实验方案已经解放军总医院伦理委员会批准。结果与结论:①两组材料孔径大小、骨密度、最大抗压强度、弹性模量、胶原含量比较差异均无显著性意义(P>0.05);②扫描电镜显示,对照组材料孔隙连通欠佳,有软组织残留;实验组材料孔隙相互连通、结构完整;③傅里叶红外光谱及X射线衍射分析显示,两组骨组织材料具有相似的吸收峰及衍射峰,热重分析显示超临界二氧化碳萃取可减少骨组织水分含量;④苏木精-伊红染色显示实验组骨无软组织残留,骨陷凹内细胞残留明显减少,对照组有软组织及细胞残留;天狼星红及改良Masson染色显示实验组骨胶原结构完整,胞质成分减少,对照组胞质成分残留明显;⑤扫描电镜显示,对照组骨无明显细胞黏附,实验组骨可见明显细胞黏附生长;⑥实验组骨组织植入皮下的血管周围炎症反应明显轻于对照组骨组织;⑦结果表明,超临界二氧化碳萃取技术是一种有效、环保的骨组织处理技术,在不影响其胶原结构及含量、力学性能的基础上,能够有效去除猪股骨松质骨细胞及软组织,保留骨孔隙结构完整,增加细胞黏附及生长,有效减低炎性排斥反应。 展开更多
关键词 超临界二氧化碳 同种异体骨 猪松质骨 骨缺损 骨生物材料 清洗 脱脂 脱细胞
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脱细胞猪皮基质构建组织工程半月板支架
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作者 王皓 陈明学 +10 位作者 李俊康 罗旭江 彭礼庆 李获 黄波 田广招 刘舒云 眭翔 黄靖香 郭全义 鲁晓波 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第22期3473-3478,共6页
背景:半月板损伤的再生修复目前仍然是一个科学性难题,构建具有良好生物力学性能与细胞相容性的组织工程支架至关重要。目的:制备脱细胞猪皮基质支架,评价其生物力学性能和细胞相容性。方法:采用胰蛋白酶、Triton X-100、十二烷基磺酸... 背景:半月板损伤的再生修复目前仍然是一个科学性难题,构建具有良好生物力学性能与细胞相容性的组织工程支架至关重要。目的:制备脱细胞猪皮基质支架,评价其生物力学性能和细胞相容性。方法:采用胰蛋白酶、Triton X-100、十二烷基磺酸钠组合对猪皮进行脱细胞处理,获得脱细胞猪皮基质,采用DAPI染色观察脱细胞效果,扫描电镜观察其微观结构。通过组织学染色、胶原和糖胺多糖定量及生物力学检测对比脱细胞猪皮基质与天然半月板的差异。将第3代骨髓间充质干细胞接种于脱细胞猪皮基质上,培养3 d后分别进行扫描电镜、死/活细胞染色和鬼笔环肽染色观察。结果与结论:①DAPI染色显示,脱细胞猪皮基质无细胞核结构;扫描电镜显示,脱细胞猪皮基质表面较为粗糙,表面纤维呈拓扑学结构;②组织学染色显示,天然半月板组织含有丰富的细胞外基质,半月板细胞在基质中均匀分布,胶原纤维致密且排列规则,胶原成分主要以Ⅰ型胶原纤维为主,含有糖胺多糖成分;脱细胞猪皮基质无细胞核,呈疏松的纤维条索状,有较多的孔隙结构,胶原成分主要以Ⅰ型胶原纤维为主,含有糖胺多糖成分;③脱细胞猪皮基质的胶原含量、拉伸弹性模量与天然半月板比较差异无显著性意义(P>0.05),糖胺多糖含量、压缩弹性模量低于天然半月板(P<0.05),并且脱细胞猪皮基质的生物力学性能足够承受膝关节的负荷、保持支架的完整;④扫描电镜显示,骨髓间充质干细胞黏附分布在猪皮基质的孔隙结构中,细胞呈椭圆形,聚集生长;⑤死/活细胞染色显示,脱细胞猪皮基质上的骨髓间充质干细胞具有较高的活性(94.0±3.8)%;⑥鬼笔环肽/DAPI染色显示,骨髓间充质干细胞在脱细胞猪皮基质上呈现出很好的铺展状;⑦结果表明,脱细胞猪皮基质与天然半月板具有类似的胶原成分,呈现出良好的生物力学性能和细胞相容性,有利于细胞的黏附和生长。 展开更多
关键词 半月板 组织工程 脱细胞支架 猪皮基质 胶原 细胞外基质
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驻香港部队卫勤保障中锁定暂时性血管分流装置的应用研究
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作者 陆海波 许文静 +9 位作者 罗涌 彭江 郭全义 张小天 卢道云 聂晨阳 李森 王春雨 张斌 卢世璧 《西北国防医学杂志》 CAS 2018年第7期432-436,共5页
目的:探讨锁定暂时性血管分流(locked temporary vascular shunts,LTVS)装置在驻港部队四肢血管伤紧急救治中的应用效果。方法:LTVS装置是将暂时性血管分流(temporary vascular shunts,TVS)的外壁改进成等距螺纹状,将螺纹分流管插入受... 目的:探讨锁定暂时性血管分流(locked temporary vascular shunts,LTVS)装置在驻港部队四肢血管伤紧急救治中的应用效果。方法:LTVS装置是将暂时性血管分流(temporary vascular shunts,TVS)的外壁改进成等距螺纹状,将螺纹分流管插入受损血管断端后,再用2个内壁呈匹配内螺纹的合页式锁定螺帽,将分流管与血管壁固定,用以替代TVS的徒手打结固定方式。并分别比较TVS组与LTVS组的血管分流操作时间。结果:LTVS组的体外血管爆破压比TVS组高114.29%[(0.05±0.01)MPa vs(0.02±0.01)MPa],LTVS组的血管分流操作时间比TVS组明显缩短60.37%[(138.89±18.22)s vs(350.48±52.20)s]。结论:与现行TVS相比,LTVS的安全性及使用率更高。 展开更多
关键词 血管伤 暂时性血管分流 战伤救治
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脱细胞软骨细胞外基质取向支架复合软骨细胞构建组织工程软骨的实验研究 被引量:9
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作者 鹿亮 刘彬 +7 位作者 尚希福 张雨 陈伟健 刘舒云 黄靖香 汪爱媛 郭全义 卢世璧 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期291-297,共7页
目的探讨脱细胞软骨细胞外基质(acellular cartilage extracellular matrix,ACECM)取向支架复合软骨细胞构建组织工程软骨的可行性。方法取市售猪关节软骨组织,分离培养关节软骨细胞并传代。取第3代软骨细胞行PKH26荧光标记,MTT检测标... 目的探讨脱细胞软骨细胞外基质(acellular cartilage extracellular matrix,ACECM)取向支架复合软骨细胞构建组织工程软骨的可行性。方法取市售猪关节软骨组织,分离培养关节软骨细胞并传代。取第3代软骨细胞行PKH26荧光标记,MTT检测标记对细胞增殖无影响后,分别取标记及未标记的软骨细胞复合ACECM取向支架并体外培养后,大体观察支架形态,倒置显微镜、荧光显微镜观察软骨细胞在支架中的黏附、生长和分布情况,扫描电镜观察支架中细胞形态,Ⅱ型胶原免疫荧光染色观察软骨细胞外基质分泌情况。将PKH26标记的软骨细胞-支架复合物植入裸鼠背部皮下腔隙,术后观察裸鼠一般情况,4周后分子荧光活体成像系统无创伤性评估细胞-支架复合物生长情况,取材行大体观察以及番红O、甲苯胺蓝、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色观察,评价形成软骨组织的能力。结果细胞-支架复合物体外培养7 d,大体观察呈半透明并具有一定硬度;倒置显微镜和荧光显微镜观察软骨细胞在支架上能良好黏附生长,并沿支架管道方向生长,分泌Ⅱ型胶原。细胞-支架复合物植入裸鼠皮下后,分子荧光活体成像系统观察示细胞均存活;术后4周,大体观察见复合物呈类软骨样组织,组织学染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色示细胞周围软骨细胞外基质分泌,可见"陷窝"样结构形成。结论 ACECM取向支架有利于软骨细胞的黏附、增殖及取向性分布类似于正常软骨结构,并在裸鼠皮下成功异位构建组织工程软骨。 展开更多
关键词 软骨组织工程 脱细胞软骨细胞外基质取向支架 软骨细胞 支架材料
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静电纺丝聚己内酯/Ⅰ型胶原纳米纤维取向性补片用于肩袖修复 被引量:6
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作者 高超 李超明 +10 位作者 徐玉龙 王振勇 李浩江 罗旭江 彭礼庆 张彬 沈师 刘舒云 眭翔 郭全义 杨建华 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期628-633,共6页
目的利用静电纺丝技术制备聚己内酯(polycaprolactone,PCL)/Ⅰ型胶原纳米纤维取向性补片,对其进行理化表征和生物性能评价,探讨其作为肩袖修复人工合成材料的可行性。方法利用静电纺丝技术分别使用质量比10%PCL静电纺丝溶液制备单纯PCL... 目的利用静电纺丝技术制备聚己内酯(polycaprolactone,PCL)/Ⅰ型胶原纳米纤维取向性补片,对其进行理化表征和生物性能评价,探讨其作为肩袖修复人工合成材料的可行性。方法利用静电纺丝技术分别使用质量比10%PCL静电纺丝溶液制备单纯PCL纳米纤维补片(对照组),以及含25%Ⅰ型胶原的PCL混合静电纺丝溶液制备PCL/Ⅰ型胶原纳米纤维补片(实验组)。取两种补片行大体及扫描电镜观察支架形态及微观结构并测量纤维直径和孔隙率,行单轴拉伸试验检测补片的力学性能,使用傅氏转换红外线光谱分析仪对补片成分进行分析,测量补片表面接触角。将两种补片浸提液与第3代兔肌腱干细胞复合培养,细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测材料毒性和细胞增殖情况,以正常培养细胞作为空白对照组;将兔肌腱干细胞复合于两种补片上,体外培养3 d后进行死/活细胞染色,共聚焦激光扫描显微镜下观察细胞在补片上的黏附和活性。结果大体及扫描电镜观察示,两种补片纤维均呈取向性排列,实验组补片纤维直径显著小于对照组(t=26.907,P=0.000),孔隙率显著大于对照组(t=2.506,P=0.032)。实验组补片的纤维拉伸强度和杨氏模量均显著高于对照组,差异有统计学意义(t=3.705,P=0.029;t=4.064,P=0.034)。红外光谱分析示,实验组补片中PCL和Ⅰ型胶原成功混合。实验组补片表面接触角为(73.88±4.97)°,为亲水的;而对照组补片表面接触角为(128.46±5.10)°,为疏水的;两组表面接触角比较差异有统计学意义(t=21.705,P=0.002)。随培养时间延长,各组细胞吸光度(A)值均逐渐增加,各时间点实验组和对照组A值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。共聚焦激光扫描显微镜观察示,培养3 d,兔肌腱干细胞在两种补片表面均可黏附、生长,实验组补片表面黏附的细胞数量多于对照组,且活性更好。结论利用静电纺丝技术制备的PCL/Ⅰ型胶原纳米纤维取向性补片具有优良的理化性能及细胞黏附性能,无细胞毒性,未来可作为肩袖修复理想的组织工程补片。 展开更多
关键词 静电纺丝 肩袖补片 肌腱组织工程 聚己内酯 Ⅰ型胶原
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3D bioprinting of a biomimetic meniscal scaffold for application in tissue engineering 被引量:5
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作者 Zhou Jian Tian Zhuang +13 位作者 Tian Qinyu Peng Liqing Li Kun Luo Xujiang Wang Diaodiao Yang Zhen Jiang Shuangpeng Sui Xiang Huang Jingxiang Liu Shuyun Hao Libo Tang Peifu Yao Qi guo quanyi 《Bioactive Materials》 SCIE 2021年第6期1711-1726,共16页
Appropriate biomimetic scaffolds created via 3D bioprinting are promising methods for treating damaged menisci.However,given the unique anatomical structure and complex stress environment of the meniscus,many studies ... Appropriate biomimetic scaffolds created via 3D bioprinting are promising methods for treating damaged menisci.However,given the unique anatomical structure and complex stress environment of the meniscus,many studies have adopted various techniques to take full advantage of different materials,such as the printing combined with infusion,or electrospining,to chase the biomimetic meniscus,which makes the process complicated to some extent.Some researchers have tried to tackle the challenges only by 3D biopringting,while its alternative materials and models have been constrained.In this study,based on a multilayer biomimetic strategy,we optimized the preparation of meniscus-derived bioink,gelatin methacrylate(GelMA)/meniscal extracellular matrix(MECM),to take printability and cytocompatibility into account together.Subsequently,a customized 3D bioprinting system featuring a dual nozzle+multitemperature printing was used to integrate the advantages of polycaprolactone(PCL)and meniscal fibrocartilage chondrocytes(MFCs)-laden GelMA/MECM bioink to complete the biomimetic meniscal scaffold,which had the best biomimetic features in terms of morphology and components.Furthermore,cell viability,mechanics,biodegradation and tissue formation in vivo were performed to ensure that the scaffold had sufficient feasibility and functionality,thereby providing a reliable basis for its application in tissue engineering. 展开更多
关键词 3D bioprinting Tissue engineering MENISCUS SCAFFOLD
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