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许氏平鲉蛋白激酶B(SsAkt)基因的克隆及其mRNA在细菌胁迫后的表达规律
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作者 李兆龙 王腾腾 +6 位作者 韩慧宗 陈钰臻 王斐 张明亮 孙硕 解维俊 姜海滨 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2024年第1期47-59,共13页
为研究蛋白激酶B(Akt)在许氏平鲉(Sebastes schlegelii)应答细菌胁迫过程中的作用,本研究应用PCR技术对许氏平鲉Akt基因(SsAkt)的编码区序列进行了克隆和特征分析,并应用实时荧光定量PCR技术检测了健康许氏平鲉各组织和细菌胁迫后肾脏... 为研究蛋白激酶B(Akt)在许氏平鲉(Sebastes schlegelii)应答细菌胁迫过程中的作用,本研究应用PCR技术对许氏平鲉Akt基因(SsAkt)的编码区序列进行了克隆和特征分析,并应用实时荧光定量PCR技术检测了健康许氏平鲉各组织和细菌胁迫后肾脏、血液和肝脏中SsAktm RNA的表达规律。结果显示,SsAkt的开放阅读框(ORF)的长度为1440 bp,编码479个氨基酸,预测其蛋白的相对分子质量为55.80 k Da,理论等电点(p I)为5.64。SMART分析显示,Ss Akt蛋白含有丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族的3个特征性保守结构域和2个磷酸化位点。同源比对发现,Ss Akt与鱼类的同源性较高,与尖嘴鲈(Lates calcarifer)的相似度最高,为99.37%。组织表达分析显示,SsAkt在许氏平鲉健康组织(血液、鳃、肝脏、肌肉、肾脏、脾脏、肠、脑和心脏)中均有表达,在肾脏、脑和血液中的相对表达量较高。许氏平鲉响应细菌胁迫的表达结果显示,藤黄微球菌(Micrococcus luteus)感染后,SsAkt在3种组织中的表达明显上调,呈先上升后下降的趋势;鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染后,SsAkt在3种组织中呈现不同的表达趋势:在肾脏中,SsAkt的表达趋势为先上升后下降又上升再下降,而在血液和肝脏中的表达趋势为先上升后下降。以上研究表明,SsAkt响应了外源微生物对许氏平鲉的胁迫,在抵御外源微生物免疫应答过程中发挥重要作用。本研究结果为许氏平鲉的免疫机理研究奠定了基础。 展开更多
关键词 许氏平鲉 蛋白激酶B AKT 基因克隆 表达规律
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2株海水鱼源潜在益生菌的分离、鉴定及特性分析 被引量:1
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作者 杜文勇 王腾腾 +4 位作者 韩慧宗 王斐 张明亮 宋元照 姜海滨 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第3期188-199,共12页
为筛选用于微生态制剂研发的海水鱼源益生菌,本研究对海捕野生许氏平鲉(Sebastes schlegelii)和大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)的消化道内壁黏膜样品进行细菌分离纯化,获得80株可培养细菌。使用选择性培养基对菌株的产酶能力进行测定,... 为筛选用于微生态制剂研发的海水鱼源益生菌,本研究对海捕野生许氏平鲉(Sebastes schlegelii)和大泷六线鱼(Hexagrammos otakii)的消化道内壁黏膜样品进行细菌分离纯化,获得80株可培养细菌。使用选择性培养基对菌株的产酶能力进行测定,选取海水鱼常见病原菌为指示菌测定分离菌株产物的抑菌活性,筛选出2株潜在益生菌TS2和TH8,并进行菌株的生理生化检测、16S rDNA序列分析、生长特性及其对宿主安全性的研究。结果显示,TS2产蛋白酶(protease)、淀粉酶(amylase)和脂肪酶(lipase),其无菌培养产物可显著抑制鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harvey)和假交替单胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)的生长。TH8产蛋白酶和脂肪酶,其无菌培养产物可显著抑制鳗弧菌、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、副溶血弧菌、假交替单胞菌、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)和大肠杆菌(Escherichia coli)的生长。基于细菌生理生化检测和16S rDNA序列比对,鉴定TS2为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),TH8为河流漫游球菌(Vagococcus fluvialis)。TS2在温度为15~40℃、Na Cl浓度为0~0.08 g/L、p H为5~9时生长较快,6 h进入对数期,26 h后进入稳定期;TH8在温度为20~40℃、Na Cl浓度为0~0.08 g/L、p H为5~12时生长较快,2 h进入对数期,14 h后进入稳定期。菌株对同源宿主的安全性检测发现,TS2和TH8在108 CFU/mL浓度条件下对同源宿主是相对安全的。筛选的枯草芽孢杆菌TS2、河流漫游球菌TH8产酶能力强,其产物能抑制多种病原菌的生长,具有广温、广盐、耐酸碱、生长速度快等优点,可作为候选菌株开发为微生态制剂,研究结果为其在海水鱼养殖业中的应用提供数据支撑。 展开更多
关键词 许氏平鲉 大泷六线鱼 枯草芽孢杆菌 河流漫游球菌 产酶 抑菌
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海水池塘底播江蓠对仿刺参生长的影响研究
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作者 周全利 秦显明 +6 位作者 任利华 郭治诚 韩慧宗 王忠全 相智巍 刘元进 刘义豪 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期474-479,共6页
大型藻类在多营养层次综合养殖系统中的食物产出和生态调控功能显著,为研究底播菊花江蓠对仿刺参生长的影响效果,在中试池塘(0.1hm^(2))进行仿刺参1个投放密度[(100.0±23.6)g/m^(2)]和菊花江蓠4个投放密度[0、100、300、600g/m^(2)... 大型藻类在多营养层次综合养殖系统中的食物产出和生态调控功能显著,为研究底播菊花江蓠对仿刺参生长的影响效果,在中试池塘(0.1hm^(2))进行仿刺参1个投放密度[(100.0±23.6)g/m^(2)]和菊花江蓠4个投放密度[0、100、300、600g/m^(2)]的试验。结果显示:高温期间,底播菊花江蓠对池塘底层水温有降低的作用(P<0.05),对底层溶解氧含量有增加的作用(P<0.05),且有随着菊花江蓠投放密度的增大影响越来越大的趋势;仿刺参收获数量和质量随菊花江蓠投放密度的增大而增加,在此试验条件下对照组仿刺参生长和成活与各密度组均差异显著(P<0.05),各密度组的菊花江蓠自身生长差异不显著(P>0.05),对照组成活后仿刺参的生长与各密度组均差异显著(P<0.05),各密度组间差异不显著(P>0.05)。综合表明,池塘底播菊花江蓠能降低水温、增加溶解氧含量,可显著提高仿刺参的成活和生长,菊花江蓠投放密度为300~600g/m^(2)时,仿刺参成活和生长效果好。 展开更多
关键词 仿刺参 菊花江蓠 混养 投放密度 生长
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许氏平鲉增殖放流苗种网箱中培技术研究
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作者 周广军 杨涛 +3 位作者 吴红伟 赵运星 韩慧宗 孙灵毅 《水产科技情报》 2023年第5期294-300,共7页
为研究许氏平鲉(Sebastes schlegelii)大规格苗种网箱中间培育技术,提高其增殖放流的成活率和回捕率,以拟放流的许氏平鲉大规格苗种(体长>5 cm)为对象,分别在沉淀池和天然海域开展了为期28 d的苗种网箱中间培育试验。试验结果显示,... 为研究许氏平鲉(Sebastes schlegelii)大规格苗种网箱中间培育技术,提高其增殖放流的成活率和回捕率,以拟放流的许氏平鲉大规格苗种(体长>5 cm)为对象,分别在沉淀池和天然海域开展了为期28 d的苗种网箱中间培育试验。试验结果显示,在沉淀池培育的许氏平鲉苗种平均全长增长率为30.48%,平均体质量增长率为209.36%,平均存活率为94.28%;在天然海域培育的苗种平均全长增长率为11.47%,平均体质量增长率为102.28%,平均存活率为83.55%。对中间培育苗种的全长和体质量进行拟合,结果显示,在沉淀池培育条件下生长因子b的分布范围为0.879 0~1.353 8,表现为负异速生长。结果表明,许氏平鲉增殖放流苗种的网箱中间培育技术可行,且沉淀池培育的效果优于天然海域。 展开更多
关键词 许氏平鲉 增殖放流 中间培育 形态参数相关性
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许氏平鲉体质量与形态性状的表型特征分析 被引量:15
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作者 刘阳 韩慧宗 +4 位作者 王腾腾 张明亮 王斐 孙娜 姜海滨 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2019年第5期117-125,共9页
为探究许氏平鲉(Sebastesschlegelii)主要形态性状与体质量的相关性及在三代选育群体间的差异性,以随机采集8月龄许氏平鲉群体内选育F1代、群体内家系选育F2代和F3代为研究对象,本研究每代各选取80尾分别测量了体质量(Y,g)和11个形态性... 为探究许氏平鲉(Sebastesschlegelii)主要形态性状与体质量的相关性及在三代选育群体间的差异性,以随机采集8月龄许氏平鲉群体内选育F1代、群体内家系选育F2代和F3代为研究对象,本研究每代各选取80尾分别测量了体质量(Y,g)和11个形态性状指标(cm):全长(X1)、体长(X2)、体高(X3)、头长(X4)、尾长(X5)、尾柄长(X6)、尾柄高(X7)、吻长(X8)、躯干长(X9)、眼径(X(10))、眼后头长(X(11)),采用通径分析和灰色关联度分析2种方法对许氏平鲉三代选育群体的形态性状对体质量的影响情况进行评价。结果显示,三代选育群体11个形态性状与体质量的相关关系达到极显著水平(P<0.01)或显著水平(P<0.05)。通径分析中,F1、F2代的体高和躯干长对体质量的通径系数达到极显著水平(P<0.01);F3代的体高和尾柄长对体质量的通径系数达到极显著水平(P<0.01)。采用逐步回归方法建立了三代选育群体形态性状与体质量的多元回归方程,F1:Y=-47.383+17.097X3+7.308X9;F2:Y=-34.615+15.779X3+3.901X9;F3:Y=-54.496+21.966X3+7.283X6。灰色关联度分析中,三代选育群体体质量与形态性状的关联度大小及次序存在一定差异,但三代间与体质量关联度最高的前3个性状均为体高、全长和体长。研究表明,2种分析方法得到的影响体质量的主要形态性状有所不同,且在三代群体间也有所差异,但2种方法在三代选育群体中得到的第一主控性状均为体高,说明体高是影响许氏平鲉三代选育群体体质量的最主要的形态性状。本研究可为许氏平鲉选育测量指标的确定提供参考数据。 展开更多
关键词 许氏平鲉 形态性状 体质量 通径分析 灰色关联度 三代选育群体
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陆源有机碳对黄河口及周边近海4种常见鱼类的营养贡献 被引量:2
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作者 王斐 张明亮 +5 位作者 李凡 李少文 徐炳庆 李斌 韩慧宗 齐占会 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2021年第4期395-403,共9页
为了解黄河输送陆源有机碳对河口以及近海生态系统物质和能量的补充作用,通过多元相似性分析研究了斑尾刺虾虎鱼(Acanthogobius ommaturus)、短吻红舌鳎(Cynoglossus joyneri)、矛尾虾虎鱼(Chaeturichthys stigmatias)、青鳞小沙丁鱼(Sa... 为了解黄河输送陆源有机碳对河口以及近海生态系统物质和能量的补充作用,通过多元相似性分析研究了斑尾刺虾虎鱼(Acanthogobius ommaturus)、短吻红舌鳎(Cynoglossus joyneri)、矛尾虾虎鱼(Chaeturichthys stigmatias)、青鳞小沙丁鱼(Sardinella zunasi)等4种常见鱼类碳氮稳定同位素在时间、空间尺度上的差异,并应用稳定同位素分析R语言包(SIAR)计算了陆源有机碳对4种鱼类的营养贡献。结果表明,尽管在时间(R=0.08,P<0.01)、空间(R=0.19,P<0.01)尺度上,4种鱼类碳氮稳定同位素均差异不大,但陆源有机碳对其营养贡献空间和时间变化明显。陆源有机碳对4种鱼类的营养贡献在夏季较秋季高4.3%~32.0%,黄河口区域较近海高12.4%~19.8%。 展开更多
关键词 陆源有机碳 营养贡献 稳定同位素 MANOSIM SIAR
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许氏平鲉微卫星多重PCR体系构建及亲本对子代贡献率 被引量:3
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作者 韩慧宗 刘阳 +4 位作者 王腾腾 张明亮 王斐 孙娜 姜海滨 《中国渔业质量与标准》 2018年第4期48-57,共10页
为了探究许氏平鲉(Sebastes schlegelii)交配模式和父本对子代的贡献率,利用本课题组开发的13对许氏平鲉高多态性微卫星标记,基于扩增片段大小、退火温度、引物浓度等条件进行优化组合,成功构建了3个三重和2个两重PCR反应体系。同时设... 为了探究许氏平鲉(Sebastes schlegelii)交配模式和父本对子代的贡献率,利用本课题组开发的13对许氏平鲉高多态性微卫星标记,基于扩增片段大小、退火温度、引物浓度等条件进行优化组合,成功构建了3个三重和2个两重PCR反应体系。同时设计10雌与10雄许氏平鮋亲鱼自由交尾实验,有4尾雌鱼顺利产仔,运用CERVUS 3.0软件对4个母本、4个家系(每个家系取94个个体)及10个候选父本进行亲权鉴定。结果表明:在双亲基因型已知的情况下,当利用5组多重PCR反应体系鉴定4个家系时,累积排除率均达到0.999 999以上,亲子鉴定准确率均达到100%,可有效鉴定许氏平鲉4个家系的亲权关系;能鉴定到父本数为3~6个,4个家系中父本数依次为6、5、4和3个,雄性亲鱼Ma2和Ma7参与到4个母本交配受精中,Ma3、Ma4、Ma5和Ma10则参与到2个母本交配受精,因此,说明"一雌多雄"和"一雄多雌"的交配模式均存在。在所有子代中,父本对子代的贡献差异很大,贡献率最高的为Ma7、Ma2和Ma6,其总和达到67.82%。其中Ma1和Ma9未发现子代,说明未参与交配或交配受精不成功,其贡献率为0。本研究可为许氏平鲉人工繁育和良种选育提供科学理论依据。 展开更多
关键词 许氏平鲉 微卫星标记 多重PCR体系 亲子鉴定 交配模式 贡献率
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蜡样芽孢杆菌YB1对大菱鲆幼鱼生长性能、肠道消化酶、肝脏抗氧化酶及肠道组织结构的影响 被引量:7
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作者 崔广鑫 孙娜 +3 位作者 王腾腾 陈钰臻 韩慧宗 姜海滨 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2022年第1期97-105,共9页
为探究在饲料中添加蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)YB1对大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼生长性能、肠道消化酶活力和肝脏抗氧化酶活力以及肠道组织结构的影响,本研究选取720尾初始体质量为(3.6±0.7)g的大菱鲆幼鱼,随机分为4组,... 为探究在饲料中添加蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)YB1对大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼鱼生长性能、肠道消化酶活力和肝脏抗氧化酶活力以及肠道组织结构的影响,本研究选取720尾初始体质量为(3.6±0.7)g的大菱鲆幼鱼,随机分为4组,每组3个平行,每个平行60尾。4组大菱鲆幼鱼在投喂的饲料中分别添加活菌量为0(对照)、10^(5) 、10^(6) 和10^(7) CFU/g的YB1,养殖期为50 d。结果显示,YB1添加量为10^(7) CFU/g时,大菱鲆幼鱼的增重率(WGR)和特定生长率(SGR)显著高于对照组(P<0.05)。YB1添加量为10^(6) CFU/g组的大菱鲆幼鱼肠道蛋白酶和淀粉酶活力分别提高了57.86%和82.37%,显著高于对照组(P<0.05);YB1添加量提高到10^(7) CFU/g时,脂肪酶的含量显著高于对照组(P<0.05)。饲料中添加YB1对大菱鲆幼鱼肝脏过氧化氢酶活力无显著性影响(P>0.05);YB1添加量为10^(6) CFU/g组的幼鱼肝脏丙二醛含量下降了42.03%,显著低于对照组(P<0.05);实验组大菱鲆幼鱼肝脏超氧化物歧化酶活力相较于对照组有上升的趋势,差异不显著(P>0.05)。YB1添加量为10^(6) CFU/g组的大菱鲆幼鱼肠道肌层厚度增加最为显著(P<0.05),与对照组相比在实验末期提高了68.91%。研究表明,饲料中添加适量蜡样芽胞杆菌YB1具有促进大菱鲆幼鱼生长、提高幼鱼肠道消化酶和肝脏抗氧化酶活力以及改善幼鱼肠道组织结构的作用,推荐添加量为10^(6) CFU/g。 展开更多
关键词 蜡样芽孢杆菌 大菱鲆 酶活力 肠道组织结构 促生长
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Terrestrial dissolved organic carbon consumption by heterotrophic bacterioplankton in the Huanghe River estuary during water and sediment regulation 被引量:1
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作者 ZhanG Mingliang YU Guanglei +4 位作者 WANG Fei LI Bin han huizong QI Zhanhui WANG Tengteng 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期1062-1070,共9页
Nearly 20%–50% of the annual terrestrial dissolved organic carbon(DOC)from the Huanghe(Yellow)River was transported to the estuary during the 5-14d of water and sediment regulation.The concentration of DOC increased ... Nearly 20%–50% of the annual terrestrial dissolved organic carbon(DOC)from the Huanghe(Yellow)River was transported to the estuary during the 5-14d of water and sediment regulation.The concentration of DOC increased sharply during the period of water and sediment regulation,which may promote the terrestrial DOC consumption by heterotrophic bacterioplankton.Water and sediment regulation provides an ideal condition for the study of terrestrial DOC consumption by heterotrophic bacterioplankton when terrestrial DOC increases sharply in rainy season,which may help to seek the fates of terrestrial DOC in the estuaries and coasts.In this study,the concentration and stable isotope of DOC,the biomass,growth,and respiration of heterotrophic bacterioplankton were determined.By the study,we found both average percent contribution of terrestrial DOC to the DOC pool and Contribution of terrestrial DOC to the carbon composition of heterotrophic bacterioplankton decreased as distance from the river mouth increased off shore,which was deceased from(39.2±4.0)%,(37.5±4.3)%to(30.3±3.9)%,(28.2±3.9)%respectively.255-484μg C/(L·d)terrestrial DOC was consumed by heterotrophic bacterioplankton.And 29%-45%terrestrial DOC consumed by heterotrophic bacterioplankton releasing as CO2 by respiration.Comparing with tropical estuary,terrestrial DOC consumed by heterotrophic bacterioplankton was lower in temperate estuary(this study).Temperature may limit the consumption of terrestrial DOC by heterotrophic bacterioplankton. 展开更多
关键词 TERRESTRIAL dissolved organic CARBON HETEROTROPHIC BACTERIOPLANKTON CARBON stable ISOTOPE BIOGEOCHEMICAL cycles
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许氏平鲉致病菌P5W的分离鉴定及致病力分析
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作者 陈钰臻 王腾腾 +4 位作者 韩慧宗 崔广鑫 王斐 张明亮 姜海滨 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2023年第5期44-52,共9页
为明确养殖过程中许氏平鲉(Sebastes schlegelii)病害爆发的原因,本研究从烟台养殖区自然发病的许氏平鲉病灶处分离获得1株优势菌株P5W,综合采用形态特征观察、结合线粒体16S rDNA序列比对与系统发育进化鉴定分析,明确菌株P5W为哈维氏弧... 为明确养殖过程中许氏平鲉(Sebastes schlegelii)病害爆发的原因,本研究从烟台养殖区自然发病的许氏平鲉病灶处分离获得1株优势菌株P5W,综合采用形态特征观察、结合线粒体16S rDNA序列比对与系统发育进化鉴定分析,明确菌株P5W为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)。进一步开展了人工感染实验、组织病理学观察、胞外产物酶活性及溶血性分析、理化特性及药敏实验等研究,结果显示:人工感染证实菌株P5W为导致此次许氏平鲉患病的病原菌,且半数致死量LD50为5.7×10^(6)CFU/mL;患病许氏平鲉肝、脾、肾和肌肉等组织器官出现了不同程度的病变,主要表现在肝细胞出现明显空泡化,脾脏组织细胞发生离散,肾小管上皮细胞脱落坏死,肌纤维断裂;P5W胞外产物具有蛋白酶、脂肪酶、卵磷脂酶、淀粉酶、尿素酶及明胶酶活性,对绵羊红细胞有溶血活性;P5W的适宜生长条件为15~35℃, pH值5~10, NaCl含量(w/v%)1~8,最适生长条件为温度25℃, pH值7, NaCl含量2~4;P5W对头孢噻肟、头孢曲松、左氟沙星、四环素、复方新诺明等13种药物尤为敏感。研究结果为许氏平鲉养殖过程中弧菌类疾病的防治提供了理论和实践指导。 展开更多
关键词 许氏平鲉 哈维氏弧菌P5W 鉴定 组织病理学 胞外产物 致病力
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