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全人源抗大别班达病毒抗体的制备及功能鉴定
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作者 徐若薇 韩一芳 +4 位作者 周婷婷 吴梓菡 李军 金柯 汪春晖 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第6期743-752,共10页
目的:从发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)恢复期患者的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中,获得大别班达病毒(Dabie bandavirus,DBV)特异性抗体序列,制备全人源DBV抗... 目的:从发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome,SFTS)恢复期患者的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中,获得大别班达病毒(Dabie bandavirus,DBV)特异性抗体序列,制备全人源DBV抗体。方法:用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测恢复期患者血浆抗体效价,挑取恢复期患者PBMC样本进行磁珠富集,经流式细胞仪分选获得能够结合DBV糖蛋白的特异性单个B细胞,经B细胞受体(B cell receptor,BCR)测序获得抗体序列,进行单链抗体的原核表达,采用蛋白免疫印迹、ELISA和体外中和实验鉴定抗体的表达、结合能力和中和活性。结果:共收集25例SFTS恢复期患者血液样本,血浆中均发现了DBV糖蛋白和核衣壳蛋白的抗体。选取样本进行流式分选和BCR测序,分析后共获得6个单链抗体,对DBV均具有良好的结合能力和中和活性。结论:成功表达了6个与DBV具有中和作用的全人源抗DBV抗体。 展开更多
关键词 发热伴血小板减少综合征 大别班达病毒 恢复期患者 全人源抗体
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某部2006-2015年呼吸道传染病发病情况分析 被引量:4
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作者 韩一芳 王平 +2 位作者 张琪 张锦海 王长军 《解放军预防医学杂志》 CAS 2017年第9期1047-1049,共3页
目的目的统计分析某部2006-2015年10年间呼吸道传染病的发病情况,为进一步做好预防控制工作提供参考。方法数据来源于中国人民解放军突发公共卫生事件和传染病疫情报告信息系统,使用Excel、SPSS 18.0软件对数据进行统计分析。结果 2006-... 目的目的统计分析某部2006-2015年10年间呼吸道传染病的发病情况,为进一步做好预防控制工作提供参考。方法数据来源于中国人民解放军突发公共卫生事件和传染病疫情报告信息系统,使用Excel、SPSS 18.0软件对数据进行统计分析。结果 2006-2015年某部呼吸道传染病总体发病率为8.26‰;肺结核和水痘位居所有呼吸道传染病总体发病率的前两位;2008年呼吸道传染病发病率为10年来最高,12月-次年4月的冬春季为呼吸道传染病的高发季节;男性占报告总数的96.46%,战士和学员占报告总数的79.12%。结论针对呼吸道传染病发病率上升的趋势,应加强预防宣教、疫情监督、疾病控制工作。 展开更多
关键词 呼吸道传染病 发病率 预防控制
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某部2007-2016年病毒性肝炎发病情况分析 被引量:1
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作者 史富全 韩一芳 +3 位作者 张锦海 叶福强 张琪 王长军 《解放军预防医学杂志》 CAS 2018年第3期301-303,共3页
目的统计分析某部2007-2016年10年间病毒性肝炎的发病情况,为进一步做好军队病毒性肝炎预防控制工作提供依据。方法数据来源于中国人民解放军突发公共卫生事件和传染病疫情报告信息系统,使用Excel、SPSS 18.0软件对数据进行统计分析。结... 目的统计分析某部2007-2016年10年间病毒性肝炎的发病情况,为进一步做好军队病毒性肝炎预防控制工作提供依据。方法数据来源于中国人民解放军突发公共卫生事件和传染病疫情报告信息系统,使用Excel、SPSS 18.0软件对数据进行统计分析。结果 2007-2016年该部共报告病毒性肝炎病例452例,其中甲型肝炎占6.64%、乙型肝炎占41.37%、丙型肝炎占13.94%、戊型肝炎占5.53%、未分型肝炎占32.52%;总体发病情况呈逐年下降趋势;发病月份主要集中在3月及9月;男性多于女性,发病人群主要集中在35岁以下的年轻人,占报告发病总数的77.21%;战士、干部为主要发病人群。结论病毒性肝炎仍是危害部队官兵健康的重要传染病之一,尤其是乙型肝炎,应重视肝炎疫苗免疫接种的落实,加强疫情监控。 展开更多
关键词 病毒性肝炎 发病情况 防治
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基于纳米孔测序技术的呼吸道病原体快速确认 被引量:9
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作者 叶福强 李鹏 +8 位作者 韩一芳 张琪 林彦锋 王凯英 王太武 宋宏彬 王长军 汪春晖 张锦海 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第2期127-132,150,共7页
目的验证纳米孔测序技术在呼吸道病原体应急检测中的可行性。方法对某上呼吸道感染患者的咽拭子标本进行总核酸抽提并定量,接着进行cDNA的逆转录合成和测序文库构建,在便携式三代测序仪MinION上进行测序,然后对测序数据进行病原分类学分... 目的验证纳米孔测序技术在呼吸道病原体应急检测中的可行性。方法对某上呼吸道感染患者的咽拭子标本进行总核酸抽提并定量,接着进行cDNA的逆转录合成和测序文库构建,在便携式三代测序仪MinION上进行测序,然后对测序数据进行病原分类学分析,最后使用实时荧光定量PCR验证测序结果。结果MinION在15 h内共计产生188063条有效序列。测序数据分析表明,在咽拭子样本中同时检测到人呼吸道腺病毒7型和甲型流感病毒H3N2亚型,分别有19和4条序列匹配到参考基因组。测序开始9 h内,MinION已分别产出78.95%的7型腺病毒序列和100%的H3N2序列。从取样到初步获得鉴定结果,流转时间为18.6 h。实时荧光定量PCR与测序结果一致。结论MinION用于呼吸道病原体的快速检测具有可行性,且具备同时检测多种病原体并对病原分型的能力,在暴发疫情和呼吸道病毒应急检测方面具有应用价值。 展开更多
关键词 纳米孔测序 MinION 病原体 快速检测
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全球肝炎检测专利技术的计量可视化研究
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作者 弓大元 韩一芳 +7 位作者 张琪 叶福强 罗正汉 胡丹 吕恒 张锦海 王太武 汪春晖 《西南国防医药》 CAS 2020年第8期716-720,共5页
目的阐明世界肝炎检测专利技术的发展历程、现状以及研究热点和前沿,为肝炎检测技术的学术研究方向和整体规划提供参考借鉴。方法以德温特专利索引数据库(Derwent Innovations Index)建库以来所有年份发表的肝炎检测为主题的专利为对象... 目的阐明世界肝炎检测专利技术的发展历程、现状以及研究热点和前沿,为肝炎检测技术的学术研究方向和整体规划提供参考借鉴。方法以德温特专利索引数据库(Derwent Innovations Index)建库以来所有年份发表的肝炎检测为主题的专利为对象,采用文献计量分析的方法,获得有关肝炎检测专利逐年发表情况、研究核心机构的分布、领域专业术语及德温特手工代码的聚类、时间线和热点图谱等,确定了世界肝炎检测专利技术研究领域在不同时期的研究关键和前沿,识别了该领域热点和演化趋势。结果近年来世界肝炎检测专利技术研究发表呈现上升趋势,研究的公司机构主要集中在美国;研究热点经历了单克隆抗体、固体支撑物、丙型肝炎病毒、氨基酸、核酸、分离多肽、免疫原性片段、药物成分、类风湿性关节炎、丙肝病毒感染、氨基酸序列(SEQ ID)、检测实用新型技术、温度(℃)、乙肝病毒感染检测;应用方面经历了最初的一般性技术、设备逐渐发展到分子层面的分离鉴定技术、具有针对性的基因工程、基因探针技术,接着又发展到近年来神经系统相关领域检测研究。结论肝炎检测专利年申请量正快速上升,技术层面上获得了飞跃性的进展;肝炎检测实用新型技术、检测温度、乙肝病毒感染检测是目前研究前沿,近年来一些肝炎检测专利也同时应用于多发性硬化治疗、脱髓鞘疾病、脑和脊髓等研究领域。 展开更多
关键词 肝炎检测 CITESPACE Bibexcel 科学知识图谱
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音画合一:银幕视像与音乐“呼吸”之“艺术同化原则”解析
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作者 韩宜芳 《电影评介》 北大核心 2019年第4期97-100,共4页
苏珊·朗格(SusanneK.Langer)在其《艺术问题》中提出:"当音乐与其他艺术结合时,服从艺术的同化原则。"不同类型的艺术形态结合后,表达强势的一方会遮盖或吞并另一种艺术形态,弱势的艺术品会失去原有的独立性,两者的结合... 苏珊·朗格(SusanneK.Langer)在其《艺术问题》中提出:"当音乐与其他艺术结合时,服从艺术的同化原则。"不同类型的艺术形态结合后,表达强势的一方会遮盖或吞并另一种艺术形态,弱势的艺术品会失去原有的独立性,两者的结合会让强势的艺术形态更加光芒闪耀,形成新的艺术形式。 展开更多
关键词 艺术问题 同化 音乐 解析 呼吸 视像 银幕 艺术形态
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基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测研究
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作者 赵楠 齐永 +12 位作者 李巍 毛颖清 刘文婧 韩一芳 张迩馨 徐应佳 吕瑞辰 蒋宇欣 赖玉珍 李佳萌 沈万鹏 宋悦 李越希 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期658-666,共9页
目的基于规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的特异性识别切割与非特异性的“反式切割”活性,建立易操作、检测限低、特异性好的核酸免扩增可视化快速检测方法—基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增快速检... 目的基于规律成簇间隔短回文重复序列及其相关蛋白(CRISPR/Cas13a)的特异性识别切割与非特异性的“反式切割”活性,建立易操作、检测限低、特异性好的核酸免扩增可视化快速检测方法—基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增快速检测技术。方法参照新型冠状病毒的基因序列,利用生信技术筛选并设计合成多个新型冠状病毒特异的crRNA(CRISPR RNA),以体外转录的通用ssRNA(单链RNA)靶标建立检测技术并优化检测体系,以新型冠状病毒假病毒核酸标准物来评价方法检测限。收集临床样本,其中阳性样本应包含不同的新型冠状病毒变异株,阴性样本包括其他的常见呼吸道病原体(甲型流感病毒/乙型流感病毒、人类副流感病毒、肺炎克雷伯菌等)临床样本。分别用实时荧光定量PCR(qPCR)、数字PCR及本研究建立的免扩增可视化快速检测技术,对各种样本进行检测,分析评价新建立技术的灵敏度和特异度。采用四格表确切概率法针对荧光定量PCR、数字PCR与本技术检测结果进行统计学分析,采用双侧检验,P<0.01为差异有统计学意义。结果本研究设计合成了10条crRNA,用于基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测技术的建立与优化,本技术可在最短6 min内检出新型冠状病毒的核酸。利用新型冠状病毒假病毒核酸标准物评价该技术的检测限,结果显示仪器辅助下本技术检测限为14拷贝/μl,肉眼下检测限为28拷贝/μl。以qPCR和数字PCR确认的113份临床样本对所建立的检测技术进行敏感度和特异度分析,利用相关公式及SPSS22软件计算分析,该检测技术的敏感度98.5%(66/67),特异度100%(46/46),本研究建立的基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒免扩增可视化快速检测技术检测结果与金标准qPCR检测结果差异无统计学意义(P=1)。结论本研究成功建立了一种基于CRISPR/Cas13a的新型冠状病毒核酸免扩增可视化快速检测技术,该技术流程简单、操作便捷,对操作环境要求低,检测限接近qPCR,有较强的现场检测应用潜力。 展开更多
关键词 基因编辑 新型冠状病毒 核酸检测
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酶促重组等温扩增实时荧光法快速检测基孔肯雅病毒方法的建立
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作者 罗正汉 蒯月璋 +6 位作者 韩一芳 叶福强 胡丹 王太武 汪春晖 何君花 张锦海 《国际病毒学杂志》 北大核心 2024年第1期28-32,共5页
目的建立一种快速、准确、高灵敏度检测基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)的逆转录-酶促重组等温扩增(reverse transcription enzymatic recombinase amplification,RT-ERA)的基因检测技术方法.方法以CHIKV非结构蛋白1(non-structu... 目的建立一种快速、准确、高灵敏度检测基孔肯雅病毒(chikungunya virus,CHIKV)的逆转录-酶促重组等温扩增(reverse transcription enzymatic recombinase amplification,RT-ERA)的基因检测技术方法.方法以CHIKV非结构蛋白1(non-structural protein 1,NSP1)基因的保守序列为靶标,根据RT-ERA反应原理设计、合成荧光探针及对应引物,以pUC18为载体构建靶标质粒并在体外转录后作为阳性对照品,将阳性对照品倍比稀释后筛选出扩增效率最高的探针引物组合.利用筛选的探针引物组合,对不同拷贝数的CHIKV进行荧光RT-ERA法扩增,评价该方法的最低检出限;再分别以森林脑炎病毒、登革热病毒、寨卡病毒、乙型脑炎病毒、新布尼亚病毒的RNA为模板进行荧光RT-ERA法扩增,评价该方法的特异性.结果在40℃恒温条件下,利用荧光RT-ERA法10 min内可以完成CHIKV核酸扩增,该方法最低检出限可达10拷贝/μL,且当CHIKV核酸扩增为阳性时,其他病毒检测结果为阴性.结论成功建立一种可用于检测CHIKV NSP1基因的荧光RT-ERA法,该方法操作简便、检测限低且特异性好. 展开更多
关键词 基孔肯雅病毒 逆转录-酶促恒温扩增 NSP1基因
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Theoretical and experimental investigation on a liquid-gas ejector power cycle using ammonia-water 被引量:10
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作者 YUAN han MEI Ning +3 位作者 LI Yan YANG Shuai HU SiYuan han yifang 《Science China(Technological Sciences)》 SCIE EI CAS 2013年第9期2289-2298,共10页
The purpose of this paper is to investigate a novel power cycle using low-temperature heat sources such as oceanic-thermal, biomass as well as industrial waste heat. Both a reheater and a liquid-gas ejector are used i... The purpose of this paper is to investigate a novel power cycle using low-temperature heat sources such as oceanic-thermal, biomass as well as industrial waste heat. Both a reheater and a liquid-gas ejector are used in this ammonia-water based cycle. Energy analysis and parametric analysis are performed to guide the theoretical performance and experimental investigation is done to verify the theoretical results. The results show that the generator pressure, heating source temperature and turbine outlet depressurization made by the ejector can affect the cycle performances. Besides, the experimental thermal efficiency is much lower than the theoretical one on account of the heat losses and irreversibility. Moreover, the performance of liquid-gas ejector is affected by primary flow pressure and temperature. 展开更多
关键词 引射器 实验 循环使用 氨水 液气喷射器 压力发生器 电源 导向性能
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