犬细小病毒临床分离株VP2基因进化分析

为了对犬细小病毒临床分离株的VP2基因进行遗传变异分析,了解本地区犬细小病毒流行的优势型别及病毒变异情况。采集2例患犬细小病毒病的动物粪便,提取病毒基因组,设计特异性引物,PCR扩增VP2基因,对扩增产物测序,对序列结果与同属其他毒株VP2基因序列用MEGA 7和MegAlign进行同源性分析和遗传进化分析。同时比较其氨基酸变异情况。结果显示,PCR扩增出VP2基因,测序结果显示大小为1755 bp,2株病毒VP2基因NCBI序列登录号分别为MH155192和MH155193,MH155192与MF467233.1和JQ743891.1的核苷酸同源性为99.9%,MH155193与KY937651.1、KP260509.1、KY937641.1核苷酸同源性为99.8%。MH155192主要位点氨基酸分别为为267Y,324I,370Q,426D,440A。MH155193主要位点氨基酸分别为267Y,324I,370R,426E,440T。且2株病毒297位均为A。表明分离到的2株病毒分别为新CPV-2b和CPV-2c型。

Synthesis, Crystal Structure and Biological Evaluation of 6'-Chloro-4'-methylene-3H-spiro[isobenzofuran-1,3'-isochroman]

The title compound 6?-chloro-4?-methylene-3 H-spiro [isoben zofura-1,3?-isochroman], C_(17)H_(13)ClO_2, was prepared and characterized by IR, NMR, HRMS and single-crystal X-ray diffraction. This compound has a bisbenzannulated [5,5]-spiroketals skeleton. It crystallizes in orthorhombic, space group P212121 with a = 13.383(3), b = 7.6120(17), c = 13.793(3) ?, Z = 4, Dc= 1.275 g/cm^3, μ = 0.28 mm^(–1), F(000) = 592, wR = 0.1443 and R = 0.0557. The preliminary biological test showed that the title compound has good anti-bacterial activities in vitro.

利用超临界CO2萃取法提取西藏白花杜鹃花中活性成分及GC-MS初步分析

确定超临界CO2萃取西藏白花杜鹃花的最优工艺条件和初步鉴定其提取物的化学成分。以提取率为评价指标,利用正交试验对西藏白花杜鹃花超临界CO2萃取有效成分条件进行了优化,采用气相色谱-质谱联用技术(gas chromatgraphy-mass spectrometry,GC-MS)分析了萃取物的化学成分。结果表明,超临界CO2萃取西藏白花杜鹃花的最优提取工艺为开花期白花杜鹃的花粉碎为200目、萃取压力25 MPa、萃取温度为40℃、反应时间2.5 h,GC-MS检测分离出24种含量较高的化合物。由此可得,经与质谱谱图数据库比对,初步鉴定主要为烷烃及其含氧衍生物(62.32%)、烯和醇(8.09%)、酯(4.87%)等化合物,其中含有提高机体免疫力和抗肿瘤作用的角鲨烯(含量达4.79%)等药用活性成分,具有很好的研究开发前景。

超临界CO2萃取法提取西藏红花杜鹃叶中化学成分及其GC-MS初步分析研究

确定超临界CO2萃取西藏红花杜鹃叶的最优提取工艺,并初步鉴定分析其提取物的主要化学成分组成。以提取率为评价指标,利用正交优化法对开花期西藏红花杜鹃叶进行超临界CO2萃取,采用气相色谱-质谱联用技术(gas chromatgraphy-mass spectrometry,GC-MS)对提取物进行化学成分分析。超临界CO2萃取西藏红花杜鹃叶的最优工艺条件为将红花杜鹃叶粉碎为200目、萃取压力20 MPa、萃取温度为40℃、反应时间2.5 h,GC-MS检测分离出了23种含量较高的化合物。经与质谱谱图数据库比对,西藏红花杜鹃叶超临界CO2萃取提取物主要为烷烃(39.54%)、酯(26.94%)、烯(24.48%)、酰胺类(8.78%)等化合物。

牛至、香茅、丁香精油化学成分及体外抑菌活性研究

采用滤纸片法、肉汤稀释法和点种法研究3种植物精油及其化学成分对5种病原菌的体外抑菌活性。用气相色谱-质谱联用技术(gas chromatography-mass spectrometer,GC-MS)最佳分析条件对化学活性成分进行鉴定,用峰面积归一法测定各化合物在挥发油中的相对百分含量。结果表明:9.5%的牛至、香茅、丁香精油可将白色葡萄球菌、白色念珠菌全部杀灭;4.75%的牛至、香茅、丁香精油可将金黄色葡萄球菌全部杀灭;4.75%牛至、丁香精油可将大肠埃希菌全部杀灭,但香茅精油杀灭浓度相对较弱;3种精油对铜绿假单胞菌的杀灭浓度均大于9.5%;GC-MS结果显示,牛至精油中主要含有双戊烯(33.93%)、百里香酚(19.12%)、4-萜品醇(14.92%)、α-蒎烯(10.87%);丁香精油主要成分为丁香酚(86.54%),1-石竹烯(10.41%);香茅精油主要包括香茅醛(31.38%)、香叶醇(18.43%);植物精油具有广谱的抑菌活性。

三种植物精油化学成分分析及体外抑菌活性研究

为了研究肉桂、山苍子、迷迭香植物精油化学成分及体外抑菌活性,采用滤纸片法测定抑菌圈直径,通过肉汤稀释法和点种法测定其最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC),并通过气相-质谱法(GC-MS)测定各植物精油的成分及含量。结果显示,肉桂精油浓度在1.118%时就可将5种病原菌全部杀灭;山苍子精油浓度在4.75%时可将S.albus、S.aureus、E.coli、C.albians杀灭,而对P.aeruginosa的杀灭浓度大于9.5%;迷迭香精油在浓度9.5%可将S.albus、S.aureus、C.albicans杀灭,而对E.coli、P.aeruginosa的杀灭浓度大于9.5%。GC-MS结果显示,肉桂精油主要组分为肉桂醛(83.57%)、2′-甲氧基肉桂醛(5.96%),香豆素(2.90%);山苍子精油包括柠檬醛(21.45%)、双戊烯(21.88%)、(Z)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯醛(20.96%);迷迭香精油主要含有α-蒎烯(24.09%)、桉树脑(25.81%)、左旋樟脑(25.09%)、异龙脑(9.28%)。结果表明,3种植物精油具有广谱的抑菌活性,能够为开发新型、绿色、安全、高效的抗生素替代品提供理论依据。

茶树精油的化学成分检测及其抑菌效果

【目的】研究茶树精油的化学成分及抑菌效果.【方法】通过管碟法、肉汤稀释法和点种法对茶树精油抑菌活性进行探讨,并用GC-MS法采用最佳分析条件对化学成分进行鉴定,用峰面积归一法测定各化合物在挥发油中的相对百分含量,通过BCA试剂盒及扫描电子显微镜对其抑菌效果进行观察.【结果】茶树精油中含有44个组分,鉴别出35种化合物,包括烯类(44.26%)、醇类(44.92%)、烷烃类(8.01%)、极少的酸和醚类.茶树精油对供试菌均具有较好的抑制作用,抑菌圈直径介于18.51~28.24 mm之间,最小抑菌浓度(MIC)在1.32~5.27 mg/mL之间,最小杀灭浓度(MBC)在2.64~21.09 mg/mL之间.【结论】茶树精油对金黄色葡萄球菌的抑菌作用位点可能位于细胞膜上,导致菌体细胞变形,胞内蛋白质泄漏,菌体逐渐被分解为碎片而死亡.

疯草内生真菌研究进展

疯草内生真菌Undifiumn oxytropis是由分布于我国西北地区的疯草中分离得到的一类内生真菌,其代谢产物苦马豆素(swainsonine,SW)具有良好的抗肿瘤活性,还能导致牛、羊疯草中毒,对我国草原畜牧业造成了严重的危害。论文对疯草内生真菌的分布、生长特性、SW抗肿瘤活性以及疯草内生真菌生物合成SW的研究进展做一综述,为有关研究提供参考。

茶树精油兽用消毒剂中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇检测方法的建立

通过检测茶树精油兽用消毒剂中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的含量,并建立茶树精油中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的气相色谱检测方法,为茶树精油新制剂的质量标准研究提供理论依据。采用水蒸气蒸馏法先将茶树精油兽用消毒剂中的茶树精油提取出来,再用GC法测定提取的挥发油中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的含量。茶树精油兽用消毒剂不同批次中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇含量保持稳定;1,8-桉叶素在0.013mg/mL～0.41 mg/mL之间具有良好的线性关系(r=0.999 98),松油烯-4-醇在0.175 mg/mL～5.575mg/mL之间具有良好的线性关系(r=0.999 93),1,8-桉叶素的平均加样回收率为99.19%,RSD为1.89%(n=6),松油烯-4-醇的平均加样回收率为102.58%,RSD为1.45%(n=6)。该方法能够简便、准确、快速的测定茶树精油兽用消毒剂中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的含量,可为茶树精油兽用消毒剂的质量评价提供依据。

菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌体内外抑菌活性研究

研究菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌的体内外抑菌活性作用。用传统水煎法制备菪可轮蒲水煎液,用HPLC法测定菪可轮蒲水煎液中龙胆苦苷浓度,并用龙胆苦苷浓度标定复方药物浓度,分别采用牛津杯法和宏量肉汤稀释法测定菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),通过建立死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型,测定浓度为0.0232mg/mL的菪可轮蒲水煎液,在感染前和感染后给药方式下,分别给予0.1、0.3、0.5mL药物时对小鼠多杀性巴氏杆菌感染的预防和治疗作用。结果显示,菪可轮蒲水煎液浓度为0.0464mg/mL时,对多杀性巴氏杆菌的抑菌圈平均直径为13.5mm,MIC值为0.0029mg/mL,经病理剖检、细菌镜检、全自动微生物鉴定及药敏系统(VITEK2COMPACT)细菌鉴定,表明死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型建立成功,且预防组各组和治疗组各组小鼠死亡率依次为58.3%、41.7%、83.3%、66.7%、58.3%和91.7%。综合以上试验结果,菪可轮蒲水煎液对多杀性巴氏杆菌具有良好的体内外抑菌活性,且其预防作用较治疗作用明显。

产苦马豆素疯草内生真菌及苦马豆素研究进展

疯草(Locoweed)是黄芪属、棘豆属和苦马豆属中含苦马豆素(swainsonine,SW)有毒植物的统称,具有抗旱耐寒,分布广泛的特性。牲畜长期采食疯草会引起蓄积性中毒,严重时导致死亡,严重危害了我国草原畜牧业的可持续发展。疯草内生真菌是疯草具有毒性的根本原因,其毒性代谢产物即苦马豆素。论文对疯草在中国的种类与分布、疯草与内生真菌互作关系、疯草内生真菌种属及检测方法、疯草内生真菌传播方式与内生真菌育种;苦马豆素的来源、毒理机制及生物合成通路最新研究进展做一综述,以期为疯草植株及其内生真菌的改造利用方面提供参考。

益生菌发酵中药研究进展

益生菌对于平衡动物胃肠道菌群有着重要影响,其在生长繁殖过程中会产生多种活性酶及其他代谢产物。中药经益生菌发酵后,其有效活性成分得到充分利用的同时还可促进动物生长、提高免疫力,具有无抗、低残留、绿色安全等优点,是替代抗生素的理想饲料添加剂,在畜牧业中的发展前景十分广阔。论文从益生菌发酵中药的作用机理、种类、特征、菌种选择及条件优化等方面分别进行了阐述,为研发新型饲料添加剂提供一定的参考。

翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌体外抑菌活性及小鼠感染模型的防治效果研究

研究翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌的体外抑菌活性及小鼠感染模型的防治效果。利用传统水煎法制备翼草景香水煎液,用HPLC方法测定翼草景香水煎液中红景天苷浓度,并用红景天苷浓度标定翼草景香水煎液药物浓度,分别采用牛津杯法和试管2倍稀释法测定翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC),通过建立死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型,测定翼草景香水煎液浓度为0.12316 mg/m L时,在感染前和感染后给药方式下,分别给与0.1、0.3、0.5 m L药物时对小鼠的体内感染防治作用。结果表明,当翼草景香水煎液浓度为0.49263 mg/m L时,抑菌圈平均直径为28.5 mm; MIC值为0.00385 mg/m L,经病理解剖、细菌镜检、全自动微生物鉴定及药敏系统(VTEK 2 COMPACT)系统细菌鉴定,表明死亡率为75%的多杀性巴氏杆菌体内感染小鼠模型建立成功,当水煎液浓度为0.12316 mg/m L时,0.1、0.3、0.5 m L预防组和治疗组小鼠死亡率分别依次为50%,41.7%,81.8%,66.7%,50%和75%。因此,翼草景香水煎液对多杀性巴氏杆菌具有良好的体内、外抑菌活性,且其预防作用较治疗作用明显。

Effect of the Extract from Hypericum perforatum on Highly Pathogenic Avian Influenza Virus(HPAIV)

[Objective] The aim was to study the effects of the extract from Hypericum perforatum on highly pathogenic Avian Influenza Virus(HPAIV)in vivo.[Method] Chickens infected with H5N1 virus were treated with the extract from H.perforatum for 4 d.The virus was then detected by hemoagglutination(HA)test and reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR).[Result] No H5N1 virus could be detected at the 7th d when the chickens were treated with 0.2 or 0.1 g/(kg·d)of the extract from H.perforatum.However,the virus could be detected in other chickens without the extract from HPE treatment.[Conclusion] The extract from H.perforatum might be a potential drug candidate to control infection of H5N1 subtype AIV in chickens.

供热工程全生命周期智能管理平台研究

城市供热工程的主体位于地层内部,工程的设计、施工和运营涉及的数据量大,数据类型多,工程的管理需要投入大量的人力物力,且难以实现全面、直观的管理。为解决这些问题,本文引入开源Cesium三维可视化引擎及开源PostgreSQL数据库,研发了一套具有自主知识产权的三维WebGIS平台,平台可以规划阶段的供热线路路径设计功能、施工阶段的实时监测功能,以及用于运营管理的三维浏览、信息查询、以及空间分析的功能。

牦牛漫游球菌的分离与生物学特性鉴定

为探究1只牦牛屠宰后肝脏有干酪样结节形成的原因,对肝脏进行细菌的分离培养,对分离到的1株细菌的16S rRNA和16S～23S rRNA基因序列用通用引物扩增和并用NCBI blast和MEGA 7进行序列分析,并用Vitek 2全自动微生物鉴定仪进行生化表型的鉴定,用K-B法进行药敏试验,结果显示:该菌的16S rRNA为1 524 bp,NCBI GenBank登录号为MG753544.1,与水獭漫游球菌的同源性较高,16S～23S rRNA有大小不同的2个片段,分别为522,425 bp,NCBI GenBank登录号分别为MG758122.1和MG758123.1。Vitek 2全自动微生物鉴定仪鉴定为迟缓葡萄球菌。该菌对妥布霉素、头孢哌酮、米诺环素等多种药物高度敏感,对苯唑西林、头孢西丁有抗性。结果表明,分离出的细菌为漫游球菌,该菌是否具有致病性还有待进一步试验验证。

青蒿新品种“科蒿1号”的选育研究

青蒿是抗疟疾一线药物青蒿素的天然植物来源,其青蒿素含量的高低直接影响着后续青蒿素的提取工艺和青蒿素的提取量。目前常常使用传统育种方法结合组织培养等进行选育高产青蒿素的青蒿新品种,但该选育方法具有效率低,需要持续选育等缺点。该研究利用重离子束辐照技术以青蒿栽培群体特异性种质资源为材料,以形态特征、农艺性状和青蒿素含量为指标,观察历代选育材料,进行品比试验和区域试验,培育新品种,并对该品种进行了SRAP分子标记技术鉴定。结果发现,选育的青蒿新品种"科蒿1号",平均干叶亩产量235.0 kg,较对照增产20%以上;平均青蒿素质量分数为2.0%,比对照提高45%,高抗白粉病,为高产优质新品种。重离子束辐照诱变育种可明显提高青蒿产量和青蒿素含量,"科蒿1号"具有良好的推广价值。

白花杜鹃水提液对多房棘球蚴的体外杀灭和体内感染疗效的研究

为研究白花杜鹃水提液对多房棘球蚴--原头蚴的体外杀灭作用,以及对多房棘球蚴感染小鼠的治疗作用,通过在体外原头蚴培养体系中分别添加白花杜鹃水提液生药质量浓度分别为10、20和40 mg/mL,以阿苯达唑伊维菌素培养基(阿苯达唑的质量浓度为20 mg/mL、伊维菌素的质量浓度为0.83 mg/mL)、阿苯达唑伊维菌素溶剂培养基和常规培养基分别作为对照组进行原头蚴的培养,分别经第0、12小时和第1、2、3、4、5、6、7天观察记录各药物对原头蚴的杀灭效果,并于第7天通过台盼蓝染色比较各组死亡率;将50只感染多房棘球蚴1个月的雌性BALB/c小鼠随机分为5组,每组10只,依次为白花杜鹃水提液低剂量(10 mg/mL,RL组)、中剂量(20 mg/mL,RM组)、高剂量(40 mg/mL,RH组)治疗组,阿苯达唑伊维菌素治疗组(C组),感染不治疗组(IT组),另包括10只健康小鼠作为空白对照组(B组),各组小鼠连续灌胃给药后第7天,第30天后剖检,对小鼠脏器及棘球蚴组织固定并做石蜡切片进行病理学观察。结果显示,白花杜鹃水提液低、中、高剂量组,阿苯达唑伊维菌素溶液组,溶剂对照组以及空白对照组原头蚴培养后第7天后,原头蚴的死亡率分别为54.00%、56.53%、89.27%、57.60%、19.27%和15.80%,白花杜鹃高剂量组与对照组相比差异极显著(P<0.01)。多房棘球蚴感染小鼠腹部明显肿胀,剖检可见腹腔内有大量大小不等的包囊。石蜡切片结果表明,RH组小鼠脏器病变程度最低,且RH组和C组小鼠体内少量包囊发生钙化。研究表明,白花杜鹃水提液对体外原头蚴具有杀灭作用,且40 mg/mL白花杜鹃水提液对小鼠感染多房棘球蚴有一定的治疗作用。

产苦马豆素疯草内生真菌U.oxytropis的发酵培养及苦马豆素检测方法的建立

通过对生长初期疯草内生真菌U.oxytropis菌丝复苏后连续培养32d,每隔4d取样1次,并设3个平行培养组,测定其不同培养时期菌丝干重变化,利用超声减压旋蒸法提取菌丝和发酵液中苦马豆素(SW),并分别利用薄层层析法、气相色谱法和α-甘露糖苷酶抑制法对菌丝、发酵液中SW含量进行测定。结果显示,经测定疯草内生真菌U.oxytropis菌丝干重质量,确定疯草内生真菌U.oxytropis生长周期为24d;薄层层析法、气相色谱法和α-甘露糖苷酶抑制法都可快速对菌丝和发酵液中提取的SW进行定性、定量检测,并比较3种检测方法,发现气相色谱法检测限低、灵敏度更高。本试验完成了疯草内生真菌U.oxytropis生长周期的测定,并建立了菌丝、发酵液中SW的有效、快速提取及检测方法,为下一步产苦马豆素疯草内生真菌U.oxytropis生物合成机理的研究奠定基础。