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CRISPR /Cas9基因编辑技术在山羊和绵羊中的应用研究进展 被引量:3
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作者 宋绍征 陆睿 +4 位作者 张婷 何正义 吴赵曼秋 成勇 周鸣鸣 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期62-68,共7页
CRISPR/Cas9系统是近年来新兴的一种基因编辑技术,可将特定DNA基因序列敲除、插入或定点突变,具有快捷、高效、精准、特异性高等特点,广泛地应用于遗传育种、生物医药和基因工程等研究领域。山羊和绵羊是重要的经济家畜动物和实验动物,... CRISPR/Cas9系统是近年来新兴的一种基因编辑技术,可将特定DNA基因序列敲除、插入或定点突变,具有快捷、高效、精准、特异性高等特点,广泛地应用于遗传育种、生物医药和基因工程等研究领域。山羊和绵羊是重要的经济家畜动物和实验动物,利用CRISPR/Cas9基因编辑系统对羊进行遗传修饰,将加速品种改良,提高动物生产性能,获得更加优质的农副产品。主要对CRISPR/Cas9基因编辑技术的概述、作用机理及在羊乳"人源化"改造、提高肉品质、改善毛纤维质量等方面的应用研究进展及发展前景作简要阐述,以期为相关科研人员提供参考。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 基因编辑 基因组 遗传 山羊 绵羊
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间充质干细胞在肝纤维化治疗中的研究进展 被引量:1
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作者 康艳敏 叶俊松 +5 位作者 邹征伟 张敏鸿 刘书画 李艺 何正义 叶军明 《赣南医学院学报》 2021年第1期71-77,共7页
肝纤维化是各种慢性肝损伤,如病毒性肝炎、酒精、药物、代谢性疾病和肝细胞自身免疫调节失调等原因导致的以肝组织中细胞外基质过度沉积为特点的慢性病理过程,最近研究表明肝纤维化过程是可逆的。间充质干细胞(MSCs)是一类具有持续自我... 肝纤维化是各种慢性肝损伤,如病毒性肝炎、酒精、药物、代谢性疾病和肝细胞自身免疫调节失调等原因导致的以肝组织中细胞外基质过度沉积为特点的慢性病理过程,最近研究表明肝纤维化过程是可逆的。间充质干细胞(MSCs)是一类具有持续自我更新、增殖、多向分化和免疫调节活性的成体干细胞,MSCs通过肝源性分化、与肝细胞融合、旁分泌效应和免疫调节,直接或间接消除细胞外基质的沉积,有助于瘢痕组织的降解和促进肌成纤维细胞凋亡,成为治疗肝纤维化最具潜力的种子细胞。本文就间充质干细胞在肝纤维化疾病中的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 肝纤维化 间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 脐带间充质干细胞 脂肪间充质干细胞
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同源臂长度对CRISPR/Cas9介导hLF基因打靶山羊β-乳球蛋白位点效率的影响 被引量:1
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作者 李丹 周鸣鸣 +2 位作者 何正义 吴赵曼秋 宋绍征 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期182-190,共9页
【目的】探究同源臂长度对CRISPR/Cas9系统介导人乳铁蛋白基因(hLF)打靶山羊β-乳球蛋白基因(BLG)座位点效率的影响,为今后体细胞核移植制备BLG-/hLF+基因打靶山羊提供科学依据,也为CRISPR/Cas9基因编辑系统介导BLG基因或其他基因座位... 【目的】探究同源臂长度对CRISPR/Cas9系统介导人乳铁蛋白基因(hLF)打靶山羊β-乳球蛋白基因(BLG)座位点效率的影响,为今后体细胞核移植制备BLG-/hLF+基因打靶山羊提供科学依据,也为CRISPR/Cas9基因编辑系统介导BLG基因或其他基因座位点定向精准分子修饰的遗传育种提供借鉴。【方法】针对山羊BLG基因第一外显子区域设计构建sgBLG/Cas9载体,电转染山羊胎儿成纤维细胞,PCR验证BLG基因座位点致突变活性;以BLC14乳腺特异性表达载体为基础构建3种同源臂长度(6.0、3.5和1.2 kb)的hLF基因打靶载体,分别与sgBLG/Cas9载体共转染山羊胎儿成纤维细胞,经500μg/mLG418筛选后,采用PCR检测基因打靶情况。【结果】sgBLG/Cas9载体在山羊胎儿成纤维细胞BLG基因座附近切割DNA双链的致突变活性效率在30%~35%。构建获得3种同源臂长度的hLF基因打靶载体(BLC14-1、BLC14-2和BLC14-3),对应的同源臂长度分别为6.0、3.5和1.2 kb;将3种hLF基因打靶载体与sgBLG/Cas9载体共转染山羊胎儿成纤维细胞,经5次电转染和G418筛选,分别获得83、77和86株药物抗性细胞,经PCR同源重组检测最终获得42、38和44株BLG-/hLF+基因打靶细胞株,即hLF基因在山羊胎儿成纤维细胞BLG基因座的平均打靶效率分别为50.6%(42/83)、49.4%(38/77)和51.2%(44/86)。3种不同长度同源臂构建的hLF基因打靶载体在山羊BLG基因座位点的打靶效率在统计学上无显著差异(P>0.05),表明同源臂长度对CRISPR/Cas9介导hLF基因打靶山羊BLG基因座位点无显著影响。【结论】利用CRISPR/Cas9系统介导hLF基因打靶山羊胎儿成纤维细胞BLG基因座位点能成功获得多株hLF+/BLG-基因打靶细胞株(BLG基因座定点打靶hLF基因),但打靶载体同源臂长度对CRISPR/Cas9系统介导BLG位点定向整合hLF基因的打靶效率无明显影响。 展开更多
关键词 山羊 CRISPR/Cas9 基因打靶 同源臂长度 β-乳球蛋白基因(BLG) 人乳铁蛋白基因(hLF)
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自闭症康复治疗的现状与进展 被引量:1
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作者 屈家阳 何正义 +3 位作者 李林材 邹征伟 王茂源 叶俊松 《赣南医学院学报》 2022年第5期529-535,共7页
自闭症是一种以重复刻板行为、社交能力障碍以及兴趣狭窄为主要表现的神经发育障碍。自闭症发病机制至今并未明确,且无特效药物,目前国内自闭症的群体仍不断增长,给家庭及社会都带来了极大压力。合适的治疗方案会改善自闭症儿童的核心症... 自闭症是一种以重复刻板行为、社交能力障碍以及兴趣狭窄为主要表现的神经发育障碍。自闭症发病机制至今并未明确,且无特效药物,目前国内自闭症的群体仍不断增长,给家庭及社会都带来了极大压力。合适的治疗方案会改善自闭症儿童的核心症状,因此,在众多干预手段中选择适当的方法极为重要。然而,目前自闭症康复行业存在乱象,各个机构的专业度参差不齐。本文对数种干预方法及其作用进行梳理,目前除了康复机构常规开展的治疗方法,如言语治疗、感统训练、行为干预和结构化训练等,艺术疗法、同伴支持治疗及动物辅助治疗等也逐渐兴起,弥补了传统训练方法的不足。通过干细胞治疗自闭症是基于细胞技术治疗自闭症的一种新方法,有望从细胞分子层面改善自闭症核心症状。鉴于自闭症的异质性,单一的治疗方法并不可取,干细胞的注射治疗综合各种康复治疗手段的干预将是未来自闭症治疗的新模式。 展开更多
关键词 自闭症 康复治疗 干细胞治疗
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The cross-sectional and longitudinal association of the BODE index with quality of life in patients with chronic obstructive pulmonary disease 被引量:9
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作者 LIN Ying-xiang XU Wan-ning +12 位作者 LIANG Li-rong PANG Bao-sen NIE Xiu-hong ZHANG Jie WANG Hong LIU Yu-xiang WANG Dan-qi XU Zhen-yang WANG Hong-wu ZHANG Hu-sheng he zheng-yi YANG Ting WANG Chen 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2009年第24期2939-2944,共6页
Background The body mass index, airflow obstruction, dyspnea, and exercise capacity (BODE) index was shown at predicting the risk of death, exacerbation and disease severity among patients with COPD, but few studies... Background The body mass index, airflow obstruction, dyspnea, and exercise capacity (BODE) index was shown at predicting the risk of death, exacerbation and disease severity among patients with COPD, but few studies verified relationship between BODE index and health related quality of life (HRQoL) among Chinese COPD patients. The objective of this study was to evaluate the relationship between BODE index and HRQoL in cross-sectional and longitudinal association analyses. Methods A multi-center prospective cohort study was initially conducted in 491 stable COPD patients in Beijing, China. Health status (HRQoL) was assessed by St. George's Respiratory Questionnaire (SGRQ); the BODE index was calculated for each patient; dyspnea was assessed using the 5-grade Medical Research Council dyspnea scale. Other measurements included socio-demographic, body mass index (BMI), lung function test and 6-minute-walk test (6MWT). Patients were then followed monthly for 12 months. Results Only 450 patients completed the 1-year follow up and were enrolled in our present analyses. Mean age was (65.2 ±10.6)years,' men 309 (68.7%). The BODE index was categorized into 4 subgroups: 0-2, 3-4, 5-6 and 7-10. At baseline BODE index was gradually increased with baseline total SGRQ and SGRQ subscales (P trend 〈0.001). For individual components of BODE index, with the decrease of airflow limitation, and 6MWD, and with the increase of Medical Research Council (MRC) dyspnea grade, total SGRQ and SGRQ subscales were increased correspondingly, P trend 〈0.05, respectively. Similar association patterns were found between baseline BODE index and its individual components and mean SGRQ scores at the end of 1-year follow up. By multiple linear regression analyses, baseline BODE index was not only significantly associated with SGRQ score at baseline but also with SGRQ score at the end of 1-year follow up after adjustment for age, male, current smoking, 13s being 0.434 and 0.378, respectively. Conclusions BODE index is associated with SGRQ score cross-sectionally and longitudinally among stable COPD patients. BODE index might have potential to be used as a sensitive tool to assess the status of quality of life and to monitor disease progression among stable COPD patients. 展开更多
关键词 chronic obstructive pulmonary disease BODE index health-related quality of life St. George's RespiratoryQuestionnaire
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