猪肺炎支原体和猪鼻支原体TaqMan双重荧光PCR检测方法的建立及应用

为建立一种可快捷鉴别检测猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的方法,针对Mhp的183基因和Mhr的p37基因保守片段,分别设计合成引物及TaqMan探针,优化反应条件,建立一种可同时检测Mhp和Mhr的TaqMan双重荧光PCR方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果表明,该方法特异性强,检测其他常见猪呼吸系统病原不发生交叉反应;对标准品pMD18-T-Mhp-183、pMD18-T-Mhr-P37的最低检测限分别达45.2 copies/μL和29.7 copies/μL,比普通PCR检测灵敏度提高10^(3)~10^(4)倍;该方法检测结果的批内与批间变异系数均小于2%。用该方法检测145份广西自治区内临床样品,从中检出82份Mhp和9份Mhr阳性样品。该方法可用于临床样品快速检测及实验室Mhp和Mhr的鉴定,可为Mhp和Mhr在猪群中的早期监测提供技术支持。

“兽医病理生理学”混合式教学课程改革与实践

“兽医病理生理学”是农学范畴中兽医学科重要的专业基础理论课程,课程内容繁杂,理论性强,知识点抽象,传统“填鸭式”教学不能很好地达成课程教学目标,实现人才培养目标。“兽医病理生理学”课程教研组根据社会人才需求、专业毕业要求、人才培养方案,通过修订课程教学目标,优化课程教学内容,开展病例教学,优化课程评价体系,建设“互联网+”线上线下混合教学模式、教学方法、学习方式、考核方式和教学制度,构建以学生为中心、承载课程思政、培养新型农林“五有”领军型人才的“兽医病理生理学”现代化教育课程体系。

黄芩苷对GBS诱导小鼠乳腺炎症反应的干预作用及机制

为明确黄芩苷对无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,GBS)诱导的小鼠乳腺组织炎症反应的干预作用及机制,本研究将分娩后7 d~10 d的40只健康BALB/c泌乳小鼠随机分为阴性对照组、感染组、高中低剂量黄芩苷治疗组(20 mg/kg、40 mg/kg和80 mg/kg)。感染组和治疗组以GBS感染BALB/c小鼠,治疗组于感染24 h后每6 h经乳导管灌注相应剂量的黄芩苷一次,连续4次,最后一次给药6 h后摘取乳腺组织,HE染色后观察乳腺组织病理变化;利用RT-q PCR和间接ELISA检测各组小鼠乳腺组织中炎症因子及NLRP3炎症小体通路相关因子m RNA的相对转录水平及分泌水平;利用免疫组化试验检测各组小鼠乳腺组织中NLRP3蛋白的定位及含量的变化。组织病变观察可见,GBS感染可导致小鼠乳腺上皮细胞坏死、脱落,乳腺腺泡腔固有结构消失;与感染组相比,各治疗组不同浓度的黄芩苷均可减轻小鼠乳腺组织病理损伤。RT-q PCR检测结果显示,感染组小鼠乳腺组织中IL-1β、IL-6和TNF-αm RNA的相对转录水平显著或极显著高于阴性对照组小鼠(P<0.05或P<0.01);与感染组相比,各治疗组显著或极显著(P<0.05或P<0.01)下调IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、Caspase-1、NLRP3和ASC基因m RNA的相对转录水平。ELISA检测结果显示,与感染组相比,各治疗组小鼠灌注不同浓度的黄芩苷可极显著(P<0.01)下调乳腺组织中IL-1β、Caspase-1和NLRP3蛋白的分泌水平,且免疫组化试验结果显示各治疗组小鼠乳腺组织中NLRP3蛋白分布减少。综上所述,40 mg/kg黄芩苷降低小鼠乳腺炎症反应效果最好,可更有效下调NLRP3炎症小体通路相关基因m RNA相对转录水平,抑制NLRP3炎症小体活化,降低乳腺组织炎症因子m RNA相对转录和分泌水平,缓解GBS诱导的小鼠乳腺组织炎性损伤。本研究为应用黄芩苷治疗GBS感染导致的奶牛乳腺炎提供了参考依据。

猪肺炎支原体、猪圆环病毒2型和3型多重荧光定量PCR检测方法的建立与初步应用

为建立一种快速、特异的猪肺炎支原体(Mhp)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的多重荧光定量PCR鉴别检测方法,根据Mhp、PCV2和PCV3及β-actin基因保守区域序列,设计合成4对特异性引物及4种荧光基团标记的Taq Man探针。构建含有各目的基因的重组质粒标准品,筛选引物,优化反应条件,成功建立多重荧光定量PCR后评价该方法的特异性、敏感性、重复性并将该方法初步应用于临床样品检测。结果显示,该方法能同时特异性地鉴别检测Mhp、PCV2和PCV3,检测PRRSV、CSFV、PRV、JEV、PPV、PEDV、TGEV、FMDV病毒核酸无交叉反应;对Mhp、PCV2、PCV3和β-actin标准质粒的最小检出量分别为26.4、66.7、25.6、5990 copies/μL;该方法重复性好,组间和组内试验变异系数低于1.5%;用该方法检测101份临床样本,Mhp、PCV2和PCV3阳性率分别为20.8%、36.6%和33.7%。建立的多重荧光定量PCR方法能同时快速和定量检测Mhp、PCV2和PCV3,较普通PCR更敏感,实用性强,有效避免了多次检测耗时长、费用高的问题,为Mhp、PCV2和PCV3的监测和防控提供了可靠的检测技术。

莽草酸对PEDV感染仔猪生长性能、腹泻指数、血清免疫及抗氧化指标的影响

试验旨在研究莽草酸对感染猪流行性腹泻病毒(PEDV)仔猪的生长性能、腹泻指数、血清免疫及抗氧化指标的影响。将120头感染PEDV的7日龄“杜×长×大”仔猪随机分为6组,每组5个重复,每个重复4头猪。处理1组、2组、3组分别每日给感染PEDV仔猪灌服800、400、200 mg/kg莽草酸,处理4组每日给感染PEDV仔猪灌服400 mg/kg绿原酸,处理5组每日给感染PEDV仔猪灌服2万单位庆大霉素,处理6组为阳性对照组,另选选择20头健康仔猪作为空白对照组。试验期为5 d,之后观察3 d。结果显示,与阳性对照组相比,处理1组、2组、3组仔猪平均日增重(ADG)均显著升高(P<0.05)。处理1组和2组仔猪的PEDV感染治愈率均达到85%,处理5组仔猪的PEDV感染治愈率为65%;处理1组、2组、3组仔猪血清中的免疫球蛋白G(IgG)含量均显著升高(P<0.05);处理1组、2组、3组仔猪血清中的总超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、髓过氧化物酶(MPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0.05);丙二醛(MDA)、黄嘌呤氧化酶(XOD)水平显著降低(P<0.05)。研究表明,莽草酸能够提高仔猪的生长性能,降低腹泻指数,增强血清免疫力和抗氧化能力,对PEDV感染仔猪具有抗病促生长作用。

山豆根多糖通过JAK-STAT/NF-κB信号通路干预PCV2感染免疫细胞炎性反应及免疫抑制的研究

试验旨在探究山豆根多糖(SSP)对猪圆环病毒2型(PCV2)感染小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7)炎性反应及免疫抑制的调节作用。SSP (100、200、400 mg/L)处理PCV2感染RAW264.7细胞16 h后,测定信号转导与转录激活子1、2 (STAT1、STAT2)、Janus激酶1 (JAK1)、酪氨酸激酶2 (TYK2)、趋化因子C-C配体3 (Ccl3)、趋化因子C-X-C配体2 (CXCL2)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、REL原癌基因(REL proto-oncogene)、NF-κB亚基(Rel)、B细胞增强剂κ轻链基因增强剂α、δ核因子抑制因子(Nfκbia、Nfκbid)和B细胞增强剂κ轻链基因增强剂ζ核因子抑制因子(Nfκbiz)的mRNA表达。测定细胞中磷酸化前后信号转导与转录激活子1、2 (Stat1、Stat2、p-Stat1、p-Stat2)、磷酸化前后核因子κB抑制因子(IκB、p-IκB)、磷酸化前后核因子κB亚单位p65 (p65、p-p65)、CXCL2,磷酸化前后的Janus激酶1 (JAK1、p-JAK1)和TYK2的蛋白表达水平。测定细胞上清白细胞介素-1β (IL-1β)、干扰素-α (IFN-α)、干扰素-β (IFN-β)和TNF-α的水平。结果显示,PCV2感染RAW264.7细胞16 h后,STAT1、STAT2、JAK1、TYK2和Nfκbia的mRNA表达水平显著上调(P<0.05),Ccl3、CXCL2、TNF-α、Rel、Nfκbid和Nfκbiz的mRNA表达水平显著下调(P<0.05);Stat1、p-Stat1、Stat2、p-Stat2、JAK1、p-JAK1和Tyk2的蛋白表达水平显著上调(P<0.05),IκB、p-IκB、p65、p-p65和CXCL2的蛋白表达水平显著下调(P<0.05),200 mg/L SSP可以显著干预上述因子表达水平的异常表达(P<0.05)。研究表明,SSP通过Janus激酶-信号传导及转录激活因子/核因子激活的B细胞的κ-轻链增强(JAKSTAT/NFκB)信号通路调节PCV2感染诱导的炎性反应和免疫抑制。

黄芪多糖脂质体对肉鸡生长性能及免疫器官指数的影响

【目的】探讨不同添加剂量的黄芪多糖脂质体对肉鸡生长性能及免疫器官指数的影响,为黄芪多糖的临床推广提供参考。【方法】在肉鸡日粮中添加不同剂量的黄芪多糖脂质体,于试验第14、28及42天计算其平均日增重、饲料转化率、特定生长率、胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。【结果】黄芪多糖脂质体能够显著提高肉鸡平均日增重、饲料转化率、特定生长率、胸腺指数、脾脏指数和法氏囊指数。【结论】提高肉鸡生长性能的最佳黄芪多糖脂质体添加剂量为100 m L/kg,连续添加14 d效果最佳。提高肉鸡免疫器官指数的最佳黄芪多糖脂质体添加剂量为50 m L/kg,连续添加28~42 d效果最佳。

2013～2018年广西部分规模猪场主要病毒性腹泻疫病流行病学调查研究

为了解广西壮族自治区规模猪场主要病毒性腹泻疫病的流行情况,本研究采用RT-PCR方法,对2013~2018年广西壮族自治区14个地级市送检的1547份腹泻类样品进行猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PoRV)、猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)和猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)4种猪的主要病毒性腹泻疫病的病原阳性率、季节影响因素和混合感染情况进行调查与分析。检测结果显示,2013~2018年,病毒平均样品阳性率从高到低依次为PEDV(54.94%)、PDCoV(4.52%)、PoRV(4.40%)和TGEV(0.00%),其中PEDV的样品阳性率、地区阳性率和秋冬季节阳性率均为最高。4种病毒均存在不同程度的单一感染或混合感染,其中单独感染以PEDV为主,其次是PDCo V和Po RV,TGEV单一感染率最低;混合感染中以PEDV+PDCo V和PEDV+Po RV双重感染为主,三重感染较少发生。结果表明,2013~2018年PEDV阳性检出率最高,已经成为引发广西规模猪场流行性腹泻的最主要病原,并且常与Po RV和PDCo V发生混合感染,是当前广西猪病毒性腹泻类疫病的防控重点。

苦玄参提取物对仔猪生长性能的影响研究

[目的]试验旨在探讨苦玄参提取物对仔猪生长性能的影响,为其在动物生产中更好地应用提供参考依据。[方法]选取体重相近的28～35日龄杜×长×大三元杂交的健康断奶仔猪250头,随机分为5组(A、B、C、D、E组),每组设5个重复,每个重复10头。其中,A、B、C组依次为苦玄参提取物高、中、低3个剂量试验组,分别在基础日粮中添加3.500、1.750和0.875 g/kg苦玄参提取物;D组在基础日粮中添加对照药物七补散4.0 g/kg;E组为空白对照组,饲喂基础日粮,预饲期7 d,正试期30 d。于试验正式开始的第0天、第15天和第30天7:00分别对各组的每一头试验猪进行空腹称重,并每天记录每个组试验猪的采食量,计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。[结果]添加苦玄参提取物后,A、B、C组仔猪的体重、ADG及ADFI,与E组相比显著或极显著(P<0.05或P<0.01)增加,而料重比降低;其中苦玄参提取物中剂量组仔猪的体重、平均日增重及平均日采食量提升最明显,料重比也极显著低于D组与E组(P<0.01)。[结论]苦玄参提取物对仔猪生长具有一定的促进作用,以1.750 g/kg的添加剂量添加在饲料中效果最佳。

贞苓增免散对罗非鱼生长性能及免疫功能的影响

试验旨在探讨贞苓增免散对罗非鱼生长性能及免疫功能的影响。选取吉富罗非鱼600尾随机分为6组(每组4个重复,每个重复25尾)。空白对照组饲喂基础饲料,试验组分别在日粮中添加0.1%、0.2%、0.4%、0.8%的贞苓增免散,200 mg/kg的黄芪多糖对照药物,试验周期为28 d。结果表明:与空白对照组相比,贞苓增免散可显著提高吉富罗非鱼的增重率、特定生长率、肝脏和脾脏指数(P<0.05),显著降低饲料系数(P<0.05);贞苓增免散可显著提高吉富罗非鱼的白蛋白和肌酐含量(P<0.05),显著降低甘油三酯、总胆固醇含量及碱性磷酸酶、谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性(P<0.05);贞苓增免散可显著提高吉富罗非鱼的总抗氧化能力、过氧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、酸性磷酸酶活性及一氧化氮、溶菌酶的活性(P<0.05)。研究表明,0.4%贞苓增免散对罗非鱼的生长性能和非特异免疫效果较好。

淫羊藿提取物的安全性评价

试验旨在评价淫羊藿提取物的安全性,为临床用药提供参考依据。试验选取20只小鼠进行急性毒性试验,未检测出半数致死量(LD_(50)),另选取20只小鼠一次性灌服淫羊藿提取物(20 g/kg·BW)进行最大耐受量试验。将80只大鼠随机分为空白对照组,高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg·BW),除空白对照组外,连续30 d灌服淫羊藿提取物并观察其变化。停药后继续观察7 d。观察大鼠体征和体重变化,采集血液进行血液生理生化指标测定,并进行病理组织学检查。结果显示,急性毒性试验各组小鼠均存活,体态无异常,未能测出LD_(50),小鼠对淫羊藿提取物的最大耐受量为20 g/kg·BW。30 d喂养试验中,各给药剂量组大鼠体重、血液生理生化指标和脏器指数与空白对照组相比,均无显著差异(P>0.05)。剖检心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃肠、睾丸、卵巢和子宫等组织器官未见异常变化,镜检未见明显的病理组织学变化。结果表明,淫羊藿提取物属于无毒物质,对连续用药1个月的大鼠无毒性作用。

“连藤”中草药添加剂对广西三黄鸡血液生化、免疫及抗氧化性能的影响

试验旨在探讨连藤中草药添加剂对广西三黄鸡血液生化、免疫及抗氧化能力的影响。480羽1日龄广西三黄鸡随机分4组,每组6个重复,每重复20羽。其中,A、B、C组为试验组,在基础日粮中添加0.1%、0.2%和0.4%连藤添加剂;D组为对照组,饲喂基础日粮。试验期70 d。分别于试验21、35、49 d从每组抽取6羽静脉采血,分离血清,测定生化、免疫及抗氧化指标。结果显示,连藤添加剂不同添加量对广西三黄鸡3个阶段的血清葡萄糖、甘油三酯、总蛋白、总胆固醇、尿素氮含量无显著影响(P>0.05),但A、B组35 d白蛋白含量极显著高于D组(P<0.01),B组49 d白蛋白含量显著高于D组(P<0.05)。A组49 d免疫球蛋白M含量显著低于D组(P<0.05)。A、B组49 d白细胞介素-2含量显著高于D组(P<0.05)。A、B、C 3组49 d总抗氧化能力极显著高于D组(P<0.01),B组35 d总抗氧化能力显著高于D组(P<0.05)。A、B组49 d谷胱甘肽含量极显著高于D组和C组(P<0.01)。B、C组35 d总超氧化物歧化酶活性显著高于D组(P<0.05)。日粮添加0.2%连藤中草药添加剂在一定程度上可以提高试鸡的免疫性能,显著提高鸡的抗氧化能力。

山豆根多糖对人工感染罗非鱼链球菌病的预防效果

试验研究山豆根多糖(SSP)对罗非鱼链球菌病的预防效果。从形态学、生化鉴定和双重PCR鉴定无乳链球菌GX107,测定LD_(50)。将罗非鱼分为6组(0.1%SSP、0.2%SSP、0.4%SSP、0.4%APS、无乳链球菌感染组、空白对照组),每组4个重复,每个重复20尾鱼。试验组饲喂混有不同剂量(0.1%、0.2%、0.4%)SSP的饲料,黄芪多糖(APS)对照组饲喂含0.4%黄芪多糖的饲料,无乳链球菌感染组和空白对照组投喂基础饲料。试验组和感染组以10倍的LD_(50)浓度的无乳链球菌GX107腹腔注射,空白对照组注射等量生理盐水,计算各组保护率和死亡率。结果显示,该菌在BA血平板上,出现β溶血环,在BHIA培养基上出现灰白或白色湿润凸起菌落,过氧化氢酶试验为阳性,双重PCR鉴定为无乳链球菌。感染无乳链球菌的罗非鱼肝脏、脾脏、肾脏、胆不同程度地水肿,LD_(50)为6.61×10^(5)CFU/mL。10倍LD_(50)浓度的无乳链球菌感染罗非鱼,死亡率为85.71%,添加SSP可极显著降低死亡率(P<0.01),其中0.2%的SSP保护率最高,为61.9%。研究表明,不同剂量的SSP对链球菌感染的罗非鱼能有着不同程度保护效果,可以有效降低罗非鱼感染无乳链球菌后的死亡率。

辣蓼黄酮有效成分对猪伪狂犬病毒体外感染3D4/2细胞炎症因子分泌水平的调节作用

试验旨在明确辣蓼黄酮有效成分金丝桃苷(hyperoside,HYP)和槲皮苷(quercitrin,QUE)体外抗猪伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)的效果。通过CCK-8法检测药物对猪肺泡巨噬细胞(3D4/2)的毒性作用,检测不同浓度HYP和QUE对PRV感染的3D4/2细胞中炎症因子分泌水平的影响。结果显示:HYP和QUE分别在40、160μmol/L对3D4/2细胞活性具有不同程度的促进作用,分别选择浓度为10~40μmol/L的HYP和10~160μmol/L的QUE作为后续试验的药物浓度范围。与细胞对照组相比,使用10^(2)TCID_(50)的PRV感染3D4/2细胞能够显著升高细胞中炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌水平(P<0.05);40μmol/L的QUE处理8、12、24 h时可以显著或极显著降低感染细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平(P<0.05或P<0.01);20μmol/L的HYP处理8、12、24 h时能够显著或极显著降低感染细胞中IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌水平(P<0.05或P<0.01)。研究表明,一定浓度的HYP和QUE可以有效降低PRV感染引起的细胞炎症反应,QUE对3D4/2细胞的最大安全浓度为160μmol/L;HYP对3D4/2细胞的最大安全浓度为40μmol/L。

山豆根多糖对吉富罗非鱼的安全性试验

试验研究高于临床推荐剂量的山豆根多糖对罗非鱼的安全性。选择225尾罗非鱼,随机分为5组,每组3个重复,每个重复15尾。对照组罗非鱼饲喂基础饵料,山豆根多糖组罗非鱼分别投喂含0.2%、0.6%、1.0%和2.0%山豆根多糖的饵料。试验期30 d。结果显示,0~15 d,各剂量山豆根多糖均能够促进罗非鱼的生长;16~30 d,各剂量组对罗非鱼的生长无显著作用(P>0.05)。1.0%山豆根多糖组的罗非鱼肝组织出现严重的空泡化,2.0%山豆根多糖组的肝细胞核偏移严重,说明高剂量的山豆根多糖会对罗非鱼肝组织造成一定损伤。研究表明,山豆根多糖以投料量0.6%以内应用到罗非鱼养殖中是安全无毒的。

螺旋藻的急性和亚慢性毒性试验

[目的]旨在评价螺旋藻的毒性,从而为临床安全用药提供理论依据。[方法]以昆明小鼠为研究对象,进行急性和亚慢性毒性试验。在急性毒性试验中,采用不同浓度的螺旋藻水溶液进行小鼠灌胃来测定螺旋藻的半数致死量和最大耐受量;在亚慢性毒性试验中,小鼠以(10.0、5.0、2.5 g/kg)不同剂量连续饲喂28 d,在给药第28天观察小鼠的临床体征、体重、饲料利用率、白细胞总数、血液生化指标和病理组织学变化。[结果]急性毒性试验各剂量组小鼠均无死亡,无法测出LD_(50),最大耐受量为10 g/kg。亚慢性毒性试验中用药组小鼠的临床体征、体重、饲料利用率、白细胞计数、血液生化指标与空白对照组小鼠相比,无显著差异(P>0.05)。组织病理学观察,实质器官无异常病变。[结论]螺旋藻实际无毒,安全性好。

柴桂感寒口服液对靶动物的安全性试验

为了评价柴桂感寒口服液对靶动物(鸡)的安全性,将150只15日龄三黄鸡随机分为空白对照组和4个试验组,试验组分别按照柴桂感寒口服液临床推荐剂量(1 mL/L饮水)的1、3、5、10倍量给药,连续5 d饮水给药,停药后继续观察至第14天,空白对照组只给予饮水。结果显示,柴桂感寒口服液的1倍剂量组试验鸡的平均增重显著高于空白对照组(P<0.05),而3、5、10倍剂量组平均增重均极显著高于空白对照组(P<0.01),其中5倍剂量组的增重率高达189.85%;给药后第7天,各试验组鸡的血常规和血液生化指标与空白对照组比较差异不显著(P>0.05);给药后第14天,5倍剂量组的白细胞数、10倍剂量组的红细胞数及3倍和5倍剂量组的血红蛋白含量均显著高于空白对照组(P<0.05),10倍剂量组血红蛋白含量及5倍和10倍剂量组的白蛋白含量极显著高于空白对照组(P<0.01);5倍剂量组碱性磷酸酶显著低于空白对照组(P<0.05);10倍剂量组的尿素氮及5倍和10倍剂量组总胆固醇含量显著高于空白对照组(P<0.05),但均在正常生理值范围内。结果表明,柴桂感寒口服液按推荐剂量的1倍~10倍剂量饮水给药对靶动物(鸡)是安全的,临床应用剂量的安全范围较大。

三黄连翘合剂对南美白对虾血淋巴细胞和生长性能的影响

试验旨在探究三黄连翘合剂对南美白对虾的安全性。选取南美白对虾1500尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复100尾。空白对照组对虾投喂基础饵料,4个三黄连翘合剂组分别投喂最佳推荐剂量(20 mL/kg)的1、3、5、10倍剂量进行试验。试验期35 d,分别于试验第18、35 d测定各试验组南美白对虾生长性能以及生理生化指标,观察肝胰腺组织病理变化。结果显示:与空白对照组相比,第18和35 d时,1、3、5倍剂量组能够不同程度提高南美白对虾的各项生长指标和器官指数。第35 d,1、3倍剂量组南美白对虾的总血淋巴细胞数、碱性磷酸酶活性和总蛋白含量均显著升高(P<0.05),半透明细胞数量显著降低(P<0.05);1、3、5倍剂量组南美白对虾肝胰腺组织结构清晰、细胞分布均匀、排列有序。研究表明,南美白对虾连续饲喂35 d的三黄连翘合剂能够在一定程度上提高其生长性能和机体免疫功能,推荐剂量(20 mL/kg)的1、3、5倍剂量均具有良好的安全性。

天冬糖苷散的质量标准研究

试验建立天冬糖苷散的质量控制方法,采用薄层色谱法定性鉴别天冬糖苷散中三七总皂苷,并采用高效液相色谱法测定天冬糖苷散中三七总皂苷含量,采用硫酸蒽酮法测定天冬糖苷散中总多糖的含量;进行碘-碘化钾反应、茚三酮反应、Molish反应、紫外光谱分析定性鉴别天冬糖苷散中的多糖。结果显示,天冬糖苷散与三七对照药材在薄层色谱图中相同位置有相同斑点,且斑点清晰无干扰,可有效鉴别三七总皂苷;高效液相色谱法可检测天冬糖苷散中三七总皂苷的含量,稳定可靠;硫酸蒽酮法测得天冬糖苷散中总多糖含量为59.90%;多糖的定性鉴别结果显示,碘-碘化钾和茚三酮反应呈阴性,Molish反应呈阳性,紫外光谱分析未见核酸和蛋白质。研究表明,试验建立的方法简便易行,稳定性和重复性较高,可有效地控制天冬糖苷散质量。

苦玄参提取物中苦玄参苷Ⅰ_A质量控制方法的建立

[目的]建立苦玄参提取物中苦玄参苷Ⅰ_A的鉴别和含量测定方法。[方法]采用薄层色谱法对苦玄参苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定提取物中苦玄参苷Ⅰ_A的含量,色谱条件为:Waters Symmetry C_(18)(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈—水(35∶65),流速1.0 m L/min,检测波长264nm,柱温35℃,进样量20μL。[结果 ]苦玄参苷Ⅰ_A的薄层色谱鉴别方法专属性强;苦玄参苷Ⅰ_A在20.06~104.10μg/m L的质量浓度范围内线性关系良好(R2=0.9992),平均加样回收率为99.90%,RSD=0.53%。[结论]建立的方法专属性强,定量准确性高,适用于苦玄参提取物的质量控制。