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麻黄-甘草药对抑制Th2型变应性接触性皮炎的作用及机制探讨 被引量:10
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作者 李恋曲 季律 +6 位作者 魏盼 袁为远 包凯帆 华永庆 吴鹏 洪敏 江国荣 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期282-286,共5页
目的研究麻黄-甘草药对对Th2型变应性接触性皮炎(Allergic contact dermatitis,ACD)的影响及机制。方法采用不同浓度异硫氰酸荧光素(FITC)诱导BALB/c小鼠建立Th2型ACD模型及诱导初期ACD模型。HE染色观察小鼠耳组织病理学变化,测量小鼠... 目的研究麻黄-甘草药对对Th2型变应性接触性皮炎(Allergic contact dermatitis,ACD)的影响及机制。方法采用不同浓度异硫氰酸荧光素(FITC)诱导BALB/c小鼠建立Th2型ACD模型及诱导初期ACD模型。HE染色观察小鼠耳组织病理学变化,测量小鼠耳肿胀,ELISA法检测小鼠耳组织Th2细胞因子水平及胸腺基质淋巴细胞生成素(Thymic stromal lymphopoietin,TSLP)蛋白水平,用qPCR检测小鼠耳组织TSLP mRNA水平,Poly(I∶C)和TNF-α联合刺激HaCaT细胞,检测细胞分泌的TSLP蛋白水平。结果 Th2型ACD模型中,与模型组小鼠比较,麻黄-甘草2.34g/kg和7.02g/kg组均明显抑制小鼠耳肿胀,减少耳组织炎性细胞浸润;麻黄-甘草2个剂量组均显著降低耳匀浆中IL-4水平,麻黄-甘草7.02g/kg组明显降低IL-13水平。诱导初期Th2型ACD模型中,与模型组比较,麻黄-甘草药对显著降低耳匀浆TSLP的基因及蛋白表达,体外麻黄-甘草药对及其主要单体成分同样抑制TSLP的分泌。结论麻黄-甘草药对具有抑制过敏性炎症的作用,其作用机制可能是通过减少TSLP的分泌。 展开更多
关键词 麻黄 甘草 TSLP 变应性接触性皮炎 TH2细胞因子
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斑马鱼眼部细胞凋亡模型的建立 被引量:3
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作者 杨菲 华永庆 +5 位作者 林紫微 黄天一 崔杰 李梦雨 陈婷婷 许惠琴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1320-1325,共6页
目的建立邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导的斑马鱼眼部细胞凋亡模型,并用于抗眼部细胞凋亡药物的活性评价。方法斑马鱼受精后30 h(hpf),加入DBP(0.1、10、50、100μmol·L^-1)18 h和42 h,观察斑马鱼的存活率;将30或54 hpf的斑马鱼在直射... 目的建立邻苯二甲酸二丁酯(DBP)诱导的斑马鱼眼部细胞凋亡模型,并用于抗眼部细胞凋亡药物的活性评价。方法斑马鱼受精后30 h(hpf),加入DBP(0.1、10、50、100μmol·L^-1)18 h和42 h,观察斑马鱼的存活率;将30或54 hpf的斑马鱼在直射光或非直射光条件下,加入DBP(0.1、1、5、10、50μmol·L^-1)造模18 h,吖啶橙染色(AO),采用体视荧光显微镜观察斑马鱼眼部细胞凋亡情况;造模同时,给予不同浓度N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)或人参皂苷Rg1,观察药物对斑马鱼眼部细胞凋亡的影响。结果DBP造模18、42 h,10μmol·L^-1及以下浓度对鱼卵存活率无明显影响,50μmol·L^-1及以上浓度会致使斑马鱼存活率明显降低(P<0.01);30 hpf的斑马鱼在10μmol·L^-1 DBP造模18 h后显示明显的眼部细胞凋亡(P<0.01)。斑马鱼在72 h可见眼部细胞自发性凋亡,且与光照条件无关。在该造模条件下,NAC或人参皂苷Rg1均能抑制斑马鱼眼部细胞凋亡(P<0.05)。结论利用DBP可快速高效地建立斑马鱼眼部细胞凋亡模型,该模型可用于药物活性的快速评价。 展开更多
关键词 斑马鱼 邻苯二甲酸二丁酯 眼部细胞凋亡模型 活性评价 N-乙酰-L-半胱氨酸 人参皂苷RG1
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雷公藤甲素对模式生物雄性秀丽隐杆线虫的生殖毒性作用 被引量:1
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作者 阮秦莉 俞辰亚代 +2 位作者 华永庆 王梦 段金廒 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1009-1014,共6页
目的研究中药雷公藤的主要成分之一雷公藤甲素的雄性生殖毒性及其作用机制。方法将L4期him-5雄虫在0.02、0.2、2.0 mg/L的雷公藤甲素中处理48 h。应用杂交试验观察雷公藤甲素对雄虫生育力的作用,通过观察精细胞形态发育、精细胞活化、... 目的研究中药雷公藤的主要成分之一雷公藤甲素的雄性生殖毒性及其作用机制。方法将L4期him-5雄虫在0.02、0.2、2.0 mg/L的雷公藤甲素中处理48 h。应用杂交试验观察雷公藤甲素对雄虫生育力的作用,通过观察精细胞形态发育、精细胞活化、精子运动能力,并应用实时荧光定量PCR检测精子发生相关基因的mRNA表达水平,探讨雷公藤甲素雄性生殖毒性的作用机制。结果雷公藤甲素处理48 h后,与溶剂对照组比较,2.0 mg/L雷公藤甲素组线虫后代数目显著减少,0.2、2.0 mg/L雷公藤甲素组线虫精细胞直径和截面积均显著降低,精子活化率显著降低、活动精子百分率显著下降。spe-10在0.02~2.0 mg/L雷公藤甲素组、spe-15在0.2、2.0 mg/L雷公藤甲素组、fer-1和folt-1在2.0 mg/L雷公藤甲素组均出现表达水平下调的现象。结论雷公藤甲素通过抑制him-5雄虫精子发生通路相关基因的表达水平,抑制精细胞形态发育和精子的形态和功能发育,降低him-5雄虫的生育力,提示精子发生损伤是雷公藤甲素发挥生殖毒性作用的重要途径之一。 展开更多
关键词 秀丽隐杆线虫 雷公藤甲素 精子发生 生殖毒性
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基于斑马鱼模型的枸杞子改善骨质疏松活性部位筛选及其机制初探 被引量:11
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作者 郑慧丽 华永庆 +6 位作者 刘欣慧 李梦婷 周曈 朱悦 余黎 郭盛 段金廒 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期127-138,共12页
利用斑马鱼幼鱼筛选枸杞子改善骨质疏松的活性部位,并通过斑马鱼成鱼骨质疏松模型验证筛选结果。以泼尼松龙为诱导剂构建斑马鱼幼鱼及成鱼骨质疏松模型,给予枸杞子不同提取物及化学部位共9组样品,通过茜素红染色后统计第一椎骨面积及光... 利用斑马鱼幼鱼筛选枸杞子改善骨质疏松的活性部位,并通过斑马鱼成鱼骨质疏松模型验证筛选结果。以泼尼松龙为诱导剂构建斑马鱼幼鱼及成鱼骨质疏松模型,给予枸杞子不同提取物及化学部位共9组样品,通过茜素红染色后统计第一椎骨面积及光密度值,椎骨骨节数量以筛选枸杞子抗骨质疏松的活性部位。采用茜素红染色观察斑马鱼成鱼鳞片基质矿化及骨吸收情况;采用碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP/TRACP)染色检测鳞片中成骨细胞和破骨细胞活性;采用qRT-PCR法测定鳞片中骨代谢相关基因alp、骨桥蛋白(opn)、成骨细胞特异性转录因子(sp7)、组织蛋白酶K (ctsk)、tracp、Runx家族转录因子2b (runx2b)的表达情况。结果显示,枸杞子各样品组均能够不同程度地改善斑马鱼幼鱼第一椎骨形成面积、染色光密度值和椎骨骨节数量,其中以枸杞子多糖部位效果最优。枸杞多糖能够显著抑制斑马鱼鳞片中骨吸收陷窝的形成,增强鳞片中ALP活性,降低TRAP活性,上调alp、sp7、opn基因,下调ctsk、tracp基因的表达。研究结果表明,枸杞多糖能够调节成骨细胞与破骨细胞活性,减少骨吸收,促进骨形成,增强骨密度,为枸杞子抗骨质疏松的主要活性部位。本研究为中药枸杞子“坚筋骨”传统功效提供了科学证据,为基于斑马鱼成鱼模型评价中药抗骨质疏松活性的研究提供了借鉴,也为老龄化社会人群骨健康需求提供了有益的启示。 展开更多
关键词 宁夏枸杞 枸杞子 骨质疏松 斑马鱼 鳞片 活性筛选 枸杞多糖
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补肾通络方通过抑制chemerin及炎性因子干预骨质疏松症的机制研究 被引量:6
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作者 谭登 方彭华 +6 位作者 孙旭 张玉 张农山 华永庆 韩龙 万仕炜 闵文 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期5899-5909,共11页
目的评价补肾通络方对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨、成脂分化以及小鼠单核巨噬细胞RAW264.7破骨分化模型的干预作用,并探究其调节骨形成及骨吸收的相关机制。方法分别给予补肾方、通络方和补肾通... 目的评价补肾通络方对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨、成脂分化以及小鼠单核巨噬细胞RAW264.7破骨分化模型的干预作用,并探究其调节骨形成及骨吸收的相关机制。方法分别给予补肾方、通络方和补肾通络方进行干预,采用茜素红染色法鉴定BMSCs成骨分化后各组钙结节形成情况;采用油红O染色鉴定BMSCs成脂分化后各组脂滴形成情况;采用q RT-PCR法检测BMSCs成骨、成脂分化后各组成骨、成脂分化标志基因m RNA表达,成骨、成脂分化过程和炎症模型中chemerinm RNA表达;采用ELISA法检测BMSCs成骨、成脂分化过程和炎症模型中各组chemerin分泌量。采用抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant alkaline phosphatase,TRAP)染色鉴定各组RAW264.7细胞破骨分化程度,并测定各组TRAP活性;采用Westernblotting法检测RAW264.7细胞破骨分化中各组TRAP蛋白表达情况;采用q RT-PCR法及ELISA法检测RAW264.7细胞破骨分化后各组chemerin、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)mRNA表达及分泌。结果与对照组比较,补肾通络方组钙结节显著增多(P<0.01),脂滴显著减少(P<0.01),成骨分化标志基因表达显著升高(P<0.01),成脂分化标志基因表达显著下降(P<0.05),chemerin分泌及基因表达在成骨分化第3天及成脂分化第3、7天显著下降(P<0.05、0.01)。与对照组比较,BMSCs炎症模型chemerin分泌及基因表达显著升高(P<0.01);与BMSCs炎症模型比较,补肾通络方组chemerin分泌及基因表达显著下降(P<0.01)。与对照组比较,RAW264.7细胞破骨分化中TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达均显著升高(P<0.05、0.01);与模型组比较,补肾通络方组TRAP阳性细胞、活力、蛋白表达以及IL-6、TNF-α分泌与基因表达显著降低(P<0.01)。结论补肾通络方可通过抑制chemerin及炎症因子来调节成骨、成脂分化及破骨细胞分化,从而促进骨形成、抑制骨吸收、改善骨质疏松症。 展开更多
关键词 骨质疏松症 CHEMERIN 炎症因子 补肾通络方 骨髓间充质干细胞 RAW264.7细胞
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丹参茎叶提取物对高糖诱导的果蝇代谢紊乱模型的糖脂代谢的调节作用及其机制 被引量:9
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作者 俞辰亚代 于金高 +3 位作者 顾俊菲 宿树兰 华永庆 段金廒 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1484-1491,共8页
该文采用高糖诱导建立果蝇代谢紊乱模型,研究丹参茎叶对该模型的作用及机制。检测果蝇体内葡萄糖、三酰甘油、蛋白质的含量,记录成蛹时间,基于代谢组学评价代谢紊乱模型的可靠性和丹参茎叶作用的机制。结果显示,与对照组(N组)相比,模... 该文采用高糖诱导建立果蝇代谢紊乱模型,研究丹参茎叶对该模型的作用及机制。检测果蝇体内葡萄糖、三酰甘油、蛋白质的含量,记录成蛹时间,基于代谢组学评价代谢紊乱模型的可靠性和丹参茎叶作用的机制。结果显示,与对照组(N组)相比,模型组(M组)果蝇体内葡萄糖、三酰甘油含量显著上升(P〈0.05);与模型组相比,达美康阳性药物组(GLZ组)、丹参茎叶提取物中剂量组(SM-M组)和高剂量组(SM-H组)果蝇体内的葡萄糖含量显著降低(P〈0.05,P〈0.01),GLZ组、丹参茎叶提取物高剂量组(SM-H组)果蝇体内的三酰甘油含量显著下降(P〈0.05,P〈0.01)。对代谢物轮廓主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)发现,经丹参茎叶提取物干预后,模型果蝇的代谢水平有所回调,通过差异代谢物筛选、文献比对和数据库检索,分析得到17个标志性化合物和4个主要代谢通路。丹参茎叶提取物在果蝇体内可能是通过影响组氨酸代谢、甘油磷脂代谢、戊糖和葡萄糖醛酸盐相互作用、甘油酯代谢等代谢通路发挥调节糖脂代谢的功效。该研究表明,丹参茎叶提取物能有效调节果蝇代谢紊乱模型的糖脂代谢恢复正常,为丹参茎叶资源价值发现和资源化利用提供参考。 展开更多
关键词 丹参茎叶 果蝇 糖脂代谢 资源价值发现
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雷公藤肝毒性机制及配伍减毒研究进展 被引量:5
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作者 周国梁 宿树兰 +3 位作者 华永庆 余黎 朱悦 段金廒 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第24期8263-8272,共10页
综合分析国内外雷公藤研究相关文献,对雷公藤临床不良反应及肝毒性表现进行表述和总结,分析肝毒性产生的机制。通过雷公藤配伍单味中药、有效化学成分及中药复方及炮制加工降低肝毒性进行归纳,并分析其降低毒性机制,从而明确雷公藤肝毒... 综合分析国内外雷公藤研究相关文献,对雷公藤临床不良反应及肝毒性表现进行表述和总结,分析肝毒性产生的机制。通过雷公藤配伍单味中药、有效化学成分及中药复方及炮制加工降低肝毒性进行归纳,并分析其降低毒性机制,从而明确雷公藤肝毒性研究现状及不足,并进一步对雷公藤药材及成分降低毒性提高疗效发展提出建议,以期为雷公藤药材研究发展及临床安全有效使用提供参考。 展开更多
关键词 雷公藤 肝毒性 配伍 雷公藤甲素 雷公藤红素 雷公藤多苷
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1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的骨保护作用与Nrf2/HO-1信号通路的相关性研究 被引量:5
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作者 陈婷婷 黄天一 +3 位作者 李梦雨 崔杰 华永庆 许惠琴 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期907-914,共8页
研究1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(1,2,3,4,6-pentyl-O-galloyl-beta-D-glucose, PGG)骨保护作用及其抗成骨细胞凋亡相关机制。建立泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松模型,钙黄绿素染色观察PGG对斑马鱼骨骼面积的影响。体外培养骨髓间充质干... 研究1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(1,2,3,4,6-pentyl-O-galloyl-beta-D-glucose, PGG)骨保护作用及其抗成骨细胞凋亡相关机制。建立泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏松模型,钙黄绿素染色观察PGG对斑马鱼骨骼面积的影响。体外培养骨髓间充质干细胞,茜素红染色观察钙化结节数目, qRT-PCR法检测成骨细胞分化相关指标Runt相关转录因子2 (Runt-related transcription factor 2, Runx 2)和骨钙蛋白(osteocalcin, OCN)的mRNA水平;体外培养前成骨细胞系MC3T3-E1,过氧化氢(400μmol·L^-1)建立氧化应激模型,观察在该模型下PGG对成骨细胞的作用。采用MTT法检测PGG对成骨细胞活力的影响;Hoechst 33342染色观察PGG对细胞凋亡的作用;Western blot检测PGG对抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax、核因子E2相关因子2 (nuclear factor erythroid-2-related factor 2, Nrf2)及下游蛋白血红素氧合酶-1 (heme oxygenase-1, HO-1)的表达;DCFH-DA荧光染色检测细胞内的活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平;JC-1荧光染色检测线粒体膜电位水平。结果显示,与模型组相比, PGG可以显著提高斑马鱼模型椎骨面积;成骨细胞分化第14天时,与空白组相比, PGG组钙化结节数目显著增多, Runx 2、OCN的mRNA水平显著提高;此外,在氧化应激环境下, PGG可以提高成骨细胞活力,显著减少凋亡细胞数,提高Bcl-2/Bax的比率;荧光染色结果显示, PGG降低细胞内ROS荧光密度,提高线粒体膜电位。Western blot实验数据显示, PGG可以促进核内Nrf2蛋白表达,并增强下游蛋白HO-1的表达。综上, PGG可改善斑马鱼骨质疏松,且该作用可能与调控Nrf2/HO-1信号通路改善线粒体功能障碍,抗氧化应激环境下成骨细胞凋亡从而促进骨形成有关。本研究为抗骨质疏松治疗药物的发现提供新的思路与线索。 展开更多
关键词 骨质疏松 1 2 3 4 6-五没食子酰葡萄糖 MC3T3-E1 细胞凋亡 线粒体 Nrf2/HO-1
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Chinese medicine Yu-Ping-Feng-San attenuates allergic inflammation by regulating epithelial derived pro-allergic cytokines 被引量:7
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作者 WANG Xiao-Tong LIU Hai-Liang +6 位作者 YU Xi WANG Can GUI Li-Li WANG Xiao-Yu hua yong-qing ZHENG Jie HONG Min 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2019年第7期525-534,共10页
This study aimed to investigate the mechanisms of Yu-Ping-Feng-San(YPFS) on attenuating allergic inflammation in the initial stage of atopic dermatitis(AD). AD mouse model was established with fluorescein isothiocyana... This study aimed to investigate the mechanisms of Yu-Ping-Feng-San(YPFS) on attenuating allergic inflammation in the initial stage of atopic dermatitis(AD). AD mouse model was established with fluorescein isothiocyanate(FITC) sensitization and elicitation. Epithelial barrier structure was observed with transmission electron microscope. The populations of dendritic cells(DCs)and group 2 innate lymphoid cells(ILC2 s) were detected by flow cytometry. Human immortalized keratinocyte(Ha Ca T) cells were stimulated with Poly(I:C)/TNF-α in vitro to assess thymic stromal lymphopoietin(TSLP), interleukin(IL)-33 and nuclear factor-κB(NF-κB) levels or expressions by immunofluorescence, enzyme linked immunosorbent assay(ELISA) and western blot. In the initial stage of AD, ear swelling and infiltration of inflammatory cells in ear tissues were markedly attenuated with YPFS treatments. The damaged structures of ear epithelium and the increased levels of Th2-cytokines induced by FITC were significantly rescued in YPFS-treated mice. The production of pro-allergic cytokines, TSLP and IL-33, as well as the cell populations of their target cells DCs and ILC2 s were decreased in AD model, respectively. Likewise, the levels of TSLP and IL-33 in Poly(I:C)/TNF-α-stimulated HaCaT cells showed the same results. Lower levels of p-NF-κB were detected with YPFS treatment, and the expressions of TSLP and IL-33 could be further decreased with inhibiting of NF-κB. Therefore, YPFS attenuates allergic inflammation in the initial stage of AD probably through regulating NF-κB-TSLP/IL-33 pathway, which may provide a novel effective target for the prevention and treatment of allergic diseases. 展开更多
关键词 Yu-Ping-Feng-San ALLERGIC inflammation TSLP IL-33 NF-κB
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