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2020—2022年闽粤赣地区PRRSV ORF5基因的分子流行病学调查
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作者 吕紫欣 张鑫杰 +7 位作者 薛少华 金艳冬 陈林熙 黄喜荣 罗国清 蒙宁 陈瑶 戴爱玲 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期235-242,共8页
【目的】了解闽粤赣地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的分子流行动态,为该疫病的科学防控提供参考。【方法】采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对2020—2022年闽粤赣地区1475份临床猪组织和血清样品进行检测,对PRRSV阳性样品进行ORF5... 【目的】了解闽粤赣地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的分子流行动态,为该疫病的科学防控提供参考。【方法】采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对2020—2022年闽粤赣地区1475份临床猪组织和血清样品进行检测,对PRRSV阳性样品进行ORF5基因扩增和测序,并对ORF5基因的序列进行系统发育分析。【结果】2020、2021、2022年闽粤赣地区发病猪PRRSV的阳性率分别为24.23%(95/392)、27.69%(162/585)、18.07%(90/498),2020—2022年福建、广东、江西地区PRRSV的阳性率分别为23.20%(272/1172)、23.96%(52/217)、26.44%(23/87)。挑选来自不同猪场的86份阳性样品进行PCR扩增,成功获得62株PRRSV ORF5基因序列,并下载GenBank已发布的18株2020—2022年闽粤赣地区PRRSV的ORF5基因序列,与127株PRRSV国内外参考株ORF5基因序列构建系统发育树。系统发育树显示,80株闽粤赣PRRSV分离株均属美洲株。其中,40株分布在谱系1(NADC30-like株、NADC34-like株)上,12株分布在谱系3(GM2-like株、QYYZ-like株)上,7株分布在谱系5(VR2332-like株、BJ-4-like株)上,21株分布在谱系8(JXA1-like株、CH-1a-like株)上。对核苷酸和氨基酸序列的同源性进行分析,结果显示,80株PRRSV ORF5基因编码的核苷酸序列同源性为81.2%~100%,氨基酸序列同源性为78.6%~100%。33株PRRSV ORF5基因编码的GP5蛋白氨基酸序列在中和表位区第39氨基酸残基处存在变异。【结论】2020—2022年闽粤赣地区PRRSV流行株以谱系1为主(50.00%),并存在谱系1、3、5、8的混合流行。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ORF5基因 遗传变异
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抗体监测在规模猪场猪繁殖与呼吸综合征防控中的预警作用
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作者 黄喜荣 张鑫杰 +5 位作者 薛少华 吕紫欣 邱飞铭 蒙宁 陈瑶 戴爱玲 《福建畜牧兽医》 2024年第3期18-22,共5页
为了揭示猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体水平在免疫猪群与非免疫猪群中的变化规律,本研究选取福建省龙岩市两个规模相似的自繁自养猪场,其中一个场免疫国内某厂家的TJM-F92株,另一个场不进行免疫。试验采用ELISA方法对两个场不同周龄的... 为了揭示猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)抗体水平在免疫猪群与非免疫猪群中的变化规律,本研究选取福建省龙岩市两个规模相似的自繁自养猪场,其中一个场免疫国内某厂家的TJM-F92株,另一个场不进行免疫。试验采用ELISA方法对两个场不同周龄的商品猪进行PRRS抗体检测及分析,通过RT-PCR方法对临床样品中检测到的两株PRRSV的ORF5基因进行测序,并结合参考株进行序列分析。抗体检测结果表明,未免疫场248份血清中PRRS抗体阳性率从4周龄的70.0%下降至10周龄的26.7%,14周龄后抗体阳性率开始上升直至18周龄,保持在97.1%~100%;免疫场170份血清中未免疫的2周龄抗体水平较高,阳性率为100%,免疫后除6周龄、8周龄、10周龄分别为80%、70%、90%,其他周龄均为100%。ORF5基因遗传演化分析表明,免疫场检出毒株为HP-PRRSV,与HP-PRRSV(JXA1、HuN4等)、疫苗株HP-PRRSV TJM-F92等的同源性为70.5%~93.8%,并与JXA1、HuN4等处于同一小分支。未免疫场检出毒株与PRRSV NADC30株同源性为87.2%,属于NADC30-like分支。因此,当发现PRRS抗体阳性率较低、出现个别S/P值高且离散度大时,猪场要立刻采取处理措施预防因PRRSV感染而引起的继发感染。表明抗体定期监测在疫苗免疫场和阳性稳定场PRRS防控上可发挥有效的预警作用。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ELISA RT-PCR 监测 预警
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粮食中二甲戊灵的时间分辨荧光免疫层析快速检测技术研究 被引量:1
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作者 李紫云 黄熙荣 +5 位作者 黄伟 黄文杰 刘珊珊 孙秀兰 丁丽 肖理文 《粮食加工》 2023年第4期158-164,共7页
粮食中二甲戊灵残留分析方法多为大型仪器检测,检测结果准确,但存在操作复杂、设备价格昂贵等问题,旨在建立一种基于免疫层析技术来检测粮食中二甲戊灵检测方法。通过研究,成功研制出一种选用时间分辨荧光微球为载体,利用二甲戊灵抗原... 粮食中二甲戊灵残留分析方法多为大型仪器检测,检测结果准确,但存在操作复杂、设备价格昂贵等问题,旨在建立一种基于免疫层析技术来检测粮食中二甲戊灵检测方法。通过研究,成功研制出一种选用时间分辨荧光微球为载体,利用二甲戊灵抗原抗体特异性反应来进行检测的快速定量检测卡,并摸索出二甲戊灵快速定量检测卡的最佳标记工艺为羊抗鼠抗体-145~198 nm微球-二甲戊灵抗体组合标记方案,最佳划膜液为PBS与CBS体系划膜液,最佳样品垫为GL0194与JL80,最佳样品稀释液体系为BBS体系。并对检测卡进行性能检测,得出其最低检出限为7.516μg/kg,最低定量限为19.873μg/kg,检测灵敏度高,可用于粮食中二甲戊灵的快速定量检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光微球 二甲戊灵 快速检测 特异性反应 检出限
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舆情信息对投资者频繁交易的影响研究
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作者 黄美霖 黄玺蓉 +1 位作者 张楚晗 李秀婷 《科技促进发展》 2023年第11期693-699,共7页
大数据环境下,互联网与新媒体的飞速发展加快了网络舆论的流动性,也影响到投资者的交易行为。我国机构和个人投资者普遍偏好短线交易,大量舆情信息的冲击更容易使投资者增加交易频次。本研究借鉴已有研究成果,选取2019年9月至2022年9月... 大数据环境下,互联网与新媒体的飞速发展加快了网络舆论的流动性,也影响到投资者的交易行为。我国机构和个人投资者普遍偏好短线交易,大量舆情信息的冲击更容易使投资者增加交易频次。本研究借鉴已有研究成果,选取2019年9月至2022年9月与舆情相关的概念股,研究舆情信息传播与投资者频繁交易之间的关系,研究发现:(1)舆情信息的传播增加了投资者的交易频次;(2)舆情信息的传播虽然使投资者频繁交易,但并没有促成过度交易;(3)舆情信息通过吸引投资者的关注从而促使投资者产生频繁买卖的行为。研究结论对投资者正确看待舆情信息、监管当局关注媒体舆论导向和金融市场稳定发展具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 舆情信息 频繁交易 过度交易 投资者注意力
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荧光免疫层析法检测粮食谷物中重金属铅的前处理研究
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作者 黄伟 黄熙荣 +5 位作者 叶金 伍先绍 刘珊珊 孙秀兰 丁丽 肖理文 《粮食加工》 2023年第5期141-147,共7页
基于时间分辨荧光纳米微球的重金属铅快速定量检测卡,通过对样品前处理的研究,确定了最佳提取液为0.5~1 mol/L HCl,最佳螯合剂为1~2 mmoL/L ITCBE,提高了粮食谷物中重金属铅的检测灵敏度,使得检测卡能满足粮食谷物中重金属铅快速检测的... 基于时间分辨荧光纳米微球的重金属铅快速定量检测卡,通过对样品前处理的研究,确定了最佳提取液为0.5~1 mol/L HCl,最佳螯合剂为1~2 mmoL/L ITCBE,提高了粮食谷物中重金属铅的检测灵敏度,使得检测卡能满足粮食谷物中重金属铅快速检测的需求。并对重金属铅荧光定量检测卡的性能进行检测,其最低检出限LOD为7.428μg/kg,最低定量限LOQ为20.830μg/kg,线性范围为25~1000μg/kg,线性范围内的添加回收率为96.43%~108.34%,5次重复的变异系数在10%以内,其准确性和可靠性均可以满足欧盟和我国对重金属铅的分析标准的技术要求,且该方法具有简便快速、准确可靠、重复性好等特点,可用于不同粮食谷物中重金属铅的快速定量检测分析。 展开更多
关键词 粮食 重金属铅 荧光定量免疫层析 前处理
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闽粤地区PPV7与PCV2的混合感染调查及PPV7 Cap基因的遗传变异分析 被引量:4
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作者 张鑫杰 薛少华 +5 位作者 吕紫欣 黄喜荣 陈羽璇 范克伟 杨小燕 戴爱玲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第6期2291-2297,共7页
【目的】调查闽粤地区猪细小病毒7型(Porcine parvovirus type 7,PPV7)与猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的混合感染情况,并掌握两地PPV7 Cap基因的分子遗传特征。【方法】收集闽粤地区69个猪场的432份发病猪血液进行PPV... 【目的】调查闽粤地区猪细小病毒7型(Porcine parvovirus type 7,PPV7)与猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)的混合感染情况,并掌握两地PPV7 Cap基因的分子遗传特征。【方法】收集闽粤地区69个猪场的432份发病猪血液进行PPV7和PCV2的PCR检测,并对阳性样品的PPV7 Cap基因进行克隆测序。利用DNAStar软件对两地PPV7 Cap基因的核苷酸序列及氨基酸序列进行分析,并采用Mega 7.0软件绘制遗传进化树。【结果】闽粤地区PPV7阳性率为21.99%(96/432),场阳性率为53.62%(37/69),PCV2阳性率为54.17%(234/432),两者共感染率为13.43%(58/432)。应用PCR方法成功扩增出17株PPV7 Cap基因序列。核苷酸相似性分析发现,17株PPV7 Cap基因序列之间相似性在85.6%~100%,与国内外参考毒株相似性在85.8%~99.0%。氨基酸序列比对发现,17株PPV7 Cap蛋白氨基酸序列相似性为87.6%~100%,与国内外参考毒株间的氨基酸相似性为82.6%~98.7%。基于Cap基因的遗传进化分析表明,PPV7可分为PPV7a~PPV7e 5个主要的进化分支,其中9株属于PPV7a进化分支,3株属于PPV7b分支,4株属于PPV7c分支,仅有1株属于PPV7e分支。【结论】PPV7在闽粤地区广泛流行,并且与PCV2有较高的共感染率,可能为猪圆环病毒相关疾病(Porcine circovirus associated disease,PCVAD)的潜在致病因子。闽粤两地PPV7毒株具有丰富的遗传多样性,而PPV7a分支毒株为目前的主要优势毒株。本研究为闽粤地区PPV7的防控及疫苗研究提供理论依据及数据参考。 展开更多
关键词 猪细小病毒7型(PPV7) Cap基因 遗传变异 相似性分析
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Effects of nonionic surfactant Triton X-100 on the laccase-catalyzed conversion of bisphenol A 被引量:6
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作者 JIGuanglei ZHANG Haibo +1 位作者 huang Feng huang xirong 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2009年第11期1486-1490,共5页
The laccase-catalyzed conversion of bisphenol A (BPA) in aqueous solutions was studied in the absence and presence of nonionic surfactant Triton X-100. It was found that the addition of Triton X-100 into the reactio... The laccase-catalyzed conversion of bisphenol A (BPA) in aqueous solutions was studied in the absence and presence of nonionic surfactant Triton X-100. It was found that the addition of Triton X-100 into the reaction system increased the conversion of BPA, especially near the critical micelle concentration of Triton X-100. Also it was found that the stability of laccase was greatly improved in the presence of TritonX-100. Studies on the endogenous fluorescence emission of laccase indicated that there existed an interaction between Triton X-100 and laccase, which was beneficial to folding and stabilizating of laccase. The binding of Triton X-100 to the laccase surface also mitigated the inactivation effect caused by the free radicals and polymerization products. Under otherwise identical conditions, a lower dosage of laccase was needed for the higher conversion of BPA in the presence of Triton X-100. 展开更多
关键词 CONVERSION LACCASE bisphenol A Triton X-100
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一例猪蓝耳病与猪圆环病毒病及多重细菌共感染的实验室诊断 被引量:2
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作者 黄喜荣 陈羽璇 +4 位作者 张鑫杰 薛少华 吕紫欣 蒙宁 戴爱玲 《福建畜牧兽医》 2022年第5期45-49,52,共6页
为了确诊2021年10月在福建龙岩地区某规模猪场发生的一起仔猪体温升高、呼吸困难、消瘦的病例,分别设计PRRSV、PCV2特异性扩增引物进行PCR检测及阳性样品基因克隆与序列分析。结果表明,送检病例检出PRRSV和PCV2型,PRRSV ORF5序列分析发... 为了确诊2021年10月在福建龙岩地区某规模猪场发生的一起仔猪体温升高、呼吸困难、消瘦的病例,分别设计PRRSV、PCV2特异性扩增引物进行PCR检测及阳性样品基因克隆与序列分析。结果表明,送检病例检出PRRSV和PCV2型,PRRSV ORF5序列分析发现所得毒株为高致病性毒株,PCV2全长基因的序列分析为PCV2a亚型;同时从肺脏和肝脏分离所得细菌的16S rRNA进行鉴定与测序,结果发现分离菌为猪链球菌、肺炎克雷伯菌、O157:H7血清型大肠杆菌。说明该猪场疫情主要由高致性PRRSV与PCV2共感染,同时并发多重细菌感染引起。通过对该病例的诊断和疫情分析提出针对性防控措施,为养猪生产实践中的疫病防控提供参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS) 猪圆环病毒(PCV) 细菌感染 共感染
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玉米赤霉烯酮荧光定量快速检测试纸卡及仪器技术性能优化的研究报告 被引量:1
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作者 巩性涛 田宪玺 +9 位作者 赵莹 黄熙荣 王春霞 黄伟 刘珊珊 李雅健 宋永泉 赵皖 丁丽 肖理文 《粮食加工》 2022年第6期107-114,共8页
基于时间分辨荧光微球制备的玉米赤霉烯酮荧光定量快速检测试纸卡,通过两线及三线试纸卡灵敏度与重复性的对比,筛选出效果更优的三线试纸卡;通过50 mM与100 mM离子浓度缓冲稀释液对不同pH值样本检测准确度的对比,筛选出对pH值兼容范围... 基于时间分辨荧光微球制备的玉米赤霉烯酮荧光定量快速检测试纸卡,通过两线及三线试纸卡灵敏度与重复性的对比,筛选出效果更优的三线试纸卡;通过50 mM与100 mM离子浓度缓冲稀释液对不同pH值样本检测准确度的对比,筛选出对pH值兼容范围更广的100 mM离子浓度缓冲稀释液;并对选用100 mM离子浓度缓冲稀释液的三线试纸卡的不同性能要求进行检测验证。结果表明,选用100 mM离子浓度缓冲稀释液的玉米赤霉烯酮三线试纸卡检出限与定量限符合要求,准确度、重复性、稳定性等均达到更优的效果,更能满足快速定量检测需求。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 三线 时间分辨荧光免疫层析法 检出限、定量限、准确性、重复性
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猪细小病毒7型VP2蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备
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作者 吕紫欣 张鑫杰 +3 位作者 薛少华 黄喜荣 刘建奎 戴爱玲 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第14期56-60,共5页
为了表达猪细小病毒7型(PPV7)VP2蛋白(由Cap基因编码)并制备其多克隆抗体,试验从GenBank数据库中下载PPV7 Cap基因序列,选择不同毒株的高频序列作为目的基因序列,使用T4 DNA连接酶将目的基因与pET-32a表达载体连接,将连接产物转化至DH5... 为了表达猪细小病毒7型(PPV7)VP2蛋白(由Cap基因编码)并制备其多克隆抗体,试验从GenBank数据库中下载PPV7 Cap基因序列,选择不同毒株的高频序列作为目的基因序列,使用T4 DNA连接酶将目的基因与pET-32a表达载体连接,将连接产物转化至DH5α感受态细胞中,并使用IPTG对重组菌进行诱导,对表达的重组蛋白进行可溶性分析与纯化并通过Western-blot检测重组蛋白的反应原性,用纯化后的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体并分别通过间接ELISA方法、Western-blot检测多克隆抗体的效价及其与重组蛋白的反应性。结果表明:诱导后的重组菌在56 ku处出现明显条带,重组蛋白主要以包涵体的形式表达;纯化后的重组蛋白为单一条带,质量浓度为0.46 mg/mL,能与His标签抗体特异性结合;制备的多克隆抗体的效价为1∶51200,能与重组蛋白特异性结合。说明PPV7 VP2蛋白获得了成功表达,该蛋白具有良好的反应原性和免疫原性,所制备的多克隆抗体效价较高。 展开更多
关键词 猪细小病毒7型 VP2蛋白 Cap基因 原核表达 多克隆抗体
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6型及4型猪细小病毒双重实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用 被引量:1
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作者 陈羽璇 张鑫杰 +9 位作者 吕紫欣 薛少华 刘小梅 黄喜荣 蒙宁 邱飞铭 许雨航 俞国华 杨小燕 戴爱玲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1133-1138,1161,共7页
根据6型猪细小病毒(porcine parvovirus 6,PPV6)和4型猪细小病毒(porcine parvovirus 4,PPV4)全基因组的保守区域基因序列,分别设计了2对特异性的引物和2种不同荧光基团标记的Taqman探针。经过条件优化,建立能够同时诊断PPV6和PPV4的双... 根据6型猪细小病毒(porcine parvovirus 6,PPV6)和4型猪细小病毒(porcine parvovirus 4,PPV4)全基因组的保守区域基因序列,分别设计了2对特异性的引物和2种不同荧光基团标记的Taqman探针。经过条件优化,建立能够同时诊断PPV6和PPV4的双重荧光定量PCR方法,并对其特异性、灵敏性、稳定性以及与常规PCR方法的符合率进行研究。结果显示,该方法能够同时检测鉴别PPV6和PPV4,且特异性良好,与猪伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、日本乙型脑炎病毒及猪细小病毒1型核酸均无交叉反应;本方法灵敏性强,PPV6和PPV4的最小检出限分别为7.7拷贝/μL和9.3拷贝/μL;组间和组内变异系数均未超过2%,具有良好的重复性;利用所建立的双重荧光定量PCR方法对福建省采集的68份猪血清及20份组织样本进行检测,PPV6阳性率为37.5%(33/88),PPV4阳性率为12.5%(11/88),混合感染率为11.36%,该结果与常规PCR的符合率分别为81.8%(PPV6),90.9%(PPV4)和90.05%(混合感染率),并且常规PCR鉴定的阳性样品通过本研究建立的方法复检时均未出现漏检。结果表明,本试验建立的检测方法对PPV6和PPV4的鉴别诊断、病原监测、流行病学调查等具有重要意义。 展开更多
关键词 猪细小病毒6型 猪细小病毒4型 TAQMAN探针 双重荧光定量PCR
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