溶藻弧菌冷冻保护剂配方与冻干工艺研究

【目的】研究溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)真空冷冻干燥保护剂配方与优化冻干工艺条件,并探究冷冻干燥对菌株毒力及药物敏感性的影响,为菌种在冷冻干燥保藏上的应用提供理论依据。【方法】采用真空冷冻干燥技术,以溶藻弧菌HY9901为研究对象,通过单因素试验及正交试验,探究L-谷氨酸钠、海藻糖、脱脂乳、葡萄糖、甘露醇、甘氨酸6种单一保护剂对菌株活性的影响,筛选最佳冷冻保护剂复配配方,并研究菌液浓度、预冻时间、预冻温度及复水介质4个因素对菌株冻干工艺的影响,优化溶藻弧菌冻干工艺条件。同时,通过储藏试验、半数致死量(LD_(50))试验和药敏试验,探究冻干菌株的活性变化规律及其生物特性。【结果】6种单一保护剂对溶藻弧菌冻干的保护效果存在显著差异,其效果从强到弱依次为:L-谷氨酸钠、海藻糖、脱脂乳、葡萄糖、甘露醇、甘氨酸;菌株最佳冷冻干燥保护剂复配配方为海藻糖50 g/L+L-谷氨酸钠50 g/L+脱脂乳50 g/L,其存活率为62.12%,与单一保护剂的保护效果差异显著;冻干工艺最适条件:菌液浓度1×10~8~10~9 CFU/mL、预冻时间3 h、预冻温度-80℃、复水介质为PBS或50 g/L脱脂乳,此条件下菌株存活率可达到最大值(63.72%)。最佳冻干条件下,菌株储藏60 d期间,其活性无显著差异;菌株冻干前后的LD_(50)分别为1.22×10~8、1.20×10~8 CFU/mL,LD_(50)无显著差异。菌株在冻干前后的药敏抑菌圈直径无显著差异,对氟苯尼考、氯霉素、环丙沙星等药物均表现敏感;对新霉素、卡那霉素均表现中度敏感;对丁胺卡那、哌拉西林等药物均表现耐药。【结论】溶藻弧菌HY9901的冷冻干燥复配配方为海藻糖50 g/L+L-谷氨酸钠50 g/L+脱脂乳50 g/L,冻干工艺条件为菌液浓度1×10~8~10~9 CFU/mL、预冻时间3 h、预冻温度-80℃、复水介质为PBS或50 g/L脱脂乳,该配方及工艺合理可行,具有良好的储藏性及生物稳定性。

多纹钱蝶鱼溃疡病病原的分离鉴定及药敏试验

为研究2023年广西壮族自治区钦州湾网箱养殖多纹钱蝶鱼(Selenotoca multifasciata)发生溃疡病的原因,从患病多纹钱蝶鱼的肝、脾和肾组织中分离纯化出优势菌株,并对其进行形态学观察、生理生化特性鉴定、16S rRNA与dnaJ基因序列测序分析、毒力基因检测、人工感染试验及药敏试验。结果表明:分离获得的优势菌在TCBS平板上形成黄色、圆形的光滑菌落,在TSA平板上形成乳白色微凸圆润菌落;生理生化特征分析显示,菌株为β溶血的革兰氏阴性菌,可发酵葡萄糖、蔗糖、甘露糖和阿拉伯糖,V-P试验呈阳性;基于16S rRNA和dnaJ基因序列构建的系统发育树显示,3株优势菌均与鳗弧菌(Vibrio anguillarum)聚为一支,综合鉴定表明菌株QZ991、QZ992和QZ993均为鳗弧菌;毒力基因检测显示,3株优势菌均携带virA、vah1、virC、empA、angM、flaA和ompU 7种毒力基因;人工感染试验显示,QZ991、QZ992和QZ993对多纹钱蝶鱼的半致死浓度(LD_(50))分别为5.10×10^(5)、4.33×10^(5)、2.45×10^(6)CFU/mL;药敏试验显示,3株优势菌均对多粘菌素B、庆大霉素、四环素类、喹诺酮类和多数头孢烯类等多种抗菌药物敏感;组织病理切片观察发现,患病多纹钱蝶鱼多脏器发生了不同程度的损伤,主要表现为充血、出血、坏死和炎性细胞浸润等。研究表明,鳗弧菌为广西钦州湾地区多纹钱蝶鱼溃疡病的病原,对多纹钱蝶鱼具有较强的致病性,并具有一定的耐药性,建议交替使用水产用多西环素和恩诺沙星进行治疗。

可见光促进三组分合成C3-芳甲基取代的咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物

C3-芳甲基取代的咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物在材料及药物化学领域有着广泛应用。基于自由基对亚胺C=N键的插入串联环化策略,以2-氨基吡啶衍生物、芳基甲醛为原料、芳基溴乙炔为自由基源,在可见光促进和路易斯酸协同作用下,通过三组分串联反应,以70%~78%的产率实现了C3-芳甲基取代的咪唑并[1,2-a]吡啶衍生物的构建。目标产物结构经^(1)H NMR、^(13)C NMR和HR-MS确证。本方法无需额外添加光催化剂,操作简便、反应条件温和,具有较好的底物适用性和官能团耐受性,并且可以应用于唑吡坦的一步合成。

基于机器视觉技术的激光焊机支撑块零件测绘的研究

机器视觉测量技术具有非接触、全视场测量、高精度和自动化程度高的特点,特别适用于轻微破损零件的测绘及后续修复。本文通过选用合适的光源、镜头和相机,搭建了机器视觉测量系统,对激光焊机设备支撑块零件4个面进行了视觉图像采集,并通过康耐视VisionPro软件对图像进行处理与分析,实现了对该零件整体尺寸的视觉精准测量。在此基础上,采用SolidWorks软件,完成支撑块的三维模型设计,为后续零件的加工与替换奠定技术基础。

城南诗社、地域认同与现代天津文化空间的转换

城南诗社是活跃于现代天津的一个传统文人团体。它以古体诗词创作追怀传统,通过仪式化集会,在现代城市里延续传统的高雅文化。城南诗社参与者形成较强的思想共识与地域认同,并积极调动自身文化、经济资源,介入到现代城市建设中,将湮没的私家园林改造为现代公园,将衰落的传统空间改造为现代教育学校。城南诗社不仅是一个在现代白话文背景下接续传统的旧文人社团,更是一个积极介入城市现代化,使传统文化在现代城市里争取到立足之地的文人团体。

水生动物解剖学课程建设与实践

水生动物解剖学是水生动物医学专业核心课程之一,也是一门新开设课程。对该课程建设思路及建设过程进行分析和总结,探讨如何围绕课程教学目标,对教学内容、教学过程和考核方式等进行设计,把该课程建设成为一门符合水生动物医学的高层次人才培养的专业基础课,以期为农林专业类课程建设提供一定的借鉴。

华人抗日史书写与“雨林美学”新变——论张贵兴长篇小说《野猪渡河》

马华留台作家张贵兴于2018年推出长篇小说《野猪渡河》。在小说里,张贵兴以砂劳越被日军占领的“三年八个月”为中心,试图揭开婆罗洲隐而未现的华人抗日史,在剥除隐喻与再造寓言的基础上,重新思考与建构“雨林”美学,写出华文文学世界里的人类共通经验。他的尝试既是对自己“雨林”美学的一种新变,也为华文文学新题材的出现开辟了道路。

“五四”新文化运动与文学课堂的转变——以鲁迅的文学教育为中心

"五四"新文化运动对学校影响深远。文学课堂也因此从教学方法、教材编纂、现场教学等发生全面的改变。鲁迅在"五四"前后曾担任兼任教师,他将传统诵读法与西式教学方法相结合,编纂了《中国小说史略》等教材,以其活泼、生动的现场教学使学生们不仅获得文学史知识,也获得审美教育。鲁迅的教学实践不仅对重新认识"五四"有帮助,对当下文学教学也有着重要的启迪。

基于深度学习的网络入侵检测研究综述

互联网的迅速发展在给用户带来巨大便利的同时,也引发了诸多安全事故.随着零日漏洞、加密攻击等网络攻击行为日益增加,网络安全形势愈发严峻.入侵检测是网络攻击检测的一种重要手段.近年来,随着深度学习技术的持续发展,基于深度学习的入侵检测系统逐渐成为网络安全领域的研究热点.通过对文献的广泛调查,介绍了利用深度学习技术进行网络入侵检测的最新工作.首先,对当前网络安全形势及传统入侵检测技术进行简要概括;然后,介绍了网络入侵检测系统中常用的几种深度学习模型;接着,总结了深度学习中常用的数据预处理技术、数据集以及评价指标;再从实际应用的角度介绍了深度学习模型在网络入侵检测系统中的具体应用;最后,讨论了目前研究过程中面临的问题,提出了未来的发展方向.

试论海峡两岸网游产业的历史与合作趋势

网游产业随着网络的普及与技术进步在两岸迅速发展壮大,但也遇到诸多困难。两岸使用共同的语言,有合作开发的产业基础,有相似的文化资源,因此可以全方位、多渠道的合作。随着移动网络的发展,两岸在技术更新与产业链整合方面展现更多的可能。两岸要通过加快企业合作,合理分工,这样才能解决各自问题,又能加强双方交流。

清末民初天津“口岸文人”的文化困境与自我调适——以严修和“城南诗社”为例

1860年天津作为通商口岸开放,迅速将其推向了商贸经济发达、中西文化冲突的前沿,出于新旧文化激烈碰撞中的一大批中国传统文人,不仅要面对传统社会现代转型的剧烈变动,更面临着文化更迭的尴尬困境。以严修为核心的“城南诗社”作为天津“口岸文人”的典型代表,一方面以创作旧体诗词等形式,固守中国儒学人文理想;另一方面又以融合传统“普民济世”内涵和现代商业功利目的于一体的“实用”观为引导,广泛开展文化教育、辑录乡土地志、参与城市建设,推动天津在新文化交流、城乡改造、市政发展等方面提升发展,鲜明地体现了清末民初“口岸文人”遭遇的文化困境和主动调适的道路选择。

端炔基改性聚乳酸的合成与性能研究

本文以乳酸(LA)、丙炔醇乙氧基醚(PME)为原料,通过直接熔融聚合法合成了一系列不同投料比的含末端炔基的聚乳酸高分子(PLA-PME),并用IR、^(1)HNMR、DSC、XRD等分析手段,对不同投料比的PLA-PME产物进行结构与性能表征。结果表明,通过直接熔融聚合法可以将末端炔基引入到PLA链段中。该方法有望进一步通过Click Chemistry反应将三氮唑药物因子引入到PLA链段中,扩展了聚乳酸高分子的应用领域。

拉曼光谱技术在法庭科学中的应用进展

自拉曼光谱发现至今,拉曼光谱仪器和技术不断发展进步。新激光源的引入,全息光栅、电荷耦合阵列探测器和高效瑞利谱线抑制滤波器的发展,表面增强拉曼光谱等的扩展,以及便携式拉曼光谱仪的出现,使得拉曼光谱已经成为相当成熟的分析技术。协同密度泛函理论等手段,拉曼光谱为法庭科学工作者鉴定相关物质结构和成分提供了有力支持。本文介绍了拉曼光谱的原理与发展及其在法庭科学中的应用。

徐州市铜山区数字孪生城区防洪指挥平台建设

徐州市铜山区水务局基于“数字孪生”理念与现有的信息化资源,利用知识图谱、机器学习等技术,研发智能模型耦合联动机制,建设了数字孪生城区防洪指挥平台,打造出具有铜山特色的防洪排涝联合指挥调度示范应用体系。该平台建设分为数据底板、模型库、水利知识引擎与防洪排涝联合调度系统建设4个部分,总体以城区防洪为目标,构建区域性、针对性的数字孪生,为实施大范围、多目标、多情景的数字孪生建设奠定基础,有助于构筑具有预报、预警、预演、预案“四预”功能的智慧城区防洪体系。

Characterization and Expression Analysis of B Cell Receptor Accessory Molecule CD79 Gene in Humphead Snapper(Lutjanus sanguineus)

CD79, a key component of the B cell antigen receptor complex, is composed of CD79a（Igα and CD7913（Igβ） encoded by rnb-1 and B29 respectively, and plays an important role in B cell signaling. In this study, we isolated and characterized rob-1 and B29 from humphead snapper （Lutjanus sanguineus）. Their tissue distribution and expression profiles after stimulations in vitro and in vivo were also investigated. The humphead snapper rob-1 and B29 contain open reading frames of 684 bp and 606 bp, encoding 227 amino acids and 201 amino acids, respectively. Both CD79α and CD79β possess signal peptide, extracellular Ig domain, transmem- brane region and immunoreceptor tyrosine kinase activation motif （ITAM）. Mb-1 is highly expressed in lymphoid organs （thymus, posterior kidney and spleen） and mucosal-associated lymphoid tissues （gill and intestine）, while B29 is mainly detected in posterior kidney, spleen, gill and skin. Furthermore, transcription of rob-1 and B29 in head kidney leucocytes was up-regulated following lipopolysaccharide （LPS）, pokeweed mitogen （PWM）, and polyinosinic-polycytidylic acid （PolyI：C） stimulation, respectively, and their expression level in anterior kidney and spleen was also increased after challenged with formalin-inactived Vibrio harveyi. These results indicated that humphead snapper CD79 molecule might play an important role in immune response to pathogen infection.

基于电磁诱导透明的人工表面等离激元片上传感器(特邀)

利用排布在人工表面等离激元传输线两侧的微结构谐振组实现了波导类电磁诱导透明(Electromagnetically Induced Transparency,EIT)效应,并基于此开发了结构紧凑的片上传感器。根据电场分布的特性,发现片上类EIT效应的传感工作机理主要是利用暗模谐振器内部的强局域化电场对周围介质的敏感程度,能够反映到EIT特征频率的偏移量和谐振幅度的变化。进一步地,详细仿真了待测物的折射率、正切损耗、厚度、半径等参数变化对EIT透明窗口的响应规律,发现该片上传感器在1.26~1.79折射率变化范围下的灵敏度可达1.12 GHz/RIU,传感品质因数值为5.45。实验中通过对三种食用油进行传感测量,验证了所提出的基于类EIT效应的片上传感器具有高灵敏度、无标记检测和实验灵活的特点。

用于激光增材制造的光刻胶:现状、挑战和机遇(特邀)

近年来,激光增材制造作为一项极具潜力的新兴加工技术而受到广泛关注。然而,现阶段的研究主要侧重于光学器件调控或光路优化,对光刻胶的综合讨论尚显不足,特别是关于激光与材料交互作用机理的深入探究更为匮乏。本文论述了光刻胶的组成及其在激光增材制造领域的影响,分别介绍了烯烃类、硫醇-烯烃类、无机类和非均相聚合4种不同单体组成的光刻胶,并阐述了它们的研究现状。之后,讨论了有机类、无机类和两步吸收光引发剂对激光增材制造技术的影响,通过分析不同光引发剂的激发机理,探究了它们在激光增材制造过程中的协同优化机制。最后,探讨了目前激光增材制造在光刻胶设计与制备方面面临的不同挑战,并在当前研究的基础上对光刻胶未来的发展趋势进行了展望。

免疫标记技术在死后经过时间推断中的研究进展

死后经过时间的准确推断是法医病理学和刑事侦查领域的一项困难且极为关键的任务。近年来,物理、化学、微生物学、免疫学、昆虫学、分子生物学等学科方兴未艾,特殊染色、光谱、质谱、色谱、影像学等技术不断发展,用于死后经过时间推断的方法日益增多,其中免疫标记技术发挥了重要作用。本文系统地综述了国内外利用免疫标记技术推断死后经过时间的相关研究,包括免疫组化技术、免疫印迹技术、免疫荧光技术、放射免疫技术等,总结并分析这些技术在死后经过时间推断中的研究进展,以期为开拓法医病理学死后经过时间推断的研究思路,并能更好地将之应用于法医实践中提供参考。

斜带石斑鱼肠道乳酸菌的分离、鉴定及特性分析

从健康斜带石斑鱼肠道中分离出3株形态特征不同的菌株,经革兰氏染色、氧化酶及触酶反应筛选出3株革兰氏阳性球菌,通过生化鉴定和16S rRNA测序结果发现他们分别为粪肠球菌、乳酸片球菌和乳酸乳球菌,命名为WYZ-1、WYZ-2和WYZ-3。选取嗜水气单胞菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈氏弧菌以及大肠杆菌以琼脂扩散法测定WYZ-1、WYZ-2和WYZ-3的抑菌活性,结果表明WYZ-3对大肠杆菌无抑制作用,对溶藻弧菌、副溶血弧菌、哈氏弧菌和嗜水气单胞菌都有较显著的抑制作用,其中对溶藻弧菌和副溶血弧菌抑菌效果最好,抑菌直径为21.5~23.5 mm;粪肠球菌和乳酸片球菌均对5种致病菌有抑制作用,抑菌直径为9.5~22.5 mm。利用药敏纸片琼脂扩散法检测WYZ-1、WYZ-2和WYZ-3对34种常用抗生素的药敏性,结果表明3株乳酸菌均对氨基糖类、喹诺酮类多数、复方新诺明、多粘菌素B和氨曲南表现为耐药,对青霉素类多数、四环素类、大环内脂类及克林霉素和氯霉素敏感;WYZ-3对头孢类抗生素表现为敏感,WYZ-1和WYZ-2则对大部分头孢类抗生素表现为耐药。本研究表明三株乳酸菌均具有广谱抑菌性和对绝大多数抗生素有耐药性。

长毛明对虾酚氧化酶原基因cDNA克隆及组织表达分析

酚氧化酶(phenoloxidase,PO)属于对虾免疫系统的核心酶,在机体抵抗微生物感染过程中起到重要的作用。本研究利用RT-PCR和RACE技术克隆长毛明对虾(Fenneropenaeus penicillatus)酚氧化酶原(prophenoloxidase,proPO)基因(F-proPO)。cDNA全长3003 bp,包含63 bp的5′-UTR、879 bp的3′-UTR和编码686个氨基酸的2061 bp的开放阅读框(ORF),预测分子量为78.05 kD,理论等电点(pI)为5.79;含有3个串联式血蓝蛋白结构功能域、2个保守的Cu2+结合位点和6个组氨酸残基;多重比对结果表明,F-proPO与中国明对虾proPO相似度最高(98%),与其他甲壳类动物proPO相似度为51%~93%。实时荧光定量PCR检测结果表明,该基因的表达具有组织特异性,在血淋巴中表达量最高。人工感染溶藻弧菌后,该基因在鳃、血淋巴、肠和性腺中表达水平显著上调;人工感染白斑综合征病毒后,该基因在脑、鳃、心、血淋巴和肠中表达水平显著上调。可见,长毛明对虾PO是参与机体免疫防御反应的一种重要分子。