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莲草直胸跳甲短神经肽F受体基因sNPFR的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 王康 赵雪莹 +4 位作者 霍楠 胡军 王苑馨 杨军 贾栋 《山西农业科学》 2024年第1期137-144,共8页
为明确莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)短神经肽F受体AhsNPFR功能及其表达特点,为探索莲草直胸跳甲生防作用奠定理论基础,利用PCR技术克隆鉴定莲草直胸跳甲AhsNPFR基因并进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR技术分析其在莲草直... 为明确莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)短神经肽F受体AhsNPFR功能及其表达特点,为探索莲草直胸跳甲生防作用奠定理论基础,利用PCR技术克隆鉴定莲草直胸跳甲AhsNPFR基因并进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR技术分析其在莲草直胸跳甲不同发育时期和组织中的时空表达谱。结果表明,克隆获得基因AhsNPFR全长1 669 bp,开放阅读框1 257 bp,编码418个氨基酸;预测其蛋白质分子质量为48.11 ku,理论等电点为8.21,AhsNPFR具有7个典型保守跨膜结构域,属于GPCRs家族,系统进化树分析表明,其与玉米根萤叶甲Diabrotica virgifera virgifera sNPFR亲缘关系最近。AhsNPFR基因在不同发育阶段均有表达,在1龄幼虫中的表达量最高,是卵中表达量的9.06倍;在卵中表达量最低;雌成虫的表达量显著高于雄成虫。AhsNPFR基因在不同组织中均有表达,在3龄幼虫后肠中显著高表达,是脂肪体表达量的12.21倍;在雌雄成虫后肠显著高表达,并在所有组织中均没有雌雄表达差异。 展开更多
关键词 莲草直胸跳甲 短神经肽F受体基因sNPFR 基因克隆 发育时期表达 组织表达
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梨小食心虫卵黄原蛋白基因的鉴定及表达分析
2
作者 霍楠 胡军 +5 位作者 孙江 吕品 王苑馨 杨军 罗进仓 贾栋 《山西农业科学》 2024年第2期58-64,共7页
为明确重要果树害虫梨小食心虫(Grapholita molesta)卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)基因功能及其生殖调控机制,为GmVg基因功能的深入研究奠定理论基础,克隆鉴定了梨小食心虫卵黄原蛋白基因(GmVg)并进行生物信息学分析,通过qRT-PCR分析GmV... 为明确重要果树害虫梨小食心虫(Grapholita molesta)卵黄原蛋白(Vitellogenin,Vg)基因功能及其生殖调控机制,为GmVg基因功能的深入研究奠定理论基础,克隆鉴定了梨小食心虫卵黄原蛋白基因(GmVg)并进行生物信息学分析,通过qRT-PCR分析GmVg在梨小食心虫不同发育时期、不同性别和不同组织的表达模式。结果表明,GmVg基因全长5 573 bp,开放阅读框(ORF)5 364 bp,编码1 787个氨基酸,信号肽长度为15个氨基酸,分子式为C_(9041)H_(14090)N_(2544)O_(2743)S_(57);氨基酸组成中丙氨酸(Ala)、谷氨酸(Gln)和丝氨酸(Ser)占比最大,分别为8.2%、7.9%和7.8%,酸性残基的数量(Asp+Glu)为187个,碱性残基的数量(Arg+Lys)为204个,预测蛋白质分子质量和等电点分别为204.1 ku和8.79,具有Vitellogenin-N、DUF1943和VWD共3个典型保守结构域。GmVg成虫期的表达量显著高于卵、幼虫和蛹期,且羽化后24 h时达到峰值。GmVg的表达具有性别特异性,在雄虫中表达量极低。GmVg在雌成虫头部、卵巢和脂肪体中的表达呈现组织特异性,其中脂肪体显著高表达,分别是头部和卵巢表达量的21.49倍和16.4倍。 展开更多
关键词 梨小食心虫 卵黄原蛋白 基因克隆 发育时期表达 组织表达
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人SLC25A37基因促进肺癌细胞的生长与迁移
3
作者 孙志佳 亢小峰 +3 位作者 薛春源 霍楠 徐小洁 王颖杰 《西南医科大学学报》 2023年第2期130-134,共5页
目的将pCMV-Tag2B-Flag标签连接到人线粒体溶质载体蛋白25A37(SLC25A37)的基因上构建真核表达载体,检测其对人肺癌细胞H460功能的影响。方法采用PCR技术扩增人乳腺文库中SLC25A37的编码区片段,用限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶作为该片... 目的将pCMV-Tag2B-Flag标签连接到人线粒体溶质载体蛋白25A37(SLC25A37)的基因上构建真核表达载体,检测其对人肺癌细胞H460功能的影响。方法采用PCR技术扩增人乳腺文库中SLC25A37的编码区片段,用限制性内切酶EcoR I和Xho I双酶作为该片段和Flag的载体,经连接后形成重组质粒。通过Western Blot(WB)技术鉴定目的基因在细胞中的表达,利用CCK-8和克隆形成方法检测SLC25A37对肺癌H460细胞增殖的影响,划痕试验检测SLC25A37对H460细胞迁移能力的影响。结果将构建好的Flag-SLC25A37真核表达质粒转染H460细胞后成功表达融合蛋白;过表达SLC25A37后能够增强H460细胞的增殖和迁移能力。结论携带Flag标签的人SLC25A37基因的真核表达载体能在人肺癌H460细胞中表达,该基因能够增强H460细胞的增殖和迁移能力。SLC25A37可能是促癌基因,并可能为肺癌的治疗提供重要的靶标。 展开更多
关键词 SLC25A37 肺癌 H460细胞 克隆
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“微信读书”与社交化阅读 被引量:3
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作者 朱敏 霍男 《山东图书馆学刊》 2020年第4期109-115,共7页
目前,移动阅读逐渐成为当今社会普遍的阅读方式,国家大力推进全民阅读、打造书香社会,移动阅读市场的发展更是欣欣向荣。其中,腾讯于2015年上线“微信读书”APP,着重打造“社交+阅读”的产品理念,迅速在同类移动阅读产品中脱颖而出。本... 目前,移动阅读逐渐成为当今社会普遍的阅读方式,国家大力推进全民阅读、打造书香社会,移动阅读市场的发展更是欣欣向荣。其中,腾讯于2015年上线“微信读书”APP,着重打造“社交+阅读”的产品理念,迅速在同类移动阅读产品中脱颖而出。本文以“微信读书”为研究对象,从内容资源、产品设计、商业模式、营销策略和用户运营等方面分析其社交化阅读特性的实现,并指出其发展过程中存在问题及解决策略。这些特色与经验对数字阅读推广以及其他移动阅读产品具有一定的启发意义。 展开更多
关键词 微信读书 社交化阅读 移动阅读 阅读推广
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线粒体分裂蛋白1在人宫颈癌细胞中过表达能促进线粒体裂变并降低细胞的增殖和迁移能力 被引量:2
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作者 丛瑞 李星宇 +7 位作者 霍楠 朱祥 薛春源 房廖鑫 亢小峰 朱俊闻 杜祎萌 徐小洁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期926-935,共10页
线粒体是持续进行分裂和融合的动态细胞器。近年来,除了线粒体代谢作用相关的研究之外,线粒体动力学也开始逐渐引起研究的关注。越来越多的研究表明,线粒体动力学与肿瘤细胞生物学行为具有相关性。线粒体分裂蛋白1(mitochondrial fissio... 线粒体是持续进行分裂和融合的动态细胞器。近年来,除了线粒体代谢作用相关的研究之外,线粒体动力学也开始逐渐引起研究的关注。越来越多的研究表明,线粒体动力学与肿瘤细胞生物学行为具有相关性。线粒体分裂蛋白1(mitochondrial fission protein 1,FIS1)介导线粒体分裂复合物的组装,参与线粒体分裂,是线粒体融合分裂过程中重要的蛋白质。然而,鲜有研究揭示FIS1在人宫颈癌中的表达及其作用。本研究对比了宫颈癌组织以及癌旁组织的转录物组数据,结果显示,与癌旁组织相比,人宫颈癌组织中的FIS1 mRNA水平明显降低(P<0.01)。进一步进行宫颈癌组织FIS1高表达组与低表达组的差异基因分析,发现差异基因主要与线粒体功能相关。随后,进行FIS1过表达后HeLa细胞增殖、迁移、线粒体裂变以及ROS水平的相关分析。结果显示,过表达FIS1基因,HeLa细胞增殖及迁移能力显著降低,细胞内线粒体裂变程度加剧并且细胞内ROS水平升高。综合以上结果,FIS1在人宫颈癌细胞中表达水平较低,而过表达FIS1可促使宫颈癌细胞因线粒体动力学失衡而发生一系列生物学功能异常。因此,本研究为进一步研究FIS1在宫颈癌治疗中的作用奠定了重要基础。 展开更多
关键词 线粒体分裂蛋白1 癌症基因组数据集 线粒体 宫颈癌 生物信息学
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交叉与融合:高校创新创业课程建设路径探索 被引量:5
6
作者 霍楠 《甘肃开放大学学报》 2022年第4期7-10,共4页
创新创业课程是创新创业教育的核心环节,高校可以通过不同性质、不同形式、不同专业课程的交叉与融合,建立全覆盖、梯度式、开放性的创新创业课程体系。当前高校在双创建设过程中存在课程失衡的现象,可以从深化校企合作、完善教师队伍... 创新创业课程是创新创业教育的核心环节,高校可以通过不同性质、不同形式、不同专业课程的交叉与融合,建立全覆盖、梯度式、开放性的创新创业课程体系。当前高校在双创建设过程中存在课程失衡的现象,可以从深化校企合作、完善教师队伍建设、改进评价方法三个方面进行完善。 展开更多
关键词 创新创业 创新创业课程 课程建设
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Prevalence and Rates of New Diagnosis and Missed Diagnosis of Diabetes Mellitus among 35-74-year-old Residents in Urban Communities in Southwest China 被引量:1
7
作者 CAO Xin YANG Min +7 位作者 HUANG Xiao Bo TAN Xue Ling LIU Ya huo nan CHEN Ming Sheng TANG Wei Wei MA Xiao XU Rong Hua 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2019年第9期704-709,共6页
The high prevalence of diabetes has become a major public health issue worldwide[1], particularly in middle-and low-income countries[2]. The prevalence of diabetes in China, the largest developing country,has more tha... The high prevalence of diabetes has become a major public health issue worldwide[1], particularly in middle-and low-income countries[2]. The prevalence of diabetes in China, the largest developing country,has more than quadrupled in recent decades, and many cases of diabetes are undiagnosed[3]. The problem with missed diabetes diagnoses is a challenge faced both by China and the rest of the world[4]. 展开更多
关键词 DIABETES DIABETES INCOME
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利用产业并购基金推动检验检测行业结构升级的研究 被引量:1
8
作者 庄伟 霍楠 +2 位作者 杨慧 孔英 胡鹏宇 《中国标准化》 2019年第3期42-47,共6页
本文针对我国检验检测行业的发展现状及挑战,结合政府主管部门政策导向和行业机构整合需求,在介绍产业并购基金特点及优势的基础上,总结了行业内A股上市公司在产业并购基金方面的探索及应用情况,旨在阐述产业并购基金对检验检测行业整... 本文针对我国检验检测行业的发展现状及挑战,结合政府主管部门政策导向和行业机构整合需求,在介绍产业并购基金特点及优势的基础上,总结了行业内A股上市公司在产业并购基金方面的探索及应用情况,旨在阐述产业并购基金对检验检测行业整合及行业结构升级的关键意义。 展开更多
关键词 检验检测 产业并购基金 整合 行业结构升级
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新形势下固定式气体报警器检定的实施 被引量:1
9
作者 霍楠 孙巍 《品牌与标准化》 2018年第5期41-43,共3页
在强制检定免费的新形势下,报警器的检定数量急剧增加,按时完成企业固定式气体报警器周期检定已成为当前急待解决的问题。本文从标准样气的准备、人员进厂办理、作业方案和安全方案等方面进行了探究,详细介绍了固定式气体报警器检定的... 在强制检定免费的新形势下,报警器的检定数量急剧增加,按时完成企业固定式气体报警器周期检定已成为当前急待解决的问题。本文从标准样气的准备、人员进厂办理、作业方案和安全方案等方面进行了探究,详细介绍了固定式气体报警器检定的实施。 展开更多
关键词 固定式气体报警器 检定 作业方案 安全方案
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ABRACL基因启动子不同片段重组质粒构建及转录活性研究 被引量:1
10
作者 朱俊闻 杜祎萌 +5 位作者 霍楠 薛春源 亢小峰 房廖鑫 徐小洁 张清媛 《军事医学》 CAS CSCD 2023年第5期341-345,共5页
目的构建肌动蛋白结合Rho激活C末端样(ABRACL)基因启动子不同截短片段重组质粒,并检测其转录活性。方法以含ABRACL启动子全长质粒为模板,利用PCR方法分别扩增ABRACL启动子不同截短片段;将扩增片段分别插入pGL3.0-basic载体,构建ABRACL... 目的构建肌动蛋白结合Rho激活C末端样(ABRACL)基因启动子不同截短片段重组质粒,并检测其转录活性。方法以含ABRACL启动子全长质粒为模板,利用PCR方法分别扩增ABRACL启动子不同截短片段;将扩增片段分别插入pGL3.0-basic载体,构建ABRACL启动子不同截短片段重组质粒;经双酶切及序列鉴定正确后,将重组质粒转染ZR75-1和A549细胞,采用双荧光素酶报告基因检测系统测定ABRACL启动子不同截短片段的双荧光素酶活性;检测转录因子MYB原癌基因样2(B-MYB)对ABRACL启动子不同截短片段转录活性的影响。结果成功构建含ABRACL基因启动子不同截短片段重组质粒,双荧光素酶活性测定发现ABRACL基因启动子-400 bp片段活性较高,转录因子B-MYB可以增强ABRACL启动子-600 bp和-1000 bp片段的活性。结论发现ABRACL基因启动子转录活性较高区域,为进一步研究ABRACL基因上游调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 ABRACL基因 启动子 转录因子 重组质粒 荧光素酶报告基因
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人AP2β基因慢病毒表达载体的构建及其对肝癌HepG2细胞生长的影响 被引量:1
11
作者 霍楠 马路园 +6 位作者 朱祥 丛瑞 初众 唐枝 亢小峰 赵彩彦 徐小洁 《军事医学》 CAS 北大核心 2020年第2期105-109,共5页
目的构建人AP2β基因慢病毒(lentivirus)表达载体,并检测其过表达对肝癌细胞HepG2生长的影响。方法从人乳腺文库中采用PCR技术扩增出人AP2β基因编码序列,并将其插入pCDH载体,获得pCDH-AP2β真核表达载体;将其与包装载体转染293T,包装成... 目的构建人AP2β基因慢病毒(lentivirus)表达载体,并检测其过表达对肝癌细胞HepG2生长的影响。方法从人乳腺文库中采用PCR技术扩增出人AP2β基因编码序列,并将其插入pCDH载体,获得pCDH-AP2β真核表达载体;将其与包装载体转染293T,包装成Lenti-AP2β慢病毒并测定病毒滴度,感染肝癌HepG2细胞,Western印迹检测病毒载体介导的AP2β蛋白的表达情况,并进行生长曲线实验研究过量表达AP2β对HepG2细胞生长的影响。结果双酶切和Western印迹表明,pCDH-AP2β真核表达质粒构建成功,包装成滴度为2.5×107PFU/ml的LentiAP2β慢病毒载体;将此慢病毒载体感染HepG2细胞,Western印迹显示,慢病毒载体成功表达AP2β,生长曲线和克隆形成实验结果表明,AP2β过表达可抑制肝癌细胞HepG2的生长。结论构建了AP2β的慢病毒表达载体LentiAP2β,在HepG2细胞中过量表达AP2β可抑制细胞的生长,该实验为进一步研究AP2β在肝癌中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 AP2β基因 慢病毒属 载体 肝肿瘤 HEPG2细胞
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溶质载体家族成员SLC25A39基因促进乳腺癌细胞线粒体分裂 被引量:1
12
作者 符静 薛春源 +6 位作者 朱祥 霍楠 丛瑞 孙志佳 亢小峰 闫志风 徐小洁 《军事医学》 CAS 2022年第4期280-284,共5页
目的 构建带Flag标签的人溶质载体家族成员蛋白SLC25A39基因的真核表达载体,在获得FlagSLC25A39融合蛋白表达后,研究SLC25A39表达对人乳腺癌细胞线粒体稳态的影响。方法 以人乳腺文库为模板采用PCR技术扩增出人SLC25A39的编码区序列,双... 目的 构建带Flag标签的人溶质载体家族成员蛋白SLC25A39基因的真核表达载体,在获得FlagSLC25A39融合蛋白表达后,研究SLC25A39表达对人乳腺癌细胞线粒体稳态的影响。方法 以人乳腺文库为模板采用PCR技术扩增出人SLC25A39的编码区序列,双酶切后将其插入到带Flag标签的pcDNA3.0载体上,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,菌液PCR鉴定阳性的克隆再进行质粒提取,测序正确后将重组质粒与空载体分别转染人乳腺癌细胞ZR75-1。Western印迹鉴定SLC25A39目的基因的表达;Mitotracker对乳腺癌细胞的线粒体进行染色,共聚焦显微镜对线粒体进行观察;Western印迹检测线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达变化。结果双酶切鉴定表明,Flag-SLC25A39真核表达载体构建成功;Western印迹验证SLC25A39基因表达成功;激光共聚焦显微镜下观察发现SLC25A39过表达的乳腺癌ZR75-1细胞分裂的线粒体较多;Western印迹证实SLC25A39基因过表达后线粒体分裂蛋白Fis1表达增高,线粒体融合蛋白Mfn1表达减弱。结论 成功构建带Flag标签的SLC25A39基因真核表达载体,该基因可促进人乳腺癌细胞的线粒体分裂,有望成为靶向线粒体治疗乳腺癌的潜在新靶点。 展开更多
关键词 线粒体溶质载体蛋白SLC25A39 真核表达 人乳腺癌细胞ZR75-1 线粒体分裂
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带Flag标签的Sirt2真核表达载体的构建及其与PKM2的相互作用
13
作者 朱祥 李齐宏 +7 位作者 霍楠 丛瑞 马路园 初众 唐枝 李春雨 徐小洁 闫志风 《军事医学》 CAS 北大核心 2019年第7期510-513,共4页
目的构建带Flag标签pcDNA3.0载体的沉默信息调节因子2(Sirt2)真核表达载体,验证其表达蛋白与M2型丙酮酸激酶(PKM2)的相互结合。方法利用聚合酶链反应(PCR)从人乳腺文库中扩增出人Sirt2的CDS编码序列,将扩增出的Sirt2基因片段插入双酶切... 目的构建带Flag标签pcDNA3.0载体的沉默信息调节因子2(Sirt2)真核表达载体,验证其表达蛋白与M2型丙酮酸激酶(PKM2)的相互结合。方法利用聚合酶链反应(PCR)从人乳腺文库中扩增出人Sirt2的CDS编码序列,将扩增出的Sirt2基因片段插入双酶切后pcDNA3.0-Flag载体上,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α后提取质粒,验证表达,测序正确后,分别转染pcDNA3.0-Flag/myc-PKM2和Flag-Sirt2/myc-PKM2共转染至人胚肾细胞(293T),通过免疫共沉淀实验证明Sirt2蛋白表与PKM2蛋白有相互结合。结果重组质粒Flag-Sirt2的基因序列与目的序列完全一致,Western印迹检测蛋白表达成功;免疫共沉淀实验证实Sirt2蛋白与PKM2蛋白有相互结合。结论成功构建了Flag-Sirt2真核表达载体,证实Sirt2蛋白与PKM2蛋白有相互结合,为进一步研究Sirt2在糖酵解中发挥的功能提供了基础。 展开更多
关键词 人胚肾细胞 沉默信息调节因子2 丙酮酸激酶 免疫共沉淀 转染
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慢病毒介导shRNA沉默AP2β对肝癌细胞生物特性的影响
14
作者 马路园 霍楠 +6 位作者 朱祥 丛瑞 初众 唐枝 韩聚强 徐小洁 赵彩彦 《军事医学》 CAS 北大核心 2019年第9期669-673,共5页
目的通过构建慢病毒介导的靶向AP2β基因短发夹RNA(shRNA)重组质粒,观察AP2β低表达对肝细胞癌(HCC)细胞生物学功能的影响。方法构建人AP2β慢病毒shRNA质粒,将重组质粒转染至人胚肾293T细胞。AP2βshRNA与4个包装质粒共同转染293T细胞... 目的通过构建慢病毒介导的靶向AP2β基因短发夹RNA(shRNA)重组质粒,观察AP2β低表达对肝细胞癌(HCC)细胞生物学功能的影响。方法构建人AP2β慢病毒shRNA质粒,将重组质粒转染至人胚肾293T细胞。AP2βshRNA与4个包装质粒共同转染293T细胞包装成慢病毒后感染HepG2细胞,经嘌呤霉素筛选2周后,收集细胞,通过实时定量PCR(qRT-PCR)及Western印迹检测AP2βshRNA干扰效果;利用CCK-8法和细胞划痕实验检测沉默AP2β对HepG2细胞生长、增殖及侵袭迁移的影响。结果AP2βshRNA能有效沉默AP2β基因;CCK-8法、细胞划痕实验提示,沉默AP2β可促进HepG2细胞生长、增殖及侵袭迁移。结论慢病毒介导的AP2β敲减重组质粒构建成功,且沉默AP2β可促进HepG2细胞生长、增殖及侵袭迁移,因此AP2β可能是HCC治疗的一个潜在新靶点。 展开更多
关键词 肝细胞 AP2β 短发夹RNA 慢病毒属 质粒 转染 HEK293细胞
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Flag-Tinagl1真核表达载体的构建及功能验证
15
作者 霍楠 洪倩 +10 位作者 朱祥 马路园 丛瑞 薛春源 孙志佳 初众 唐枝 亢小峰 贾松浩 赵彩彦 徐小洁 《军事医学》 CAS 2021年第7期500-504,共5页
目的构建带Flag标签的肾小管间质性肾炎抗原样蛋白1(Tinagl1)基因真核表达载体,检测其对肝癌细胞HepG2 ERK/AKT磷酸化、生长和迁移的影响。方法以人乳腺cDNA文库为模板,PCR扩增Tinagl1基因片段,将其插入pcDNA3.0载体,经双酶切和测序验证... 目的构建带Flag标签的肾小管间质性肾炎抗原样蛋白1(Tinagl1)基因真核表达载体,检测其对肝癌细胞HepG2 ERK/AKT磷酸化、生长和迁移的影响。方法以人乳腺cDNA文库为模板,PCR扩增Tinagl1基因片段,将其插入pcDNA3.0载体,经双酶切和测序验证后,将重组质粒转染到肝癌HepG2细胞中,采用Western印迹检测重组蛋白对ERK和AKT磷酸化水平的影响,生长曲线和划痕实验检测其对肝癌细胞HepG2生长和迁移的影响。结果双酶切和Western印迹结果表明,pcDNA3.0-Flag-Tinagl1真核表达质粒构建成功,Tinagl1可降低ERK和AKT的磷酸化水平;生长曲线和划痕实验表明Tinagl1抑制肝癌细胞HepG2生长和迁移。结论构建了带Flag标签的Tinagl1真核表达载体,并能抑制肝癌细胞HepG2中ERK/AKT磷酸化、生长和迁移,为进一步研究Tinagl1在肝癌细胞中的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 肾炎 间质性 Tinagl1基因 真核表达载体 ERK/AKT磷酸化 HEPG2细胞
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海上钢管桩沉桩定位系统改进及应用 被引量:1
16
作者 钞强 沈家海 +2 位作者 宁泽峰 霍楠 李乐 《公路》 北大核心 2022年第11期217-221,共5页
结合厦门第二东通道工程大潮差、浅覆盖层施工环境,为保证钢管桩在最大潮差达6.92 m、长短桩长度差达15 m条件下的沉桩精度,需钢管桩至少要在两层扫描仪监测下沉桩。因此,特别改进研发了沉桩定位系统及分离式测量支架安装扫描仪和GPS等... 结合厦门第二东通道工程大潮差、浅覆盖层施工环境,为保证钢管桩在最大潮差达6.92 m、长短桩长度差达15 m条件下的沉桩精度,需钢管桩至少要在两层扫描仪监测下沉桩。因此,特别改进研发了沉桩定位系统及分离式测量支架安装扫描仪和GPS等设备,既保证钢管桩不管高低潮均能在两层扫描仪监测下沉桩,又不受沉桩时导向架晃动、变形的影响,可确保海上钢管桩沉桩的高效率和总体精度。 展开更多
关键词 海上钢管桩 测量定位 沉桩
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SLC25A5基因真核表达载体的构建及其功能验证
17
作者 亢小峰 霍楠 +8 位作者 丛瑞 马路园 初众 唐枝 孙志佳 贾松浩 刘含笑 徐小洁 张萍 《军事医学》 CAS 北大核心 2020年第12期926-929,946,共5页
目的构建SLC25A5基因的真核表达载体,同时验证该基因与肝癌细胞生长之间的关系。方法以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出SLC25A5的CDS区编码序列,应用双酶切将PCR产物插入到带Flag标签的pCMV-Tag2B载体上,酶切和测序验证后转染到人肝... 目的构建SLC25A5基因的真核表达载体,同时验证该基因与肝癌细胞生长之间的关系。方法以人乳腺文库为模板,采用PCR技术扩增出SLC25A5的CDS区编码序列,应用双酶切将PCR产物插入到带Flag标签的pCMV-Tag2B载体上,酶切和测序验证后转染到人肝癌HepG2细胞中,通过Western印迹检测其表达情况,CCK-8法、克隆形成实验测定其对肝癌HepG2细胞生长的影响。结果双酶切结果显示,pCMV-Tag2B-Flag-SLC25A5真核表达载体构建成功;提取质粒转染人肝癌HepG2细胞;Western印迹技术验证该基因蛋白成功表达;CCK-8法和克隆形成实验证明过表达pCMV-Tag2B-Flag-SLC25A5促进肝癌HepG2细胞增殖。结论pCMV-Tag2B-Flag-SLC25A5真核表达载体构建成功,并证明其可促进肝癌细胞增殖,为进一步研究SLC25A5在肝癌中的发生发展作用奠定了基础。 展开更多
关键词 SLC25A5基因 肝细胞 HEPG2 真核表达 细胞增殖
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