Gfi1.1 regulates hematopoietic lineage differentiation during zebrafish embryogenesis

(GFI1 ) 生长因素独立 1 为成年造血的干细胞(HSC ) 的哺乳动物的淋巴细胞和 neutrophils 和维护的成熟是重要的。在胚胎的造血作用的 GFI1 的角色是很好描绘的更少。通过一幅 enhancer 陷井屏幕和生物信息学分析，我们识别了 Gfi1 (命名 gfi1.1 ) 的一个斑马鱼相当或相同的事物并且在胚胎发育期间分析了它的功能。内长的 gfi1.1 基因和在它的 genomic 地点附近插入的 GFP 记者基因的表示在斑马鱼胚胎的造血的房间被检测。Morpholino (瞬间) gfi1.1 击倒 scl， lmo2， c-myb， mpo， rag1， gata1 和血红素高山的减少的表示哈 embryonic-1 (hbae1 ) ，以及胚胎的血红素的全部的数量，而是 pu.1 和 l-plastin 的增加的表示。在一样的条件下面，瞬间注射没影响涉及的标记脉管并且专业版肾的开发。相反地，在经由信使 rna 的 gfi1.1 的表示上，注射提高了 gata1 的表示，但是禁止了 pu.1 的表示。这些调查结果建议 Gfi1.1 在调整胚胎的 erythroid 和 myeloid 系决心的平衡起一个关键作用，并且也在斑马鱼期间为淋巴细胞和 granulocytes 的区别被要求胚胎开始。

地黄苷通过稳定RPL27A缓解5-氟尿嘧啶抑制的核糖体生物合成

天然化合物地黄苷(Martynoside,MAR)在5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的“血虚”小鼠中表现出补血活性.然而,MAR的蛋白靶点和分子机制尚不清楚通过md-LED技术平台对MAR进行了体外单轮亲和多肽的筛选,揭示了核糖体蛋白L27a(RPL27A)是MAR的关键直接作用靶蛋白.结构及突变分析明确了MAR与RPL27A第4-5外显子编码区之间的特异性相互作用,并且R87及K116是介导结合的关键氨基酸残基.功能上,MAR减弱了5-FU诱导的骨髓有核细胞细胞毒性,增加了RPL27A蛋白稳定性,并减少了RPL27A在K92和K94位点的泛素化.靶点蛋白K116Y突变降低了其与MAR的结合,并阻断了MAR的蛋白稳定作用.此外,整合非标记定量蛋白质组学、泛素化修饰组学、转录组学和核糖体分析及功能测定,MAR恢复了RPL27A蛋白水平的同时部分挽救了5-FU损害的核糖体生物合成.具体来说,MAR增加了成熟rRNA的丰度,抑制了全局核糖体蛋白降解,并提升了核糖体丰度及翻译功能.这项工作明确了天然化合物MAR的直接作用蛋白靶点,揭示了核糖体生物合成在造血过程中的重要性,并为靶向RPL27A改善造血功能的研究开辟了新的方向.