乙型肝炎病毒变异与暴发性肝炎

人类受乙肝病毒(HBV)感染后,大约1％的患者发展为暴发性肝炎,并在数周内导致肝脏完全破坏。到目前为止,对于暴发性肝炎尚缺乏有效的治疗手段,80％以上患者最终需要肝移植,否则患者将死于肝功能衰竭。暴发性肝炎的发病机制尚不清楚。

HBV和HCV感染小鼠模型的建立

目前尚无可供人类嗜肝病毒研究应用细胞系的情况下，通过向小鼠肝内移植人类肝细胞为研究人类肝脏疾病和嗜肝病毒提供了一个极好的体内模型。

乙型肝炎病毒X蛋白在嗜肝DNA病毒复制及感染中的作用

在所有哺乳动物嗜肝病毒中乙肝病毒X基因是高度保守，而且表达很弱的基因。慢性乙型肝炎感染与肝细胞肝癌的发生有密切的关系，据认为X基因参与肝癌的发生过程。过去一直有这样的观点，鸭肝炎病毒感染的鸭子不发生肝癌与鸭肝炎病毒缺乏X基因有关。由于缺乏体外感染系统，HBx在病毒的生命周期中的意义尚不清楚。虽然，土拨鼠模型的基因研究指出：土拨鼠肝炎病毒感染土拨鼠必须有X基因存在。然而，X基因作用的方式以及与之有关的细胞因子，因为缺乏适当的哺乳动物嗜肝病毒细胞培养系统仍然不清楚。在体外HBx可作为特殊胞浆信号传导径路的细胞核协同活化因子(nuclear co-activator)，或刺激因子(stimulator)。最近我们证实HBx以依赖NF-kB方式影响细胞周期，HBV复制与细胞周期有关，在S-期分化状态降低。因此，我们的资料提示HBx的效应是在G1相阻断细胞的复制从而有利于病毒的复制。在现在的研究计划中，我们希望研究X-诱导的细胞周期下调和NF-kB信号传导对体外和体内病毒生命周期的影响。此外，我们还分析了是否鸭肝炎病毒也存在可以表达X样蛋白隐蔽的开读框架。

细胞因子抗HBV效应的调控和分析

全世界大约有3亿人患有慢性HBV感染，慢性HBV感染主要用IFN-α治疗，但结果只有10％～20％的患者能被有效降低病毒血症。迄今，我们对大多数患者用IFN-α治疗无效的机制及少数患者用此治疗有效，可以清除病毒的机制仍不清楚。以前，人们认为IFN-α作用机制是通过诱导细胞内机制，通过非细胞毒方式干扰HBV感染；为了提高对慢性HBV感染的疗效，我们对其作用机制进行了研究。

顺式激活和反式激活元件对HBV RNA稳定性的调节

乙型肝炎转基因小鼠模型中，在HBsAg特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)注射和细胞因子调节后，病毒RNA可以通过转录后机制诱导而下调。本研究的目的是证实反式激活因子控制HBV RNA稳定性和病毒RNA的降解过程。第一步，我们分析、纯化和鉴定了一个特异的RNA结合蛋白，称为La自身抗原，是众所周知的与RNA形成的多个步骤有关的RNA结合蛋白，显示在细胞因子介导的下调病毒RNA作用与细胞因子诱导La蛋白溶解过程之间存在着严格的时态相关性。La结合位点位于HBV转录后调节元件(PRE)的预测茎环5’端。除了具有核酸内切核酸溶解的特征外，并且显示当HBV RNA发生降解时活性增强。断裂点非常接近于La结合位点。估计La可能是一种胞内蛋白，控制HBV RNA稳定性。预测的茎环结构是HBV RNA稳定性的重要决定簇。

PML小体的组成、结构及其在细胞生物学和人类疾病中的作用

PML小体,亦称为核小体(NBs),是位于细胞核内的一些特异性区域,其内含有一些在人类多种疾病(从自身免疫性疾病、白血病、肿瘤到病毒感染性疾病)的发生中发挥重要作用的蛋白质。近来的研究证据表明这些小体还与细胞的基本生物学功能如染色质结构、转录调控、凋亡及DNA修复有关。